RU2191752C2 - Биопрепарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов - Google Patents
Биопрепарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2191752C2 RU2191752C2 RU99120413/13A RU99120413A RU2191752C2 RU 2191752 C2 RU2191752 C2 RU 2191752C2 RU 99120413/13 A RU99120413/13 A RU 99120413/13A RU 99120413 A RU99120413 A RU 99120413A RU 2191752 C2 RU2191752 C2 RU 2191752C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oil
- preparation
- drug
- cells
- bacteria
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
В состав бактериального препарата, имеющего коммерческое название "Экойл", входят аэробные нефтеокисляющие бактерии Mycobacterium, Rhodococcus и Acinetobacter, сахароза, полиэтиленгликоль, нефть и вода. Препарат обладает высокой утилизирующей способностью по отношению к нефти, мазуту, керосину, дизельному топливу, нафталину, пентадекану, тетрадекану, гексадецену, фенилдекану, пирену, пристану, фенантрену, аценафтену в широком диапазоне температур и может быть использован для очистки почв и водоемов, загрязненных нефтепродуктами и солями тяжелых металлов из-за устойчивости культур препарата к ионам тяжелых металлов: Cu, Ag, Mn, Ni, Zn, Mo, Pb, Fe, Cr; а также к фенолу и формальдегиду. Биопрепарат не токсичен, не загрязняет окружающую среду, срок хранения в условиях холодильника до 1 месяца. 4 з.п. ф-лы.
Description
Изобретение относится к микробиологической очистке почв и водоемов при разливе нефти и нефтепродуктов, при очистке промышленных сточных вод, загрязненных нефтепродуктами и солями тяжелых металлов.
Проблема очистки водоемов и почв от загрязнений нефтью и нефтепродуктами является важной задачей биотехнологии защиты окружающей среды. Процесс самовосстановления загрязненных почв является очень длительным и может продолжаться более 25 лет, а в районах севера и до 50 лет. Интенсификация биологического разрушения углеводородов нефти в окружающей среде может быть достигнута за счет интродукции в загрязненную экосистему нефтеокисляющих микроорганизмов.
Известен бактериальный препарат "Путидойл" (ТУ 64-16-75-91), предназначенный для ускорения разложения нефти. Его недостатком является сложная технология приготовления препарата, которая предусматривает распылительную сушку живой культуры бактерий. Этот метод сушки не позволяет получить препарат с титром клеток более 1010 кл/г вследствие инактивации клеток под действием высоких температур (+60oС).
Существуют также публикации, указывающие на то, что в естественных условиях препарат "Путидойл" оказался малоэффективен, и что он оказывает угнетающее воздействие на естественный микробный ценоз (Новиков Ю.В., Комзолова В.В. Исследования бактериального препарата "Путидойл", предложенного для очистки водоемов от нефти. - "Водное хозяйство", 1992, 2, с.121-123).
Наиболее близок предлагаемому бактериальный препарат "Нафтокс" (патент RU 2053206). Его недостатком является то, что бактерии препарата утилизируют только нормальные парафины нефти (С12-С18), а это 10-20% от состава нефти. В состав же нефти входят, кроме нормальных парафинов, нафтены, ароматические, полиароматические, непредельные, предельные, изопреноидные и другие углеводороды, все они более токсичны для живой природы, чем нормальные углеводороды, и без их биодеструкции очистка от нефтезагрязнений будет незначительная.
Задачей предлагаемого изобретения является создание высокоэффективного бактериального препарата (предлагаемое название "Экойл"), обладающего высокой утилизирующей способностью по отношению к нефти и нефтепродуктам в широком диапазоне температур, который может быть использован для очистки почв и водоемов, загрязненных нефтепродуктами и солями тяжелых металлов.
