RU2194499C2

RU2194499C2 - Arylalkylamine exhibiting activity with respect to calcium receptors

Info

Publication number: RU2194499C2
Application number: RU96109472A
Authority: RU
Inventors: Эдвард Ф. НЕМЕТ; Вагенен Брэдфорд К. Ван; Мануэль Ф. БАЛАНДРИН; Эрик Г. ДЕЛМАР; Скотт Т. Мо
Original assignee: Эн-Пи-Эс Фармасьютикалз, Инк.
Priority date: 1993-10-22
Filing date: 1994-10-21
Publication date: 2002-12-20
Also published as: SG52796A1

Abstract

FIELD: organic chemistry, biochemistry. SUBSTANCE: invention relates to molecules of the general formula (I)

or (II)

Description

Изобретение относится к конструированию, разработке, композициям и применению новых молекул, способных изменять активность рецептора неорганических ионов. The invention relates to the design, development, compositions and use of new molecules capable of changing the activity of the inorganic ion receptor.

Некоторые клетки организма реагируют не только на химические сигналы, но также на ионы, такие как внеклеточные ионы кальция (Са²⁺). Изменение концентрации внеклеточного Са²⁺ (обозначаемой далее как "[Са²⁺]") изменяет фукциональную восприимчивость этих клеток. Одной из таких специализированных клеток является клетка паращитовидной железы, секретирующая паратгормон. Паратгормон является основным эндокринным фактором, регулирующим гомеостаз в крови и внеклеточных жидкостях.Some cells in the body respond not only to chemical signals, but also to ions, such as extracellular calcium ions (Ca ²⁺ ). Changing the concentration of extracellular Ca ²⁺ (hereinafter referred to as "[Ca ²⁺ ]") changes the functional susceptibility of these cells. One such specialized cell is a parathyroid cell secreting parathyroid hormone. Parathyroid hormone is the main endocrine factor that regulates homeostasis in the blood and extracellular fluids.

Паратгормон, действуя на костные клетки и клетки почек, повышает уровень Са²⁺ в крови. Повышение [Са²⁺] действует далее как отрицательный сигнал обратной связи, подавляя секрецию паратгормона. Взаимосвязь между [Са²⁺] и секрецией паратгормона образует необходимый механизм поддержания гомеостаза Са²⁺.Parathyroid hormone, acting on bone and kidney cells, increases the level of Ca ²⁺ in the blood. The increase in [Ca ²⁺ ] further acts as a negative feedback signal, inhibiting the secretion of parathyroid hormone. The relationship between [Ca ²⁺ ] and the secretion of parathyroid hormone forms the necessary mechanism for maintaining Ca ²⁺ homeostasis.

Внеклеточный Са²⁺ действует непосредственно на клетки паращитовидной железы, регулируя секрецию паратгормона. Подтверждено существование белка поверхности клеток паращитовидной железы, обнаруживающего изменение [Са²⁺], Brown et al., 366 Nature 574, 1993. В клетках паращитовидной железы этот белок действует как рецептор внеклеточного Са²⁺ (рецептор кальция), обнаруживает изменение [Са²⁺] и инициирует функциональный отклик клетки - секрецию паратгормона.Extracellular Ca ²⁺ acts directly on the cells of the parathyroid gland, regulating the secretion of parathyroid hormone. The existence of a surface protein of the parathyroid cells detecting a change [Ca ²⁺ ] has been confirmed, Brown et al., 366 Nature 574, 1993. In parathyroid cells, this protein acts as an extracellular Ca ²⁺ receptor (calcium receptor), and it shows a change [Ca ^{2 +} ] and initiates the functional response of the cell - the secretion of parathyroid hormone.

Внеклеточный Са²⁺ может проявлять влияние на различные клеточные функции, см. обозрение Nemeth et al., 11 Cell Calcium 319, 1990. Роль внеклеточного Са²⁺ в парафолликулярных (С-клетках) и клетках паращитовидной железы обсуждается в публикации Nemeth, 11 Cell Calcium 323, 1990. Было показано, что эти клетки экспрессируют подобные Са²⁺ рецепторы. Brown et al., 366 Nature 574, 1993, Mithal et al., 9 Suppl. 1, J.Bone and Mineral Res. s.282, 1994; Rogers et al., 9 Suppl. 1, J.Bone and Mineral Res. s.409, 1994; Garett et al., 9 Suppl. 1, J.Bone and Mineral Res. s.409, 1994. Действие внеклеточного Са²⁺ на костные остеокласты обсуждается Zaidi 10 Bioscience Reports 493, 1990. Кератиноциты, юкстагломерулярные клетки, трофобласты, панкретические бета-клетки и жировые клетки - все реагируют на рост внеклеточного кальция, что, вероятно, отражает активацию рецепторов кальция этих клеток.Extracellular Ca ²⁺ can affect various cellular functions, see review Nemeth et al., 11 Cell Calcium 319, 1990. The role of extracellular Ca ²⁺ in parafollicular (C cells) and parathyroid cells is discussed in Nemeth, 11 Cell Calcium 323, 1990. These cells have been shown to express Ca ²⁺ receptors. Brown et al., 366 Nature 574, 1993, Mithal et al., 9 Suppl. 1, J. Bon and Mineral Res. s. 282, 1994; Rogers et al., 9 Suppl. 1, J. Bon and Mineral Res. s.409, 1994; Garett et al., 9 Suppl. 1, J. Bon and Mineral Res. s.409, 1994. The effect of extracellular Ca ²⁺ on bone osteoclasts is discussed by Zaidi 10 Bioscience Reports 493, 1990. Keratinocytes, juxtaglomerular cells, trophoblasts, pancreatic beta cells and fat cells all respond to the growth of extracellular calcium, which probably reflects extracellular calcium activation of the calcium receptors of these cells.

Способность различных соединений имитировать внеклеточный Са²⁺ in vitro рассматривалась в книге Nemeth et al., "Calcium-Binding Proteins in Health and Disease" (роль белков, связывающих кальций, в обеспечении здоровья и лечении заболеваний), 1987, Academic Press Jnc., р.р. 33-35 (спермин и спермидин); Brown et al. , 128 Endocrinology 3047, 1991 (например, неомицин); Chen et al. , 5, J.Bone and Mineral Res. 581, 1990 (дилтиазем и его аналог ТА-3090); и Zaidi et al. , 167 Biochem Biophys. Res. Commun, 807, 1990 (верапамил). Nemeth et al. РСТ/ US 93/01642, WO 94/18959 и Nemeth et al. РСТ/US 92/07175, WO 93/04373, описывает различные соединения, которые могут изменять влияние неорганического иона на клетки с рецепторами неорганического иона, предпочтительно кальция, на рецепторы кальция.The ability of various compounds to mimic extracellular Ca ²⁺ in vitro was examined in Nemeth et al., Calcium-Binding Proteins in Health and Disease (role of calcium binding proteins in health and disease management), 1987, Academic Press Jnc., R.R. 33-35 (spermine and spermidine); Brown et al. 128 Endocrinology 3047, 1991 (e.g. neomycin); Chen et al. , 5, J. Bon and Mineral Res. 581, 1990 (diltiazem and its analogue TA-3090); and Zaidi et al. 167 Biochem Biophys. Res. Commun, 807, 1990 (verapamil). Nemeth et al. PCT / US 93/01642, WO 94/18959 and Nemeth et al. PCT / US 92/07175, WO 93/04373, describes various compounds that can alter the effect of an inorganic ion on cells with inorganic ion receptors, preferably calcium, on calcium receptors.

Настоящее изобретение предлагает молекулы, которые могут модулировать активность рецептора неорганических ионов, предпочтительно молекулы могут имитировать или блокировать влияние внеклеточного Са²⁺ на рецептор кальция. Предпочтительно такие молекулы применяют для лечения заболеваний или нарушений, изменяя активность рецептора неорганических ионов, предпочтительно активность рецептора кальция.The present invention provides molecules that can modulate the activity of the inorganic ion receptor, preferably the molecules can mimic or block the effect of extracellular Ca ²⁺ on the calcium receptor. Preferably, such molecules are used to treat diseases or disorders by altering the activity of the inorganic ion receptor, preferably the activity of the calcium receptor.

Внеклеточный Са²⁺ находится под сильным контролем гомеостаза и регулирует различные процессы, такие как свертывание крови, возбудимость нервов и мышц и правильное образование костей. Белковые рецепторы кальция позволяют некоторым специализированным клеткам реагировать на изменение концентрации внеклеточного Са²⁺. Например, внеклеточный Са²⁺ ингибирует секрецию паратгормона клетками паращитовидной железы, ингибирует рассасывание кости остеокластами и стимулирует секрецию кальцитонина С-клетками.Extracellular Ca ²⁺ is strongly controlled by homeostasis and regulates various processes such as blood coagulation, excitability of nerves and muscles, and proper bone formation. Calcium protein receptors allow some specialized cells to respond to changes in extracellular Ca ²⁺ concentration. For example, extracellular Ca ²⁺ inhibits parathyroid hormone secretion by parathyroid cells, inhibits bone resorption by osteoclasts, and stimulates calcitonin secretion by C cells.

Соединения, модулирующие активность рецепторов неорганических ионов, можно использовать для лечения заболеваний и нарушений, на которые влияют активность или активности рецептора неорганического иона, приводящие к благоприятному влиянию на пациента. Например, остеопороз является возрастным заболеванием, характеризующимся потерей костной массы и увеличением риска растрескивания костей. Соединения, блокирующие рассасывание кости остеокластами непосредственно (например, ионмиметиками остеокластов) или косвенно посредством увеличения эндогенных уровней кальцитонина (например, ионмиметиками С-клеток) и/или посредством снижения уровней паратгормона (например, ионмиметиками клеток паращитовидной железы), могут замедлять костные потери и, следовательно, приводить к благоприятному влиянию на пациента, страдающего остеопорозом. Compounds that modulate the activity of inorganic ion receptors can be used to treat diseases and disorders that are affected by the activity or activity of the inorganic ion receptor, leading to a beneficial effect on the patient. For example, osteoporosis is an age-related disease characterized by loss of bone mass and an increased risk of bone cracking. Compounds that block bone resorption by osteoclasts directly (e.g., osteoclast ion-mimetics) or indirectly by increasing endogenous calcitonin levels (e.g. C-cell ion-mimetics) and / or by decreasing parathyroid hormone levels (e.g., parathyroid cell ion-mimetics) can slow down bone loss and, therefore, lead to a beneficial effect on a patient suffering from osteoporosis.

В дополнение известно, что прерывистая низкая дозировка паратгормона анаболически влияет на костную массу и соответственно на реконструкцию костей. Следовательно, соединения и способ дозировки, приводящие к временному увеличению паратгормона, могут повышать костную массу пациентов, страдающих остеопорозом. In addition, it is known that intermittent low dosage of parathyroid hormone anabolic effect on bone mass and, accordingly, on bone reconstruction. Therefore, the compounds and dosage method leading to a temporary increase in parathyroid hormone can increase the bone mass of patients suffering from osteoporosis.

Также настоящее изобретение позволяет лечить заболевания или нарушения, связанные с недостатком одной или нескольких активностей рецептора неорганических ионов. Например, некоторые формы начального гиперпаратиреоза характеризуются аномально высоким уровнем паратгормона и снижают восприимчивость паращитовидной железы к циркулирующему кальцию. Средства, изменяющие рецепторы кальция, можно использовать для изменения восприимчивости клеток паращитовидной железы к кальцию. The present invention also allows the treatment of diseases or disorders associated with a deficiency of one or more inorganic ion receptor activities. For example, some forms of initial hyperparathyroidism are characterized by abnormally high levels of parathyroid hormone and reduce the sensitivity of the parathyroid gland to circulating calcium. Calcium receptor modifying agents can be used to alter the sensitivity of parathyroid cells to calcium.

Предпочтительно соединения изменяют активность рецептора кальция и используются для лечения заболеваний или нарушений, на которые может влиять изменение одной или нескольких активностей рецептора кальция. В основном эти заболевания характеризуются атипичным костным и минеральным гомеостазом, особенно гомеостазом кальция. Preferably, the compounds alter the activity of the calcium receptor and are used to treat diseases or disorders that may be affected by a change in one or more activities of the calcium receptor. Basically, these diseases are characterized by atypical bone and mineral homeostasis, especially calcium homeostasis.

Аномальный гомеостаз кальция характеризуется одним или несколькими следующими признаками: (1) аномальным увеличением или уменьшением кальция в сыворотке; (2) аномальным увеличением или уменьшением в мочевыделении кальция; (3) аномальным увеличением или уменьшением костных уровней кальция, например определенными измерениями плотности костного минерала; (4) аномальным усвоением кальция из пищи; и (5) аномальным увеличением или уменьшением выработки и/или выделения циркулирующих посредников или гормонов, влияющих на гомеостаз кальция, таких как паратгормон и кальцитонин. Аномальное увеличение или уменьшение гомеостаза кальция в этих различных аспектах соотносится с гомеостазом у населения в целом и обычно связано с заболеванием или нарушением. Abnormal calcium homeostasis is characterized by one or more of the following symptoms: (1) an abnormal increase or decrease in serum calcium; (2) an abnormal increase or decrease in urinary calcium; (3) an abnormal increase or decrease in bone calcium levels, for example, certain measurements of bone mineral density; (4) abnormal absorption of calcium from food; and (5) an abnormal increase or decrease in the production and / or release of circulating mediators or hormones that affect calcium homeostasis, such as parathyroid hormone and calcitonin. An abnormal increase or decrease in calcium homeostasis in these various aspects is correlated with homeostasis in the general population and is usually associated with a disease or disorder.

Обычно молекула, которая изменяет активность рецептора неорганического иона, полезна для лечения заболеваний, характеризуемых атипичным гомеостазом неорганического иона. Предпочтительно, молекула изменяет один или несколько эффектов рецептора неорганического иона. Средства, изменяющие рецептор неорганического иона, включают ионмиметики, ионолитики, кальцимиметики и кальцилитики. Typically, a molecule that changes the activity of an inorganic ion receptor is useful for treating diseases characterized by atypical homeostasis of an inorganic ion. Preferably, the molecule modifies one or more effects of the inorganic ion receptor. Inorganic ion receptor modifying agents include ion mimetics, ionolytics, calcimimetics, and calcylitics.

Ионмиметики - это молекулы, которые имитируют эффекты повышенной концентраци иона у рецептора неорганического иона. Предпочтительно, молекула влияет на одну или несколько активностей рецептора кальция. Кальцимиметики - это ионмиметики, которые влияют на одну или несколько активностей рецептора кальция и, предпочтительно, связаны с рецептором кальция. Ion mimetics are molecules that mimic the effects of an increased concentration of an ion at an inorganic ion receptor. Preferably, the molecule affects one or more calcium receptor activities. Calcimimetics are ion-mimetics that affect one or more calcium receptor activities and are preferably associated with a calcium receptor.

