RU2181729C1

RU2181729C1 - Muramic acid derivatives

Info

Publication number: RU2181729C1
Application number: RU2000124015A
Authority: RU
Inventors: О.В. Калюжин; Александр Евгеньевич Земляков; М.В. Шкалев; А.В. Караулов; М.В. Нелюбов
Original assignee: Калюжин Олег Витальевич; Шкалев Михаил Владимирович; Нелюбов Михаил Владимирович
Priority date: 2000-09-20
Filing date: 2000-09-20
Publication date: 2002-04-27

Abstract

FIELD: organic synthesis. SUBSTANCE: invention provides compounds of formula I:

Description

Изобретение относится к новым производным мурамовой кислоты, которые могут найти применение в народном хозяйстве, в частности в медицине. The invention relates to new derivatives of muramic acid, which may find application in the national economy, in particular in medicine.

Среди большого числа эндогенных и экзогенных иммуномодуляторов известны и производные мурамовой кислоты, например, N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглутамин (мурамилдипептид, или МДП) (Ellouz E., Adam A., Cioburi R. & Lederer E. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1974. - Vol. 59. - P. 1317-1325). Among a large number of endogenous and exogenous immunomodulators, muramic acid derivatives are also known, for example, N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamine (muramyl dipeptide, or MDP) (Ellouz E., Adam A., Cioburi R. & Lederer E. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1974. - Vol. 59. - P. 1317-1325).

Известно, что мурамилдипептид способен активировать основные звенья иммунитета, в частности, противоопухолевого ответа. Однако, обладая высокой гидрофильностью, он быстро выводится из организма и является высоко пирогенным. Muramyl dipeptide is known to be able to activate the basic links of the immune system, in particular, the antitumor response. However, having high hydrophilicity, it is rapidly excreted from the body and is highly pyrogenic.

Известно и другое производное мурамовой кислоты -β-гептилгликозид-N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглутамин (β-гептилгликозид-МДП), обладающее свойствами иммуномодулятора (Калюжин О.В., Караулов А.В. // В книге "Успехи клинической иммунологии и аллергологии" под ред. А.В. Караулова. - 2000. - Т.1. - С. 252-258). Another derivative of muramic acid, β-heptylglycoside-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamine (β-heptylglycoside-MDP), which has the properties of an immunomodulator (Kalyuzhin O.V., Karaulov A.V. // In the book " Advances in clinical immunology and allergology "under the editorship of A.V. Karaulov. - 2000. - T. 1. - S. 252-258).

Указанное амфифильное соединение активирует основные звенья иммунитета и стимулирует противоопухолевый иммунный ответ, эффективнее немодифицированного МДП. The specified amphiphilic compound activates the main links of the immune system and stimulates the antitumor immune response, more effective than unmodified MDP.

Недостатком этого производного является его сравнительно невысокая иммуномодулирующая активность. The disadvantage of this derivative is its relatively low immunomodulatory activity.

Задача изобретения - создание новых производных мурамовой кислоты, обладающих более высокой иммуномодулирующей активностью и большей биологической доступностью при разных формах введения. The objective of the invention is the creation of new derivatives of muramic acid with higher immunomodulating activity and greater bioavailability in various forms of administration.

Указанная задача решается производными мурамовой кислоты общей формулы

где Х - C₁-С₂₀-алкил, за исключением Х - гептил или гексадецил,
или С₃-С₉-циклоалкил, незамещенный или замещенный C₁-С₃-алкилом,
или адамантил, незамещенный или замещенный C₁-С₃-алкилом,
или С₆-C₁₂-арил, незамещенный или замещенный одним или тремя C₁-С₃-алкилами.This problem is solved by derivatives of muramic acid of the general formula

where X is C ₁ -C ₂₀ -alkyl, with the exception of X - heptyl or hexadecyl,
or C ₃ -C ₉ cycloalkyl unsubstituted or substituted with C ₁ -C ₃ alkyl,
or adamantyl unsubstituted or substituted with C ₁ -C ₃ alkyl,
or C ₆ -C ₁₂ aryl unsubstituted or substituted with one or three C ₁ -C ₃ alkyl.

Указанные соединения могут быть получены, в частности, последовательным гликозилированием спиртов или фенолов в присутствии соответственно иодида ртути или гидроксида натрия и тетраалкиламмоний хлорида, деацетилированием метанолом в присутствии каталитического количества метилата натрия, изопропилиденированием 2,2-диметоксипропаном, алкилированием S-2-бромпропановой кислотой в присутствии гидрида натрия, конденсацией с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина N-оксисукцинимидным методом, кислотным гидролизом изопропилиденовой группы и каталитического гидрогенолиза бензилового эфира. These compounds can be obtained, in particular, by sequential glycosylation of alcohols or phenols in the presence of mercury iodide or sodium hydroxide and tetraalkylammonium chloride, respectively, by deacetylation with methanol in the presence of a catalytic amount of sodium methylate, isopropylation by 2,2-dimethoxypropane, alkylation with S-2-bromopropanoic acid in the presence of sodium hydride, condensation with trifluoroacetate of benzyl ester of L-alanyl-D-isoglutamine by the N-oxysuccinimide method, acid hydrolysis of isopr the opilidene group and the catalytic hydrogenolysis of benzyl ether.

Нижеследующие примеры иллюстрируют синтез соединений по изобретению и их биологическую активность. The following examples illustrate the synthesis of compounds of the invention and their biological activity.

Общие методики синтеза
Гликозилирование в присутствии Hgl₂.General synthesis techniques
Glycosylation in the presence of Hgl ₂ .

К раствору 2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-α-0-глюкопиранозилхлорида (1) в сухом дихлорэтане (25 мл/г) добавили 1,16 экв. иодида ртути (II) и 1 экв. спирта. Реакционную смесь перемешивали в присутствии молекулярных сит 0,3 нм до исчезновения гликозил-донора (контроль ТСХ в системе хлороформ - бензол - этанол, 10:1:1). Молекулярные сита и катализатор отфильтровали, фильтрат разбавили хлороформом, промыли раствором тиосульфата натрия и водой. Органический слой отделили, осушили безводным Na₂SO₄ и упарили. Остаток очищали кристаллизацией или колоночной хроматографией.To a solution of 2-acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-α-0-glucopyranosyl chloride (1) in dry dichloroethane (25 ml / g) was added 1.16 equiv. mercury (II) iodide and 1 equiv. alcohol. The reaction mixture was stirred in the presence of 0.3 nm molecular sieves until the glycosyl donor disappeared (TLC control in the chloroform – benzene – ethanol system, 10: 1: 1). The molecular sieves and the catalyst were filtered off, the filtrate was diluted with chloroform, washed with sodium thiosulfate solution and water. The organic layer was separated, dried with anhydrous Na ₂ SO ₄ and evaporated. The residue was purified by crystallization or column chromatography.

