RU2176792C2

RU2176792C2 - Method for studying urease activity

Info

Publication number: RU2176792C2
Application number: RU98110329A
Authority: RU
Inventors: А.В. Иванов; В.Е. Милейко
Original assignee: Иванов Александр Владимирович; Милейко Виктор Евгеньевич
Priority date: 1998-05-15
Filing date: 1998-05-15
Publication date: 2001-12-10

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves introducing in vivo carbamide into organism and controlling its hydrolysis with gas analysis measurements. In breathing through nose, breathing frequency, or volume discharge rate of exhaled air or carbon dioxide contents of normal isotope composition and/or ammoniac contents of normal isotope composition is determined before and after introducing carbamide. Increments of the mentioned parameters relative to their initial values are interpreted in terms of urease activity availability. EFFECT: high reliability and accuracy of diagnosis method. 6 cl, 1 dwg

Description

Изобретение относится к области микробиологических исследований, связанных с оценкой уреазной активности микроорганизмов, вызывающих заболевания желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), в частности для диагностики инвазии Heficobacter pylori (HP) [Marshall B.I. History of the discovery of C. pylori. - In "Campylobacter pylori in gastritis and peptic ulcer disease": Blaser M. J. ed. New York, Igaku-Shoir, 1989, p. 7-24. Marshall B.I., Warren I.R. Unidentifed curved bacill on gastric epitritium in active chronic gastritis. Lancet, 1984, p. 1311-1315. Foreman D., Webb P., Parsonnet I. H. pylori and gastric cancer. Lancet, 1994, p. 243 - 244, letter]. The invention relates to the field of microbiological studies related to the assessment of the urease activity of microorganisms that cause diseases of the gastrointestinal tract (GIT), in particular for the diagnosis of invasion of Heficobacter pylori (HP) [Marshall B.I. History of the discovery of C. pylori. - In "Campylobacter pylori in gastritis and peptic ulcer disease": Blaser M. J. ed. New York, Igaku-Shoir, 1989, p. 7-24. Marshall B.I., Warren I.R. Unidentifed curved bacill on gastric epitritium in active chronic gastritis. Lancet, 1984, p. 1311-1315. Foreman D., Webb P., Parsonnet I. H. pylori and gastric cancer. Lancet, 1994, p. 243 - 244, letter].

Для диагностических исследований уреазной активности микрофлоры желудка и двенадцатиперстной кишки и, главным образом, для диагностики HP инфицирования традиционно используют методики исследования уреазной активности in vitro [П.Я. Григорьев, В.А. Исаков, В.М. Розенталь и др. Способ выявления Campilobacter pylori при язвенной болезни желудка и хроническом гастрите. Авторское свидетельство СССР N 1564192, C 12 Q 1/04, опубл. 18.04.1988]. В основе этой методики лежит изменение pH реакционной среды в ходе удаления из нее продуктов гидролиза карбамида (субстрата). Гидролиз интенсивно протекает под действием фермента (уреазы), продуцируемого микроорганизмами (в частности HP). For diagnostic studies of the urease activity of the microflora of the stomach and duodenum, and mainly for the diagnosis of HP infection, traditionally used methods for the study of urease activity in vitro [P.Ya. Grigoryev, V.A. Isakov, V.M. Rosenthal et al. Method for detecting Campilobacter pylori in gastric ulcer and chronic gastritis. USSR author's certificate N 1564192, C 12 Q 1/04, publ. 04/18/1988]. The basis of this technique is the change in the pH of the reaction medium during the removal of urea (substrate) hydrolysis products from it. Hydrolysis proceeds intensively under the action of an enzyme (urease) produced by microorganisms (in particular HP).

Когда уреаза HP присутствует в желудке, субстрат (мочевина) быстро гидролизуется (1) с образованием аммиака и двуокиси углерода:

[Аруин Л. И, Григорьев П. Я. , Исаков В.А., Яковенко Э.П. Хронический гастрит, Амстердам, 1993, 262 с. Григорьев П.Я. и сотр. Метод определения Campilobacter pylori в слизистой оболочке желудка при хроническом гастрите. Лабораторное дело. 1989, N 6, с 52-54. Е.М. Стародуб и др. Геликобактериоз и язвенная болезнь, Л. , 1991, 32 с., с 19. Н.В. Сафонова и др. Гастрит язвенная болезнь и хеликобактериоз. СПб, 1993, 40 с., с. 13, 32]. Методики, выполняемые in vivo, используются для оценки активности микробного фермента по газообразным продуктам реакции гидролиза карбамида в выдыхаемом воздухе (воздухе ротовой полости) или моче и позволяют оценить характер инвазии.When HP urease is present in the stomach, the substrate (urea) quickly hydrolyzes (1) to form ammonia and carbon dioxide:

[Aruin L. I, Grigoriev P. Ya., Isakov V.A., Yakovenko E.P. Chronic gastritis, Amsterdam, 1993, 262 p. Grigoriev P.Ya. et al. Method for determination of Campilobacter pylori in the gastric mucosa in chronic gastritis. Laboratory work. 1989, N 6, s 52-54. EAT. Starodub et al. Helicobacteriosis and peptic ulcer, L., 1991, 32 p., P. 19. N.V. Safonova et al. Gastritis, peptic ulcer disease and helicobacteriosis. St. Petersburg, 1993, 40 p., P. 13, 32]. In vivo methods are used to assess the activity of the microbial enzyme by the gaseous products of the urea hydrolysis reaction in exhaled air (oral air) or urine and make it possible to assess the nature of the invasion.

Для таких исследований используют изотопные маркеры и реакция ферментативного гидролиза происходит не с ¹²C¹H₄ ¹⁴N₂ ¹⁶O (карбамидом нормального изотопного состава), а с аналогами измененного изотопного состава: ¹³C¹H₄ ¹⁴N₂ ¹⁶O, или ¹⁴C¹H₄ ¹⁴N₂ ¹⁶O, или ¹²C¹H₄ ¹⁵N₂ ¹⁶O.For such studies, isotopic markers are used and the enzymatic hydrolysis reaction does not occur with ¹² C ¹ H ₄ ¹⁴ N ₂ ¹⁶ O (carbamide of normal isotopic composition), but with analogues of the modified isotopic composition: ¹³ C ¹ H ₄ ¹⁴ N ₂ ¹⁶ O, or ¹⁴ C ¹ H ₄ ¹⁴ N ₂ ¹⁶ O, or ¹² C ¹ H ₄ ¹⁵ N ₂ ¹⁶ O.

