RU2202178C2 - Method for matching species of russian sturgeon acipencer guldenstadti in aquaculture - Google Patents

Method for matching species of russian sturgeon acipencer guldenstadti in aquaculture Download PDF

Info

Publication number
RU2202178C2
RU2202178C2 RU2001100171/13A RU2001100171A RU2202178C2 RU 2202178 C2 RU2202178 C2 RU 2202178C2 RU 2001100171/13 A RU2001100171/13 A RU 2001100171/13A RU 2001100171 A RU2001100171 A RU 2001100171A RU 2202178 C2 RU2202178 C2 RU 2202178C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
sturgeon
acipencer
dna
pcr
guldenstadti
Prior art date
Application number
RU2001100171/13A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2001100171A (en
Inventor
Н.В. Войнова
И.В. Корниенко
Д.И. Водолажский
Original Assignee
Азовский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Азовский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства filed Critical Азовский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства
Priority to RU2001100171/13A priority Critical patent/RU2202178C2/en
Publication of RU2001100171A publication Critical patent/RU2001100171A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2202178C2 publication Critical patent/RU2202178C2/en

Links

Images

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Abstract

FIELD: pisciculture. SUBSTANCE: the method deals with industrial matching in fish breeders. Optimization deals with analyzing the sequence of mitochondrial DNA of Russian sturgeon Acipencer guldenstadti in D-loop area due to PCR-amplification by using direct (OS1) and reverse (OS2) primers. For reproduction one should match species different by length of mtDNA PCR-products. The innovation favors to minimize genetic degradation in natural populations. EFFECT: higher efficiency of matching. 1 dwg, 1 tbl

Description

Изобретение относится к рыбному хозяйству и предназначено для заводского отбора производителей русского осетра Acipencer

Figure 00000005

В условиях интенсивного воспроизводства осетровых на рыбоводных заводах возникает проблема подбора производителей, минимизированных по показателям инбридинга (близкородственного скрещивания), особенно в условиях стремительного сокращения их численности.The invention relates to fisheries and is intended for factory selection of manufacturers of Russian sturgeon Acipencer
Figure 00000005

In conditions of intensive reproduction of sturgeon in hatcheries, the problem of selecting producers minimized by inbreeding (closely related crossbreeding) arises, especially in conditions of rapid reduction in their numbers.

Поскольку инбридинг не отвечает задаче получения потомства с максимально высоким показателем устойчивости к неблагоприятным факторам внешней среды, клонирование одних и тех же производителей с последующей интродукцией их потомства в природные водоемы наносит большой ущерб природному генофонду (в данном случае - рыб). Since inbreeding does not meet the task of obtaining offspring with the highest possible resistance to adverse environmental factors, the cloning of the same producers with the subsequent introduction of their offspring into natural water bodies causes great damage to the natural gene pool (in this case, fish).

Известны способы отбора потенциально рыбоводнопродуктивных производителей по биометрическим (длина тела, масса тела), физиологическим (качество половых продуктов (икры и спермы), созревание производителей после инъекции и пр. ), а также биохимическим показателям (способ индивидуального отбора самок посредством прижизненного определения в крови содержания белка, липидов и холестерина) [1]. Known methods for the selection of potentially fish-producing producers by biometric (body length, body weight), physiological (quality of sex products (eggs and sperm), maturation of producers after injection, etc.), as well as biochemical parameters (method of individual selection of females by intravital determination in blood the content of protein, lipids and cholesterol) [1].

Недостатком данных способов является то, что они только выявляют подготовленность мигрантов к размножению, но не могут предотвратить снижения гетерогенности популяции осетровых. The disadvantage of these methods is that they only reveal the preparedness of migrants for reproduction, but cannot prevent a decrease in the heterogeneity of the sturgeon population.