Дезацетилирование
К раствору ацетата в сухом метаноле (10 мл/г) добавили 0,01-0,05 экв. 0,1 н. раствора метилата натрия в метаноле, выдержали 12-24 ч. Раствор нейтрализовали катионитом КУ-2 (Н+), смолу промыли метанолом и фильтрат упарили.Deacetylation
0.01 to 0.05 equivalents were added to a solution of acetate in dry methanol (10 ml / g). 0.1 n a solution of sodium methylate in methanol, kept for 12-24 hours. The solution was neutralized with KU-2 (H +) cation exchanger, the resin was washed with methanol and the filtrate was evaporated.

Изопропилиденирование
К раствору триола в диоксане или тетрагидрофуране (50 мл/г) при нагревании до 60^oС, добавили 3 экв. 2,2-диметоксипропана и 10-20 мг сухой TsOH. Через 1 ч (контроль ТСХ в системе хлороформ - этанол, 15:1) реакционную смесь нейтрализовали пиридином и упарили. Остаток растворили в 50 мл хлороформа, промыли водой (3•25 мл). Органический слой высушили безводным Na₂SO₄ и упарили досуха. Изопропилиденовое производное очищали колоночной хроматографией (элюент: хлороформ --> хлороформ - этанол, 20:1).Isopropylidene
To a solution of triol in dioxane or tetrahydrofuran (50 ml / g) when heated to 60 ^{° C.} , 3 equiv. 2,2-dimethoxypropane and 10-20 mg dry TsOH. After 1 h (TLC control in a chloroform – ethanol system, 15: 1), the reaction mixture was neutralized with pyridine and evaporated. The residue was dissolved in 50 ml of chloroform, washed with water (3 • 25 ml). The organic layer was dried with anhydrous Na ₂ SO ₄ and evaporated to dryness. The isopropylidene derivative was purified by column chromatography (eluent: chloroform -> chloroform - ethanol, 20: 1).

Получение мурамовых кислот
К раствору сахарида со свободной С-3-ОН группой в сухом диоксане (20 мл/г) при перемешивании порциями добавили 4 экв. гидрида натрия. Реакционную смесь нагрели до 95^oС, выдержали при этой температуре 1 ч и после охлаждения до 65^oС прилили 1,5 экв. S-2-бромпропановой кислоты и выдержали при 65^oС еще 3 ч. После охлаждения избыток гидрида натрия разложили этанолом, смесь концентрировали и вылили в холодную воду. Раствор подкислили 2 н. серной кислотой до рН 2-3 и экстрагировали мурамовую кислоту хлороформом. Экстракт высушили безводным Na₂SO₄ и упарили.Muramic Acid Preparation
To a solution of a saccharide with a free C-3-OH group in dry dioxane (20 ml / g), 4 equiv. sodium hydride. The reaction mixture was heated to 95 ^o C, kept at this temperature for 1 h and after cooling to 65 ^o C added 1.5 equiv. S-2-bromopropanoic acid and kept at 65 ^o With another 3 hours. After cooling, the excess sodium hydride was decomposed with ethanol, the mixture was concentrated and poured into cold water. The solution was acidified with 2 N. sulfuric acid to pH 2-3 and muramic acid was extracted with chloroform. The extract was dried with anhydrous Na ₂ SO ₄ and evaporated.

Конденсация N-оксисукцинимидным методом
К раствору кислоты в сухом диоксане или ТГФ (10-20 мл/г) при перемешивании добавили 1,1 экв. N-гидроксисукцинимида (HOSu) и 1,1 экв. N,N'-дициклогексилкарбодиимида (DCC). Через 3-5 ч отфильтровали осадок дициклогексилмочевины, промыли его растворителем. К фильтрату добавили 1 экв. трифторацетата бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина и триэтиламин до рН 8. По окончании реакции продукт отделили фильтрованием.N-oxysuccinimide condensation
To an acid solution in dry dioxane or THF (10-20 ml / g), 1.1 equiv. N-hydroxysuccinimide (HOSu) and 1.1 eq. N, N'-Dicyclohexylcarbodiimide (DCC). After 3-5 hours, the dicyclohexylurea precipitate was filtered off and washed with a solvent. 1 eq. Was added to the filtrate. L-alanyl-D-isoglutamine benzyl ester trifluoroacetate and triethylamine to pH 8. After completion of the reaction, the product was separated by filtration.

Гидролиз изопропилиденовых производных
Изопропилиденовые производные растворили при нагревании на кипящей водяной бане в 80% уксусной кислоте (10 мл/г) и выдержали при этой температуре 20 мин (контроль ТСХ в системе хлороформ - этанол, 5:1). Раствор упарили досуха, остаток очистили колоночной хроматографией (элюент: хлороформ хлороформ --> этанол, 10:1).Hydrolysis of isopropylidene derivatives
Isopropylidene derivatives were dissolved by heating in a boiling water bath in 80% acetic acid (10 ml / g) and held at this temperature for 20 min (TLC control in a chloroform – ethanol system, 5: 1). The solution was evaporated to dryness, the residue was purified by column chromatography (eluent: chloroform chloroform -> ethanol, 10: 1).

Гидрогенолиз бензильных защит
Вещество растворили в этаноле, ТГФ или их смеси (50-100 мл/г) и подвергли гидрогенолизу над 10% Pd/C (1:5 к веществу) при комнатной температуре. Время реакции составляло 2-5 ч. По окончании реакции (контроль ТСХ в системе бутанол-1 - уксусная кислота - вода, 3:1:1) катализатор отфильтровали, промыли растворителем, фильтрат упарили. Остаток затерли в эфире.Hydrogenolysis of benzyl protections
The substance was dissolved in ethanol, THF or mixtures thereof (50-100 ml / g) and subjected to hydrogenolysis over 10% Pd / C (1: 5 to the substance) at room temperature. The reaction time was 2-5 hours. At the end of the reaction (TLC control in the system butanol-1 - acetic acid - water, 3: 1: 1), the catalyst was filtered off, washed with a solvent, and the filtrate was evaporated. The remainder was jammed on air.

Примеры синтеза производных мурамовой кислоты
Пример 1. 0-(Гексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (2).Examples of the synthesis of derivatives of muramic acid
Example 1. 0- (Hexyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranosid-3-yl) -D-lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (2).