Эти диагностические методики ("urea breath test") предполагают прием per os мочевины, меченной радиоактивным ¹⁴C или стабильным ¹³C, и контроль процесса ее гидролиза in vivo по содержанию изотопов углерода ¹⁴C и ¹³C в выдыхаемом CO₂ [Peura D.A., Pambianko D.J., Dye K.R., et al. Microdose urea breath test offersdiagnosis of Helicobacter pylori in 10 minutes. Am. J. Gastro. 1996, v. 91, N. 2, p. 233-238. Marshall B.J., Plankey M.W., Hoffman S. R. , et al. A 20-minute breath test for helicobacter pylori. Am. J. Gastroenterol. 1991, v. 86, p 438-435. Grahm D.Y., Klein P.D., Evans D.J. Jr. Campylobacter pylory detectected noninvasively by the 13C-urea breath test. Lancet 1987, n. 1, 1174-1177]. По мнению их авторов не существует иной возможности для того, чтобы проконтролировать процесс ферментативного гидролиза in vivo по продуктам нормального изотопного состава из-за того, что мочевина присутствует во всех биологических жидкостях человека, а углекислый газ содержится в выдыхаемом воздухе. Однако в этом случае речь идет о моделировании естественного процесса, а не о реакции гидролиза карбамида нормального изотопного состава, который синтезируется печенью человека. Продукты гидролиза, радиоактивные ¹⁵N¹H₃ и ¹⁴C¹³O₂ или стабильный ¹³C¹⁶O₂, образующиеся из вносимых извне аналогов естественного карбамида, несвойственны для процессов, обычно протекающих в живом организме. Исключение составляет только ¹³C¹⁶O₂. Его следовые количества всегда образуются в процессе дыхания. Именно поэтому контроль изотопных маркеров в выдыхаемом воздухе или моче является качественно иной задачей нежели контроль естественных метаболитов. Обычно он осуществляется методами радиоуглеродного анализа, масс-спектрометрией и им подобными приборными методами. Причем в случае радиоактивных изотопов их количество, вносимое в организм, лимитируется ущербом от их внедрения и оно минимизировано. Это требует применения высокоточных методик и использования высокочувствительных, а следовательно, дорогих аналитических устройств. В случае ¹³C ущерб здоровью от применения нерадиоактивного изотопного маркера не отмечался и его небольшое количество, вносимое в организм в ходе исследования, определяется только желанием сэкономить дорогостоящий реагент. Это в свою очередь неоправданно повышает требования к чувствительности и другим метрологическим характеристикам масс-спектрометра и используемых аналитических методик. В то же время, в этом случае требуется измерение фоновой концентрации ¹³C¹⁶O₂ в выдыхаемом воздухе до введения карбамида, меченного изотопным маркером, и эффект селективности, присущий методикам с использованием изотопных маркеров, отсутствует или используется не в полной мере. Все вышеперечисленные способы (методические подходы) воспроизводят биохимический уреазный тест в максимально усложненном варианте, где контроль инвазии осуществляется по результатам анализа сложных кинетических зависимостей. Чувствительность таких кинетических методик тем не менее достигает 96-99%, а специфичность - 98% [Walsh J.H., Peterson W.L. The Treatment of Helicobacter Pylori Infection in the Management of Peptic Ulces Disease. Review Article, The New England Jounal of Medicine, v. 333, n. 15, p. 984-991]. Но использование радиоактивного ¹⁴C в детской практике ограничено, а определение ¹³C связано с эксплуатацией дорогостоящего масс-спектрометра.These diagnostic methods (urea breath test) involve taking per os urea labeled with radioactive ¹⁴ C or stable ¹³ C and monitoring its hydrolysis in vivo by the content of carbon isotopes ¹⁴ C and ¹³ C in expired CO ₂ [Peura DA, Pambianko DJ, Dye KR, et al. Microdose urea breath test offersdiagnosis of Helicobacter pylori in 10 minutes. Am. J. Gastro. 1996, v. 91, N. 2, p. 233-238. Marshall BJ, Plankey MW, Hoffman SR, et al. A 20-minute breath test for helicobacter pylori. Am. J. Gastroenterol. 1991, v. 86, p 438-435. Grahm DY, Klein PD, Evans DJ Jr. Campylobacter pylory detectected noninvasively by the 13C-urea breath test. Lancet 1987, n. 1, 1174-1177]. According to their authors, there is no other way to control the in vivo enzymatic hydrolysis of products of normal isotopic composition due to the fact that urea is present in all human biological fluids and carbon dioxide is contained in exhaled air. However, in this case we are talking about modeling a natural process, and not about the hydrolysis reaction of urea with a normal isotopic composition, which is synthesized by the human liver. The hydrolysis products, radioactive ¹⁵ N ¹ H ₃ and ¹⁴ C ¹³ O ₂ or stable ¹³ C ¹⁶ O ₂ , formed from externally introduced analogues of natural urea, are not typical for processes usually occurring in a living organism. The exception is only ¹³ C ¹⁶ O ₂ . Its trace amounts are always formed during breathing. That is why the control of isotopic markers in exhaled air or urine is a qualitatively different task than the control of natural metabolites. It is usually carried out by radiocarbon analysis methods, mass spectrometry, and similar instrumental methods. Moreover, in the case of radioactive isotopes, their amount introduced into the body is limited by the damage from their introduction and it is minimized. This requires the use of high-precision techniques and the use of highly sensitive and, therefore, expensive analytical devices. In the case of ¹³ C, health damage from the use of a non-radioactive isotope marker was not observed and its small amount introduced into the body during the study is determined only by the desire to save an expensive reagent. This, in turn, unreasonably raises the requirements for sensitivity and other metrological characteristics of the mass spectrometer and the used analytical techniques. At the same time, in this case, it is necessary to measure the background concentration of ¹³ C ¹⁶ O ₂ in the expired air before the introduction of carbamide labeled with an isotopic marker, and the selectivity effect inherent in methods using isotopic markers is absent or is not fully used. All of the above methods (methodological approaches) reproduce the biochemical urease test in the most complicated version, where invasion control is carried out according to the results of the analysis of complex kinetic dependencies. The sensitivity of such kinetic techniques nevertheless reaches 96-99%, and the specificity is 98% [Walsh JH, Peterson WL The Treatment of Helicobacter Pylori Infection in the Management of Peptic Ulces Disease. Review Article, The New England Jounal of Medicine, v. 333, n. 15, p. 984-991]. But the use of radioactive ¹⁴ C in children's practice is limited, and the definition of ¹³ C is associated with the operation of an expensive mass spectrometer.