Известен способ подбора производителей карпа из двух искусственно сформированных генетически отдаленных линий (гомозиготных по альбумино-трансферриновому комплексу плазмы крови из чешуйчатой линии (SSnn) и гетерогенному подбору по этому комплексу - разбросанной (SSnn) линии) [2]. There is a method of selecting carp producers from two artificially formed genetically distant lines (homozygous for the albumin-transferrin complex of blood plasma from a scaly line (SSnn) and heterogeneous selection for this complex - scattered (SSnn) lines) [2].

Недостатком этого способа является то, что увеличение выживаемости молоди на 20-25%, полученной от межлинейных скрещиваний уже на уровне первого селекционного поколения, носит характер гетерозисного. Как известно, характерной чертой гетерозиса является затухание в ряду поколений [3]. Кроме того, формирование генетически отдаленных линий путем ассортативного отбора - весьма длительный и трудоемкий процесс. The disadvantage of this method is that the increase in survival of juveniles by 20-25%, obtained from interline crossings already at the level of the first breeding generation, is heterotic. As is known, a characteristic feature of heterosis is attenuation in a series of generations [3]. In addition, the formation of genetically distant lines through assortative selection is a very long and laborious process.

Наиболее близким по технической сущности (прототип) является способ исследования изменчивости митохондриального генома у осетра Acipencer oxyrynchus desotoi [4]. С использованием метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) показано, что 18,5% особей имеют в своих клетках несколько разных по длине вариантов митохондриальной ДНК (мтДНК), т.е. являются гетероплазмичными. Эти варианты обусловлены наличием от 1 до 4 копий последовательности длиной 81 п.н., находящихся в составе D-петли мтДНК. Параметры изменчивости мтДНК у A. oxyrynchus desotoi во многом сходны с таковыми, ранее определенными у белого осетра A. transmontanus [5] и A.

Figure 00000006

Недостатком прототипа является невозможность экстраполяции на все виды осетровых ввиду уникальности раметров изменчивости мтДНК у каждого из них (применить использованные праймеры для других видов осетровых).The closest in technical essence (prototype) is a method for studying the variability of the mitochondrial genome in the sturgeon Acipencer oxyrynchus desotoi [4]. Using the method of polymerase chain reaction (PCR), it was shown that 18.5% of individuals have several different length mitochondrial DNA (mtDNA) variants in their cells, i.e. are heteroplasmic. These options are due to the presence of 1 to 4 copies of a 81 bp sequence in the mtDNA D loop. The parameters of mtDNA variability in A. oxyrynchus desotoi are largely similar to those previously determined for the white sturgeon A. transmontanus [5] and A.
Figure 00000006

The disadvantage of the prototype is the inability to extrapolate to all types of sturgeons due to the uniqueness of the mtDNA variability parameters for each of them (use the used primers for other types of sturgeons).

Цель изобретения - обеспечить решение задачи получения максимально жизнеспособного потомства от генетически удаленных друг от друга родительских линий русского осетра Acipenser

Figure 00000007
и свести к минимуму генетическую деградацию природных популяций.The purpose of the invention is to provide a solution to the problem of obtaining the most viable offspring from the parental lines of the Acipenser Russian sturgeon genetically remote from each other
Figure 00000007
and minimize the genetic degradation of natural populations.

Эта цель достигается тем, что подбор производителей Acipenser

Figure 00000008
осуществляют путем секвенс-анализа мтДНК в области D-петли методом ПЦР-амплификации с использованием прямого (OS1) и обратного (OS2) праймеров, имеющих указанную ниже структуру, а для воспроизводства подбирают особей, различных по длине ПНР-продуктов мтДНК (см. таблицу).This goal is achieved by the fact that the selection of manufacturers Acipenser
Figure 00000008
carried out by sequencing analysis of mtDNA in the D-loop region by PCR amplification using direct (OS1) and reverse (OS2) primers having the structure shown below, and individuals that are different in length of the mtDNA PNR products are selected for reproduction (see table )

Сущность изобретения состоит в следующем. The invention consists in the following.