Гексанол-1 (0,30 мл, 2,36 ммоль) гликозилировали 0,86 г (2,36 ммоль) хлорида 1 и после кристаллизации из эфира получили 0,45 г (45%) гексил-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-р-0-глюкопиранозида (2а). Аналитический образец перекристаллизовали из смеси эфир - гексан; т. пл. 125-127^oС, [α]_54б-17^° (с 1,0; хлороформ). 'Н-ЯМР (300 МГц, С₂НСl₃): 0,88 т

, 1,28 м и 1,57 м ([СН₂]_n), 1,95с, 2,02с, 2,03с, 2,08с (12Н, NAc и 3 ОАс), 3,47 дт и 3,85 дт (2Н, С-1-ОСН₃, J_гем 9,5 Гц), 3,70 ддд (1Н, Н-5, J_5,6а 2,5 Гц, J_5.6b 5 Гц), 3,83 ддд (1Н, Н-2, J_2,3 10 Гц), 4,13 дд и 4,28 дд (2Н, Н-6a, Н-6b, J_6а,6b 12 Гц), 4,69 д (1Н, Н-1, J_1,2 8,5 Гц), 5,07 дд (1Н, Н-4, J_4,5 9,5 Гц), 5,32 дд (1Н, Н-3, J_3,4 9,5 Гц), 5,63 д (1Н, NH, J_2,NH 8,5 Гц).Hexanol-1 (0.30 ml, 2.36 mmol) glycosylated 0.86 g (2.36 mmol) of chloride 1 and, after crystallization from ether, 0.45 g (45%) of hexyl-2-acetamido-3.4 was obtained , 6-tri-0-acetyl-2-deoxy-p-0-glucopyranoside (2a). An analytical sample was recrystallized from ether-hexane; t. pl. 125-127 ^o C, [α] _54b -17 ^° (s 1.0; chloroform). 'H-NMR (300 MHz, C ₂ Hcl ₃ ): 0.88 t

, 1.28 m and 1.57 m ([CH ₂ ] _n ), 1.95 s, 2.02 s, 2.03 s, 2.08 s (12H, NAc and 3 OAc), 3.47 dt and 3.85 dt (2H, C-1-OCH ₃ , J _heme 9.5 Hz), 3.70 ddd (1H, H-5, J _5.6a 2.5 Hz, J _5.6b 5 Hz), 3.83 ddd (1H, H-2, J _2.3 10 Hz), 4.13 dd and 4.28 dd (2H, H-6a, H-6b, J _{6a, 6b} 12 Hz), 4.69 d (1H, H-1, J _1.2 8.5 Hz), 5.07 dd (1H, H-4, J _4.5 9.5 Hz), 5.32 dd (1H, H-3, J _3.4 9.5 Hz), 5.63 d (1H, NH, J _{2, NH} 8.5 Hz).

1,54 г (3,57 ммоль) ацетата 2а дезацетилировали и получили 1,0 г (92%) гексил-2-ацетамидо-2- дезокси-β-D- глюкопиранозида (2б), которое изопропилиденировали и получили 0,61 г (54%) гексил-2-ацетамидо- 2-дезокси-4,6-0-изопропилиденβ- D-глюкопиранозида (2в); стеклообразный продукт, [α]_54б-88^° (с 1,0; хлороформ).1.54 g (3.57 mmol) of 2a acetate was deacetylated to give 1.0 g (92%) of hexyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranoside (2b), which was isopropylidened to give 0.61 g (54%) hexyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-β-D-glucopyranoside (2c); glassy product, [α] _54b -88 ^° (c 1.0; chloroform).

Алкилированием 485 мг (1,41 ммоль) соединения 2в 5-2-бромпропановой кислотой синтезировали 0,57 г (97%) гексил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-D-глюкопиранозида (2г), которые конденсировали с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина. В гликопептидном 2д производном гидролизовали изопропилиденовую защиту и получили 0,48 г (55%) бензилового эфира 0-(гексил-2-ацетамидо-2- дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил) -D-лактоил-L-аланил-D- изоглутамина (2е), аморфный порошок, [α]_54б-2^° (с 1,0; этанол). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): 0,85 т γ- 1,22 м

1,24 м и 1,43 м ([СН₂]_n), 1,75с (3Н, NAc), 1,77 м и 2,01 м (2Н,

-СН₂-Glu), 2,35 т (2Н, ^β-CH₂-Glu), 4,10 ддд (1Н, CH-Glu), 4,18 дк (1Н, CH-Ala), 4,22 к γ- 4,35 д (1Н, H-1, J_1.2 8 Гц), 4,61 т (1Н, С-6-ОН), 5,04с (2Н, COOCH₂Ph), 5,28а (1Н, С-4-ОН), 7,13с и 7,29с (2Н, CONH₂-Glu), 7,36 м (5Н, Ph), 7,39 д, 7,80 д и 8,13 д (3Н, 3 NH).Alkylation of 485 mg (1.41 mmol) of compound 2c with 5-2-bromopropanoic acid produced 0.57 g (97%) of hexyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-3-0- (D -1-carboxyethyl) -β-D-glucopyranoside (2g), which was condensed with trifluoroacetate of benzyl ester of L-alanyl-D-isoglutamine. In the glycopeptide 2d derivative, isopropylidene protection was hydrolyzed to obtain 0.48 g (55%) of 0- (hexyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranoside-3-yl) -D-lactoyl-L-alanyl benzyl ester -D- isoglutamine (2e), amorphous powder, [α] _54b -2 ^° (c 1.0; ethanol). 'H-NMR (300 MHz, DMSO-d ₆ ): 0.85 t γ- 1.22 m

1.24 m and 1.43 m ([CH ₂ ] _n ), 1.75 s (3H, NAc), 1.77 m and 2.01 m (2H,

-CH ₂ -Glu), 2.35 t (2H, ^β- CH ₂ -Glu), 4.10 ddd (1H, CH-Glu), 4.18 dc (1H, CH-Ala), 4.22 q γ- 4.35 d (1H, H-1, J _1.2 8 Hz), 4.61 t (1H, C-6-OH), 5.04 s (2H, COOCH ₂ Ph), 5.28a (1H, C-4-OH), 7.13 s and 7.29 s (2H, CONH ₂ -Glu), 7.36 m (5H, Ph), 7.39 d, 7.80 d and 8.13 d (3H, 3 NH).