Ионолитики - это молекулы, которые уменьшают или блокируют одну или несколько активностей, оказываемых неорганическим ионом на рецептор неорганического иона. Предпочтительно, молекула ингибирует одну или несколько активностей рецептора кальция. Кальцилитики - это ионолитики, которые ингибируют одну или несколько активностей рецептора кальция, вызываемых внеклеточным кальцием, и, предпочтительно, связаны с рецептором кальция. Ionolytics are molecules that reduce or block one or more activities exerted by an inorganic ion on the inorganic ion receptor. Preferably, the molecule inhibits one or more calcium receptor activities. Calcifications are ionolytics that inhibit one or more extracellular calcium-induced calcium receptor activities, and are preferably associated with a calcium receptor.

Средства, модулирующие рецептор неорганического иона, могут быть изготовлены в форме фамакологических средств или композиций, чтобы облегчить их введение больному. Фармакологические средства или композиции являются средствами и композициями в форме, пригодной для введения млекопитающим, предпочтительно людям. Аспекты, касающиеся форм введения, известны и включают токсические эффекты, растворимость, способ введения и поддерживающую активность. Inorganic ion receptor modulating agents can be formulated as famakologic agents or compositions to facilitate their administration to the patient. Pharmacological agents or compositions are agents and compositions in a form suitable for administration to mammals, preferably humans. Aspects regarding administration forms are known and include toxic effects, solubility, route of administration, and maintenance activity.

Следовательно, первый аспект изобретения относится к средству, изменяющему рецептор неорганического иона и содержащему молекулу, которая вызывает одну или несколько активностей рецептора неорганического иона, обусловленных внеклеточным неорганическим ионом. Молекула имеет формулу:

где каждый Х независимо выбран из группы, состоящей из изопропила, СН₃О, СН₃S, CF₃О, алифатического кольца и присоединенного или конденсированного ароматического кольца; и каждый m находится независимо между 0 и 5 включительно.Therefore, a first aspect of the invention relates to an agent for modifying an inorganic ion receptor and comprising a molecule that induces one or more inorganic ion receptor activities due to an extracellular inorganic ion. The molecule has the formula:

where each X is independently selected from the group consisting of isopropyl, CH ₃ O, CH ₃ S, CF ₃ O, an aliphatic ring and an attached or fused aromatic ring; and each m is independently between 0 and 5 inclusive.

Предпочтительно ароматические и алифатические кольца имеют 5-7 членов. Более предпочтительно, ароматические и алифатические кольца содержат только атомы углерода (например, кольцо не является гетероциклическим кольцом). Preferably, aromatic and aliphatic rings have 5-7 members. More preferably, aromatic and aliphatic rings contain only carbon atoms (for example, the ring is not a heterocyclic ring).

Предпочтительно молекула вызывает одну или несколько активностей рецептора кальция или блокирует одну или несколько активностей рецептора кальция, вызванных внеклеточным кальцием. Preferably, the molecule induces one or more calcium receptor activities or blocks one or more calcium receptor activities caused by extracellular calcium.

Другой аспект настоящего изобретения относится к средству, изменяющему рецептор неорганического иона, формулы:

где каждый Х независимо выбирают из группы, состоящей из Н, СН₃, СН₃О, СН₃СН₂О, метилендиоксигруппы, Br, Cl, F, CF₃, CHF₂, CH₂F, CF₃O, CH₃S, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, NO₂, CH₃CH₂, пропила, изопропила, бутила, изобутила, трет-бутила, ацетоксигруппы, алифатического кольца, ароматического кольца или конденсированного ароматического кольца;
каждый R независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, метила, этила, пропила, изопропила, бутила, аллила, изобутила, трет-бутила, циклопентила, циклогексила, циклогептила, циклооктила, инденила, инданила, дигидроиндолила, тиодигидроиндолила и 2-, 3- или 4-пиперид(ин)ила; и
кажды m находится независимо между 0 и 5 включительно.Another aspect of the present invention relates to a means for modifying an inorganic ion receptor of the formula:

where each X is independently selected from the group consisting of H, CH ₃ , CH ₃ O, CH ₃ CH ₂ O, methylenedioxy, Br, Cl, F, CF ₃ , CHF ₂ , CH ₂ F, CF ₃ O, CH ₃ S , OH, CH ₂ OH, CONH ₂ , CN, NO ₂ , CH ₃ CH ₂ , propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, acetoxy, an aliphatic ring, an aromatic ring or a fused aromatic ring;
each R is independently selected from the group consisting of hydrogen, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, allyl, isobutyl, tert-butyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl, indenyl, indanyl, dihydroindolyl, thiodihydroindolyl and 2-, 3- or 4-piperide (yn) sludge; and
each m is independently between 0 and 5 inclusive.

Молекула либо вызывает одну или несколько активностей рецептора неорганического иона, либо блокирует одну или несколько активностей рецептора неорганического иона, обусловленных внеклеточным кальцием. The molecule either induces one or more inorganic ion receptor activities, or blocks one or more inorganic ion receptor activities due to extracellular calcium.

В предпочтительном варианте изобретения R - либо Н, СН₃, этил, либо изопропил, и каждый Х - независимо выбран из группы, состоящей из изопропила, СН₃О, СН₃S, СF₃О, алифатического кольца и ароматического кольца. Предпочтительно алифатические кольца, ароматические и конденсированные ароматические кольца имеют 5-7 членов. Более предпочтительно ароматические и алифатические кольца содержат только атомы углерода.In a preferred embodiment of the invention, R is either H, CH ₃ , ethyl, or isopropyl, and each X is independently selected from the group consisting of isopropyl, CH ₃ O, CH ₃ S, CF ₃ O, an aliphatic ring and an aromatic ring. Preferably, aliphatic rings, aromatic and fused aromatic rings have 5-7 members. More preferably, aromatic and aliphatic rings contain only carbon atoms.

Другой аспект настоящего изобретения относится к средству, изменяющему активность рецептора неорганических ионов и содержащему молекулу, выбранную из группы, состоящей из соединения 4L, соединения 8J, соединения 8U, соединения 9R, соединения 11Х, соединения 12U, соединения 12V, соединения 12Z, соединения 14U, соединения 16М и соединения 16Р. Another aspect of the present invention relates to a means for changing the activity of an inorganic ion receptor and containing a molecule selected from the group consisting of 4L, 8J, 8U, 9R, 11X, 12U, 12V, 12Z, 14U, Compound 16M and Compound 16P.

Другие аспекты настоящего изобретения относятся к способам использования средств, описанных здесь, для лечения заболеваний или нарушений изменением активности рецептора неорганических ионов. Больных, нуждающихся в таком лечении, можно выявить обычными методами медицины, такими как обычный анализ крови. Например, этим методом можно выявить недостаток белка, на выработку или секрецию которого влияют изменения концентраций неорганических ионов, или выявить аномальные уровни неорганических ионов или гормонов, которые влияют на гомеостаз неорганических ионов. Other aspects of the present invention relate to methods of using the agents described herein to treat diseases or disorders by altering the activity of the inorganic ion receptor. Patients in need of such treatment can be detected by conventional methods of medicine, such as a routine blood test. For example, this method can detect a protein deficiency whose production or secretion is affected by changes in the concentration of inorganic ions, or to detect abnormal levels of inorganic ions or hormones that affect the homeostasis of inorganic ions.

Терапевтические методы включают введение больному терапевтически эффективного количества средства, изменяющего рецептор неорганического иона. В предпочтительных вариантах эти методы используют для лечения заболеваний или нарушений, характеризуемых аномальным гомеостазом неорганического иона, более предпочтительно заболеваний или нарушений, характеризуемых аномальным гомеостазом кальция. Заболевания и нарушения, характеризуемые аномальным гомеостазом кальция, включают гиперпаратиреоз, остеопороз и другие костные и минеральные нарушения и т.д. (как описано, например, в обычном учебнике, таком как "Harrison's Principles of Jnternal Medicine"). Такие заболевания и нарушения лечат средствами, изменяющими рецепторы кальция, которые имитируют или блокируют одно или несколько влияний Са²⁺ и, следовательно, прямо или косвенно влияют на уровень белков или других молекул в организме больного.Therapeutic methods include administering to the patient a therapeutically effective amount of an inorganic ion receptor modifying agent. In preferred embodiments, these methods are used to treat diseases or disorders characterized by abnormal homeostasis of an inorganic ion, more preferably diseases or disorders characterized by abnormal calcium homeostasis. Diseases and disorders characterized by abnormal calcium homeostasis include hyperparathyroidism, osteoporosis and other bone and mineral disorders, etc. (as described, for example, in a regular textbook such as "Harrison's Principles of Jnternal Medicine"). Such diseases and disorders are treated with agents that modify calcium receptors, which mimic or block one or more of the effects of Ca ²⁺ and, therefore, directly or indirectly affect the level of proteins or other molecules in the patient's body.

Под "терапевтически эффективным количеством" понимают количество средства, которое облегчает до некоторой степени один или несколько симптомов заболевания или нарушения у больного, или возвращает к нормальному состоянию, частично или полностью, один или несколько физиологических или биохимических параметров, связанных или служащих причиной заболевания или нарушения. By "therapeutically effective amount" is meant an amount of an agent that alleviates to some extent one or more symptoms of a disease or disorder in a patient, or returns to a normal state, in part or in full, one or more physiological or biochemical parameters related to or causing a disease or disorder .

В предпочтительном варианте больной имеет заболевание или нарушение, характеризуемое аномальным уровнем компонентов, регулируемых одним или несколькими рецепторами кальция, и молекула активна по отношению к рецепторам кальция клеток, выбранных из группы, состоящей из клетки паращитовидной железы, остеокласта кости, юкстагломерулярной клетки почки, проксимальной трубочковой клетки почки, дистальное трубочковой клетки почки, клетки центральной нервной системы, клетки периферической нервной системы, клетки толстой восходящей ветви петли Генле и/или собирающего протока, кератиноцита эпидермиса, парафолликулярной клетки щитовидной железы (С-клетки), кишечной клетки, трофобласта плаценты, тромбоцита, клетки гладкой мышцы сосудов, клетки предсердия, гастрин-секритирующей клетки, глюкагон-секретирующей клетки, клетки мезангия почки, клетки молочной железы, бета-клетки, жировой клетки, иммунной клетки и клетки желудочно-кишечного тракта. In a preferred embodiment, the patient has a disease or disorder characterized by an abnormal level of components regulated by one or more calcium receptors, and the molecule is active against calcium receptors of cells selected from the group consisting of parathyroid cells, bone osteoclast, juxtaglomerular kidney cells, proximal tubular kidney cells, distal tubular kidney cells, central nervous system cells, peripheral nervous system cells, cells of the thick ascending branch ne aphids of Henle and / or the collecting duct, epidermal keratinocyte, parafollicular thyroid cell (C-cell), intestinal cell, placental trophoblast, platelet, vascular smooth muscle cell, atrial cells, gastrin-secreting cells, glucagon-secreting cells, mesangium cells , breast cells, beta cells, fat cells, immune cells and cells of the gastrointestinal tract.

Более предпочтительно клетка является клеткой паращитовидной железы, и молекула снижает уровень паратгормона в сыворотке больного, даже более предпочтительно уровень снижается до степени, достаточной, чтобы вызвать уменьшение Са²⁺ в плазме, наиболее предпочтительно уровень паратгормона снижается до уровня у нормального индивидуума.More preferably, the cell is a parathyroid cell, and the molecule reduces the level of parathyroid hormone in the patient's serum, even more preferably the level is reduced to a level sufficient to cause a decrease in plasma Ca ²⁺ , most preferably the level of parathyroid hormone is reduced to a level in a normal individual.

Следовательно, настоящее изобретение относится к средствам и способам, пригодным для лечения заболеваний и нарушений изменением активности рецепторов неорганических ионов. Например, молекулы настоящего изобретения можно использовать, чтобы сориентировать рецепторы кальция на различные типы клеток, обнаруживающих и реагирующих на изменение внеклеточного кальция. Например, молекулы, имитирующие внеклеточный кальций можно использовать для селективного подавления секреции паратгормона клетками паращитовидной железы, или подавляют ресорбцию кости остеокластами, или стимулируют секрецию кальцитонина С-клетками. Такие молеклуы можно использовать для лечения заболеваний или нарушений, характеризуемых атипичным гомеостазом кальция, таких как гиперпаратиреоидизм и остеоопороз. Therefore, the present invention relates to means and methods suitable for treating diseases and disorders by altering the activity of inorganic ion receptors. For example, the molecules of the present invention can be used to target calcium receptors to various types of cells that detect and respond to changes in extracellular calcium. For example, molecules that mimic extracellular calcium can be used to selectively suppress parathyroid hormone secretion by parathyroid cells, or inhibit bone resorption by osteoclasts, or stimulate calcitonin secretion by C cells. Such molecules can be used to treat diseases or disorders characterized by atypical calcium homeostasis, such as hyperparathyroidism and osteoporosis.

Другие признаки и преимущества изобретения будут очевидны из последующего описания предпочтительных вариантов и формулы изобретения. Other features and advantages of the invention will be apparent from the following description of preferred embodiments and claims.

Краткое описание чертежей
Фиг. 1А-Е, 2A-D, 3A-E, 4A-E, 5A-D, 6A-E, 7A-E, 8A-E, 9A-F, 10A-D, 11A-E, 12A-D, 13A-D, 14A-D, 15A-D, 16A-D, 17A-D, 18A-E, 19A-D и 20A-D показывают химические структуры молекул, производных дифенилпропил-α-фенэтиламина, демонстрируя семейство молекул, которые были получены и подвергнуты скриннингу, чтобы найти молекулы, пригодные для изобретения.Brief Description of the Drawings
FIG. 1A-E, 2A-D, 3A-E, 4A-E, 5A-D, 6A-E, 7A-E, 8A-E, 9A-F, 10A-D, 11A-E, 12A-D, 13A- D, 14A-D, 15A-D, 16A-D, 17A-D, 18A-E, 19A-D and 20A-D show the chemical structures of diphenylpropyl-α-phenethylamine derivatives, demonstrating the family of molecules that were obtained and subjected screening to find molecules suitable for the invention.

Настоящее изобретение описывает средства, модулирующие рецепторы неорганических ионов и способные имитировать или блокировать влияние неорганического иона у рецепторов неорганического иона. Предпочтительным использованием средств, изменяющих рецепторы неорганических ионов, является лечение заболеваний или нарушений изменением активности рецепторов неорганических ионов. Предпочтительно молекулы используют для лечения заболеваний или нарушений, характеризуемых атипичным гомеостазом ионов, более предпочтительно атипичным гоместазом кальция. Известно также другое использование средств, изменяющих рецепторы неорганических ионов, например, в диагностике (РСТ/US 93/01642, WO 94/18959). The present invention describes agents that modulate inorganic ion receptors and are able to mimic or block the effect of an inorganic ion at inorganic ion receptors. A preferred use of inorganic ion receptor modifying agents is the treatment of diseases or disorders by altering the activity of inorganic ion receptors. Preferably, the molecules are used to treat diseases or disorders characterized by atypical ion homeostasis, more preferably atypical calcium homeostasis. Another use of agents that modify inorganic ion receptors is also known, for example, in diagnostics (PCT / US 93/01642, WO 94/18959).

