RU2192882C1

RU2192882C1 - Medicinal agent and method of treatment of pathological syndrome caused by hemopoiesis impairment

Info

Publication number: RU2192882C1
Application number: RU2001110347/14A
Authority: RU
Inventors: Е.Д. Гольдберг; А.М. Дыгай; О.И. Эпштейн
Original assignee: Эпштейн Олег Ильич; Гольдберг Евгений Данилович; Дыгай Александр Михайлович
Priority date: 2001-04-18
Filing date: 2001-04-18
Publication date: 2002-11-20

Abstract

FIELD: medicine, hematology, homeopathy, pharmacy. SUBSTANCE: invention relates to the developed antibody-base medicinal agent that comprises activated form of supersmall doses of monoclonal, polyclonal or natural antibodies raised to erythropoietin prepared by multiple successive dilution and external effect, mainly by homeopathic technology. For preparing antibodies human or heterogeneous alpha-, beta- or omega-erythropoietin, among them, recombinant or genetic engineering one is used being mixture of different, mainly, hundredth dilutions is used. Invention can be used for treatment and prophylaxis of acute and chronic diseases associated with hemopoiesis impairment, mainly, erythropoiesis. EFFECT: expanded arsenal of homeopathic agents. 4 cl, 1 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения и профилактики острых и хронических заболеваний, связанных с нарушением кроветворения, преимущественно эритропоэза. The invention relates to medicine and can be used for the treatment and prevention of acute and chronic diseases associated with impaired blood formation, mainly erythropoiesis.

Из уровня техники известно использование антител для лечения патологических синдромов (SU 1331508 А, А 61 К 39/00, 1984; SU 1730144 А1, С 12 N 7/00, 1992). The use of antibodies for the treatment of pathological syndromes is known from the prior art (SU 1331508 A, A 61 K 39/00, 1984; SU 1730144 A1, C 12 N 7/00, 1992).

Известны также лекарственные препараты (сыворотки, иммуноглобулины) на основе антител, используемых в терапевтических дозах (например, см. Регистр лекарственных средств России, Энциклопедия лекарств, 7-е изд., 2000, стр. 358-359). Drugs (serums, immunoglobulins) based on antibodies used in therapeutic doses are also known (for example, see Russian Drug Register, Encyclopedia of Medicines, 7th ed., 2000, pp. 358-359).

Однако среди данных препаратов нет средств, используемых для лечения заболеваний, связанных с нарушением кроветворения. However, among these drugs there are no drugs used to treat diseases associated with impaired blood formation.

Известен способ лечения патологического синдрома, связанного с нарушением кроветворения, путем введения в организм рекомбинантного человеческого эритропоэтина (см., например, Регистр лекарственных средств России "Энциклопедия лекарств", 7 издание, Москва, РЛС, 2000, с.789). There is a method of treating a pathological syndrome associated with impaired hematopoiesis by introducing recombinant human erythropoietin into the body (see, for example, the Russian Drug Register "Encyclopedia of Drugs", 7th edition, Moscow, Radar Station, 2000, p.789).

Основным недостатком применения такого препарата является наличие многочисленных и тяжелых побочных эффектов. The main disadvantage of using such a drug is the presence of numerous and severe side effects.

Изобретение направлено на создание эффективного препарата для лечения и профилактики острых и хронических заболеваний, связанных с нарушением кроветворения, преимущественно эритропоэза, путем использования активированных форм антител. The invention is aimed at creating an effective drug for the treatment and prevention of acute and chronic diseases associated with impaired hematopoiesis, mainly erythropoiesis, by using activated forms of antibodies.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что лекарственное средство содержит активированную форму сверхмалых доз моноклональных, поликлональных или естественных антител к эритропоэтину, приготовленную путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия, преимущественно по гомеопатической технологии. The solution to this problem is ensured by the fact that the drug contains an activated form of ultra-low doses of monoclonal, polyclonal or natural antibodies to erythropoietin, prepared by repeated serial dilution and external exposure, mainly by homeopathic technology.

При этом для получения антител используют человеческий или гетерологичный эритропоэтин альфа, бета или омега, в том числе рекомбинантный или генно-инженерный. At the same time, human or heterologous erythropoietin alpha, beta or omega, including recombinant or genetic engineering, is used to produce antibodies.