В 250 мг (0,38 ммоль) соединения 2е удалили гидрогенолизом бензиловый эфир. Добавлением эфира высадили 170 мг (78%) аморфного гликопептида 2; [α]_54б+5^° (с 0,83; этанол).In 250 mg (0.38 mmol) of compound 2e, benzyl ether was removed by hydrogenolysis. 170 mg (78%) of amorphous glycopeptide 2 were landed by addition of ether; [α] _54b +5 ^° (s 0.83; ethanol).

Пример 2. 0-(Октил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил) -D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (3). Example 2. 0- (Octyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranosid-3-yl) -D-lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (3).

Октанол-1 (0,40 мл, 3,28 ммоль) гликозилировали 1,0 г (2,73 ммоль) хлорида 1 и после очистки колоночной хроматографией (элюент: бензол --> бензол - этанол, 50:1) получили 0,95 г (76%) октил-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил- 2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (3а). Аналитический образец перекристаллизовали из смеси эфир - гексан; т. пл. 103-105^oС, [α]_54б-31^° (с 1,0; хлороформ). 'Н-ЯМР (300 МГц, С₂НСl₃): 0,88т

1,26 м и 1,56 м ([СН₂]_n), 1,95с, 2,02с, 2,03с, 2,08с (12Н, NAc и 3 ОАс), 3,47 дт и 3,86 дт (2Н, С-1-ОСН, Jгем 9,5 Гц), 3,84 ддд (1Н, Н-2, J_2.3 10 Гц), 3,69 м (1-Н, H-5, J_5,6a 2 Гц, J_5.6b 4,5 Гц), 4,13 дд и 4,27 дд (2Н, Н-6а, H-6b, J_6а, _6b 12 Гц), 4,69д (1Н, H-1, J_1.2 8,5 Гц), 5,07 дд (1Н,H-4 J_4.5 9,5 Гц), 5,32 дд (1Н, Н-3, J_3.4 9,5 Гц), 5,49д (1Н, NH, J_2,NH 8.5 Гц).Octanol-1 (0.40 ml, 3.28 mmol) was glycosylated with 1.0 g (2.73 mmol) of chloride 1, and after purification by column chromatography (eluent: benzene -> benzene - ethanol, 50: 1), 0 was obtained. 95 g (76%) octyl-2-acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-β-D-glucopyranoside (3a). An analytical sample was recrystallized from ether-hexane; t. pl. 103-105 ^o C, [α] _54b -31 ^° (s 1.0; chloroform). 'H-NMR (300 MHz, C ₂ Hcl ₃ ): 0.88t

1.26 m and 1.56 m ([CH ₂ ] _n ), 1.95 s, 2.02 s, 2.03 s, 2.08 s (12H, NAc and 3 OAc), 3.47 dt and 3.86 dt (2H, C-1-OCH, Jhem 9.5 Hz), 3.84 ddd (1H, H-2, J _2.3 10 Hz), 3.69 m (1-H, H-5, J _5.6a 2 Hz, J _5.6b 4.5 Hz), 4.13 dd and 4.27 dd (2H, H-6a, H-6b, J _6a, _6b 12 Hz), 4.69 d (1H, H-1, J _1.2 8.5 Hz), 5.07 dd (1H, H-4 J _4.5 9.5 Hz), 5.32 dd (1H, H-3, J _3.4 9.5 Hz), 5.49 d (1H , NH, J _{2, NH} 8.5 Hz).

Дезацетилированием 2,5 г (5,45 ммоль) ацетата 3а получили 1,80 г (99%) октил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D- глюкопиранозида (3б), изопропилиденирование 1,65 г (4,95 ммоль) триола 3б дало 1,55 г (84%) аморфного октил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-β-D-глюкопиранозида (3в); [α]_54б-71^° (с 1,0; хлороформ).Deacetylation of 2.5 g (5.45 mmol) of acetate 3a gave 1.80 g (99%) of octyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranoside (3b), isopropylidation of 1.65 g (4.95 mmol) of triol 3b gave 1.55 g (84%) of amorphous octyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-β-D-glucopyranoside (3c); [α] _54b -71 ^° (c 1.0; chloroform).

Алкилированием 2,2 г (5,9 ммоль) соединения 3в S-2-бромпропановой кислотой синтезировали 2,4 г (92%) октил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-0-глюкопиранозида (3 г). Мурамовую кислоту 3г (2,0 г, 4,49 ммоль) конденсировали с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина. Выход гликопептидного производного 3д составил 2,0 г (61%). В 1,0 г (1,36 ммоль) соединения 3д гидролизовали изопропилиденовую защиту и получили 0,72 г (76%) бензилового эфира О-(октил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил) -D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамина (3е); [α]_54б-2^° (с 1,0; этанол). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 0,86т

1,24 м и 1,44 м

1,75с (3Н, NAc), 1,71 м и 1,94 м (2Н, β-CH₂-Glu), 2,20 т (2Н, γ-CH₂-Glu), 3,69ддд (1Н, CH-Glu), 4,12дк (1Н, CH-Ala), 4,22к

4,25д (1Н, H-1, J_1.2 8 Гц), 4,57т (1Н, С-6-ОН), 5,02с (2Н, COOCH₂Ph), 5,25а (1Н, С-4-ОН), 7,09с и 7,33с (2Н, CONH₂-Glu), 7,36 м (5Н, Ph), 7.39д, 7,80д и 8,09д (3Н, 3 NH).By alkylation of 2.2 g (5.9 mmol) of compound 3c with S-2-bromopropanoic acid, 2.4 g (92%) of octyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-3-0- were synthesized. (D-1-carboxyethyl) -β-0-glucopyranoside (3 g). Muramic acid 3 g (2.0 g, 4.49 mmol) was condensed with trifluoroacetate of L-alanyl-D-isoglutamine benzyl ester. The yield of the 3D glycopeptide derivative was 2.0 g (61%). Isopropylidene protection was hydrolyzed in 1.0 g (1.36 mmol) of compound 3D to give 0.72 g (76%) of O- (octyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranosid-3-yl benzyl ester ) -D-lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (3e); [α] _54b -2 ^° (c 1.0; ethanol). 'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): 0.86t

1.24 m vs 1.44 m

1.75 s (3H, NAc), 1.71 m and 1.94 m (2H, β-CH ₂ -Glu), 2.20 t (2H, γ-CH ₂ -Glu), 3.69 ddd (1H, CH-Glu), 4.12dc (1H, CH-Ala), 4.22k

4.25 d (1H, H-1, J _1.2 8 Hz), 4.57 t (1H, C-6-OH), 5.02 s (2H, COOCH ₂ Ph), 5.25a (1H, C-4- OH), 7.09 s and 7.33 s (2H, CONH ₂ -Glu), 7.36 m (5H, Ph), 7.39 d, 7.80 d and 8.09 d (3H, 3 NH).