1. Рецепторы кальция
Рецепторы кальция и нуклеиновые кислоты, кодирующие рецепторы кальция, описаны в РСТ/US 93/01642, WO 94/18959. Рецепторы кальция присутствуют в различных клетках, таких как клетки паращитовидной железы, остеокласта кости, юкстагломерулярной клетки почки, проксимальной трубочковой клетки почки, дистальной трубочковой клетки почки, клетки центральной нервной системы, клетки периферической нервной системы, клетки толстой восходящей ветви петли Генле и/или собирающего протока, кератиноцита эпидермиса, парафолликулярной клетки щитовидной железы (С-клетки), кишечной клетки, трофобласта плаценты, тромбоцита, клетки гладкой мышцы сосудов, клетки предсердия, гастрин-секретирующей клетки, глюкагон-секретирующей клетки, клетки мезангия почки, клетки молочной железы, бета-клетки, жировой клетки, иммунной клетки и клетки желудочно-кишечного тракта. Рецепторы кальция этих клеток могут быть различными. Возможно также, что клетка может иметь более, чем один тип рецептора кальция.1. Calcium receptors
Calcium receptors and nucleic acids encoding calcium receptors are described in PCT / US 93/01642, WO 94/18959. Calcium receptors are present in various cells, such as cells of the parathyroid gland, bone osteoclast, juxtaglomerular kidney cell, proximal tubular kidney cell, distal tubular kidney cell, central nervous system cell, peripheral nervous system cell, thick ascending branch of the Henle loop and / or collecting cell duct, keratinocyte of the epidermis, parafollicular cell of the thyroid gland (C-cell), intestinal cell, placental trophoblast, platelet, vascular smooth muscle cell, pre angry, gastrin-secreting cell, glucagon-secreting cell, kidney mesangial cell, mammary cell, beta cell, fat cells, immune cells and cells of the gastrointestinal tract. The calcium receptors of these cells may be different. It is also possible that a cell may have more than one type of calcium receptor.

Сравнение активностей рецепторов кальция и аминокислот различных клеток указывает, что существуют различные типа рецепторов кальция. Например, рецепторы кальция могут реагировать на различные двух- и трехвалентные катионы. Паратиреоидные рецепторы кальция реагируют на кальций и Gd³⁺, тогда как остеокласты реагируют на двухвалентные катионы, такие как кальций, и не реагируют на Gd³⁺. Следовательно, паратиреоидные рецепторы кальция отличны от рецепторов остеокластов.A comparison of the activities of calcium receptors and amino acids of different cells indicates that there are different types of calcium receptors. For example, calcium receptors can respond to various divalent and trivalent cations. Parathyroid calcium receptors respond to calcium and Gd ³⁺ , while osteoclasts respond to divalent cations, such as calcium, and do not respond to Gd ³⁺ . Consequently, parathyroid calcium receptors are different from osteoclast receptors.

С другой стороны, нуклеиновые кислоты, кодирующие рецепторы кальция паратиреоидных и С-клеток, свидетельствуют, что эти рецепторы имеют весьма похожую структуру аминокислот. Тем не менее, кальцимиметики имеют различную фармакологию и регулируют различные активности паратиреоидных клеток и С-клеток. Следовательно, фармакологические свойства рецепторов кальция могут значительно изменяться в зависимости от типа клетки или органа, в котором они проявляются, даже если рецепторы кальция имеют близкие структуры. On the other hand, nucleic acids encoding the parathyroid and C-cell calcium receptors indicate that these receptors have a very similar amino acid structure. However, calcimimetics have different pharmacologies and regulate different activities of parathyroid cells and C cells. Therefore, the pharmacological properties of calcium receptors can vary significantly depending on the type of cell or organ in which they appear, even if calcium receptors have similar structures.

Рецепторы кальция, в целом, имеют низкое сродство к внеклеточному Са²⁺ (кажущаяся K_d обычно больше, чем 0,5 мМ). Рецепторы кальция могут включать свободный или связанный эффекторный механизм в соответствии с описанным в публикации Cooper, Bloom and Roth, "Biochemical Basis of Neuropharmacology", глава 4, и, следовательно, отличаются от внутриклеточных рецепторов кальция, например калмодулина и тропонинов.Calcium receptors generally have a low affinity for extracellular Ca ²⁺ (apparent K _{d is} usually greater than 0.5 mM). Calcium receptors may include a free or bound effector mechanism as described in Cooper, Bloom and Roth, “Biochemical Basis of Neuropharmacology”, chapter 4, and therefore differ from intracellular calcium receptors, for example calmodulin and troponins.

Рецепторы кальция реагируют на изменения уровней внеклеточного кальция. Точные изменения зависят от отдельных рецепторов и вида клеток, содержащих рецептор. Например, влияние кальция in vitro на рецептор кальция в клетке паращитовидной железы состоит в следующем:
1. Увеличении концентрации внутреннего кальция. Увеличение обусловлено притоком внешнего кальция и/или созданием подвижности внутреннего кальция. Характеристики повышения внутреннего кальция включают следующее:
(а) Быстрое (максимальное повышение в пределах менее 5 с) и временное увеличение [Са²⁺] , которое невосприимчиво к ингибированию 1 мкМ La³⁺ или 1 мкМ Gd³⁺ и устраняется предварительным введением иономицина (при отсутствии внеклеточного Са²⁺);
(б) Увеличение не ингибируется дигидропиридинами;
(в) Временное увеличение устраняется предварительной обработкой 10 мМ фторидом натрия в течение 10 минут;
(г) Временное увеличение снижается предварительной обработкой активатором протеинкиназы С, таким как миристатацетат форбола, мезереин или (-)-индолактам У. Полное влияние активатора протеинкиназы С заключается в сдвиге кривой концентрация кальция - реакция вправо без влияния на максимальную реакцию; и
(д) Обработка токсином коклюша (100 нг/мл в течение больше 4 часов) не влияет на это увеличение.Calcium receptors respond to changes in extracellular calcium levels. The exact changes depend on the individual receptors and the type of cells containing the receptor. For example, the effect of in vitro calcium on the calcium receptor in a parathyroid cell is as follows:
1. An increase in the concentration of internal calcium. The increase is due to the influx of external calcium and / or the creation of mobility of internal calcium. Characteristics of increasing internal calcium include the following:
(a) Rapid (maximum increase within less than 5 s) and a temporary increase in [Ca ²⁺ ], which is immune to inhibition of 1 μM La ³⁺ or 1 μM Gd ³⁺ and is eliminated by prior administration of ionomycin (in the absence of extracellular Ca ²⁺ ) ;
(b) The increase is not inhibited by dihydropyridines;
(c) A temporary increase is eliminated by pretreatment with 10 mM sodium fluoride for 10 minutes;
(d) Temporary increase is reduced by pre-treatment with protein kinase C activator, such as phorbol myristate acetate, meserein or (-) - indolactam U. The full effect of protein kinase C activator is to shift the calcium concentration curve - reaction to the right without affecting the maximum reaction; and
(e) Treatment with pertussis toxin (100 ng / ml for more than 4 hours) does not affect this increase.

2. Быстрое (менее 30 секунд) увеличение образования инозит-1,4,5-трифосфата или диацилглицерина. Обработка токсином коклюша (100 нг/мл в течение больше 4 часов) не влияет на это увеличение;
3. Ингибирование образования циклического аденозинмонофосфата (цАМФ), стимулируемого допамином и изопротеренолом. Это влияние блокируется предварительной обработкой токсином коклюша (100 нг/мл в течение больше 4 часов);
4. Ингибирование секреции паратгормона. Обработка токсином коклюша (100 нг/мл в течение больше 4 часов) не влияет на ингибирование секреции паратгормона.2. A rapid (less than 30 seconds) increase in the formation of inositol-1,4,5-triphosphate or diacylglycerol. Treatment with pertussis toxin (100 ng / ml for more than 4 hours) does not affect this increase;
3. Inhibition of the formation of cyclic adenosine monophosphate (cAMP) stimulated by dopamine and isoproterenol. This effect is blocked by pretreatment with pertussis toxin (100 ng / ml for more than 4 hours);
4. Inhibition of parathyroid hormone secretion. Treatment with pertussis toxin (100 ng / ml for more than 4 hours) does not affect the inhibition of parathyroid hormone secretion.

Используя известные методы можно легко определить влияние кальция на другие рецепторы кальция в различных клетках. такие влияния могут быть похожи на увеличение внутреннего кальция, наблюдаемые в клетках паращитовидной железы. Однако, ожидается, что влияние отличается в других аспектах, таких как вызывание или ингибирование выделения гормона, отличного от паратгормона. Using known methods, one can easily determine the effect of calcium on other calcium receptors in various cells. such effects may be similar to the increase in internal calcium observed in parathyroid cells. However, the effect is expected to differ in other aspects, such as inducing or inhibiting the release of a hormone other than parathyroid hormone.

Средства, изменяющие рецептор неорганического иона, либо вызывают одну или несколько активностей рецептора неорганического иона, либо блокируют одну или несколько активностей рецептора неорганического иона, вызванных внеклеточным неорганическим ионом. Средства, изменяющие рецептор кальция могут имитировать или блокировать влияние внеклеточного Са²⁺ на рецептор кальция. Предпочтительными средствами, изменяющими рецептор кальция, являются кальцимиметики и кальцилитики. Общие и специфические структуры средств, изменяющих рецептор неорганического иона, приведены в реферате ранее на фиг. 1.Inorganic ion receptor modifying agents either induce one or more inorganic ion receptor activities or block one or more inorganic ion receptor activities caused by an extracellular inorganic ion. Calcium receptor modifying agents can mimic or block the effect of extracellular Ca ²⁺ on the calcium receptor. Preferred calcium receptor modifying agents are calcimimetics and calcylitics. General and specific structures of agents that modify the inorganic ion receptor are shown in the abstract earlier in FIG. 1.

Средства, изменяющие рецептор неорганического иона, можно идентифицировать скриннингом молекул, моделирующих молекулу, показывающую определенную активность (т.е. ключевую молекулу) (РСТ/US 93/01642, WO 94/18959). Inorganic ion receptor modifying agents can be identified by screening molecules to model a molecule showing a specific activity (i.e., key molecule) (PCT / US 93/01642, WO 94/18959).

Предпочтительные средства, изменяющие рецептор неорганического иона и описанные в настоящем изобретении, - это соединения 8J, 8U, 9R, 11Х, 12U, 12V, 12Z, 14U, 16М и 16Р. Все эти соединения имеют величину ЭК₅₀ меньше, чем 5 мкМ.Preferred inorganic ion receptor modifying agents described in the present invention are compounds 8J, 8U, 9R, 11X, 12U, 12V, 12Z, 14U, 16M and 16P. All of these compounds have an EC ₅₀ value of less than 5 μM.

ЭК₅₀ - это концентрация молекулы, вызывающая полумаксимальный эффект. ИК₅₀ - это концентрация, вызывающая полумаксимальный блокирующий эффект. ЭК₅₀ и ИК₅₀ можно определить анализом одной или нескольких активностей неорганического иона у рецептора неорганического иона. Предпочтительно такие анализы специфичны для определенного рецептора кальция. Например, предпочтительными являются анализы, которые измеряют гормоны, выработка или секреция которых изменяется определенным рецептором неорганического иона.EC ₅₀ is the concentration of a molecule that causes a half-maximum effect. IK ₅₀ is the concentration that causes a half-maximum blocking effect. EC ₅₀ and IC ₅₀ can be determined by analysis of one or more inorganic ion activities at the inorganic ion receptor. Preferably, such assays are specific for a particular calcium receptor. For example, assays that measure hormones whose production or secretion is altered by a particular inorganic ion receptor are preferred.

Увеличение [Са²⁺] можно обнаружить стандартными методами, такими как использование флуориметрических индикаторов или измерением роста тока Cl^- в овоците Xenopus, вводимым с нуклеиновой кислотой, кодирующей рецептор кальция (РСТ/US 93/01642, WO 94/18959). Например, поли(А)⁺ мРНК можно получить из клеток, экспрессирующих рецептор кальция, таких как клетка паращитовидной железы, остеокласт кости, юкстагломерулярная клетка почки, проксимальная трубочковая клетка почки, дистальная трубочковая клетка почки, клетка центральной нервной системы, клетка периферической нервной системы, клетка толстой восходящей ветви петли Генле и/или собирающего протока, кератиноцит эпидермиса, парафолликулярная клетка щитовидной железы (С-клетка), кишечная клетка, трофобласт плаценты, тромбоцит, клетка гладкой мышцы сосудов, клетка предсердия, гастрин-секретирующая клетка, глюкагон-секретирующая клетка, клетка мезангия почки, клетка молочной железы, бета-клетка, жировая клетка, иммунная клетка и клетка желудочно-кишечного тракта. Предпочтительно нуклеиновая кислота является нуклеиновой кислотой клетки паращитовидной железы, С-клетки или остеокласта. Более предпочтительно нуклеиновая кислота кодирует рецептор кальция и присутствует на плазмиде или векторе.An increase in [Ca ²⁺ ] can be detected by standard methods, such as using fluorimetric indicators or by measuring the increase in Cl ^- current in an Xenopus oocyte introduced with a nucleic acid encoding a calcium receptor (PCT / US 93/01642, WO 94/18959). For example, poly (A) ⁺ mRNA can be obtained from cells expressing a calcium receptor, such as a parathyroid cell, bone osteoclast, juxtaglomerular kidney cell, proximal renal tubular cell, distal renal tubular cell, peripheral nervous system cell, cell of the thick ascending branch of the loop of Henle and / or collecting duct, epidermal keratinocyte, parafollicular thyroid cell (C-cell), intestinal cell, placental trophoblast, platelet, smooth cell vascular muscle, atrial cell, gastrin-secreting cell, glucagon-secreting cell, kidney mesangium cell, breast cell, beta cell, adipose cell, immune cell and gastrointestinal cell. Preferably, the nucleic acid is a nucleic acid of a parathyroid cell, C-cell, or osteoclast. More preferably, the nucleic acid encodes a calcium receptor and is present on a plasmid or vector.