Поставленная задача решается созданием бактериального препарата, содержащего аэробные нефтеокисляющие бактерии, воду, а также сахарозу, полиэтиленгликоль и нефть при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Нефть - 0,5-1
Сахароза - 1-5
Полиэтиленгликоль - 1-5
Вода - Остальное
Аэробные нефтеокисляющие бактерии - В эффективном количестве (кл/мл препарата)
В состав предлагаемого препарата "Экойл" входят следующие культуры:
Mycobacterium flavescens ВКПМ В-6000, Mycobacterium ИЖ 4, Rhodococcus sp. 56д, Acinetobacter sp. HE-1 (защищенные патентами RU 2053296, 2077578, 2107578, 2077579 соответственно). Все культуры непатогенны, нетоксичны и нетоксигенны. Эффективность препарата обусловлена подбором штаммов бактерий:
- все штаммы обладают биоэмульгирующей и нефтеокисляющей активностью;
- в препарат входят быстро- и медленнорастущие бактерии, что обеспечивает эффективность и быстроту очистки;
- составляющие бактерии растут при температуре 4-10oС, биодеградация нефти при этих температурах замедляется, но не прекращается, поэтому предлагаемый биопрепарат можно использовать для очистки нефтезагрязненных территорий в районах Севера;
- бактерии, входящие в состав биопрепарата, имеют устойчивость к некоторым веществам и солям тяжелых металлов:
М. flavescens ВКПМ B-6000-Mn, Zn, Mo, Рb (100 мг/л), Сr (IV), Сr (VII), Fe (10 мг/л), Ni (5 мг/л), Аg (1 мг/л), Нg (0,05 мг/л), Сu (0,1 мг/л), фенол, формальдегид (100 мг/л).
Нефть - 0,5-1
Сахароза - 1-5
Полиэтиленгликоль - 1-5
Вода - Остальное
Аэробные нефтеокисляющие бактерии - В эффективном количестве (кл/мл препарата)
В состав предлагаемого препарата "Экойл" входят следующие культуры:
Mycobacterium flavescens ВКПМ В-6000, Mycobacterium ИЖ 4, Rhodococcus sp. 56д, Acinetobacter sp. HE-1 (защищенные патентами RU 2053296, 2077578, 2107578, 2077579 соответственно). Все культуры непатогенны, нетоксичны и нетоксигенны. Эффективность препарата обусловлена подбором штаммов бактерий:
- все штаммы обладают биоэмульгирующей и нефтеокисляющей активностью;
- в препарат входят быстро- и медленнорастущие бактерии, что обеспечивает эффективность и быстроту очистки;
- составляющие бактерии растут при температуре 4-10oС, биодеградация нефти при этих температурах замедляется, но не прекращается, поэтому предлагаемый биопрепарат можно использовать для очистки нефтезагрязненных территорий в районах Севера;
- бактерии, входящие в состав биопрепарата, имеют устойчивость к некоторым веществам и солям тяжелых металлов:
М. flavescens ВКПМ B-6000-Mn, Zn, Mo, Рb (100 мг/л), Сr (IV), Сr (VII), Fe (10 мг/л), Ni (5 мг/л), Аg (1 мг/л), Нg (0,05 мг/л), Сu (0,1 мг/л), фенол, формальдегид (100 мг/л).
Mycobacterium sp. ИЖ 4 - Ni, Fe (10 мг/л), Pb, Mo, Zn, Cu, Mn, Cr (IV), Cr (VII) - (1 мг/л); фенол (100 мг/л).
Rhodococcus sp. 56д - Fe (10 мг/л), Pb, Ni, Mn, Cr (IV), Cr (VII) - (1 мг/л), Нg (0,05 мг/л), Zn (0,05 мг/л), фенол (100 мг/л).
Acinetobacter sp. HB-1- Ni, Pb, Сr (VII)- (10 мг/л), Cr (IV)- (0,5 мг/л), фенол (10 мг/л).
Оптимальной для интродукции в естественную экосистему клеток предлагаемого биопрепарата является концентрация 1•107 кл/г почвы или 1•107 кл/мл3 воды. Содержание в суспензии биопрепарата сырой нефти в количестве 0,5-1%, сахарозы 1-5% и полиэтиленгликоля 1-5% способствует сохранению жизнеспособности и нефтеокисляющей активности.