Методики оценки уреазной активности in vivo по гидролизу карбамида нормального изотопного состава предполагают контроль содержания аммиака, так как считается, что наличие ¹²C¹⁶O₂ в выдыхаемом воздухе (воздухе ротовой полости) не позволяет оценить ферментативный гидролиз карбамида по приросту содержания углекислого газа.Methods for assessing urease activity in vivo by hydrolysis of urea with a normal isotopic composition suggest control of the ammonia content, since it is believed that the presence of ¹² C ¹⁶ O ₂ in exhaled air (oral air) does not allow one to evaluate the enzymatic hydrolysis of urea by the increase in carbon dioxide content.

Ограниченное применение нашел метод, названный авторами как "Аэротест" [Safonova N.V., Meelaiko V.E., Zhebrun A.B. et al. "The Respiratory Test for detecting Helicobacteriosis.": - Workshop: - Helicobacter pylori and the new concepts in gastroduodenal diseases. - Prague, 1992. - P-3. Zhebrun A.B., Safonova N. V. , Mileiko V.E. et al. "AEROTEST" for Helicobacter pylori diagnosis. : - Acta Gastroenterol. Beig. - 1993. - Vol. 56. - P. 84]. Этот метод построен на определении содержания аммиака в воздухе ротовой полости (фоновой концентрации - C₁) без внесения мочевины извне. По упрощенной методике C₁ измеряют как среднюю величину текущих концентраций за время анализа (τ). В качестве диагностического критерия, свидетельствующего об инвазии HP, авторы предлагают C₁ ≥ 0,8 мг/м³ [Милейко В.Е., Сафонова Н.В., Жебрун А. Б. и др. "Методы лабораторной диагностики хеликобактериоза": - Актуальные проблемы инфекционной патологии. - СПб, 1993. - С. 43].The method described by the authors as “Aerotest” [Safonova NV, Meelaiko VE, Zhebrun AB et al. "The Respiratory Test for detecting Helicobacteriosis.": - Workshop: - Helicobacter pylori and the new concepts in gastroduodenal diseases. - Prague, 1992. - P-3. Zhebrun AB, Safonova NV, Mileiko VE et al. "AEROTEST" for Helicobacter pylori diagnosis. : - Acta Gastroenterol. Beig. - 1993. - Vol. 56. - P. 84]. This method is based on determining the ammonia content in the air of the oral cavity (background concentration - C ₁ ) without introducing urea from the outside. Using a simplified technique, C _{1 is} measured as the average value of current concentrations during the analysis (τ). As a diagnostic criterion indicating HP invasion, the authors propose C ₁ ≥ 0.8 mg / m ³ [Mileiko V.E., Safonova N.V., Zhebrun A. B. et al. "Methods for the laboratory diagnosis of helicobacteriosis": - Actual problems of infectious pathology. - St. Petersburg, 1993. - S. 43].

В наиболее простом варианте содержание аммиака измеряется линейными одноразовыми газоанализаторами - индикаторными трубками (ИТ). Через ИТ, заполненную хемосорбентом (кислотно-основной индикатор Бромфеноловый синий на силикагеле марки КСК кислотной обработки с размером зерен 0,16-0,25 мм), прокачивается с помощью электромеханического или ручного аспиратора два литра воздуха из ротовой полости пациента. Аналитическая реакция происходит во время отбора пробы, а оценка содержания аммиака производится по длине слоя адсорбента, изменившего окраску. При использовании серийных стандартизованных ИТ каждый миллиметр слоя наполнителя, изменившего окраску, соответствует 0,3 мг/м³, а общая погрешность для C от 0,3 до 0,9 мг/м³ составляет 30%.In the simplest version, the ammonia content is measured by linear disposable gas analyzers - indicator tubes (IT). Through IT filled with chemisorbent (acid-base indicator Bromphenol blue on silica gel of the KSK brand of acid treatment with grain sizes of 0.16-0.25 mm), two liters of air are pumped from the patient's oral cavity using an electromechanical or manual aspirator. An analytical reaction occurs during the sampling, and the ammonia content is estimated along the length of the adsorbent layer, which changed color. When using standardized standard IT, each millimeter of the color-changing filler layer corresponds to 0.3 mg / m ³ , and the total error for C from 0.3 to 0.9 mg / m ³ is 30%.