Предпочтильно молекула является кальцимиметиком или кальцилитиком с ЭК₅₀ или ИК₅₀ у рецептора кальция меньше чем или равной 5 мкМ и даже более предпочтительно меньше чем или равной 1 мкМ, 100 нМ, 10 нМ или 1 нМ. Такие низкие ЭК₅₀ или ИК₅₀ предпочтительны, так как позволяют использовать более низкие концентрации молекул in vivo или in vitro в терапии или диагностике. Открытие молекул с такими низкими ЭК₅₀ или ИК₅₀ позволяет придумывать и синтезировать другие молекулы с подобной активностью и эффективностью.Preferably, the molecule is a calcimimetic or calcitic with an EC ₅₀ or IC ₅₀ at a calcium receptor of less than or equal to 5 μM and even more preferably less than or equal to 1 μM, 100 nM, 10 nM or 1 nM. Such low EC ₅₀ or IC _{50 are} preferred because they allow the use of lower concentrations of in vivo or in vitro molecules in therapy or diagnosis. The discovery of molecules with such low EC ₅₀ or IR ₅₀ allows us to invent and synthesize other molecules with similar activity and efficiency.

В предпочтительных вариантах средством, изменяющим рецептор кальция, является кальцимиметик, ингибирующий секрецию паратгормона клеткой паращитовидной железы in vitro и уменьшающий секрецию паратгормона in vivo; стимулирующий секрецию кальцитонина С-клеткой in vitro и повышающий уровни кальцитонина in vivo; или блокирующий ресорбцию кости in vitro и ингибирующий ресорбцию кости in vivo. In preferred embodiments, the calcium receptor modifying agent is a calcimimetic that inhibits parathyroid hormone secretion by an in vitro parathyroid cell and decreases parathyroid hormone secretion in vivo; stimulating the secretion of calcitonin by C-cell in vitro and increasing the levels of calcitonin in vivo; or blocking bone resorption in vitro and inhibiting bone resorption in vivo.

В другом предпочтительном варианте средством, изменяющим рецептор кальция, является кальцилитик, который вызывает секрецию паратгормона клетками пращитовижной железы in vitro и повышает уровень паратгормона in vivo. In another preferred embodiment, the calcium receptor modifying agent is calcitic, which induces parathyroid hormone secretion by in vitro adrenal gland cells and increases parathyroid hormone in vivo.

Предпочтительно средство селективно нацелено на активность рецептора неорганического иона, более предпочтительно активность рецептора кальция, в специфической клетке. Под "селективно" понимают, что молекула осуществляет большее влияние на активность рецептора неорганического иона одного типа клеток, чем другого типа клеток при заданной концентрации средства. Предпочтительно влияние различается в 10 и больше раз. Предпочтительно концентрация относится к концентрации в плазме крови, и измеряемый эффект производится внеклеточными посредниками, такими как кальцитонин плазмы, паратгормон или кальций плазмы. Например, в предпочтительном варианте средство нацелено на секрецию паратгормона больше, чем на секрецию кальцитонина. Preferably, the agent selectively targets inorganic ion receptor activity, more preferably calcium receptor activity, in a specific cell. By "selectively" it is understood that a molecule has a greater effect on the activity of the inorganic ion receptor of one type of cell than another type of cell at a given concentration of the agent. Preferably, the effect varies 10 or more times. Preferably, the concentration refers to the concentration in the blood plasma, and the measured effect is produced by extracellular mediators, such as plasma calcitonin, parathyroid hormone or plasma calcium. For example, in a preferred embodiment, the agent is aimed at secreting parathyroid hormone more than secreting calcitonin.

В другом предпочтительном варианте, молекула имеет ЭК₅₀ или ИК₅₀ меньше чем или равные 5 мкМ у одной или нескольких, но не всех клетках, выбранных из группы, состоящей из клетки паращитовидной железы, остеокласта кости, юкстагломерулярной клетки почки, проксимальной трубочковой клетки почки, дистальной трубочковой клетки почки, клетки центральной нервной системы, клетки периферической нервной системы, клетки толстой восходящей ветви петли Генле и/или собирающего протока, кератиноцита эпидермиса, парафолликулярной клетки щитовидной железы (С-клетки), кишечной клетки, тофобласта плаценты, тромбоцита, клетки гладкой мышцы сосудов, клетки предсердия, гастрин-секретирующей клетки, глюкагон-секретирующей клетки, клетки мезангия почки, клетки молочной железы, бета-клетки, жировой клетки, иммунной клетки и клетки желудочно-кишечного тракта.In another preferred embodiment, the molecule has an EC ₅₀ or IC _{50 of} less than or equal to 5 μM in one or more but not all cells selected from the group consisting of parathyroid cells, bone osteoclast, juxtaglomerular kidney cells, proximal renal tubular cells, distal tubular kidney cells, cells of the central nervous system, cells of the peripheral nervous system, cells of the thick ascending branch of the loop of Henle and / or collecting duct, keratinocyte of the epidermis, parafollicular cell of the thyroid jelly s (C cells), intestinal cell, placental tofoblast, platelet, vascular smooth muscle cells, atrial cells, gastrin-secreting cells, glucagon-secreting cells, kidney mesangium cells, breast cells, beta cells, fat cells, immune cells and cells of the gastrointestinal tract.

Предпочтительно, средства, модулирующие рецептор неорганического иона, имитируют или блокируют все влияния внеклеточного иона на клетки, содержащие рецептор неорганического иона. Например, средства, изменяющие рецептор кальция, предпочтительно имитируют или блокируют все влияния внеклаточного иона на клетки, содержащие рецептор кальция. Кальцимиметики не обладают всеми активностями внеклеточного Са²⁺, скорее имитируют, по меньшей мере, одну активность. Подобно этому кальцилитики не уменьшают или не устраняют все активности, вызванные внеклеточным кальцием. Дополнительно различные кальцимиметики и различные кальцилитики не связываются с одним и тем же местом на рецепторе кальция, как это делает внеклеточный Са²⁺ при проявлении своей активности.Preferably, inorganic ion receptor modulating agents mimic or block all effects of the extracellular ion on cells containing the inorganic ion receptor. For example, calcium receptor modifying agents preferably mimic or block all the effects of an extra-clot ion on cells containing a calcium receptor. Calcimimetics do not possess all the activities of extracellular Ca ²⁺ , rather they mimic at least one activity. Similarly, calcifications do not reduce or eliminate all activities caused by extracellular calcium. Additionally, different calcimimetics and different calcylitics do not bind to the same place on the calcium receptor, as extracellular Ca ²⁺ does when manifesting its activity.

А. Кальцимиметики
Способность молекул имитировать или блокировать активность Са²⁺ или рецепторов кальция можно определять, используя методики, приведенные в РСТ/US 93/01642 и WO 94/18959). Например, кальцимиметики обладают одной или несколькими, а предпочтительно всеми приведенными далее активностями при испытании на клетках паращитовидной железы:
1. Быстрое (максимальное повышение в пределах менее 5 с) и временное увеличение [Са²⁺]_i, которое невосприимчиво к ингибированию 1 мкМ La³⁺ или 1 мкМ Gd³⁺, рост [Са²⁺]_i продолжает существовать в отсутствие внеклеточного Са²⁺, но устраняется предварительной обработкой иономицина (при отсутствии внеклеточного Са²⁺);
2. Молекула способствует увеличению [Са²⁺]_i, вызванному субмаксимальной концентрацией внеклеточного Са²⁺;
3. Увеличение [Са²⁺] _i, вызванное внеклеточным Са²⁺, не ингибируется дигидропиридинами;
4. Временное увеличение [Са²⁺]_i, вызванное внеклеточным Са²⁺, устраняется предварительной обработкой 10 мМ фторидом натрия в течение 10 минут;
5. Временное увеличение [Са²⁺]_i, вызванное молекулой, снижается предварительной обработкой активатором протеинкиназы С, таким как миристатацетат форбола, мезереин или (-)-индолактам У. Полное влияние активатора протеинкиназы С заключается в сдвиге кривой концентрации кальция - реакция молекулы вправо без влияния на максимальную реакцию;
6. Молекула вызывает быстрое (менее 30 секунд) увеличение образования инозит-1,4,5-трифосфата и/или диацилглицерина;
7. Молекула ингибирует образование циклического аденозинмонофосфата, стимулируемого допамином или изопротеренолом;
8. Молекула ингибирует секрецию паратгормона;
9. Предварительная обработка токсином коклюша (100 нг/мл в течение больше 4 часов) блокирует ингибирующее влияние молекулы на циклический аденозинмонофосфат, но не влияет на рост [Са²⁺]_i, инозит-1,4,5-трифосфата или диацилглицерина и не увеличивает секрецию паратгормона;
10. Молекула вызывает рост тока Сl^- в овоцитах Xenopus, инъецируемых с поли(А)⁺-обогащенной мРНК из бычьих или человеческих клеток паращитовидной железы, но не влияет на овоциты Xenopus, инъецируемые с водой или мРНК мозга или печени крыс; и
11. Также, используя клонированный рецептор кальция клетки паращитовидной железы, молекула вызовет реакцию в овоцитах Xenopus, инъецируемых со специфическими цДНК и мРНК, кодирующими рецептор.A. Calcimimetics
The ability of molecules to mimic or block the activity of Ca ²⁺ or calcium receptors can be determined using the techniques described in PCT / US 93/01642 and WO 94/18959). For example, calcimimetics have one or more, and preferably all, of the following activities when tested on parathyroid cells:
1. Fast (maximum increase within less than 5 s) and a temporary increase in [Ca ²⁺ ] _i , which is immune to inhibition of 1 μM La ³⁺ or 1 μM Gd ³⁺ , growth of [Ca ²⁺ ] _i continues to exist in the absence of extracellular Ca ²⁺ , but is eliminated by pretreatment of ionomycin (in the absence of extracellular Ca ²⁺ );
2. The molecule promotes an increase in [Ca ²⁺ ] _i caused by a submaximal concentration of extracellular Ca ²⁺ ;
3. The increase in [Ca ²⁺ ] _i caused by extracellular Ca ²⁺ is not inhibited by dihydropyridines;
4. A temporary increase in [Ca ²⁺ ] _i caused by extracellular Ca ²⁺ is eliminated by pretreatment with 10 mM sodium fluoride for 10 minutes;
5. The temporary increase in [Ca ²⁺ ] _i caused by the molecule is reduced by pre-treatment with protein kinase C activator, such as phorbol myristate acetate, meserein or (-) - indolactam U. The full effect of protein kinase C activator is to shift the calcium concentration curve - the reaction of the molecule to the right without affecting the maximum response;
6. The molecule causes a rapid (less than 30 seconds) increase in the formation of inositol-1,4,5-triphosphate and / or diacylglycerol;
7. The molecule inhibits the formation of cyclic adenosine monophosphate stimulated by dopamine or isoproterenol;
8. The molecule inhibits the secretion of parathyroid hormone;
9. Pretreatment with pertussis toxin (100 ng / ml for more than 4 hours) blocks the inhibitory effect of the molecule on cyclic adenosine monophosphate, but does not affect the growth of [Ca ²⁺ ] _i , inositol-1,4,5-triphosphate or diacylglycerol and not increases secretion of parathyroid hormone;
10. The molecule causes an increase in Cl ^- current in Xenopus oocytes injected with poly (A) ⁺ -enriched mRNA from bovine or human parathyroid cells, but does not affect Xenopus oocytes injected with water or mRNA from rat brain or liver; and
11. Also, using the cloned parathyroid cell calcium receptor, the molecule will elicit a response in Xenopus oocytes injected with specific cDNA and mRNA encoding the receptor.

Различные активности кальция можно измерять доступными методами (РСТ/US 93/01642, WO 94/18959). Параллельные определения молекул, имитирующих активность Са²⁺ на других клетках, реагирующих на кальций, очевидны из примеров, приведенных здесь и в РСТ/US 93/01642, WO 94/18959.Various calcium activities can be measured by available methods (PCT / US 93/01642, WO 94/18959). Parallel determinations of molecules that mimic the activity of Ca ²⁺ on other calcium-responsive cells are apparent from the examples given here and in PCT / US 93/01642, WO 94/18959.

Предпочтительно средство, по определению биоанализом, описанным здесь и в РСТ/US 93/01642 и WO 94/18959, имеет одну или больше, предпочтительно все следующие активности: вызывает временное увеличение внутреннего кальция длительностью меньше 30 секунд (предпочтительно мобилизуя внутренний кальций); вызывает быстрый рост [Са²⁺]_i, происходящий в пределах 30 секунд; вызывает длительное увеличение (больше тридцати секунд) [Са²⁺]_i, (предпочтительно вызываемое притоком внешнего кальция); вызывает увеличение уровней инозит-1,4,5-трифосфата или диацилглицерина, предпочтительно в пределах менее 60 секунд; и ингибирует образование циклического аденозинмонофосфата, стимулируемого допамином или изопротеренолом.Preferably, the agent, as defined by the bioanalysis described here and in PCT / US 93/01642 and WO 94/18959, has one or more, preferably all of the following activities: causes a temporary increase in internal calcium lasting less than 30 seconds (preferably mobilizing internal calcium); causes rapid growth of [Ca ²⁺ ] _i , occurring within 30 seconds; causes a prolonged increase (more than thirty seconds) [Ca ²⁺ ] _i , (preferably caused by an influx of external calcium); causes an increase in inositol-1,4,5-triphosphate or diacylglycerol levels, preferably within less than 60 seconds; and inhibits the formation of cyclic adenosine monophosphate stimulated by dopamine or isoproterenol.

Временное увеличение [Са²⁺]_i предпочтительно устраняется предварительной обработкой клетки в течение 10 минут 10 мМ фторидом натрия, или временное увеличение снижается краткой предварительной обработкой (не больше 10 минут) клетки активатором протеинкиназы С, предпочтительно таким, как миристатацетат форбола, мезереин или (-)-индолактам V.A temporary increase in [Ca ²⁺ ] _{i is} preferably eliminated by pretreating the cell for 10 minutes with 10 mM sodium fluoride, or a temporary increase is reduced by briefly pretreating (not more than 10 minutes) the cell with a protein kinase C activator, preferably such as phorbol myristate acetate, meserein or ( -) - Indolactam V.

Б. Кальцилитики
Способность молекулы блокировать активность внешнего кальция можно определять, используя стандартные методы (РСТ/US 93/01642, WO 94/18959). Например, молекулы, которые блокируют влияние внешнего кальция на клетки паращитовидной железы, обладают одной или больше, предпочтительно всеми следующими характеристиками при испытании на клетках паращитовидной железы in vitro:
1. Молекула блокирует, частично или полностью, способность повышенных концентраций внеклеточного Са²⁺:
(а) увеличивать [Са²⁺]_i,
(б) мобилизовывать внутриклеточный Са²⁺,
(в) увеличивать образование инозит-1,4,5-трифосфата,
(г) снижать образование циклического аденозинмонофосфата, стимулируемого допамином или изопротеренолом,
(д) ингибировать секрецию паратгормона.B. Calcifications
The ability of a molecule to block the activity of external calcium can be determined using standard methods (PCT / US 93/01642, WO 94/18959). For example, molecules that block the effect of external calcium on parathyroid cells have one or more, preferably all of the following characteristics when tested on parathyroid cells in vitro:
1. The molecule blocks, partially or completely, the ability of increased concentrations of extracellular Ca ²⁺ :
(a) increase [Ca ²⁺ ] _i ,
(b) mobilize intracellular Ca ²⁺ ,
(c) increase the formation of inositol-1,4,5-triphosphate,
(g) reduce the formation of cyclic adenosine monophosphate stimulated by dopamine or isoproterenol,
(e) inhibit the secretion of parathyroid hormone.