В соединении 3е (350 мг, 0,51 ммоль) подвергли гидрогенолизу бензиловый эфир. Добавлением эфира высадили 290 мг (95%) аморфного гликопептида 3 [α]_54б+12^° (с 0,93, этанол).In compound 3e (350 mg, 0.51 mmol), benzyl ether was subjected to hydrogenolysis. _By adding ether, 290 mg (95%) of the amorphous glycopeptide 3 [α] _54b + 12 ^° (c 0.93, ethanol) was landed.

Пример 3. 0-(Циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (4). Example 3. 0- (Cyclohexyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranosid-3-yl) -D-lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (4).

Гликозилирование 1,42 мл (13,7 ммоль) циклогексанола 5,0 г (13,7 ммоль) хлорида 1 дало после перекристаллизации из эфира 3,97 г (68%) циклогексил-2-ацетамидо -3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-β-D- глюкопиранозида (4а), т. пл. 178^oС, [α]_54б-18^° (с 0,77; хлороформ), 'Н-ЯМР (200 МГц, С₂НС1₃): 0,15 м, 1,61 м ([СН₂] _n), 1,83с, 1,91с, 1,92с, 1,97с (12Н, NAc и 3 ОАс), 3,55 (1Н, С-1-ОСН), 3,56 м (1Н, Н-2, J_2.3 10,5 Гц), 3,59 м (1-Н, H-5, J_5.6a 2,5 Гц, J_5.6b 4,5 Гц), 3,99дд и 4,16дд (2Н, Н-6а, Н-6b, J_6а,6b 12 Гц), 4,76д (1Н, Н-1, J_1,2 8,5 Гц), 4,93дд (1Н, Н-4, J_4.5 9,5 Гц), 5,29дд (1Н, Н-3, J_3,4 9,5 Гц), 5,48д (1Н, NH, J_2.NH 8,5 Гц).Glycosylation of 1.42 ml (13.7 mmol) of cyclohexanol 5.0 g (13.7 mmol) of chloride 1 gave 3.97 g (68%) of cyclohexyl-2-acetamido -3,4,6-three after recrystallization -0-acetyl-2-deoxy-β-D-glucopyranoside (4a), mp 178 ^o C, [α] _54b -18 ^° (c 0.77; chloroform), 'H-NMR (200 MHz, C ₂ HC1 ₃ ): 0.15 m, 1.61 m ([CH ₂ ] _n ) , 1.83 s, 1.91 s, 1.92 s, 1.97 s (12H, NAc and 3 OAc), 3.55 (1H, C-1-OCH), 3.56 m (1H, H-2, J _2.3 10.5 Hz), 3.59 m (1-H, H-5, J _5.6a 2.5 Hz, J _5.6b 4.5 Hz), 3.99 dd and 4.16 dd (2H, H-6a , H-6b, J _{6a, 6b} 12 Hz), 4.76 d (1H, H-1, J _1.2 8.5 Hz), 4.93 dd (1 H, H-4, J _4.5 9.5 Hz) 5.29 dd (1H, H-3, J _3.4 9.5 Hz); 5.48 d (1H, NH, J _2.NH 8.5 Hz).

Дезацетилированием 2,8 г (6,5 ммоль) перацетата 4а получили 1,9 г (96%) циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (4б). Изопропилиденирование 830 мг (2,74 ммоль) триола 4б дало 765 мг (81%) циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси- 4,6-0-изопропилиден-β-D- глюкопиранозида (4в), стеклообразный продукт, [α]_54б-69^° (с 1,0, хлороформ).Deacetylation of 2.8 g (6.5 mmol) of peracetate 4a gave 1.9 g (96%) of cyclohexyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranoside (4b). Isopropylphenidation of 830 mg (2.74 mmol) of triol 4b gave 765 mg (81%) of cyclohexyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-β-D-glucopyranoside (4c), a glassy product, [α ] _54b -69 ^° (s 1.0, chloroform).

Алкилирование 0,75 г (2,19 ммоль) соединения 4в S-2-бромпропановой кислотой привело к 0,85 г (94%) циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-D- глюкопиранозида (4г). 250 мг (0,53 ммоль) кислоты 4 г конденсировали с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина. В защищенном гликопептиде 4д удалили изопропилиденовую защиту и получили 635 мг (48%) бензилового эфира 0-(циклогексил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамина (4е); аморфный белый порошок, [α]_54б+6^° (с 1,0; этанол). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 1,23 м, 1,41 м и 1,60 м

1,74с (3Н, NAc), 1,77 м и 2,01 м (2Н, β-СН₂-Glu), 2,35 т (2Н, γ-CH₂-Glu), 4,09ддд (1Н, CH-Glu), 4,17дк (1Н, CH-Ala), 4,23к

4,37д (1Н, H-1, J_1.2 8 Гц), 4,56т (1Н, С-6-ОН), 5,07с

5,24д (1Н, С-4-ОH), 7,12с и 7,32с (2Н, CONH₂-Glu), 7,35 м (5Н, Ph), 7,41д, 7,77д и 8,12д (3Н, 3 NH).Alkylation of 0.75 g (2.19 mmol) of compound 4c with S-2-bromopropanoic acid resulted in 0.85 g (94%) of cyclohexyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-3-0 - (D-1-carboxyethyl) -β-D-glucopyranoside (4g). 250 mg (0.53 mmol) of 4 g acid were condensed with trifluoroacetate of L-alanyl-D-isoglutamine benzyl ester. In the protected glycopeptide 4e, the isopropylidene protection was removed to obtain 635 mg (48%) of 0- (cyclohexyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranosid-3-yl) -D-lactoyl-L-alanyl-D benzyl ester -isoglutamine (4e); amorphous white powder, [α] _54b +6 ^° (c 1.0; ethanol). 'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): 1.23 m, 1.41 m and 1.60 m

1.74 s (3H, NAc), 1.77 m and 2.01 m (2H, β-CH ₂ -Glu), 2.35 t (2H, γ-CH ₂ -Glu), 4.09 ddd (1H, CH-Glu), 4.17dc (1H, CH-Ala), 4.23k

4.37 d (1H, H-1, J _1.2 8 Hz), 4.56 t (1H, C-6-OH), 5.07 s

5.24 d (1H, C-4-OH), 7.12 s and 7.32 s (2H, CONH _2- Glu), 7.35 m (5H, Ph), 7.41 d, 7.77 d and 8.12 d (3H, 3 NH).