Из образцов тканей выделяют ДНК, регион D-петли мтДНК исследуют методом ПЦР-амплификации с использованием прямого (OS1) и обратного (OS2) праймеров, имеющих указанную выше в таблице структуру. В качестве маркеров молекулярной массы ДНК при электрофорезе ПЦР-продуктов различных проб используют "100 Base Pair Ladder" (American Pharmacia). Методом прямого секвенс-анализа полной нуклеотидной последовательности по Сэнгеру выявляют различия в длине подуктов ПЦР-реакции (кратные 82 парам оснований). Подбор производителей русского осетра производят из разных групп, различающихся по кратности повторов 82 пар оснований в области D-петли мтДНК. DNA is isolated from tissue samples, the mtDNA D-loop region is examined by PCR amplification using direct (OS1) and reverse (OS2) primers having the structure shown in the table above. As markers of the molecular weight of DNA in electrophoresis of PCR products of various samples using "100 Base Pair Ladder" (American Pharmacia). By the method of direct sequencing analysis of the complete nucleotide sequence according to Sanger, differences in the length of the PCR reaction products (multiples of 82 base pairs) are detected. Manufacturers of Russian sturgeon are selected from different groups that differ in the repetition rate of 82 base pairs in the region of the mtDNA D-loop.

Отличительные признаки изобретения состоят в том, что впервые предложен способ подбора производителей осетровых с использованием методов молекулярной генетики, в частности тест-системы митохондриальной ДНК. В эукариотических клетках митохондриальная ДНК является полуавтономным образованием, очень удобным для молекулярно-генетической идентификации. Для этого существует, как минимум, две причины: относительно простая организация митохондриального генома и лучшая сохраняемость митохондриальной ДНК при длительном хранении образцов по сравнению с ядерной ДНК [6]. Distinctive features of the invention are that for the first time a method for selecting sturgeon producers using molecular genetics methods, in particular mitochondrial DNA test systems, is proposed. In eukaryotic cells, mitochondrial DNA is a semi-autonomous formation, very convenient for molecular genetic identification. There are at least two reasons for this: the relatively simple organization of the mitochondrial genome and the better preservation of mitochondrial DNA during long-term storage of samples compared to nuclear DNA [6].

Эффективность данного способа состоит в следующем. The effectiveness of this method is as follows.

1. Отбор материала без травмирования производителей. 1. The selection of material without injuring manufacturers.

2. Скорость анализа (9 ч). 2. The speed of analysis (9 hours).

3. Возможность использования образцов из генетических коллекций. 3. The possibility of using samples from genetic collections.

4. Возможность консервации образцов для последующего анализа. 4. The possibility of preservation of samples for subsequent analysis.

Пример осуществления способа. An example implementation of the method.

В тест-системе представлены данные по анализу митохондриальной ДНК от 48 особей Acipenсer