Для выполнения измерений по контролю содержания углекислого газа (другого газообразного продукта гидролиза) в воздухе также могут использоваться индикаторные трубки на основе твердых химических адсорбентов: Тимолфталеин на окиси алюминия или гидразингидрат совместно с фуксином основным на силикагеле [Е. А. Перегуд, М.С. Быховская, Е.В. Гернет. Быстрые методы определения вредных веществ. Изд. 2-ое, "Химия" М., 1970, 360 с., с. 153 и 154]. To carry out measurements to control the content of carbon dioxide (another gaseous hydrolysis product) in the air, indicator tubes based on solid chemical adsorbents can also be used: thymolphthalein on alumina or hydrazine hydrate together with fuchsin basic on silica gel [E. A. Peregud, M.S. Bykhovskaya, E.V. Gernet. Fast methods for determining harmful substances. Ed. 2nd, "Chemistry" M., 1970, 360 pp., P. 153 and 154].

Кроме того, разработан биохимический тест измерения уреазной активности in vivo (ХЕЛИК-тест) по оценке прироста концентрации аммиака (ΔC) в воздухе ротовой полости после приема пациентом мочевины (карбамида) нормального изотопного состава ¹²C¹H₄ ¹⁴N₂ ¹⁶O [патент РФ N 2100010, A 61 B 10/00, C 12 Q 1/58, "Способ неинвазивной хеликобактериозадиагностики ин виво", Корниенко Е. А., Милейко В.Е. опубл. 27.12.97, Бюл. N 36; Корниенко Е.А., Милейко В.Е. "Новый метод неинвазивной диагностики хеликобактериоза". Диагностика и лечение: - Архангельск, 1996, 11 (12), с. 31-33]. Мочевина быстро гидролизуется под действием уреазы HP и вызывает изменение содержания аммиака в воздухе. Причем контроль содержания аммиака в воздухе ротовой полости может осуществляется как простейшими средствами газового анализа (ИТ, тест-билеты или фотоколориметрические методики), так и сложными физико-химическими методами, например газоаналитической методикой с использованием спектрометра ионного дрейфа (СИД) [E. Kornienko, O. Vashkevich, V.Mileiko, V.Samokish, "Simple Express Urea Breath Test Offers Diagnosis of Helicobacter pylori Infection" in Abstracts ofinternnational Congress on Analytical Chemistry, Moscow, Russia, June 15-21, 1997, v. 2, p. 37]. Спектрометр обладает быстродействием и позволяет моментально оценить количество каких-либо веществ в воздухе, автоматически аспирируемом его системой пробоотбора. Метод ион-дрейфовой спектрометрии (ИДС) основан на том, что азот воздуха, ионизированный β -излучением от ⁶³Ni взаимодействует с примесями в камере реактора, образуя ионные кластеры. В случае NH₃ это ионные кластеры (H₂O)_nNH₃ ⁺. Слабоионизированная плазма импульсно эжектируется в дрейфовую камеру, где ионные кластеры дифференцируются по подвижности в электрическом поле. Измерение ионных токов в конце дрейфовой камеры позволяет получить представление о составе примесей в анализируемом воздухе.In addition, a biochemical test for measuring urease activity in vivo (HELIK test) was developed to assess the increase in the concentration of ammonia (ΔC) in the air of the oral cavity after a patient receives urea (urea) of normal isotopic composition ¹² C ¹ H ₄ ¹⁴ N ₂ ¹⁶ O [patent RF N 2100010, A 61 B 10/00, C 12 Q 1/58, "Method of non-invasive Helicobacter pylori diagnostics in vivo", Kornienko EA, Mileiko V.E. publ. 12/27/97, Bull. N 36; Kornienko E.A., Mileyko V.E. "A new method for the non-invasive diagnosis of helicobacteriosis." Diagnosis and treatment: - Arkhangelsk, 1996, 11 (12), p. 31-33]. Urea is rapidly hydrolyzed by the action of HP urease and causes a change in the ammonia content in the air. Moreover, the control of the ammonia content in the air of the oral cavity can be carried out both by the simplest means of gas analysis (IT, test tickets or photocolorimetric methods), as well as by complex physical and chemical methods, for example, gas analysis methods using an ion drift spectrometer (LED) [E. Kornienko, O. Vashkevich, V. Mileiko, V. Samokish, "Simple Express Urea Breath Test Offers Diagnosis of Helicobacter pylori Infection" in Abstracts of the International Congress on Analytical Chemistry, Moscow, Russia, June 15-21, 1997, v. 2, p. 37]. The spectrometer has a speed and allows you to instantly assess the amount of any substances in the air, automatically aspirated by its sampling system. The method of ion-drift spectrometry (IDS) is based on the fact that air nitrogen ionized by β-radiation from ⁶³ Ni interacts with impurities in the reactor chamber to form ionic clusters. In the case of NH _3, these are ionic clusters (H ₂ O) _n NH ₃ ⁺ . A weakly ionized plasma is pulsed ejected into a drift chamber, where ionic clusters differentiate by mobility in an electric field. Measurement of ion currents at the end of the drift chamber provides an idea of the composition of impurities in the analyzed air.