2. Молекула блокирует рост тока Сl^- в овоцитах Xenopus, инъецируемых с поли (А)⁺ мРНК из бычьих или человеческих клеток паращитовидной железы, вызываемый внеклеточным Са²⁺ или кальцимиметиками, но не в овоцитах Xenopus, инъецируемых с водой или мРНК печени;
3. Также, используя клонированный рецептор кальция клетки паращитовидной железы, молекула заблокирует реакцию, вызываемую внеклеточным Са²⁺ или кальцимиметиком, в овоцитах Xenopus, инъекцированных специфическими цДНК, мРНК или цРНК, кодирующими рецептор кальция.2. The molecule blocks the growth of Cl ^- current in Xenopus oocytes injected with poly (A) ⁺ mRNA from bovine or human parathyroid cells caused by extracellular Ca ²⁺ or calcimimetics, but not in Xenopus oocytes injected with water or liver mRNA;
3. Also, using a cloned parathyroid cell calcium receptor, the molecule will block the reaction elicited by extracellular Ca ²⁺ or a calcimimetic in Xenopus oocytes injected with specific cDNA, mRNA or cRNA encoding a calcium receptor.

Параллельные определения молекул, блокирующих активность Са²⁺ на других клетках, реагирующих на кальций, предпочтительно у рецептора кальция, очевидны из примеров, приведенных здесь и в РСТ/US 93/01642 и WO 94/18959.Parallel determinations of molecules that block Ca ²⁺ activity on other calcium responsive cells, preferably at the calcium receptor, are apparent from the examples given here and in PCT / US 93/01642 and WO 94/18959.

Предпочтительное использование соединений настоящего изобретения состоит в лечении или предотвращении различных заболеваний или нарушений изменением активности рецептора неорганического иона. Средства настоящего изобретения, изменяющие рецептор неорганического иона, могут оказывать влияние на рецептор неорганического иона, вызывая один или несколько клеточных эффектов, в конце концов производят терапевтический эффект. A preferred use of the compounds of the present invention is the treatment or prevention of various diseases or disorders by altering the activity of the inorganic ion receptor. The inorganic ion receptor modifying agents of the present invention can affect the inorganic ion receptor, causing one or more cellular effects, and ultimately produce a therapeutic effect.

Различные заболевания и нарушения можно лечить соединениями настоящего изобретения, достигающими клетки с рецептором неорганического иона, таким как рецептор кальция. Например, первичный гиперпаратиреоз характеризуется гиперкальциемией и повышенными уровнями циркулирующего паратгормона. Дефект, связанный с основным типом гипертиреоза, заключается в пониженной чувствительностью клеток паращитовидной железы к негативному регулированию обратной связи внеклеточным кальцием. Следовательно, в ткани больного первичным гипертиреозом заданное значение внеклеточного Са²⁺ сдвигается вправо, так что требуемая для подавления секреции паратгормона концентрации внеклеточного Са²⁺ должна быть больше нормальной. Более того, при первичном гиперпаратиреозе даже высокие концентрации внеклеточного Са²⁺ часто подавляют секрецию паратгормона только частично. При вторичном (уремическом) гиперпаратиреозе наблюдается похожий рост заданного значения внеклеточного Са²⁺, хотя степень подавления секреции паратгормона кальцием Са²⁺ в норме. Изменения секреции паратгормона параллельны изменениям [Са²⁺]_i; заданное значение роста [Са²⁺] _i, вызванное внеклеточным Са²⁺, сдвигается вправо, а величина такого роста снижается.Various diseases and disorders can be treated with the compounds of the present invention reaching cells with an inorganic ion receptor, such as a calcium receptor. For example, primary hyperparathyroidism is characterized by hypercalcemia and elevated levels of circulating parathyroid hormone. The defect associated with the main type of hyperthyroidism is the reduced sensitivity of parathyroid cells to negative regulation of feedback by extracellular calcium. Therefore, in the tissue of a patient with primary hyperthyroidism, the set value of extracellular Ca ²⁺ is shifted to the right, so that the concentration of extracellular Ca ²⁺ required to suppress the secretion of parathyroid hormone should be greater than normal. Moreover, with primary hyperparathyroidism, even high concentrations of extracellular Ca ²⁺ often inhibit the secretion of parathyroid hormone only partially. In secondary (uremic) hyperparathyroidism, a similar increase in the target value of extracellular Ca ²⁺ is observed, although the degree of inhibition of parathyroid hormone secretion by calcium Ca ²⁺ is normal. Changes in parathyroid hormone secretion are parallel to changes in [Ca ²⁺ ] _i ; the predetermined growth rate of [Ca ²⁺ ] _i caused by extracellular Ca ²⁺ is shifted to the right, and the magnitude of such growth decreases.

Молекулы, которые имитируют действие внеклеточного Са²⁺, действуют благотворно при длительном лечении как первичного, так и вторичного гипертиреоза. Такие молекулы обеспечивают дополнительный стимул, требуемый для подавления секреции паратгормона, которое нельзя достичь одним гиперкальциемическим состоянием, и, тем самым, помогают облегчить гиперкальциемическое состояние. Молекулы, более эффективные, чем внеклеточный Са²⁺, могут преодолеть очевидный неподавляемый компонент секреции паратгормона, который доставляет особенное беспокойство в аденоматозной ткани. Альтернативно или дополнительно такие молекулы могут подавлять синтез паратгормона, как длительная гиперкальциемия подавляет, как показано, уровни препропаратгормона мРНК в аденоматозной ткани бычьей или человеческой паращитовидной железы. Длительная гиперкальциемия также подавляет разрастание клеток паращитовидной железы in vitro, так что кальцимиметики также могут быть эффективными в ограничении гиперплазии клеток паращитовидной железы, характерной для вторичного гиперпаратиреоза.Molecules that mimic the effects of extracellular Ca ²⁺ work beneficially with long-term treatment of both primary and secondary hyperthyroidism. Such molecules provide the additional stimulus required to suppress the secretion of parathyroid hormone, which cannot be achieved by a single hypercalcemic state, and thereby help alleviate the hypercalcemic state. Molecules that are more effective than extracellular Ca ²⁺ can overcome the obvious non-repressible component of parathyroid hormone secretion, which is of particular concern in adenomatous tissue. Alternatively or additionally, such molecules can inhibit the synthesis of parathyroid hormone, as prolonged hypercalcemia suppresses, as shown, the levels of preproparathormone mRNA in adenomatous tissue of bovine or human parathyroid gland. Prolonged hypercalcemia also inhibits in vitro parathyroid cell proliferation, so that calcimimetics can also be effective in limiting parathyroid cell hyperplasia characteristic of secondary hyperparathyroidism.

Клетки, отличные от клеток паращитовидной железы, могут реагировать непосредственно на изменения концентрации внеклеточного кальция. Например, секрецию кальцитонина парафолликулярными клетками (С-клетками) щитовидной железы регулируют изменения концентрации внеклеточного Са²⁺. Выделенные остеокласты реагируют на изменение концентрации внеклеточного Са²⁺ соответствующим повышением [Са²⁺] _i, которая частично возникает вследствие мобилизации внутриклеточного Са²⁺. Рост [Са²⁺]_i в остеокластах связывают с ингибированием резорбции костей. Выделение щелочной фосфатазы костеобразующими остеобластами стимулируется непосредственно кальцием.Cells other than parathyroid cells can respond directly to changes in extracellular calcium concentration. For example, the secretion of calcitonin by parafollicular cells (C-cells) of the thyroid gland is regulated by changes in the concentration of extracellular Ca ²⁺ . Isolated osteoclasts respond to changes in the concentration of extracellular Ca ²⁺ with a corresponding increase in [Ca ²⁺ ] _i , which partially arises from the mobilization of intracellular Ca ²⁺ . The growth of [Ca ²⁺ ] _i in osteoclasts is associated with inhibition of bone resorption. The release of alkaline phosphatase by bone-forming osteoblasts is directly stimulated by calcium.

Секреция ренина юкстагломерулярными клетками почки, подобно секреции паратгормона, подавляется повышенной концентрацией внеклеточного Са²⁺. Внеклеточный Са²⁺ вызывает мобилизацию внутриклеточного Са²⁺ в этих клетках. Другие клетки почки реагируют на кальций следующим образом: повышенный Са²⁺ ингибирует образование 1,25 (ОН)₂-витамина D проксимальными трубчатыми клетками, стимулирует выработку белка, связывающего кальций, дистальными трубчатыми клетками, и ингибирует обратное всасывание Са²⁺ и Mg²⁺ трубочками и действие вазопрессина на медуллярную толстую восходящую ветвь петли Генле, снижает действие вазопрессина в клетках собирающего протока коры и влияет на клетки сосудов гладких мышц в кровеносных сосудах почечного клубочка.The secretion of renin by juxtaglomerular kidney cells, like the secretion of parathyroid hormone, is suppressed by an increased concentration of extracellular Ca ²⁺ . Extracellular Ca ²⁺ causes the mobilization of intracellular Ca ²⁺ in these cells. Other kidney cells respond to calcium as follows: elevated Ca ²⁺ inhibits the formation of 1,25 (OH) ₂ -vitamin D by proximal tubular cells, stimulates the production of calcium-binding protein by distal tubular cells, and inhibits the reverse absorption of Ca ²⁺ and Mg ^{2 +} tubules and the effect of vasopressin on the medullary thick ascending branch of the Henle loop, reduces the effect of vasopressin in the cells of the collecting duct of the cortex and affects the cells of vascular smooth muscles in the blood vessels of the renal glomerulus.

Кальций также промотирует дифференциацию бокаловидных клеток кишечника, клеток грудной железы и клеток кожи; ингибирует секрецию натриуретического пептида предсердием; снижает накопление циклического аденозинмонофосфата в тромбоцитах; изменяет секрецию гастрина и глюкагона; действует на клетки сосудов гладких мышц, изменяя секрецию клетками вазоактивных факторов; и действует на клетки ЦНС и периферийной нервной системы. Calcium also promotes the differentiation of goblet cells of the intestine, breast cells and skin cells; inhibits the secretion of the natriuretic peptide by the atrium; reduces the accumulation of cyclic adenosine monophosphate in platelets; changes the secretion of gastrin and glucagon; acts on vascular cells of smooth muscles, changing the secretion of vasoactive factors by cells; and acts on the cells of the central nervous system and peripheral nervous system.

Следовательно, существует достаточно указаний, чтобы предположить, что Са²⁺, помимо его повсеместной роли как внутриклеточного сигнала, также действует как внешнеклеточный сигнал, регулируя реакцию определенных специализированных клеток. Молекулы этого изобретения можно использовать для лечения заболеваний или нарушений, связанных с нарушением реакций этих клеток на Са²⁺.Therefore, there is enough evidence to suggest that Ca ²⁺ , in addition to its ubiquitous role as an intracellular signal, also acts as an extracellular signal, regulating the response of certain specialized cells. The molecules of this invention can be used to treat diseases or disorders associated with impaired responses of these cells to Ca ²⁺ .

Специфические заболевания и нарушения, которые можно лечить или предотвращать на основе воздействия на клетки, включают заболевания ЦНС, такие как припадки, удары, травмы головы, травмы спинного мозга, вызванные кислородной недостаточностью повреждения нервной клетки, такие как остановка сердца или дистресс новорожденных, эпилепсия, нейро-дегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцхаймера, болезнь Хантингтона и болезнь Паркинсона, слабоумие, напряжение мышц, депрессия, страх, паника, обсессивно-компулсивные нарушения, послетравматический стресс, шизофрения и синдром Туретта; заболевания, включающие избыток обратного всасывания воды почкой, такие как синдром несоответствующей секреции вазопрессина, цирроз, сердечная недостаточность и нефроз; гипертензия; предотвращающаяся и/или уменьшающаяся почечная токсичность от катионных антибиотиков (например, аминогликозидных антибиотиков); нарушения сократительной способности кишок, такие как понос и слизистый колит; заболевания желудочно-кишечной язвой; заболевания, связанные с желудочно-кишечным усвоением, такие как саркоидоз; и аутоиммунные заболевания и отторжение трансплантантов органов. Specific diseases and disorders that can be treated or prevented through exposure to cells include CNS diseases such as seizures, strokes, head injuries, spinal cord injuries caused by oxygen deficiency nerve cell damage, such as cardiac arrest or neonatal distress, epilepsy, neuro-degenerative diseases such as Alzheimer's disease, Huntington's disease and Parkinson's disease, dementia, muscle tension, depression, fear, panic, obsessive-compulsive disorders, math stress, schizophrenia, and Tourette’s syndrome; diseases including excess water reabsorption by the kidney, such as syndrome of inappropriate secretion of vasopressin, cirrhosis, heart failure and nephrosis; hypertension preventable and / or decreasing renal toxicity from cationic antibiotics (e.g. aminoglycoside antibiotics); bowel contractility disorders such as diarrhea and mucous colitis; diseases of the gastrointestinal ulcer; diseases associated with gastrointestinal absorption, such as sarcoidosis; and autoimmune diseases and organ transplant rejection.

Хотя средства настоящего изобретения, изменяющие рецептор неорганического иона, как правило, предназначены для использования в терапии больных людей, их можно использовать для лечения подобных или идентичных болезней других видов теплокровных животных, таких как другие приматы, сельскохозяйственные животные, такие как свиньи, крупный рогатый скот и птица, и спортивных и домашних животных, таких как лошади, собаки и кошки. Although the inorganic ion receptor modifying agents of the present invention are generally intended to be used in the treatment of sick people, they can be used to treat similar or identical diseases of other types of warm-blooded animals, such as other primates, farm animals, such as pigs, cattle and poultry, and sports and domestic animals such as horses, dogs, and cats.

Молекулы настоящего изобретения могут быть включены в препараты различного назначения для лечения больных изменением активности рецептора неорганических ионов. Методы и препараты для введения соединений обычно можно найти в Remington's Pharmacentical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA. Введение ионмиметиков и ионлитиков рассматривается в РСТ/US 93/01642 и WO 94/18959. The molecules of the present invention can be included in various preparations for the treatment of patients with a change in the activity of the inorganic ion receptor. Methods and preparations for administering the compounds can usually be found in Remington's Pharmaceuticalical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA. The introduction of ion mimetics and ionizers is discussed in PCT / US 93/01642 and WO 94/18959.