Способ лечения патологического синдрома, обусловленного нарушением кроветворения, преимущественно эритропоэза, заключается в том, что используют активированные формы сверхмалых доз антител к альфа, бета или омега-эритропоэтину, полученные путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия. A method of treating a pathological syndrome caused by impaired hematopoiesis, mainly erythropoiesis, is to use activated forms of ultra-low doses of antibodies to alpha, beta or omega-erythropoietin obtained by repeated serial dilution and external exposure.

Предпочтительно использование смеси различных, преимущественно сотенных, гомеопатических разведений. It is preferable to use a mixture of various, mainly hundred, homeopathic dilutions.

Полученное в соответствии с изобретением лекарственное средство представляет собой новый стимулятор эритропоэза, который характеризуется выраженной специфической фармакологической активностью, отсутствием побочных эффектов при сохранении терапевтического действия, экологической чистотой и низкой себестоимостью. The medicine obtained in accordance with the invention is a new erythropoiesis stimulator, which is characterized by a pronounced specific pharmacological activity, the absence of side effects while maintaining the therapeutic effect, ecological purity and low cost.

При этом в отличие от физиологических (терапевтических) доз антител активированные формы сверхмалых доз антител к эритропоэтину не связывают (инактивируют) эндогенный эритропоэтип, но модифицируют его эффекты. Новый препарат оказывает эффект, синергичный с эффектом эритропоэтина. Наличие терапевтического эффекта у сверхмалых доз антител, активированных по гомеопатической технологии, а тем более его однонаправленность с действием исходного вещества, не следует из известного уровня знаний и выявлена автором. Moreover, in contrast to physiological (therapeutic) doses of antibodies, the activated forms of ultra-low doses of antibodies to erythropoietin do not bind (inactivate) endogenous erythropoietip, but modify its effects. The new drug has a synergistic effect with the effect of erythropoietin. The presence of a therapeutic effect in ultra-low doses of antibodies activated by homeopathic technology, and even more so its unidirectionality with the action of the starting substance, does not follow from a known level of knowledge and has been identified by the author.

Лекарственный препарат приготовляют преимущественно следующим образом. The drug is prepared mainly as follows.

Рекомбинантный человеческий бета-эритропоэтин, экспрессируемый в клетках СНО (клетки яичника китайского хомяка), очищенный путем электрофореза и содержащий не менее 97% активной субстанции, используют в качестве иммуногена для иммунизации кроликов. Полученные иммунные поликлональные антитела очищают методом аффинной хроматографии с белком А. Recombinant human beta-erythropoietin expressed in CHO cells (Chinese hamster ovary cells), purified by electrophoresis and containing at least 97% of the active substance, is used as an immunogen to immunize rabbits. The resulting immune polyclonal antibodies are purified by protein A affinity chromatography.

Методика получения иммунных антител описана, например, в книге: Иммунологические методы/ под ред. Г.Фримеля, М.: Медицина, 1987, с.9-33. The method of obtaining immune antibodies is described, for example, in the book: Immunological methods / ed. G. Fremel, Moscow: Medicine, 1987, p. 9-33.

Выделенные антитела к рекомбинантному человеческому бета-эритропоэтину последовательно многократно разводят и подвергают внешнему механическому воздействию до получения сверхмалых или малых доз, например, по гомеопатической технологии потенцирования (см. Гомеопатические лекарственные средства. Руководство по описанию и изготовлению, В.Швабе, Москва, 1967, с. 12-38). При этом производят равномерное уменьшение концентрации путем последовательного разведения 1 объемной части исходной субстанции (антител) в 9 объемных частях (для десятичного разведения D) или в 99 объемных частях (для сотенного разведения С) нейтрального растворителя с многократным вертикальным встряхиванием каждого полученного разведения и использованием преимущественно отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой дозы (потенции). Isolated antibodies to recombinant human beta-erythropoietin are repeatedly diluted and subjected to external mechanical action until ultra-low or low doses are obtained, for example, using homeopathic potentiation technology (see Homeopathic medicines. Description and manufacture manual, V. Schwabe, Moscow, 1967, p. 12-38). In this case, a uniform decrease in concentration is made by successive dilution of 1 volume part of the starting substance (antibodies) in 9 volume parts (for decimal dilution D) or in 99 volume parts (for hundred dilution C) of a neutral solvent with multiple vertical shaking of each dilution obtained and using mainly separate containers for each subsequent dilution to obtain the desired dose (potency).