Срок хранения препарата при температуре от +4 до +8oС - 1 месяц. Изобретение поясняется следующими примерами.
Пример 1. Для культивирования нефтеокисляющих бактерий используют минеральную среду 8Е следующего состава, г/л: (NН4)2НРO4 - 0,5; KH2PO4 - 0,7; NaCl - 0,5 MgSO4 •7H2O - 0,8; дрожжевой экстракт - 0,1; глюкоза - 10,0.
Микробную массу каждого штамма выращивают отдельно в ферментере АК - 2 К при рН 6-7 и температуре 28oС со скоростью потока Д=0,04-1. В результате получают культуральную жидкость с концентрацией живых клеток 20•109 кл/мл. При необходимости уменьшения объема для дальнейшей транспортировки биопрепарата культуральную жидкость концентрируют на микрофильтрационной установке МР-0,3. Концентрированную клеточную суспензию (1011 кл/мл) смешивают с 0,5% сырой нефти. В качестве стабилизатора вносят 5% полиэтиленгликоля, для сохранения жизнедеятельности бактерий вносят 5% сахарозы.
Приготовленный таким образом биопрепарат разводят до нужной концентрации и наносят путем опрыскивания на поверхность загрязненной почвы или воды. При необходимости вместе с биопрепаратом на обрабатываемую территорию наносят минеральные удобрения (аммофоска, 0,75%), а почву дополнительно известкуют до рН 7,0. Обработанную биопрепаратом почву культивируют 3-4 раза за летне-осенний сезон. При сильном загрязнении можно провести повторную обработку биопрепаратом. Культуры биопрепарата сохраняют в почве свою жизнедеятельность и после зимнего сезона, для ускорения рекультивации загрязненных почв их можно обработать и через год.
Пример 2. В колбочки на 100 мл вносят по 30 мл минеральной среды 8Е и 1% модельной нефти (нафталин, тетрадекан, пентадекан, гексадецен, фенилдекан, пристан, пирен, фенантрен, аценафтен). В колбы добавляют предлагаемый препарат с концентрацией бактерий 1•107 кл/мл. Контрольную колбу оставляют без препарата.
Культивирование проводят на качалке при 200 об/мин, 28oС в течение 5 дней. Обработку результатов проводят на газовом хроматографе. Результаты показывают, что биодеградация указанных углеводородов прошла на 77,8%, 53,3%, 56,2%, 63,9%, 42,1% и 43,7% соответственно.
Пример 3. В колбы на 100 мл вносят по 30 мл минеральной среды 8Е, 300 мг нефти, 10 мг/л фенола и солей Мn, Pb, Zn, Mo, Fe, Ni, Аg, Cr - 50 мкг/л и предлагаемый препарат с концентрацией бактерий 1•107 кл/мл. Контролем служит колба без солей, в которую вносят нефть и препарат. Опыт проводят в трех повторностях. Культивируют колбы на качалке при 28oС при 200 об/мин в течение 5 дней. Результаты опыта показывают, что в колбе с солями металлов и без них предлагаемый препарат утилизирует нефть на 51%.
Пример 4. На опытный участок дерново-подзолистой почвы (Московская область) площадью 0,25 м2 равномерно наносят нефть из расчета 8 л/м2 и суспензию препарата из расчета 1•107 кл/г почвы. Вместе с биопрепаратом вносят 0,75% аммофоски, перегной (2%), почву рыхлят. Пробы отбирают и анализируют через 1 и 3 месяца, 1 год на содержание углеводородов нефти и на численность клеток внесенных микроорганизмов. Через 1 месяц углеводороды нефти были утилизированы на 40%, через 3 месяца - 52%, через год - 66-73%. Количество активных нефтеокисляющих бактерий составило через 1 мес. и 3 мес. -2•107, а через год - 7•106 кл/г почвы. Таким образом, клетки биопрепарата "Экойл" и через год продолжают утилизировать углеводороды нефти, еще оставшиеся в почве.