Каталитический гидрогенолиз 325 мг (0,49 ммоль) бензилового эфира 4е привел к 265 мг (92%) гликопептида 4; аморфный порошок, [α]_54б+6^° (с 0,67; этанол).Catalytic hydrogenolysis of 325 mg (0.49 mmol) of benzyl ester 4e resulted in 265 mg (92%) of glycopeptide 4; amorphous powder, [α] _54b +6 ^° (c 0.67; ethanol).

Пример 4. 0-[(Адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил]-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (5)
230 мг (1,37 ммоль) адамантил-1-метанола гликозилировали 500 мг (1,37 ммоль) хлорида 1 и после очистки колоночной хроматографией (элюент: бензол --> бензол - этанол, 25:1) получили 270 мг (41%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (5а); т. пл. 136-138^oС, [α]_54б-30^° (с 0,77; хлороформ). 'Н-ЯМР (200 МГц, С₂НСl₃): 1,43 м, 1,61 м (СН₂ и СН), 1,89с, 1,96с, 1,97с, 2,03с (12Н, NAc и 3 ОАс), 2,90д и 3,45д (2Н, C-1-OCH₂, Jгем 10), 3,86ддд (1Н, Н-2, J_2.3 10,5 Гц), 3.60ддд (1-Н, Н-5, J_5.6а 2,5 Гц, J_5.6b 4,5 Гц), 4,06дд и 4,21дд (2Н, Н-6а, H-6b, J_6a,6b 12 Гц), 4,48д (1Н, Н-1, J_1.2 8,5 Гц), 5,06дд (1Н, Н-4, J_4,5 9,5 Гц), 5,18дд (1Н, Н-3, J_3,4 9,5 Гц), 5,58д (1Н, NH, J_2,NH 8,5 Гц).Example 4. 0 - [(Adamantyl-1-methyl) -2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranosid-3-yl] -D-lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (5)
230 mg (1.37 mmol) of adamantyl-1-methanol glycosylated 500 mg (1.37 mmol) of chloride 1 and, after purification by column chromatography (eluent: benzene -> benzene - ethanol, 25: 1), 270 mg (41%) ) (adamantyl-1-methyl) -2-acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-β-D-glucopyranoside (5a); t. pl. 136-138 ^° C, [α] _54b -30 ^° (c 0.77; chloroform). 'H-NMR (200 MHz, C ₂ Hcl ₃ ): 1.43 m, 1.61 m (CH ₂ and CH), 1.89 s, 1.96 s, 1.97 s, 2.03 s (12H, NAc and 3 OAc), 2.90 d and 3.45 d (2H, C-1-OCH ₂ , Jem 10), 3.86 ddd (1 H, H-2, J _2.3 10.5 Hz), 3.60 ddd (1-H, H-5, J _5.6a 2.5 Hz, J _5.6b 4.5 Hz), 4.06 dd and 4.21 dd (2H, H-6a, H-6b, J _{6a, 6b} 12 Hz), 4.48 d (1H, H-1, J _1.2 8.5 Hz), 5.06 dd (1H, H-4, J _4.5 9.5 Hz), 5.18 dd (1H, H-3, J _3.4 9 5 Hz), 5.58 d (1H, NH, J _{2, NH} 8.5 Hz).

Дезацетилирование 1,0 г (2,02 ммоль) ацетата 5а дало 0,71 г (95%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо -2-дезокси-р-0- глюкопиранозида (5б). Изопропилиденировали 0,61 г (1,66 ммоль) вещества 5б и выделили 416 мг (62%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден -β-D-глюкопиранозида (5в), т. пл. 172-174^oС, [α]_54б-56^° (с 1,0; хлороформ).Deacetylation of 1.0 g (2.02 mmol) of acetate 5a gave 0.71 g (95%) of (adamantyl-1-methyl) -2-acetamido -2-deoxy-p-0-glucopyranoside (5b). 0.61 g (1.66 mmol) of substance 5b was isopropylidened and 416 mg (62%) of (adamantyl-1-methyl) -2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-β-D-glucopyranoside was isolated (5c), mp. 172-174 ^o C, [α] _54b -56 ^° (s 1.0; chloroform).

Алкилированием 415 мг (1,02 ммоль) соединения 5в 5-2-бромпропионовой кислотой синтезировали 470 мг (96%) (адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-2-дезокси- 4,6-0-изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β- D-глюкопиранозида (5 г). 470 мг (0,98 ммоль) кислоты 5г конденсировали трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина и выделили 510 мг (68%) бензилового эфира 0-[(адамантил-1-метил)-2-ацетамидо- 2-дезокси-4,6-0- изопропилиден-β-D- глюкопиранозид-3-ил] -D-лактоил-L-аланил- D-изоглутамина (5д). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 1,20д и 1,25д

1,32с и 1,46с (6Н, Ме₂С), 1,43 м и 1,61 м (СН₂ и СН), 1,78с (3Н, NAc), 1,90м и 2,00м (2Н, β-CH₂-Glu), 2,35т (2Н, γ-СН₂-Glu), 2,91д и 3.30д (2Н, C-1-ОСН₂, Jгем 10), 4,00ддд (1Н, CH-Glu), 4,19дк (1Н, CH-Ala), 4,24к

4,32д (1Н, Н-1, J_1.2 8), 5,08с

7,13с и 7,32с (2Н, CONH₂), 7,36 м (5Н, Ph), 7,29д, 7,91 д и 8,15д (3Н, 3 NH). В производном 5д (280 мг, 0,36 ммоль) кислотным гидролизом удалили изопропилиденовую защиту и получили 250 мг (95%) бензилового эфира 0-[(адамантил-1-метил)-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D -глюкопиранозид-3-ил] -D-лактоил- L-аланил-D-изоглутамин (5е); т. пл. 133-135^oС, [α]_54б+4^° (с 1,0; этанол).By alkylation of 415 mg (1.02 mmol) of compound 5c with 5-2-bromopropionic acid, 470 mg (96%) of (adamantyl-1-methyl) -2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-3- were synthesized. 0- (D-1-carboxyethyl) -β-D-glucopyranoside (5 g). 470 mg (0.98 mmol) of acid 5 g was condensed with trifluoroacetate of benzyl ester of L-alanyl-D-isoglutamine and 510 mg (68%) of benzyl ester 0 - [(adamantyl-1-methyl) -2-acetamido-2-deoxy- 4,6-0-isopropylidene-β-D-glucopyranosid-3-yl] -D-lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (5e). 'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): 1.20 d and 1.25 d