Внешнюю обработку в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием. External processing in the process of reducing the concentration can also be carried out by ultrasound, electromagnetic or other physical effects.

Используют приготовленное таким образом лекарственное средство, преимущественно в принятых в гомеопатической практике лекарственных формах и разведениях, в виде спиртовых или водных растворов или таблеток (гранул), полученных путем пропитывания до насыщения содержащегося в лекарственной форме наполнителя потенцированным раствором или непосредственным введением последнего в жидкую лекарственную форму. Для повышения лечебного эффекта препарата используют смесь различных гомеопатических разведений. A drug prepared in this way is used, mainly in dosage forms and dilutions accepted in homeopathic practice, in the form of alcohol or aqueous solutions or tablets (granules), obtained by soaking the filler in the dosage form by saturation with a potentized solution or by directly introducing the latter into a liquid dosage form . To increase the therapeutic effect of the drug, a mixture of various homeopathic dilutions is used.

Пример 1. Example 1

При изучении влияния активированных форм сверхмалых доз антител к эритропоэтину (анти-ЭП) на костномозговой эритропоэз, подавленный введением адриамицина в максимальной переносимой дозе, мышам линии CBA/CaLac контрольной и опытной групп предварительно вводили адриамицин в дозе 6 мг/кг однократно внутрибрюшинно. Затем животным опытной группы вводили моноклональные антитела к рекомбинантному человеческому эритропоэтину бета в виде смеси гомеопатических разведений С₁₂+С₃₀+С₂₀₀; в растворе зондом per os ежедневно по 0,2 мл/мышь в течение 10 суток начиная со дня введения цитостатика. Животные контрольной группы получали соответствующий растворитель (дистиллированная вода) в эквивалентном объеме по той же схеме. С 3-х по 10-е и на 12-е сутки эксперимента животных умерщвляли методом цервикальной дислокации позвоночника, определяли общую клеточность костного мозга (ОКК), общее количество лейкоцитов (ОКЛ), ретикулоцитов и эритроцитов в периферической крови. На мазках костного мозга и крови подсчитывали соответственно миело- и гемограмму.When studying the effect of activated forms of ultra-low doses of antibodies to erythropoietin (anti-EP) on bone marrow erythropoiesis, suppressed by the administration of adriamycin in the maximum tolerated dose, adriamycin in the control and experimental groups was previously injected with a dose of 6 mg / kg once intraperitoneally. Then, the animals of the experimental group were injected with monoclonal antibodies to recombinant human erythropoietin beta in the form of a mixture of homeopathic dilutions C ₁₂ + C ₃₀ + C ₂₀₀ ; in a solution with a per os probe, 0.2 ml / mouse daily for 10 days starting from the day the cytostatic is administered. Animals of the control group received the corresponding solvent (distilled water) in an equivalent volume according to the same scheme. From the 3rd to the 10th and the 12th day of the experiment, the animals were euthanized by cervical dislocation of the spine, the total bone marrow cellularity (OCC), the total number of leukocytes (OKL), reticulocytes and erythrocytes in peripheral blood were determined. On smears of bone marrow and blood, myelo- and hemograms were counted, respectively.

Результаты исследования фармакологического действия препарата, представленные в таблице 1, показали, что его введение мышам приводит к ускорению процессов восстановления эритропоэза, подавленного цитостатиком, по сравнению с животными контрольной группы, получавшими растворитель. The results of the study of the pharmacological action of the drug, presented in table 1, showed that its administration to mice accelerates the recovery of erythropoiesis, inhibited by cytostatic, compared with animals of the control group treated with the solvent.