Пример 5. В колбочки на 100 мл вносят по 30 мл минеральной среды и отдельно в каждую 300 мг нефти, мазута или керосина. В колбы вносят предлагаемый препарат до концентрации 1•107 кл/мл. Колбы культивируют на качалках при 200 об/мин при 10 и 28oС в течение 10 дней. Биодеградацию определяют на газовом хроматографе. Данные эксперимента показывают, что предлагаемый препарат при 10oС утилизирует нефть, мазут, дизельное топливо и керосин соответственно 24, 12, 41 и 51%, а при 28oС соответственно 72, 26, 74 и 95%.
Пример 6. Были проведены испытания препарата "Экойл" на территории Бахметьевского промысла в ПО "Нижневолжскнефть", где очищали водоем, загрязненный нефтью в результате аварийного разлива нефтепровода. Испытания проводили с сентября 1992 г. по май 1993 г. Суспензию препарата с концентрацией бактерий 6•106 кл/см2 разбрызгивали на поверхность загрязненного водоема, где толщина нефтяной пленки была около 5 мм. Через 2 месяца загрязненность водоема составляла 0,06%, а через 8 мес. - 0,0001%, что не превышает ПДК для нефти в водоемах.
Таким образом, преимуществом предлагаемого препарата "Экойл" по сравнению с аналогичным препаратом "Нафтокс", который утилизирует только нормальные углеводороды нефти, является то, что он эффективно и в короткий срок утилизирует ароматические, полиароматические, непредельные, изопреноидные углеводороды нефти, которые более канцерогенны и токсичны для живой природы по сравнению с предельными углеводородами. Кроме нефти предлагаемый препарат эффективно утилизирует мазут, дизельное топливо, керосин, как при температуре 28oС, так и при 10oС. Культуры из биопрепарата устойчивы к ионам тяжелых металлов, фенолу и формальдегиду, что расширяет диапазон его применения при очистке территорий от загрязнений нефтью и нефтепродуктами.
Claims (5)
1. Биопрепарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов, включающий аэробные нефтеокисляющие бактерии и воду, отличающийся тем, что он дополнительно содержит нефть, сахарозу и полиэтиленгликоль, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Нефть - 0,5-1
Сахароза - 1-5
Полиэтиленгликоль - 1-5
Вода - Остальное
Аэробные нефтеокисляющие бактерии - В эффективном количестве (кл/мл препарата).
Нефть - 0,5-1
Сахароза - 1-5
Полиэтиленгликоль - 1-5
Вода - Остальное
Аэробные нефтеокисляющие бактерии - В эффективном количестве (кл/мл препарата).
2. Биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве аэробных нефтеокисляющих бактерий он содержит бактерии Mycobacterium flavescens ВКПМ В-6000 в конечной концентрации не менее 1,2•107 кг/мл препарата.
3. Биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве аэробных нефтеокисляющих бактерий он содержит бактерии Mycobacterium sp. ИЖ 4 в конечной концентрации не менее 2,5•107 кл/мл препарата.
4. Биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве аэробных нефтеокисляющих бактерий он содержит бактерии Rhodococcus sp. 56д в конечной концентрации не менее 2•107 кл/мл препарата.
5. Биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве аэробных нефтеокисляющих бактерий он содержит бактерии Acinetobacter sp. НВ-1 в конечной концентрации не менее 5•107 кл/мл препарата.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99120413/13A RU2191752C2 (ru) | 1999-09-27 | 1999-09-27 | Биопрепарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99120413/13A RU2191752C2 (ru) | 1999-09-27 | 1999-09-27 | Биопрепарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU99120413A RU99120413A (ru) | 2002-04-27 |
RU2191752C2 true RU2191752C2 (ru) | 2002-10-27 |
Family
ID=20225243
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99120413/13A RU2191752C2 (ru) | 1999-09-27 | 1999-09-27 | Биопрепарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2191752C2 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2705290C1 (ru) * | 2019-05-13 | 2019-11-06 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки СИБИРСКИЙ ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИИ И БИОХИМИИ РАСТЕНИЙ СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК | Микробный препарат для биоремедиации почвы, загрязненной нефтью и нефтепродуктами |
CN110510758A (zh) * | 2019-09-10 | 2019-11-29 | 中交铁道设计研究总院有限公司 | 一种利用草分枝杆菌去除污水中铅离子的方法 |
-
1999
- 1999-09-27 RU RU99120413/13A patent/RU2191752C2/ru not_active IP Right Cessation
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2705290C1 (ru) * | 2019-05-13 | 2019-11-06 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки СИБИРСКИЙ ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИИ И БИОХИМИИ РАСТЕНИЙ СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК | Микробный препарат для биоремедиации почвы, загрязненной нефтью и нефтепродуктами |
CN110510758A (zh) * | 2019-09-10 | 2019-11-29 | 中交铁道设计研究总院有限公司 | 一种利用草分枝杆菌去除污水中铅离子的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Kg et al. | News & Notes: Bioremediation of crude oil contamination with Acinetobacter sp. A3 | |
Lin et al. | The combined effects of phytoremediation and biostimulation in enhancing habitat restoration and oil degradation of petroleum contaminated wetlands | |
RU2601155C2 (ru) | Композиция бактериальных штаммов, смесь для биоремедиации и применение указанной композиции для удаления из почвы загрязняющих веществ, а также способ очистки почвы от загрязняющих веществ | |
Macaulay et al. | Bioremediation of oil spills: a review of challenges for research advancement | |
RU2535978C1 (ru) | Биопрепарат для очистки объектов окружающей среды от угеводородного загрязнения, способ его получения и применения | |
EP2111379B1 (de) | Bioremediationsverfahren zum beschleunigten biologischen abbau von petroleum-kohlenwasserstoffen in den polaren meereisbedeckten regionen und bakterien- und enzymgemische als mittel zur verfahrensdurchführung | |
EP0267962B1 (de) | Bakterielle zusammensetzung und methode zum reinigen von durch öl verunreinigtem wasser und verunreinigter erde | |
DE69727340T2 (de) | Mikrobielle Stamme, Verfahren zum Abbau von organischen Verbindungen und Verfahren zur Entgiftung der Umwelt | |
RU2604788C1 (ru) | Способ очистки от нефти и нефтепродуктов пресноводных экосистем в условиях высоких широт | |
RU2191752C2 (ru) | Биопрепарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов | |
RU2191753C2 (ru) | Препарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов | |
RU2365438C2 (ru) | Биопрепарат для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов | |
Jabbar et al. | Bioremediation of soil contaminated with diesel using biopile system | |
RU2193533C2 (ru) | Биопрепарат для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов | |
RU2266958C2 (ru) | Штаммы микроорганизмов-деструкторов:zoogloea sp. 14h, arthrobacter sp. 13h, arthrobacter sp. 15h, bacillus sp. 3h, bacillus sp. 12 h, используемые для ремедиации водоемов и почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, и ассоциация штаммов микроорганизмов-деструкторов на их основе | |
Peyton et al. | Biotransformation of toxic organic and inorganic contaminants by halophilic bacteria | |
RU2503511C1 (ru) | Способ очистки земли от загрязнений нефтепродуктами | |
US20030201224A1 (en) | Microbial consortium for the biodegradation of dithiocarbamates | |
RU2628692C2 (ru) | Биосорбент для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов | |
RU2301258C2 (ru) | Способ очистки почвы от нефтяных загрязнений | |
RU2764434C1 (ru) | Способ очистки объектов окружающей среды от загрязнений нефтью и нефтепродуктами | |
Chekroud et al. | Bioremediation of crude oil contaminated sea water | |
RU2241745C2 (ru) | Способ выделения деструкторов нефти и нефтепродуктов | |
RU2808248C1 (ru) | Состав для биоремедиации почвы, загрязненной нефтью и нефтепродуктами | |
Singh et al. | Remediation of chromium-contaminated soils using Pseudomonas aeruginosa Strain BS2 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20060928 |