Подходящие формы, в частности, зависят от использования или пути ввода, например пероральные, чрескожные или инъекцией. Такие формы должны позволять средству достигать целевой клетки, независимо от того присутствует ли целевая клетка в многоклеточном хозяине или в культуре клеток. Например, фармакологические средства или препараты, вводимые инъекцией в поток крови, должны быть растворимы в нужной концентрации. Другие факторы известны и включают токсичность и формы, не позволяющие средству или препарату проявлять свой эффект. Suitable forms, in particular, depend on the use or route of administration, for example, oral, transdermal or injection. Such forms should allow the agent to reach the target cell, regardless of whether the target cell is present in a multicellular host or in a cell culture. For example, pharmacological agents or drugs injected into the blood stream must be soluble in the right concentration. Other factors are known and include toxicity and forms that prevent the agent or drug from exerting its effect.

Средства также введены в препараты в качестве их фармацевтически приемлемых солей (например, солей присоединения кислоты) и комплексов. Получение таких солей может облегчить фармакологическое использование физических характеристик средства, не препятствуя проявлению физиологического эффекта. Примеры полезных изменений физических свойств включают снижение точки плавления для облегчения введения через слизистую оболочку и увеличение растворимости для облегчения введения более высоких концентраций лекарства. The agents are also formulated as their pharmaceutically acceptable salts (e.g., acid addition salts) and complexes. Obtaining such salts can facilitate the pharmacological use of the physical characteristics of the drug, without interfering with the manifestation of the physiological effect. Examples of beneficial changes in physical properties include lowering the melting point to facilitate administration through the mucosa and increasing solubility to facilitate administration of higher drug concentrations.

Для системного назначения предпочтительным является пероральное введение. С другой стороны, можно использовать инъекцию, например, внутримышечную, внутривенную, интраперитонеальную и подкожную. Для инъекции молекулы изобретения вводят в жидкие растворы, предпочтительно в физиологически совместимые буферы, такие как раствор Хэнка или раствор Ринджера. Дополнительно молекулы можно вводить в твердой форме и растворять или суспендировать немедленно перед использованием. Можно получать также лиофилизированные формы. For systemic use, oral administration is preferred. Alternatively, an injection may be used, for example, intramuscular, intravenous, intraperitoneal and subcutaneous. For injection, the molecules of the invention are administered in liquid solutions, preferably in physiologically compatible buffers, such as Hank's solution or Ringer's solution. Additionally, the molecules can be introduced in solid form and dissolved or suspended immediately before use. Lyophilized forms may also be prepared.

Системное назначение может быть также осуществлено через слизистую или через кожу. Для введения через слизистую или кожу в препарате используют смачивающее вещество, соответствующее преодолеваемому барьеру. Такие смачивающие вещества обычно известны и включают, например, в случае введения через слизистую, соли желчных кислот и производные фузидовой кислоты. Дополнительно для облегчения проницаемости можно использовать моющие средства. Введение через слизистую можно осуществлять разбрызгиванием через нос, например, или используя суспозитории. Для перорального введения молекулы включают в обычные пероральные дозировочные формы, такие как капсулы, таблетки и тонизирующие средства. Systemic administration may also be via the mucosa or through the skin. For administration through the mucous membrane or skin, a wetting agent is used in the preparation corresponding to the barrier to be overcome. Such wetting agents are commonly known and include, for example, when administered through the mucosa, bile salts and fusidic acid derivatives. Additionally, detergents can be used to facilitate permeability. The introduction through the mucous membrane can be carried out by spraying through the nose, for example, or using a suspension. For oral administration, the molecules are included in conventional oral dosage forms such as capsules, tablets, and tonicity agents.

Для местного введения молекулы изобретения включают в мази, гели и кремы, как известно из предшествующего уровня. For topical administration, the molecules of the invention are included in ointments, gels and creams, as is known from the prior art.

Обычно терапевтически эффективное количество составляет от 1 нмоль до 3 мкмоль молекулы, предпочтительно от 0,1 нмоль до 1 мкмоль, в зависимости от ее ЭК₅₀ или ИК₅₀ и возраста и веса больного и заболевания или нарушения, которым страдает больной. Обычно количество составляет между 0,1 и 50 мг/кг, предпочтительно от 0,01 до 20 мг/кг массы излечиваемого.Typically, a therapeutically effective amount is from 1 nmol to 3 μmol of the molecule, preferably from 0.1 nmol to 1 μmol, depending on its EC ₅₀ or IC ₅₀ and the age and weight of the patient and the disease or disorder that the patient suffers. Typically, the amount is between 0.1 and 50 mg / kg, preferably from 0.01 to 20 mg / kg, of the mass to be treated.

Примеры
Соединения, приведенные здесь, можно синтезировать стандартными методами, описанными в РСТ/US 93/01642 и WO 94/18959. Примеры, описывающие соединения 4L, 8J, 8U, 9R, 11Х, 12U, 12V, 12Z, 14U, 16М и 16Р приведены ниже. Соединения 4L, 8J, 8U, 11Х и 16М получали конденсацией первичного амина с альдегидом или кетоном в присутствии изопропоксида титана (IV). Образующиеся промежуточные имины затем восстанавливали in situ действием цианборгидрида натрия, боргнидрида натрия или триацетоксиборгидрида натрия. Промежуточный енамин в синтезе соединения 8U каталитически восстанавливали, используя гидроксид палладия.Examples
The compounds provided herein can be synthesized by standard methods described in PCT / US 93/01642 and WO 94/18959. Examples describing compounds 4L, 8J, 8U, 9R, 11X, 12U, 12V, 12Z, 14U, 16M and 16P are given below. Compounds 4L, 8J, 8U, 11X, and 16M were prepared by condensation of a primary amine with an aldehyde or ketone in the presence of titanium (IV) isopropoxide. The resulting intermediate imines were then reduced in situ by the action of sodium cyanoborohydride, sodium borohydride or sodium triacetoxyborohydride. The intermediate enamine in the synthesis of compound 8U was catalytically reduced using palladium hydroxide.

Соединения 9R, 14U и 16Р получали восстановительным аминированием коммерчески доступного альдегида или кетона и первичного амина в присутствии цианборгидрида натрия или триацетоксиборгидрида натрия. В синтезе этих трех соединений (9R, 14U и 16Р) найдено, что триацетоксиборгидрид натрия приводит к желательным диастереомерам с большей диастереоселективностью, чем цианборгидрид натрия. Далее обогащенную смесь очищают до единственного диастереомера высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЖХ) с нормальной фазой или перекристаллизацией из органических растворителей. Compounds 9R, 14U, and 16P were prepared by reductive amination of a commercially available aldehyde or ketone and primary amine in the presence of sodium cyanoborohydride or sodium triacetoxyborohydride. In the synthesis of these three compounds (9R, 14U and 16P), sodium triacetoxyborohydride was found to produce the desired diastereomers with greater diastereoselectivity than sodium cyanoborohydride. Next, the enriched mixture is purified to a single diastereomer by high-performance liquid chromatography (HPLC) with a normal phase or recrystallization from organic solvents.

Соединения 12U, 12V и 12Z получали конденсацией амина с нитрилом при участии диизобутилалюминийгидрида. Образующийся промежуточный имин восстанавливали in situ цианборгидридом натрия или боргидридом натрия. Промежуточные алкены (соединения 12U и 12V) восстанавливали каталитическим гидрированием в этаноле в присутствии палладия на угле. Соответствующие хлоргидраты в виде белого вещества получали обработкой свободного основания эфирным HCl. Амины в этих синтезах приобретали (1) в Aldrich Chemical Co., Милуоки, Висконсин, (2) Celgene Corp, Warren, Нью-Джерси, или (3) синтезировали обычными методами. Все другие реагенты приобретены в Aldrich Chemical Co. Compounds 12U, 12V, and 12Z were prepared by condensation of an amine with nitrile with the participation of diisobutylaluminum hydride. The resulting intermediate imine was reduced in situ by sodium cyanoborohydride or sodium borohydride. Intermediate alkenes (compounds 12U and 12V) were reduced by catalytic hydrogenation in ethanol in the presence of palladium on charcoal. The corresponding hydrochlorides as a white substance were obtained by treating the free base with ethereal HCl. Amines in these syntheses were purchased (1) from Aldrich Chemical Co., Milwaukee, Wisconsin, (2) Celgene Corp, Warren, New Jersey, or (3) were synthesized by conventional methods. All other reagents purchased from Aldrich Chemical Co.

Пример 1: Синтез соединения 4
N-3-Фенил-1-пропил-1-(1-нафтил)этиламин
Смесь 3-фенил-1-пропиламина (135 мг, 1 ммоль), 1'-ацетонафтона (170 мг, 1 ммоль) и изопропоксида титана (IV) (355 мг, 1,3 ммоль) перемешивали при комнатной температуре 1 час. Реакционную смесь обрабатывали 1М этанольным раствором цианборгидрида натрия (1 мл) и перемешивали при комнатной температуре 16 часов. Реакционную смесь разбавляли эфиром и обрабатывали водой (0,1 мл). Смесь центрифугировали, эфирный слой отделяли и концентрировали до состояния молочного масла. Небольшую часть этого материала (10 мг) очищали ВЖХ (Phenomenex, 1,0•25 см, 5 мкМ оксида кремния), используя градиент дихлорметана к 10% метанола в дихлорметане, содержащем 0,1% изопропиламина. Это дает продукт (свободное основание) в виде единственного компонента по данным
GС/Е1-МS (R_t=10,48 мин) m/z (отн. инт.) 289 (М⁺, 11), 274 (63), 184 (5), 162 (5), 155 (100), 141 (18), 115 (8), 91 (45), 77 (5).Example 1: Synthesis of compound 4
N-3-Phenyl-1-propyl-1- (1-naphthyl) ethylamine
A mixture of 3-phenyl-1-propylamine (135 mg, 1 mmol), 1'-acetonaphton (170 mg, 1 mmol) and titanium (IV) isopropoxide (355 mg, 1.3 mmol) was stirred at room temperature for 1 hour. The reaction mixture was treated with 1M ethanolic sodium cyanoborohydride solution (1 ml) and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with ether and treated with water (0.1 ml). The mixture was centrifuged, the ether layer was separated and concentrated to the state of milk oil. A small portion of this material (10 mg) was purified by HPLC (Phenomenex, 1.0 x 25 cm, 5 μM silica) using a gradient of dichloromethane to 10% methanol in dichloromethane containing 0.1% isopropylamine. This gives the product (free base) as a single component according to
GС / Е1-МS (R _t = 10.48 min) m / z (rel. Int.) 289 (М ⁺ , 11), 274 (63), 184 (5), 162 (5), 155 (100) , 141 (18), 115 (8), 91 (45), 77 (5).

Пример 2: Синтез соединения 8J
N-(3-Фенилпропил)-1-(3-метилтиофенил)этиламина гидрохлорид
3'-Аминоацетофенон (2,7 г, 20 ммоль) растворяли в 4 мл концентрированной НС1, 4 г льда и 8 мл воды. Раствор охлаждали до 0^oС и в течение 5 минут к нему добавляли раствор нитрита натрия (1,45 г, 21 ммоль) в 3-5 мл воды при температуре ниже 6^oС. Метилмеркаптид натрия (1,75 г, 25 ммоль) растворяли в 5 мл воды и охлаждали до 0^oС. К этому раствору в течение 10 минут при температуре ниже 10^oС добавляли соль диазония. Реакционную смесь перемешивали дополнительно 1 час, в течение которого температура поднималась до окружающей. Реакционную смесь смешивали с эфиром и водой. Эфирный слой отделяли и промывали бикарбонатом натрия и хлоридом натрия и сушили сульфатом натрия. Эфир упаривали и получали 3'-метилтиоацетофенон с 74% выходом. Неочищенный материал очищали перегонкой при пониженном давлении.Example 2: Synthesis of compound 8J
N- (3-Phenylpropyl) -1- (3-methylthiophenyl) ethylamine hydrochloride
3'-aminoacetophenone (2.7 g, 20 mmol) was dissolved in 4 ml of concentrated HCl, 4 g of ice and 8 ml of water. The solution was cooled to 0 ^{° C.} and a solution of sodium nitrite (1.45 g, 21 mmol) in 3-5 ml of water was added to it over 5 minutes at a temperature below 6 ^° C. Sodium methyl mercaptide (1.75 g, 25 mmol) dissolved in 5 ml of water and cooled to 0 ^° C. To this solution, a diazonium salt was added over 10 minutes at a temperature below 10 ^{° C.} The reaction mixture was stirred for an additional 1 hour, during which the temperature rose to ambient. The reaction mixture was mixed with ether and water. The ether layer was separated and washed with sodium bicarbonate and sodium chloride and dried with sodium sulfate. The ether was evaporated to give 3'-methylthioacetophenone in 74% yield. The crude material was purified by distillation under reduced pressure.

Смешивали 3-фенилпропиламин (0,13 г, 1 ммоль), 3'-метилтиоацетофенон (0,17 г, 1 ммоль) и изопропоксид титана (IV) и оставляли стоять в течение 4 часов. Добавляли этанол (1 мл) и цианоборгидрид натрия (0,063 г, 1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь обрабатывали добавлением 4 мл эфира и 200 мкл воды. Смесь встряхивали и центрифугировали для отделения твердого вещества. Эфирный слой отделяли от осадка и растворитель удаляли в вакууме. Масло растворяли в дихлорметане и соединение выделяли ТСХ на силикагеле, элюируя 3% раствором метанола в дихлорметане. Получали целевое соединение в виде чистого масла:
GС/Е1-М (R_t=7,64 мин) m/z (отн. инт.) 285 (М⁺, 18), 270 (90), 180 (17), 151 (100), 136 (32), 104 (17), 91 (54), 77 (13).3-Phenylpropylamine (0.13 g, 1 mmol), 3'-methylthioacetophenone (0.17 g, 1 mmol) and titanium (IV) isopropoxide were mixed and allowed to stand for 4 hours. Ethanol (1 ml) and sodium cyanoborohydride (0.063 g, 1 mmol) were added and the reaction mixture was stirred overnight. The reaction mixture was treated by adding 4 ml of ether and 200 μl of water. The mixture was shaken and centrifuged to separate a solid. The ether layer was separated from the precipitate and the solvent was removed in vacuo. The oil was dissolved in dichloromethane and the compound was isolated by TLC on silica gel, eluting with a 3% solution of methanol in dichloromethane. Received the target compound in the form of pure oil:
GC / E1-M (R _t = 7.64 min) m / z (rel. Int.) 285 (M ⁺ , 18), 270 (90), 180 (17), 151 (100), 136 (32) 104 (17), 91 (54), 77 (13).