1.32 s and 1.46 s (6H, Me ₂ C), 1.43 m and 1.61 m (CH ₂ and CH), 1.78 s (3H, NAc), 1.90 m and 2.00 m (2 H, β-CH ₂ -Glu), 2.35 t (2H, γ-CH ₂ -Glu), 2.91 d and 3.30 d (2H, C-1-OCH ₂ , Jem 10), 4.00 ddd (1 H, CH- Glu), 4.19dc (1H, CH-Ala), 4.24k

4.32d (1H, H-1, J _1.2 8), 5.08 s

7.13 s and 7.32 s (2H, CONH ₂ ), 7.36 m (5H, Ph), 7.29 d, 7.91 d and 8.15 d (3H, 3 NH). In the 5d derivative (280 mg, 0.36 mmol), the isopropylidene protection was removed by acid hydrolysis to give 250 mg (95%) of 0 - [(adamantyl-1-methyl) -2-acetamido-2-deoxy-β-D - benzyl ester glucopyranosid-3-yl] -D-lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (5e); t. pl. 133-135 ^o C, [α] _54b +4 ^° (s 1.0; ethanol).

Каталитический гидрогенолиз 250 мг (0,34 ммоль) бензилового эфира 5е привел к 190 мг (85%) гликопептида 5, аморфный порошок. The catalytic hydrogenolysis of 250 mg (0.34 mmol) of benzyl ester 5e resulted in 190 mg (85%) of glycopeptide 5, an amorphous powder.

Пример 5. 0-(Фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-α-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамин (6). Example 5. 0- (Phenyl-2-acetamido-2-deoxy-α-D-glucopyranosid-3-yl) -D-lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (6).

Реакционную смесь, состоящую из 1,0 г хлорида 7, 0,52 г (5,48 ммоль) фенола, 0,52 г (2,29 ммоль) тетраэтилбензиламмонийхлорида, 3,5 мл (4,38 ммоль) 1,25 н. раствора NaOH и 10 мл хлороформа, интенсивно перемешивали при комнатной температуре до исчезновения гликозил-донора (контроль ТСХ в системе хлороформ - этанол, 10:1). Смесь разбавили 10 мл воды и 10 мл хлороформа. Органический слой отделили, промыли 1 н. NaOH (2•5 мл) и водой (10 мл). Хлороформный экстракт осушили безводным Na₂SO₄ и упарили. Остаток перекристаллизовали из изопропилового спирта и получили 0,76 г (66%) фенил-2-ацетамидо-3,4,6-три-0-ацетил-2-дезокси-β-D -глюкопиранозида (6а), т. пл. 205-206^oС, [α]_54б-13^° (с 0,95, хлороформ). 'Н-ЯМР (300 МГц, С₂НСl₃): 1,95с, 2,05с, 2,06с, 2,08с (12Н, NAc и 3 ОАс), 3,88ддд (1-Н, Н-5, J_5.6a,2,5 Гц, J_5.6b 5 Гц), 4,14ддд (1Н, Н-2, J_2.3 10,5 Гц), 4,18дд и 4,29дд (2Н, Н-6а, Н-6b, J_6a,6b 12 Гц), 5,15д (1Н, Н-4, J_4,5 9,5 Гц), 5,28дд (1Н, Н-1, J_1.2 8,5 Гц), 5,42дд (1Н, Н-3, J_3.4 9,5 Гц), 5,58д (1Н, NH, J_2.NH 9 Гц), 7,01 м и 7,28 м (5Н, СН_аром).The reaction mixture consisting of 1.0 g of chloride 7, 0.52 g (5.48 mmol) of phenol, 0.52 g (2.29 mmol) of tetraethylbenzylammonium chloride, 3.5 ml (4.38 mmol) of 1.25 n . NaOH solution and 10 ml of chloroform, were intensively stirred at room temperature until the glycosyl donor disappeared (TLC control in the chloroform – ethanol system, 10: 1). The mixture was diluted with 10 ml of water and 10 ml of chloroform. The organic layer was separated, washed with 1 N. NaOH (2 • 5 ml) and water (10 ml). The chloroform extract was dried with anhydrous Na ₂ SO ₄ and evaporated. The residue was recrystallized from isopropyl alcohol to give 0.76 g (66%) of phenyl-2-acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-β-D-glucopyranoside (6a), mp 205-206 ^° C, [α] _54b -13 ^° (c 0.95, chloroform). 'H-NMR (300 MHz, C ₂ Hcl ₃ ): 1.95 s, 2.05 s, 2.06 s, 2.08 s (12H, NAc and 3 OAc), 3.88 ddd (1-H, H-5, J _5.6a , 2.5 Hz, J _5.6b 5 Hz), 4.14 ddd (1H, H-2, J _2.3 10.5 Hz), 4.18 dd and 4.29 dd (2H, H-6a, H- 6b, J _{6a, 6b} 12 Hz), 5.15 d (1H, H-4, J _4.5 9.5 Hz), 5.28 dd (1 H, H-1, J _1.2 8.5 Hz), 5, 42dd (1H, H-3, J _3.4 9.5 Hz), 5.58d (1H, NH, J _2.NH 9 Hz), 7.01 m and 7.28 m (5H, CH _arom ).

0,76 г (1,8 ммоль) ацетата 6а растворили в кипящем сухом метаноле, охладили до -40^oС и добавили 0,5 мл 0,1 н. раствора метилата натрия в метаноле. Выпавший при стоянии осадок отфильтровали, промыли холодным метанолом. Выход фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозида (6б) - 0,47 г (87%). Изопропилиденированием 0,47 г (1,57 ммоль) вещества 6б получили 0,47 г (89%) фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-изопропилиден-β-/ D-глюкопиранозида (6в); т. пл. 153-154^oС, [α]_54б+55^° (с 0,8; хлороформ - метанол, 3:1).0.76 g (1.8 mmol) of 6a acetate was dissolved in boiling dry methanol, cooled to -40 ^° C and 0.5 ml of 0.1 N was added. a solution of sodium methylate in methanol. The precipitate formed upon standing was filtered off and washed with cold methanol. The yield of phenyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranoside (6b) is 0.47 g (87%). Isopropylidation of 0.47 g (1.57 mmol) of substance 6b gave 0.47 g (89%) of phenyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropylidene-β- / D-glucopyranoside (6c); t. pl. 153-154 ^o C, [α] _54b +55 ^° (c 0.8; chloroform - methanol, 3: 1).