Figure 00000009
выловленных в Азовском море в 1997-1999 годах ихтиологами АзНИИРХ. Образцы тканей были получены из банка тканей осетровых (АзНИИРХ). ДНК выделяли по стандартной методике [7]. Регион D-петли митохондриальной ДНК был исследован методами анализа продуктов полимеразной цепной реакции (ПЦР) для прямого (OS1) и обратного (OS2) праймеров. Структура праймеров была подобрана авторами данного изобретения для региона D-петли митохондриальной ДНК осетровых на основании данных GenBank: AJ249662, AJ249663, представленных A. Ludwig and 1. Jenneckens. Для проведения реакции ПЦР-амплификации использовали наборы реактивов: DNA Sequencing Kit, Big Dye Terminator Cycle Sequencing Ready Reaction (PE Biosystems) и амплификатор GeneAmp PCR System 2400 (РЕ Biosystems) [8]. Предварительные тесты с тотальной ДНК человека из наборов control human DNA 1 (PE Biosystems), control human DNA 3 (PE Biosystems); control human DNA K562 (Promega), продемонстрировали высокую степень специфичности праймеров OS1 и OS2, использованных в данной работе, к митохондриальной ДНК русского осетра.The test system presents data on the analysis of mitochondrial DNA from 48 individuals of Acipenser
Figure 00000009
caught in the Sea of Azov in 1997-1999 by ichthyologists of the AzNIIRKh. Tissue samples were obtained from a sturgeon tissue bank (AzNIIRKh). DNA was isolated by standard methods [7]. The D-loop region of mitochondrial DNA was investigated by methods of analysis of products of polymerase chain reaction (PCR) for direct (OS1) and reverse (OS2) primers. The structure of the primers was selected by the authors of this invention for the D-loop region of sturgeon mitochondrial DNA based on GenBank data: AJ249662, AJ249663, presented by A. Ludwig and 1. Jenneckens. For the PCR amplification reaction, the following reagent sets were used: DNA Sequencing Kit, Big Dye Terminator Cycle Sequencing Ready Reaction (PE Biosystems) and GeneAmp PCR System 2400 amplifier (PE Biosystems) [8]. Preliminary tests with total human DNA from the control human DNA 1 (PE Biosystems), control human DNA 3 (PE Biosystems) kits; control human DNA K562 (Promega) demonstrated a high degree of specificity of the OS1 and OS2 primers used in this work for mitochondrial DNA of Russian sturgeon.

Проведен анализ продуктов ПЦР-реакции препаратов тотальной ДНК русского осетра азовской популяции с праймерами OS1 (21 пара оснований) и OS2 (23 пары оснований) методом гель-электрофореза [9] (чертеж). The analysis of the PCR reaction products of the total DNA preparations of the Russian sturgeon of the Azov population with primers OS1 (21 base pairs) and OS2 (23 base pairs) by gel electrophoresis was carried out [9] (drawing).

Наши данные наглядно продемонстрировали случаи гетероплазмии длины митохондриальной ДНК Acipencer

Figure 00000010
в пробах печени, селезенки и икры, взятых от разных особей. По длине амплифицированного участка ПЦР-продукты распределились следующим образом: 4 пробы из 28 имели длину амплифицированного участка, равную 242 парам оснований, 4 пробы из 28 имели длину амплифицированного участка, равную 324 парам оснований, и 20 проб из 28 имели длину амплифицированного участка, равную 406 парам оснований. Таким образом, анализ полной нуклеотидной последовательности методом прямого секвенс-анализа по Сэнгеру [10] позволил уточнить различия в длине продуктов ПЦР-реакции, кратные 82 парам оснований.Our data clearly demonstrated cases of heteroplasmy of Acipencer mitochondrial DNA length
Figure 00000010
in samples of the liver, spleen and caviar taken from different individuals. The PCR products were distributed along the length of the amplified region as follows: 4 samples out of 28 had an amplified region length of 242 base pairs, 4 samples out of 28 had an amplified region length of 324 base pairs, and 20 samples out of 28 had an amplified region length of 406 base pairs. Thus, the analysis of the complete nucleotide sequence by the method of direct sequencing analysis according to Sanger [10] made it possible to clarify the differences in the length of the PCR reaction products that are multiples of 82 base pairs.

Различия между исследованными особями реализовывался по типу "инсерции": 4 особи из 28 исследованных не имели в своем составе ни одного повтора 82 пары нуклеотидов, 4 особи имели в своем составе 1 повтор 82 пары нуклеотидов и 20 особей из 28 исследованных имели в составе исследованного нами участка D-петли митохондриальной ДНК 2 повтора по 82 пары нуклеотидов. The differences between the studied individuals were realized according to the “insertion” type: 4 individuals out of 28 studied did not have a single repeat of 82 pairs of nucleotides, 4 individuals had 1 repeat of 82 pairs of nucleotides and 20 individuals from 28 studied had in the composition of the studied section of the D-loop of mitochondrial DNA 2 repeat 82 pairs of nucleotides.