Пример 3: Синтез соединения 8U
N-3-(2-Метоксифенил)-1-пропил-(R)-3-метокси-α-метилбензиламина гидрохлорид
Смесь (R)-(+)-3-метокси-α-метилбензиламина (3,02 г, 20 ммоль), 2-метоксициннамальдегида (3,24 г, 20 ммоль) и изопропоксида титана (IV) (8,53 г, 30 ммоль, 1,5 экв.) перемешивали 2 часа при комнатной температуре и обрабатывали 1М раствором цианоборгидрида натрия в этаноле (20 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи (16 часов), разбавляли диэтиловым эфиром и обрабатывали водой (1,44 мл, 80 ммоль, 4 экв.). После перемешивания в течение 1 часа реакционную смесь центрифугировали, эфирный слой удаляли и концентрировали до состояния масла. Этот материал растворяли в ледяной уксусной кислоте, встряхивали с гидроксидом палладия и гидрировали под давлением 4,219 кг/см² в течение 2 часов при комнатной температуре. Катализатор удаляли фильтрованием и образовавшийся раствор концентрировали до состояния густого масла. Этот материал растворяли в дихлорметане и нейтрализовали 1N раствором NaOH. Дихлорметановый раствор отделяли от водной фазы, сушили над безводным карбонатом калия и концентрировали до состояния масла. Этот материал растворяли в эфире 1М НСl в диэтиловом эфире. Образующийся осадок (белое твердое вещество) собирали, промывали диэтиловым эфиром и сушили на воздухе.Example 3: Synthesis of compound 8U
N-3- (2-Methoxyphenyl) -1-propyl- (R) -3-methoxy-α-methylbenzylamine hydrochloride
A mixture of (R) - (+) - 3-methoxy-α-methylbenzylamine (3.02 g, 20 mmol), 2-methoxy cinnamaldehyde (3.24 g, 20 mmol) and titanium (IV) isopropoxide (8.53 g, 30 mmol, 1.5 equiv.) Was stirred for 2 hours at room temperature and treated with a 1M solution of sodium cyanoborohydride in ethanol (20 ml). The reaction mixture was stirred overnight (16 hours), diluted with diethyl ether and treated with water (1.44 ml, 80 mmol, 4 equiv.). After stirring for 1 hour, the reaction mixture was centrifuged, the ether layer was removed and concentrated to an oil. This material was dissolved in glacial acetic acid, shaken with palladium hydroxide and hydrogenated under a pressure of 4.219 kg / cm ² for 2 hours at room temperature. The catalyst was removed by filtration and the resulting solution was concentrated to a thick oil. This material was dissolved in dichloromethane and neutralized with a 1N NaOH solution. The dichloromethane solution was separated from the aqueous phase, dried over anhydrous potassium carbonate and concentrated to an oil. This material was dissolved in 1 M HCl in diethyl ether. The resulting precipitate (white solid) was collected, washed with diethyl ether and dried in air.

GС/Е1-МS (R_t= 9,69 мин) m/z (отн. инт.) 299 (М⁺, 21), 284 (100), 164 (17), 150 (8), 135 (81), 121 (40), 102 (17), 91 (43), 77 (18).GC / E1-MS (R _t = 9.69 min) m / z (rel. Int.) 299 (M ⁺ , 21), 284 (100), 164 (17), 150 (8), 135 (81) , 121 (40), 102 (17), 91 (43), 77 (18).

Пример 4: Синтез соединения 9R
(R)-N-(1-(2-Нафтилэтил)-(R)-1-(1-нафтил)этиламина гидрохлорид
Смесь (R)-(+)-1-(1-нафтил)этиламина (10,0 г, 58 ммоль), 2'-ацетонафтон (9,4 г, 56 ммоль), изопропоксид титана (IV) (20,7 г, 73,0 изопропоксид титана (IV) ммоль) и этанол (абс.) (100 мл) нагревали до 60^oС в течение 3 часов. Затем добавляли цианоборгидрид натрия (NaCNBH₃) (3,67 г, 58,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре 18 часов. К реакционной смеси добавляли эфир (11) и воду (10 мл) и образующийся осадок удаляли центрифугированием. Надосадочную жидкость упаривали под вакуумом, неочищенный продукт перекристаллизовывали четыре раза из горячего гексана и получали 1,5 г чистого (98%) диастереомера. Свободное основание растворяли в гексане, фильтровали и добавляли эфирный раствор НС1 для осаждения продукта в виде белого твердого вещества (1,1 г, выход 6%), т.пл.: размягчается при 200-240^oС (разл.).Example 4: Synthesis of compound 9R
(R) -N- (1- (2-Naphthylethyl) - (R) -1- (1-naphthyl) ethylamine hydrochloride
A mixture of (R) - (+) - 1- (1-naphthyl) ethylamine (10.0 g, 58 mmol), 2'-acetonaphton (9.4 g, 56 mmol), titanium (IV) isopropoxide (20.7 g, 73.0 titanium (IV) isopropoxide mmol) and ethanol (abs.) (100 ml) were heated to 60 ^{° C.} for 3 hours. Then sodium cyanoborohydride (NaCNBH ₃ ) (3.67 g, 58.4 mmol) was added. The reaction mixture was stirred at room temperature for 18 hours. Ether (11) and water (10 ml) were added to the reaction mixture, and the resulting precipitate was removed by centrifugation. The supernatant was evaporated in vacuo, the crude product was recrystallized four times from hot hexane, and 1.5 g of pure (98%) diastereomer was obtained. The free base was dissolved in hexane, filtered and an ethereal HC1 solution was added to precipitate the product as a white solid (1.1 g, 6% yield), mp: softens at 200-240 ^° C (decomp.).

Пример 5: Синтез соединения 11Х
N-(4-Изопропилбензил)-(R)-1-(1-нафтил)этиламина гидрохлорид
Смесь (R)-(+)-1-(1-нафтил)этиламина (1,06 г, 6,2 ммоль), 4-изопропилбензальдегида (0,92 г, 6,2 ммоль) и изопропоксида титана (IV) (2,2 г, 7,7 ммоль) нагревали до 100^oС в течение 5 мин, затем перемешивали при комнатной температуре 4 часа. Добавляли цианоборгидрид натрия (NaCNBH₃) (0,39 г, 6,2 ммоль) и затем этанол (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре 18 часов. К реакционной смеси добавляли эфир (100 мл) и воду (1 мл) и образующийся осадок удаляли центрифугированием. Надосадочную жидкость упаривали под вакуумом, неочищенный продукт хроматографировали на силикагеле (колонка 50 мм • 30 см) (элюирование смесью 1% метанол/хлороформ). Хроматогнрафированный материал затем растворяли в гексане и добавляли эфирный НС1 для осаждения продукта в виде белого твердого вещества (0,67 г, выход 35%), т.пл. 257-259^oС.Example 5: Synthesis of compound 11X
N- (4-Isopropylbenzyl) - (R) -1- (1-naphthyl) ethylamine hydrochloride
A mixture of (R) - (+) - 1- (1-naphthyl) ethylamine (1.06 g, 6.2 mmol), 4-isopropylbenzaldehyde (0.92 g, 6.2 mmol) and titanium (IV) isopropoxide ( 2.2 g, 7.7 mmol) was heated to 100 ^{° C.} for 5 minutes, then stirred at room temperature for 4 hours. Sodium cyanoborohydride (NaCNBH ₃ ) (0.39 g, 6.2 mmol) and then ethanol (1 ml) were added. The reaction mixture was stirred at room temperature for 18 hours. Ether (100 ml) and water (1 ml) were added to the reaction mixture, and the resulting precipitate was removed by centrifugation. The supernatant was evaporated in vacuo, the crude product was chromatographed on silica gel (column 50 mm x 30 cm) (elution with 1% methanol / chloroform). The chromatographed material was then dissolved in hexane and ethereal HC1 was added to precipitate the product as a white solid (0.67 g, 35% yield), mp. 257-259 ^o C.

Пример 6: Синтез соединения 12U
N-3-(2-Метилфенил)-1-пропил-(R)-3-метокси-α-метилбензиламина гидрохлорид
Раствор 2-метилциннамонитрила (1,43 г, 10 ммоль) в дихлорметане (10 мл) охлаждали до 0^oС и добавляли по каплям в течение 15 минут 1М раствор диизобутилалюминийгидрида в дихлорметане (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0^oС в течение 15 минут и добавляли к ней по каплям в течение 15 минут 1М раствор (R)-(+)-3-метокси-α-метилбензиламина (1,51 г, 10 ммоль) в дихлорметане (10 мл). Реакционную смесь перемешивали 1 час при 0^oС и выливали в раствор этанола (100 мл), содержащий цианоборгидрид натрия (1 г, 16 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 48 часов при комнатной температуре, затем разбавляли эфиром и нейтрализовали 1N NaOH. Эфирный слой удаляли, сушили над безводным карбонатом калия и концентрировали до состояния масла. Этот материал хроматографировали на колонке силикагеля, используя градиент дихлорметана к 5% метанолу в дихлорметане с получением ненасыщенного полупродукта, единственный компонент по данным
GC/Е1-MS (R_t= 10,06 мин) m/z (отн. инт.) 281 (М⁺, 17), 266 (59), 176 (19), 146 (65), 135 (73), 131 (100), 91 (21), 77 (13).Example 6: Synthesis of compound 12U
N-3- (2-Methylphenyl) -1-propyl- (R) -3-methoxy-α-methylbenzylamine hydrochloride
A solution of 2-methylcinnamonitrile (1.43 g, 10 mmol) in dichloromethane (10 ml) was cooled to 0 ^{° C.} and a 1M solution of diisobutylaluminum hydride in dichloromethane (10 ml) was added dropwise over 15 minutes. The reaction mixture was stirred at 0 ^{° C.} for 15 minutes and a 1M solution of (R) - (+) - 3-methoxy-α-methylbenzylamine (1.51 g, 10 mmol) in dichloromethane was added dropwise over 15 minutes 10 ml). The reaction mixture was stirred for 1 hour at 0 ^{° C.} and poured into a solution of ethanol (100 ml) containing sodium cyanoborohydride (1 g, 16 mmol). The reaction mixture was stirred 48 hours at room temperature, then diluted with ether and neutralized with 1N NaOH. The ether layer was removed, dried over anhydrous potassium carbonate and concentrated to an oil. This material was chromatographed on a silica gel column using a gradient of dichloromethane to 5% methanol in dichloromethane to give an unsaturated intermediate, the only component according to
GC / E1-MS (R _t = 10.06 min) m / z (rel. Int.) 281 (M ⁺ , 17), 266 (59), 176 (19), 146 (65), 135 (73) , 131 (100), 91 (21), 77 (13).

Ненасыщенный полупродукт гидрировали (1 атм Н₂) в этаноле в присутствии палладия на угле в течение 16 часов при комнатной температуре. Продукт этой реакции превращали в гидрохлорид, обрабатывая 1М НСl в диэтиловом эфире.The unsaturated intermediate was hydrogenated (1 atm H ₂ ) in ethanol in the presence of palladium on charcoal for 16 hours at room temperature. The product of this reaction was converted to the hydrochloride by treating with 1 M HCl in diethyl ether.

GC/Е1-MS (R_t=9,31 мин) этого материала (свободное основание) показывает единственный компонент: m/z (отн. инт.) 283 (М⁺ 21), 268 (100), 164 (12), 148 (85), 121 (12), 105 (49), 91 (23), 77 (21).GC / E1-MS (R _t = 9.31 min) of this material (free base) shows a single component: m / z (rel. Int.) 283 (M ⁺ 21), 268 (100), 164 (12), 148 (85), 121 (12), 105 (49), 91 (23), 77 (21).

Пример 7: Синтез соединения 12 V
N-3-(3-Метилфенил)-1-пропил-(R)-3-метокси-α-метилбензиламина гидрохлорид
Соединение получали как в примере 6, применяя 2-метилциннамонитрил. Ненасыщенный полупродукт был единственным компонентом по данным GC/Е1-MS (R_t= 10,21 мин) m/z (отн. инт.) 281 (М⁺, 57), 266 (86), 146 (98), 131 (100), 115 (43), 102 (26), 91 (43), 77 (18). Восстановление этого материала и образование гидрохлорида по способу примера 6 дает продукт:
GC/Е1-MS (R_t= 9,18 мин) m/z (отн. инт.) 281 (М⁺, 19), 268 (100), 164 (11), 148 (8), 135 (76), 121 (16), 105 (45), 91 (23), 77 (21).Example 7: Synthesis of compound 12 V
N-3- (3-Methylphenyl) -1-propyl- (R) -3-methoxy-α-methylbenzylamine hydrochloride
The compound was prepared as in Example 6 using 2-methylcinnamonitrile. The unsaturated intermediate was the only component according to GC / E1-MS (R _t = 10.21 min) m / z (rel. Int.) 281 (M ⁺ , 57), 266 (86), 146 (98), 131 ( 100), 115 (43), 102 (26), 91 (43), 77 (18). The restoration of this material and the formation of hydrochloride according to the method of example 6 gives the product:
GC / E1-MS (R _t = 9.18 min) m / z (rel. Int.) 281 (M ⁺ , 19), 268 (100), 164 (11), 148 (8), 135 (76) , 121 (16), 105 (45), 91 (23), 77 (21).

Пример 8: Синтез соединения 12Z
N-3-(2-Хлорфенил)-1-пропил-(R)-1-(1-нафтил)этиламина гидрохлорида
Соединение получали как в примере 6 из 2-хлоргидроциннамонитрила и (R)-(+)-1-(1-нафтил)этиламина в количествах по 10 ммоль. Хроматография на силикагеле с применением градиента дихлорметана к 5% метанолу в дихлорметане дает продукт как единственный компонент по данным ТСХ (5% метанола в дихлорметане). Гидрохлорид получают обработкой 1М НСl в диэтиловом эфире.Example 8: Synthesis of compound 12Z
N-3- (2-Chlorophenyl) -1-propyl- (R) -1- (1-naphthyl) ethylamine hydrochloride
The compound was obtained as in example 6 from 2-chlorohydrocinnamonitrile and (R) - (+) - 1- (1-naphthyl) ethylamine in quantities of 10 mmol. Silica gel chromatography using a gradient of dichloromethane to 5% methanol in dichloromethane gives the product as the only component according to TLC (5% methanol in dichloromethane). The hydrochloride is obtained by treatment with 1M Hcl in diethyl ether.