0,45 г (1,36 ммоль) соединения 6в алкилировали S-2-бромпропионовой кислоты и добавлением эфира выделили 0,42 г (76%) фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-4,6-0-
изопропилиден-3-0-(D-1-карбоксиэтил)-β-D-глюкопиранозида (6 г). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6). 1,24д

1,33с и 1,48с (6Н, Ме₂С), 1,80с (3Н, NAc), 4,19к

5,25д (1H, Н-1, J_1.2 6 Гц), 6,97 м и 7,29 м (5Н, СН_аром.), 7,84д (1Н, NH, J_2.NH 6 Гц), 12,48ус (1Н, СООН). Конденсацией 270 мг (0,66 ммоль) кислоты 6г с трифторацетатом бензилового эфира L-аланил-D-изоглутамина синтезировали 270 мг (59%) гликопептида 6д. Кислотный гидролиз изопропилиденовой защиты в производном 6д (190 мг, 0,27 ммоль) дал 179 мг (100%) бензилового эфира 0-(фенил-2-ацетамидо-2-дезокси-β-D-глюкопиранозид-3-ил)-D-лактоил-L-аланил-D-изоглутамина (6е), т. пл. 212-213^oС (с разл.), [α]_54б+25^° (с 0,67; этанол). 'Н-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 1,25д и 1,27д (6H,2CH₃CH,J_Me,CH7Гц), 1,78с (3Н, NAc), 1,80 м и 2,02 м (2Н, β-CH₂-Glu), 2,36т (2Н, γ-CH₂-Glu), 3,90ддд (1Н, CH-Glu), 4,18дк (1Н, CH-Ala), 4,26к

4,69ус (1Н, С-6-ОН), 4,95д (1Н, Н-1, J_1.2 8,5 Гц), 5,08с

5,40ус (1Н, С-4-ОН), 6,98м (3Н) и 7,30м (2Н) (5Н, Наром), 7,13с и 7,32с (2Н, CONH₂), 7,36м (5Н, Ph), 7,47д, 7,91д и 8,14д (3Н, 3 NH).0.45 g (1.36 mmol) of compound 6c was alkylated with S-2-bromopropionic acid and 0.42 g (76%) of phenyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0- was isolated by adding ether.
isopropylidene-3-0- (D-1-carboxyethyl) -β-D-glucopyranoside (6 g). 'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6). 1.24d

1.33 s and 1.48 s (6H, Me ₂ C), 1.80 s (3H, NAc), 4.19 k

5.25 d (1H, H-1, J _1.2 6 Hz), 6.97 m and 7.29 m (5H, CH _arom .), 7.84 d (1H, NH, J _2.NH 6 Hz), 12 48us (1H, COOH). By condensation of 270 mg (0.66 mmol) of 6g acid with L-alanyl-D-isoglutamine benzyl ester trifluoroacetate, 270 mg (59%) of 6d glycopeptide were synthesized. Acid hydrolysis of the isopropylidene protection in the 6d derivative (190 mg, 0.27 mmol) gave 179 mg (100%) of 0- (phenyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopyranoside-3-yl) -D benzyl ester -lactoyl-L-alanyl-D-isoglutamine (6e), mp 212-213 ^o C (decomp.), [Α] _54b +25 ^° (s 0.67; ethanol). 'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): 1.25 d and 1.27 d (6H, 2CH ₃ CH, J _{Me, CH} 7 Hz), 1.78 s (3H, NAc), 1.80 m and 2, 02 m (2H, β-CH ₂ -Glu), 2.36 t (2H, γ-CH ₂ -Glu), 3.90 ddd (1H, CH-Glu), 4.18 dc (1H, CH-Ala), 4 , 26k

4.69us (1H, C-6-OH), 4.95 d (1H, H-1, J _1.2 8.5 Hz), 5.08 s

5.40us (1H, C-4-OH), 6.98m (3H) and 7.30m (2H) (5H, Narom), 7.13s and 7.32s (2H, CONH ₂ ), 7.36m ( 5H, Ph), 7.47d, 7.91d and 8.14d (3H, 3 NH).

Бензиловый эфир 6е (180 мг, 0,27 ммоль) подвергли каталитическому гидрогенолизу. Выход гликопептида 6 - 130 мг (84%); аморфный порошок. Benzyl ether 6e (180 mg, 0.27 mmol) was subjected to catalytic hydrogenolysis. The yield of glycopeptide 6 is 130 mg (84%); amorphous powder.

Примеры исследования биологических свойств производных мурамовой кислоты. Examples of studies of the biological properties of derivatives of muramic acid.

Исследована биологическая активность производных мурамовой кислоты в модельных тест-системах in vitro и in vivo. Продемонстировано, что вышеописанные соединения в большинстве тест-систем превышают по активности немодифицированный МДП и его известные гликозидные аналоги. Более того, в модельных тест-системах in vivo оригинальные производные МДП проявляли терапевтическое действие по стимуляции противоопухолевого иммунного ответа и усилению неспецифической резистетности к инфекционным заболеваниям в гораздо более низких концентрациях, чем немодицированный МДП. Последняя закономерность наблюдалась и при внутрибрюшинном, и при внутривенном, и при пероральном введении препаратов, что говорит о высокой биодоступности оригинальных производных мурамовой кислоты при вышеописанных путях введения в организм. The biological activity of muramic acid derivatives was studied in model test systems in vitro and in vivo. It has been demonstrated that the above compounds in most test systems are superior in activity to unmodified MDP and its known glycosidic analogues. Moreover, in in vivo model test systems, the original MDP derivatives exerted a therapeutic effect in stimulating the antitumor immune response and enhancing nonspecific resistance to infectious diseases at much lower concentrations than unmodified MDP. The latter pattern was observed with intraperitoneal, intravenous, and oral administration of drugs, which indicates the high bioavailability of the original derivatives of muramic acid with the above routes of administration.

Ниже приведены два примера сравнительного изучения иммуномодулирующей активности производных мурамовой кислоты в модельных тест-ситемах in vitro. The following are two examples of a comparative study of the immunomodulatory activity of muramic acid derivatives in in vitro model test systems.

Claims

Muramic acid derivatives of the general formula:

where X is C ₁ -C ₂₀ alkyl, with the exception of X is butyl, heptyl or hexadecyl, or C ₃ -C ₉ cycloalkyl unsubstituted or substituted with C ₁ -C ₃ alkyl, or adamantyl unsubstituted or substituted with C ₁ - C ₃ -alkyl, or C ₆ -C ₁₂ aryl, unsubstituted or substituted with one or three C ₁ -C ₃ -alkyl.