Наглядно продемонстрирована гетерогенность популяции русского осетра Acipencer

Figure 00000011
Азовского моря, в пределах доступной нам выборки (48 особей), реализованная через существование, как минимум, четырех групп, различающихся по кратности повторов 82 пар оснований, в области D-петли митохондриальной ДНК [5]:
1. Первая группа - 0 повторов - 242 пар оснований.The heterogeneity of the population of the Russian sturgeon Acipencer was clearly demonstrated
Figure 00000011
The Sea of Azov, within the available sample (48 individuals), realized through the existence of at least four groups, differing in the repetition rate of 82 base pairs, in the D-loop region of mitochondrial DNA [5]:
1. The first group - 0 repetitions - 242 base pairs.

2. Вторая группа - 1 повтор - 324 пары оснований. 2. The second group - 1 repeat - 324 base pairs.

3. Третья группа - 2 повтора - 406 пар оснований. 3. The third group - 2 repetitions - 406 base pairs.

4. Четвертая группа - 3 повтора - 488 пар оснований. 4. The fourth group - 3 repetitions - 488 base pairs.

Подбор производителей должен осуществляться из разных групп, например 1 гр.+2 гр., 1+3, 1+4, 2+3, 2+4, 3+4. The selection of manufacturers should be carried out from different groups, for example 1 gr. + 2 gr., 1 + 3, 1 + 4, 2 + 3, 2 + 4, 3 + 4.

Полученные данные демонстрируют высокопроизводительный и специфичный экспериментальный подход для анализа структуры популяций осетровых как в природных условиях, так и в условиях рыбоводных хозяйств. The data obtained demonstrate a highly productive and specific experimental approach for analyzing the structure of sturgeon populations both in natural conditions and in fish farming.

Практическое значение изобретения состоит в понижении инбридинга и получении жизнеспособного потомства осетра Acipencer

Figure 00000012
при искусственном воспроизводстве.The practical significance of the invention is to reduce inbreeding and obtain viable offspring of the Acipencer sturgeon
Figure 00000012
with artificial reproduction.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1. Сборник инструкций и нормативно-методических указаний по промышленному разведению осетровых рыб в Каспийском и Азовском бассейнах. - М.: Всесоюзный научно-исследовательский институт морского рыбного хозяйства и океанографии, 1986, с.36-47.SOURCES OF INFORMATION
1. A collection of instructions and regulatory and methodological guidelines for the industrial breeding of sturgeon in the Caspian and Azov basins. - M .: All-Union Scientific Research Institute of Marine Fisheries and Oceanography, 1986, p. 36-47.

2. Биологические основы формирования маточных стад карпа в тепловодном рыбоводстве: Автореф. дис. канд. биол. наук / Законнова Л.И. - Тюмень: Тюмен. гос. ун-т, 1999. - 19 с.: ил. -Рус. 2. The biological basis for the formation of brood stocks of carp in warm-water fish farming: Abstract. dis. Cand. biol. Sciences / Zakonnova L.I. - Tyumen: Tyumen. state Univ., 1999 .-- 19 p.: ill. -Rus.

3. Инге-Вечтомов С. Г. Генетика с основами селекции. М.: Высшая школа, 1989, с.557-560. 3. Inge-Vechtomov S. G. Genetics with the basics of selection. M.: Higher School, 1989, p. 557-560.

4. Tandem repeat sequence variation and length heteroplasmy in the mitochondrial DNA D-loop of the threatened Gulf of Mexico sturgeon, Acipenser oxyrhynchus desotoi / Miracle A.L., Campton D.E. // J. Hered. - 1995. - 86, N1. - 22-27. 4. Tandem repeat sequence variation and length heteroplasmy in the mitochondrial DNA D-loop of the threatened Gulf of Mexico sturgeon, Acipenser oxyrhynchus desotoi / Miracle A.L., Campton D.E. // J. Hered. - 1995 .-- 86, N1. - 22-27.