Пример 9: Синтез соединения 14U
(R)-N-1-(4-Метоксифенил)этил-(R)-1-(1-нафтил)этиламина гидрохлорид
Смесь (R)-(+)-1-(1-нафтил)этиламина (1,1 г, 6,2 ммоль), 4'-метоксиацетофенона (0,93 г, 6,2 ммоль), изопропоксида титана (IV) (2,2 г, 7,7 ммоль) и этанола (абс.) (1 мл) нагревали при 60^oС в течение 3 часов. Затем добавляли цианоборгидрид натрия (NaCNBH₃) (0,39 г, 6,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре 18 часов. К реакционной смеси добавляли эфир (200 мл) и воду (2 мл) и образующийся осадок удаляли центрифугированием. Надосадочную жидкость упаривали под вакуумом и неочищенный продукт хроматографировали на силикагеле (колонка 25 мм • 25 см) (элюировали 1% МеОН/СНСl₃). Часть этого материала очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией [Selectosil, 5 мкМ силикагель; 25 см • 10,0 мм (Phenomenex, Torrance, CA) 4 мл в минуту; УФ детектор, 275 нм; 12% этилацетата, 88% гексана (время элюирования 12,0 мин)]. Очищенный диастереомер растворяли в гексане и добавляли эфирный НСl, чтобы высадить продукт в виде белого твердого вещества (20 мг), т.пл. 209-210^oС (разл.).Example 9: Synthesis of compound 14U
(R) -N-1- (4-Methoxyphenyl) ethyl- (R) -1- (1-naphthyl) ethylamine hydrochloride
A mixture of (R) - (+) - 1- (1-naphthyl) ethylamine (1.1 g, 6.2 mmol), 4'-methoxyacetophenone (0.93 g, 6.2 mmol), titanium (IV) isopropoxide (2.2 g, 7.7 mmol) and ethanol (abs.) (1 ml) were heated at 60 ^{° C.} for 3 hours. Then sodium cyanoborohydride (NaCNBH ₃ ) (0.39 g, 6.2 mmol) was added and the reaction mixture was stirred at room temperature for 18 hours. Ether (200 ml) and water (2 ml) were added to the reaction mixture, and the resulting precipitate was removed by centrifugation. The supernatant was evaporated in vacuo and the crude product was chromatographed on silica gel (25 mm x 25 cm column) (1% MeOH / CHCl _{3 was} eluted). A portion of this material was purified by high performance liquid chromatography [Selectosil, 5 μM silica gel; 25 cm • 10.0 mm (Phenomenex, Torrance, CA) 4 ml per minute; UV detector, 275 nm; 12% ethyl acetate, 88% hexane (elution time 12.0 min)]. The purified diastereomer was dissolved in hexane and ethereal HCl was added to precipitate the product as a white solid (20 mg), mp 209-210 ^o C (decomp.).

Пример 10. Синтез соединения 16М
N-(3-хлор-4-метоксибензил-(R)-1-(1-нафтил)этиламина гидрохлорид
Смесь (R)-(+)-1-(1-нафтил)этиламина (6,6 г, 39 ммоль), 3'-хлор-4'-метоксибензальдегида (6,6 г, 39 ммоль), изопропоксида титана (IV) (13,8 г, 48,8 ммоль) и этанола (абс.) (30 мл) нагревали при 80^oС в течение 30 минут, затем перемешивали при комнатной температуре 3 часа. Затем добавили цианоборгидрид натрия (NaCNBH₃) (2,45 г, 39 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре 18 часов. К реакционной смеси добавляли эфир (100 мл) и воду (2 мл) и образующийся осадок удаляли центрифугированием. Надосадочную жидкость упаривали под вакуумом и неочищенный продукт хроматографировали на силикагеле (колонка 50 мм • 30 см) (элюировали дихлорметаном). Хроматографированный материал затем растворяли в гексане (500 мл), обеспечивали норитом, фильтровали (0,2 мкМ) и к образующемуся раствору добавляли эфирный НС1 для осаждения продукта в виде белого твердого вещества (10,2 г, выход 56%), т.пл.: 241-242^oС (разл).Example 10. Synthesis of compound 16M
N- (3-chloro-4-methoxybenzyl- (R) -1- (1-naphthyl) ethylamine hydrochloride
A mixture of (R) - (+) - 1- (1-naphthyl) ethylamine (6.6 g, 39 mmol), 3'-chloro-4'-methoxybenzaldehyde (6.6 g, 39 mmol), titanium isopropoxide (IV ) (13.8 g, 48.8 mmol) and ethanol (abs.) (30 ml) were heated at 80 ^{° C.} for 30 minutes, then stirred at room temperature for 3 hours. Then sodium cyanoborohydride (NaCNBH ₃ ) (2.45 g, 39 mmol) was added and the reaction mixture was stirred at room temperature for 18 hours. Ether (100 ml) and water (2 ml) were added to the reaction mixture, and the resulting precipitate was removed by centrifugation. The supernatant was evaporated in vacuo and the crude product was chromatographed on silica gel (50 mm x 30 cm column) (eluted with dichloromethane). The chromatographed material was then dissolved in hexane (500 ml), provided with norite, filtered (0.2 μM) and ethereal HC1 was added to the resulting solution to precipitate the product as a white solid (10.2 g, 56% yield), mp .: 241-242 ^o C (decomp.).

Пример 11: Синтез соединения 16Р
4-Метокси-3-метилацетофенон [предшественник 16Р]
Смесь 4'-гидрокси-3'-метилацетофенона (5,0 г, 33,3 ммоль), иодметана (5,7 г, 40,0 ммоль), К₂СО₃ (гранулированный, безводный) и ацетона кипятили с обратным холодильником 3 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали для удаления неорганических солей и упаривали под вакуумом. Неочищенный продукт растворяли в эфире (100 мл) и промывали водой (2•20 мл). Органический слой сушили (Na₂SO₄) и упаривали, получая 4,5 г, выход 82,4%. Кетон использовали в следующей реакции без дополнительной очистки.Example 11: Synthesis of compound 16P
4-Methoxy-3-methylacetophenone [precursor 16P]
A mixture of 4'-hydroxy-3'-methylacetophenone (5.0 g, 33.3 mmol), iodomethane (5.7 g, 40.0 mmol), K ₂ CO ₃ (granular, anhydrous) and acetone was refluxed 3 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature, filtered to remove inorganic salts and evaporated in vacuo. The crude product was dissolved in ether (100 ml) and washed with water (2 • 20 ml). The organic layer was dried (Na ₂ SO ₄ ) and evaporated, yielding 4.5 g, yield 82.4%. Ketone was used in the next reaction without further purification.

(R)-N-(1-(4-Метокси-3-метилфенил)этил)-(R)-1-(1-нафтил)этиламина гидрохлорид [соединение 16Р]
Смесь (R)-(+)-1-(1-нафтил)этиламина (4,24 г, 24,8 ммоль), 4'-метокси-3'-метилацетофенона (4,06 г, 24,8 ммоль), изопропоксида титана (IV) (8,8 г, 30,9 ммоль) и этанола (абс.) (1 мл) нагревали при 100^oС в течение 2 часов. Добавляли изопанол (45 мл) и реакционную смесь охлаждали ледяной баней до 10^oС. Затем по частям в течение 15 минут добавляли триацетоксиборгидрид натрия (NaНВ(О₂ССH₃)₃) (10,5 г, 49,5 ммоль). Реакционную смесь далее нагревали при 70^oС в течение 18 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в эфир (400 мл). Суспензию центрифугировали, надосадочную жидкость собирали, а осадок промывали эфиром (400 мл). Объединенные органические растворы упаривали под вакуумом. Остаток растворяли в эфире (400 мл) и провывали 1N NaOH (4•50 мл) и водой (2•50 мл). Органический слой сушили (Na₂SO₄), фильтровали и упаривали под вакуумом. К влажному остатку добавляли этанол (абс.) и остаток тщательно сушили на роторном испарителе до состояния масла. Смесь хроматографировали на силикагеле (50 мм • 30 см) [элюирование (1% метанола: 1% изопропанола: хлороформ) дает 4,8 г масла].(R) -N- (1- (4-Methoxy-3-methylphenyl) ethyl) - (R) -1- (1-naphthyl) ethylamine hydrochloride [16P compound]
A mixture of (R) - (+) - 1- (1-naphthyl) ethylamine (4.24 g, 24.8 mmol), 4'-methoxy-3'-methylacetophenone (4.06 g, 24.8 mmol), titanium (IV) isopropoxide (8.8 g, 30.9 mmol) and ethanol (abs.) (1 ml) were heated at 100 ^{° C.} for 2 hours. Isopanol (45 ml) was added and the reaction mixture was cooled in an ice bath to 10 ^° C. Then sodium triacetoxyborohydride (NaHB (O ₂ CCH ₃ ) ₃ ) (10.5 g, 49.5 mmol) was added in portions over a period of 15 minutes. The reaction mixture was further heated at 70 ^{° C.} for 18 hours. The mixture was cooled to room temperature and poured into ether (400 ml). The suspension was centrifuged, the supernatant was collected, and the precipitate was washed with ether (400 ml). The combined organic solutions were evaporated in vacuo. The residue was dissolved in ether (400 ml) and washed with 1N NaOH (4 • 50 ml) and water (2 • 50 ml). The organic layer was dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and evaporated in vacuo. Ethanol (abs.) Was added to the wet residue and the residue was thoroughly dried on a rotary evaporator to an oil state. The mixture was chromatographed on silica gel (50 mm x 30 cm) [elution (1% methanol: 1% isopropanol: chloroform) gives 4.8 g of oil].

Целевой диастереомер далее очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией [SUPELCOSIL^TM PLC-Si, 18 мкм силикагель; 25 см • 21,2 мм (Supelco Inc. , Bellefonte, РА), 7 мл в минуту; УФ детектор, 275 нм; 20% этилацетата, 80% гексана (время элюирования 9,5-11,0 мин)]. Вводы (800 мкл аликвоты) смеси (100 мг/мл раствор в элюенте) дали 65 мг целевого изомера. Многократные вводы дали 1,0 г чистого материала. Хроматографированный материал растворяли в гексане (50 мл) и гидрохлорид осаждали эфирным HCl. Соль собирали на стеклянном фильтре, промывали геасаном и получали 1,0 г белого твердого вещества, т.пл. 204-205^oС.The target diastereomer was further purified by high performance liquid chromatography [SUPELCOSIL ^™ PLC-Si, 18 μm silica gel; 25 cm • 21.2 mm (Supelco Inc., Bellefonte, RA), 7 ml per minute; UV detector, 275 nm; 20% ethyl acetate, 80% hexane (elution time 9.5-11.0 min)]. Inlets (800 μl aliquots) of the mixture (100 mg / ml solution in eluent) gave 65 mg of the desired isomer. Multiple entries gave 1.0 g of pure material. The chromatographed material was dissolved in hexane (50 ml) and the hydrochloride was precipitated with ethereal HCl. Salt was collected on a glass filter, washed with geasan and 1.0 g of a white solid was obtained, mp. 204-205 ^o C.

Другие варианты охватываются следующими пунктами формулы изобретения. Other options are covered by the following claims.

Claims

1. The compound of the formula

where each X is independently selected from the group consisting of isopropyl, CH ₃ O, CH ₃ S aliphatic ring and attached or condensed aromatic ring;
each Y is independently selected from the group consisting of isopropyl, CH ₃ O, CH ₃ S, CF ₃ O, an aliphatic ring and an attached or fused aromatic ring;
each m and n are independently 0 to 5 inclusive,
or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

2. The compound of the formula

where X and Y are independently selected from the group consisting of CH ₃ , CH ₃ O, CH ₃ CH ₂ O, methylenedioxy group, Br, Cl, F, CF ₃ , CHF ₂ CH ₂ F, CF ₃ O, CH ₃ S, OH , CH ₂ OH, CONH ₂ , CN, NO ₂ , CH ₃ CH ₂ , propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, acetoxy, an aliphatic ring, and an attached or fused aromatic ring;
each R is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, allyl, isobutyl, tert-butyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl, indenyl, indanyl, dihydroindolyl, thiodihydroindolyl, and 2-, 3- or 4-piperide (yn) sludge;
each m and n are independently 0 to 5 inclusive, provided that two of X together form a fused aromatic ring having 5-7 members that can be substituted, with the exception of the following compounds:
(R ₁ R) -N- (1- (1-naphthyl) ethyl) -1-phenylethylamine,
(R ₁ R) -N- (1- (2-naphthyl) ethyl) -1-phenylethylamine,
(R ₁ R) -N- (1- (1-naphthyl) ethyl) -1- (3-methoxyphenyl) ethylamine,
(R ₁ R) -N- (1- (2-naphthyl) ethyl) -1- (3-methoxyphenyl) ethylamine,
or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

3. The compound according to claim 2, characterized in that the condensed aromatic ring having 5-7 members formed by X contains only carbon atoms.

4. The compound according to claim 2, characterized in that it is selected from compounds having the following formulas:

or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

5. The compound according to p. 2, characterized in that R is selected from the group consisting of H, CH, ethyl and isopropyl.

6. The compound of claim 5, wherein each Y is independently selected from the group consisting of isopropyl, CH ₃ O, CH ₃ S, CF ₃ O, an aliphatic ring, and an attached or fused aromatic ring.

7. The compound of claim 2, representing a compound of the formula

or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

8. The compound according to claim 2, representing a compound of the formula

or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

9. The compound according to claim 2, representing a compound of the formula

or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

10. The compound according to claim 2, representing a compound of the formula

or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

11. The compound according to claim 2, representing a compound of the formula

or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

12. A pharmaceutical composition for treating diseases or disorders characterized by abnormal calcium homeostasis, comprising a compound according to any one of claims. 1-11 and a pharmaceutically acceptable carrier.

13. A method of treating a patient with a disease or disorder characterized by abnormal calcium homeostasis, characterized in that it comprises administering a composition according to claim 12.

14. The method according to p. 13, characterized in that the composition comprises a compound of the formula

where each X is independently selected from the group consisting of H, CH ₃ , CH ₃ O, CH ₃ CH ₂ O, methylenedioxy, Br, Cl, F, CF ₃ , CHF ₂ , CH ₂ F, CF ₂ O, CH ₂ S , OH, CH ₂ OH, CONH ₂ , CN, NO ₂ , CH ₃ CH ₂ , propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, acetoxy, aliphatic and an attached or fused aromatic ring;
each R is independently selected from the group consisting of hydrogen, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, allyl, isobutyl, tert-butyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl, indenyl, indanyl, dihydroindolyl, thiodihydroindoindolyl, and 2-, 3 - or 4-piperide (yn) sludge;
each m and n are independently 0 to 5 inclusive, with the exception of the following compounds:
(R) -N- (phenylmethyl) -1-phenylethylamine,
(R ₁ R) -N- (1- (1-naphthyl) ethyl) -1-phenylethylamine,
(R ₁ R) -N- (1- (2-naphthyl) ethyl) -1-phenylethylamine,
(R) -N- (1-naphthylmethyl) -1-phenylethylamine,
(R) -N- (2-naphthylmethyl) -1-phenylethylamine,
(R ₁ R) -N- (1- (1-naphthyl) ethyl) -1- (3-methoxyphenyl) ethylamine,
(R ₁ R) -N- (1- (2-naphthyl) ethyl) -1- (3-methoxyphenyl) ethylamine;
or a pharmaceutically acceptable salt or complex thereof.

15. The method according to p. 14, characterized in that the patient has a disease or disorder characterized by abnormal calcium homeostasis.

16. The method according to p. 13, characterized in that said patient has a disease or disorder selected from the group consisting of primary or secondary hyperparathyroidism, Paget's disease, hypercalcemia, osteoporosis or hypertension.

17. The method according to p. 14 or 15, characterized in that the patient has a disease or disorder selected from the group consisting of primary or secondary hyperparathyroidism, Paget's disease, hypercalcemia, osteoporosis or hypertension.