Методики, предполагающие оценку прироста содержания аммиака в воздухе ротовой полости, который связан с пероральным приемом карбамида, или карбамида в смеси с наполнителем, или раствора 0,5 г карбамида в 5-20 мл воды [Милейко В. Е. , Корниенко Е.А., Григорян Т.М. "Комплекс методик для диагностики инвазии Helicobacter pylori": Сб. докладов и тезисов докладов Второй всеросийской научно-практической конференции с международным участием "Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности" 20-22 мая 1997 г. в СПб, под ред. Проф. Н. И. Иванова, 3 т., МЦЕНТ СПб, 1997, т. 3, с. 432-438], или же ополаскиванием ротовой полости раствором карбамида [В.Л. Пайков, А.В. Иванов "Предварительные результаты исследований уреазной активности полости рта у детей с Helicobacter pylori ассоциированным гастродуоденитом". Пятая сессия Российской группы по изучению Helicobacter pylori, Омск, 20-21 мая 1997 г.: - Материалы сессии, с. 47-49] являются наиболее близкими к заявленному способу. Они предполагают контроль аммиака в выдыхаемом воздухе или воздухе ротовой полости. Выполнение этих аналитических процедур при дыхании через рот усложняет процедуру измерения, так как измеряется либо усредненный показатель между вдыхаемым и выдыхаемым воздухом, либо требуется устройство, отделяющее выдыхаемый воздух, или устройство, регулирующее отбор пробы воздуха на выдохе. Methods involving the assessment of the increase in the ammonia content in the air of the oral cavity, which is associated with the oral administration of urea, or urea mixed with a filler, or a solution of 0.5 g of urea in 5-20 ml of water [V. Mileyko, E. A. Kornienko ., Grigoryan T.M. "A complex of methods for the diagnosis of invasion of Helicobacter pylori": Sat. reports and abstracts of the Second All-Russian scientific-practical conference with international participation "New in the ecology and life safety" May 20-22, 1997 in St. Petersburg, under the editorship of Prof. N.I. Ivanova, 3 vol., ICTS SPb, 1997, vol. 3, p. 432-438], or rinsing the oral cavity with a urea solution [V.L. Paykov, A.V. Ivanov "Preliminary results of studies of urease activity of the oral cavity in children with Helicobacter pylori associated gastroduodenitis." Fifth session of the Russian group for the study of Helicobacter pylori, Omsk, May 20-21, 1997: - Session materials, p. 47-49] are closest to the claimed method. They suggest ammonia control in exhaled or oral air. Performing these analytical procedures when breathing through the mouth complicates the measurement procedure, since either the average value between the inhaled and exhaled air is measured, or a device that separates the exhaled air or a device that controls the sampling of air on the exhale is measured.

Нами экспериментально установлено, что контроль продуктов гидролиза, как углекислого газа, так и аммиака, в воздухе ротовой полости при дыхании через нос существенно упрощает аналитическую процедуру. We experimentally found that the control of the hydrolysis products of both carbon dioxide and ammonia in the air of the oral cavity when breathing through the nose significantly simplifies the analytical procedure.