5. Buroker N.E., Brown J.R., Gilbert T.A., O'Hara P.J. end all. Length Heteroplasmy of sturgeon Mitochondrial DNA: An Illegitimate Elongation Model. Genetics 124:157-163 (January, 1990). 5. Buroker N.E., Brown J.R., Gilbert T.A., O'Hara P.J. end all. Length Heteroplasmy of sturgeon Mitochondrial DNA: An Illegitimate Elongation Model. Genetics 124: 157-163 (January, 1990).

6. Holland M.M., Fisher D.L., Roby R.K., Ruderman J., Bryson C., and Weedn W. (1995). Mitochondrial DNA sequence analysis of human remains. Crime Lab. Dig. 22, 109-115. 6. Holland M.M., Fisher D.L., Roby R.K., Ruderman J., Bryson C., and Weedn W. (1995). Mitochondrial DNA sequence analysis of human remains. Crime Lab. Dig. 22, 109-115.

7. Schneider P.M. Recovery of High-Molecular-Weight DNA from Blood and Forensic Specimens. From: Methods in Molecular Biology, Vol. 98: Forensic DNA Profiling Protocols Edited by: P.J. Lincoln and J. Thomson©Humana Press Inc., Totowa, NJ, P.P.1-7.7. Schneider PM Recovery of High-Molecular-Weight DNA from Blood and Forensic Specimens. From: Methods in Molecular Biology, Vol. 98: Forensic DNA Profiling Protocols Edited by: PJ Lincoln and J. Thomson © Humana Press Inc., Totowa, NJ, PP1-7.

8. Чемерис А.В., Ахунов Э.Д., Вахитов В.А. Секвенирование ДНК. Москва, "Наука", 1999, с.169-175. 8. Chemeris A.V., Akhunov E.D., Vakhitov V.A. DNA sequencing. Moscow, "Science", 1999, p. 169-175.

9. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование. Москва, "Мир", 1984. 9. Maniatis T., Fritsch E., Sambrook J. Molecular Cloning. Moscow, Mir, 1984.

10. Sanger F., Nicklen S. and Coulson A.R. (1977). DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc. Natl. Acad. Sci: USA, 74: 5463-5467. 10. Sanger F., Nicklen S. and Coulson A.R. (1977). DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc. Natl. Acad Sci: USA 74: 5463-5467.

Claims (1)

Способ подбора особей русского осетра Acipencer
Figure 00000013
в аквакультуре, включающий секвенс-анализ митохондриальной ДНК в области D-петли методом ПЦР-амплификации, отличающийся тем, что в процессе анализа используются прямой (ОS1) и обратный (ОS2) праймеры, имеющие указанную ниже в таблице структуру, а для воспроизводства подбирают особей, различных по длине ПЦР-продуктов мтДНК (см. графическую часть).The method of selection of individuals of the Russian sturgeon Acipencer
Figure 00000013
in aquaculture, including sequencing analysis of mitochondrial DNA in the D-loop region by PCR amplification, characterized in that the analysis uses direct (OS1) and reverse (OS2) primers having the structure indicated in the table below, and individuals are selected for reproduction different in length of the PCR products of mtDNA (see graphic part).
RU2001100171/13A 2001-01-03 2001-01-03 Method for matching species of russian sturgeon acipencer guldenstadti in aquaculture RU2202178C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2001100171/13A RU2202178C2 (en) 2001-01-03 2001-01-03 Method for matching species of russian sturgeon acipencer guldenstadti in aquaculture

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2001100171/13A RU2202178C2 (en) 2001-01-03 2001-01-03 Method for matching species of russian sturgeon acipencer guldenstadti in aquaculture

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2001100171A RU2001100171A (en) 2003-03-10
RU2202178C2 true RU2202178C2 (en) 2003-04-20

Family

ID=20244354

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001100171/13A RU2202178C2 (en) 2001-01-03 2001-01-03 Method for matching species of russian sturgeon acipencer guldenstadti in aquaculture