Пример 2. Example 2

Больной К., 40 лет, после курса химиотерапии по поводу хронического миелолейкоза жалуется на резкую слабость, головокружение, одышку при незначительной нагрузке. Объективно: выражена бледность кожи и видимых слизистых. При анализе крови выявлена тяжелая гипопластическая анемия. Назначено: поликлональные антитела к рекомбинантному человеческому эритропоэтину альфа в смеси гомеопатических разведений D30+С30+С200 - по 1 таблетке ежедневно. При повторном анализе крови через 5 суток выявлено повышение уровня гемоглобина и числа эритроцитов и ретикулоцитов в периферической крови. На 10-е сутки лечения самочувствие больного нормализовалось, в анализе крови: гемоглобин 100 г/л, эритроциты 3,1х10⁶ в мл, ретикулоциты 5

.Patient K., 40 years old, after a course of chemotherapy for chronic myelogenous leukemia complains of severe weakness, dizziness, shortness of breath with a slight load. Objectively: pale skin and visible mucous membranes are expressed. A blood test revealed severe hypoplastic anemia. Prescribed: polyclonal antibodies to recombinant human erythropoietin alpha in a mixture of homeopathic dilutions D30 + C30 + C200 - 1 tablet daily. A repeated blood test after 5 days revealed an increase in hemoglobin and the number of red blood cells and reticulocytes in peripheral blood. On the 10th day of treatment, the patient's health returned to normal, in a blood test: hemoglobin 100 g / l, red blood cells 3.1 × 10 ⁶ in ml, reticulocytes 5

.

Пример 3. Example 3

Больная У., 47 лет, обратилась с жалобами на слабость, одышку, головокружения, ноющие боли в сердце. При подробном опросе выявлено неудержание мочи, извращение аппетита и вкуса, сухость кожи. В анамнезе 3 родов, гиперменорея, повторные дисфункциональные маточные кровотечения. Объективно: кожные покровы и видимые слизистые бледные, ЧСС 80 уд/мин, при аускультации сердца систолический шум на верхушке. В анализе крови: гипохромная гипорегенераторная анемия, гемоглобин 60 г/л, эритроциты 2.5х10⁶ в мл, ретикулоциты 1

. Ранее при лечении анемии больная отмечала плохую переносимость препаратов железа. Назначено: моноклональные антитела к рекомбинантному человеческому эритропоэтину альфа в смеси гомеопатических разведений С30+С200+С1000 по 1 таблетке ежедневно. Через 7 суток после начала лечения субъективно состояние улучшилось, неудержание мочи, боли в сердце, одышка отсутствуют. В анализе крови гемоглобин 85 г/л, эритроциты 3х10⁶ в мл, ретикулоциты 6

. Больная выписана через 15 суток после начала лечения в удовлетворительном состоянии, в анализе крови гемоглобин 110 г/л, эритроциты 4х10⁶ в мл.Patient U., 47 years old, complained of weakness, shortness of breath, dizziness, aching heart pain. A detailed survey revealed urinary incontinence, a distortion of appetite and taste, and dry skin. A history of 3 births, hypermenorrhea, repeated dysfunctional uterine bleeding. Objectively: skin and visible mucous membranes, heart rate of 80 beats / min, with auscultation of the heart systolic murmur at the apex. In the blood test: hypochromic hyporegenerative anemia, hemoglobin 60 g / l, red blood cells 2.5x10 ⁶ in ml, reticulocytes 1

. Previously, in the treatment of anemia, the patient noted poor tolerance to iron preparations. Prescribed: monoclonal antibodies to recombinant human erythropoietin alpha in a mixture of homeopathic dilutions C30 + C200 + C1000, 1 tablet daily. 7 days after the start of treatment, the subjective condition improved, urinary incontinence, heart pain, shortness of breath. In a blood test, hemoglobin 85 g / l, red blood cells 3x10 ⁶ in ml, reticulocytes 6

. The patient was discharged 15 days after the start of treatment in a satisfactory condition, in the analysis of blood hemoglobin 110 g / l, red blood cells 4x10 ⁶ in ml.

Claims

1. The drug is based on antibodies, characterized in that it contains an activated form of ultra-low doses of monoclonal, polyclonal or natural antibodies to erythropoietin, prepared by repeated serial dilution and external exposure, mainly by homeopathic technology.

2. The drug under item 1, characterized in that for the production of antibodies using human or heterologous erythropoietin alpha, beta or omega, including recombinant or genetically engineered.

3. A method for treating a pathological syndrome caused by impaired hematopoiesis, mainly erythropoiesis, by administering a drug based on erythropoietin, characterized in that activated forms of ultra-low doses of antibodies to alpha, beta or omega-erythropoietin are obtained, obtained by repeated serial dilution and external exposure.

4. The treatment method according to claim 3, characterized in that a mixture of various homeopathic dilutions is used.