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2202178C2 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107099595A (en) * 2017-05-12 2017-08-29 中国长江三峡集团公司中华鲟研究所 Fish natural propagation monitoring method based on environment DNA technology
CN109337962A (en) * 2018-08-24 2019-02-15 暨南大学 Primer and probe and its kit and method based on fluorescence quantitative PCR detection sturgeon
CN111607651A (en) * 2020-05-25 2020-09-01 华南农业大学 Molecular identification primer, kit and method for five groupers

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107099595A (en) * 2017-05-12 2017-08-29 中国长江三峡集团公司中华鲟研究所 Fish natural propagation monitoring method based on environment DNA technology
CN109337962A (en) * 2018-08-24 2019-02-15 暨南大学 Primer and probe and its kit and method based on fluorescence quantitative PCR detection sturgeon
CN111607651A (en) * 2020-05-25 2020-09-01 华南农业大学 Molecular identification primer, kit and method for five groupers

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ryman et al. Reproductive isolation with little genetic divergence in sympatric populations of brown trout (Salmo trutta)
Wund et al. A test of the “flexible stem” model of evolution: ancestral plasticity, genetic accommodation, and morphological divergence in the threespine stickleback radiation
Miller et al. Major histocompatibility complex loci are associated with susceptibility of Atlantic salmon to infectious hematopoietic necrosis virus
Rakitin et al. Male reproductive success and body size in Atlantic cod Gadus morhua L.
Olsén et al. Influence of MHC on sibling discrimination in Arctic char, Salvelinus alpinus (L.)
Seeb et al. Survival and allozyme expression in diploid and triploid hybrids between chum, chinook, and coho salmon
Borsa et al. Nuclear-DNA markers confirm the presence of two anchovy species in the Mediterranean
US5944652A (en) Method for breeding chickens
Galleguillos et al. Genetic and morphological divergence between populations of the flatfish Platichthys flesus (L.)(Pleuronectidae)
Echelle et al. Menidia clarkhubbsi, n. sp.(Pisces: Atherinidae), an all-female species
RU2202178C2 (en) Method for matching species of russian sturgeon acipencer guldenstadti in aquaculture
Yamamoto et al. Determination of the complete nucleotide sequence and haplotypes in the D-loop region of the mitochondrial genome in the oriental white stork, Ciconia boyciana
Li et al. Segregation of microsatellite alleles in gynogenetic diploid Pacific abalone (Haliotis discus hannai)
Morrow et al. Genetic divergence and cryptic speciation in two morphs of the common subtidal nudibranch Doto coronata (Opisthobranchia: Dendronotacea: Dotoidae) from the northern Irish Sea
Clifton et al. Characterization and application of a quantitative DNA marker that discriminates sex in chinook salmon (Oncorhynchus tshawytscha)
Fevolden et al. RAPD and scnDNA analyses of polar cod, Boreogadus saida (Pisces, Galidae), in the north Atlantic
Nilsson MtDNA and microsatellite variation in Baltic Atlantic salmon
Galvin et al. A single locus PCR amplified minisatellite region as a hypervariable genetic marker in gadoid species
Ohara et al. Natural hybridization between diploid crucian carp species and genetic independence of triploid crucian carp elucidated by DNA markers
Rogers Genetic structure and microevolution in a population of Tanzanian yellow baboons (Papio hamadryas cynocephalus)
Roldán Enzymatic polymorphisms in the Argentinian hake, Merluccius hubbsi Marini, of the Argentinian continental shelf
Tegelström et al. Paternity determination in the adder (Vipera berus)—DNA fingerprinting or random amplified polymorphic DNA?
Smith et al. Genetic markers for identification of Patagonian toothfish and Antarctic toothfish
US6696253B2 (en) Method for determining the MHC genotype of chickens
Alcivar-Warren et al. Shrimp genomics: development of a genetic map to identify QTLs responsible for economically important traits in Litopenaeus vannamei

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20060104