В воздухе ротовой полости при дыхании носом до приема дополнительных порций карбамида углекислый газ обычно содержится на уровне, не превышающем концентрации 0,1 об. %. Это содержание характерно для жилых помещений и не является значимым для диагностики. Таким образом, в этом случае присутствуют лишь следы аммиака и углекислого газа, которые обусловлены не только фоновым содержанием в воздухе жилых помещений, но и, вероятно, обусловлены уреазной активностью микроорганизмов как ротовой полости, так и ЖКТ. Кроме того, следы углекислого газа могут быть обусловлены некоторым вкладом процесса дыхания. Общеизвестно, что углекислый газ, обладающий наркотическим действием, даже в относительно малых концентрациях возбуждает дыхательный центр, а в очень больших - угнетает его [Е.А. Перегуд, М.С. Быховская, Е.В. Гернет. Быстрые методы определения вредных веществ в воздухе. Изд. 2-е, М.: Химия, 1970, 360 с., с. 151]. In the air of the oral cavity when breathing through the nose before taking additional portions of urea, carbon dioxide is usually contained at a level not exceeding a concentration of 0.1 vol. % This content is typical for residential premises and is not significant for diagnosis. Thus, in this case, there are only traces of ammonia and carbon dioxide, which are caused not only by the background content of residential premises in the air, but are also probably due to the urease activity of microorganisms of both the oral cavity and gastrointestinal tract. In addition, traces of carbon dioxide may be due to some contribution from the respiration process. It is well known that carbon dioxide, which has a narcotic effect, even in relatively low concentrations excites the respiratory center, and in very large concentrations it inhibits it [E.A. Peregud, M.S. Bykhovskaya, E.V. Gernet. Fast methods for determining harmful substances in the air. Ed. 2nd, Moscow: Chemistry, 1970, 360 pp., P. 151].

Целью данной работы было создание информативного, простого, удобного и недорогого неинвазивного метода диагностики, построенного на регистрации продуктов гидролиза карбамида под действием микробной уреазы в выдыхаемом воздухе и воздухе ротовой полости или влиянию этих продуктов на дыхание обследуемого. The aim of this work was to create an informative, simple, convenient and inexpensive non-invasive diagnostic method based on the registration of urea hydrolysis products under the action of microbial urease in exhaled air and oral air or the influence of these products on the subject's breathing.

Данные нашего исследования показали, что прием карбамида в виде раствора, гранул или же в кристаллическом виде приводит к существенному увеличению у пациентов, инфицированных HP, средневзвешенной концентрации углекислого газа и аммиака в выдыхаемом воздухе и воздухе ротовой полости при дыхании ртом или носом по сравнению с фоновым содержанием до приема карбамида. В то время как для лиц контрольной группы, не имеющих инвазии HP, отмечаются только несущественные колебания средневзвешенного содержания аммиака и углекислого газа в выдыхаемом воздухе (или воздухе ротовой полости при дыхании через рот), или воздухе ротовой полости при дыхании через нос по сравнению с фоновым содержанием до приема карбамида. Причем для пациентов, инфицированных HP, содержание углекислого газа и аммиака в воздухе ротовой полости как при дыхании носом, так и при дыхании ртом увеличивается с разной скоростью, что свидетельствует об отличии в процессах массопередачи и эвакуации для этих продуктов ферментативного гидролиза карбамида (см. чертеж). При ополаскивании ротовой полости раствором карбамида или внесении его в ротовую полость совместно с другими веществами, например жевательной резинкой Dirol® Carbamide+, увеличение содержания продуктов гидролиза в газовой среде ротовой полости отчетливо проявляется как при дыхании через нос, так и при дыхании ртом. Причем содержание аммиака и углекислого газа у пациентов, инфицированных HP, временно повышается уже со второй минуты и возвращается к фоновым значениям за меньшее время, чем в случае перорального приема внутрь, то есть попадания, главным образом, в пищевод и далее в желудок. При этом фоновая средневзвешенная концентрация углекислого газа и аммиака много меньше текущих максимальных величин, вызванных массопередачей в газовую среду продуктов ферментативного гидролиза внесенного извне карбамида. У обследуемых, не имеющих инвазии HP, содержание аммиака и углекислого газа остается практически неизменным. Аналогичная картина наблюдается и в случае других уреазопродуцентов. The data of our study showed that taking urea in the form of a solution, granules, or in crystalline form leads to a significant increase in patients infected with HP, the weighted average concentration of carbon dioxide and ammonia in the exhaled air and air of the oral cavity when breathing through the mouth or nose compared to the background content before taking carbamide. At the same time, for control group individuals who do not have HP invasion, only insignificant fluctuations in the weighted average content of ammonia and carbon dioxide in exhaled air (or air in the oral cavity when breathing through the mouth) or in the air of the oral cavity when breathing through the nose are observed compared to the background content before taking carbamide. Moreover, for patients infected with HP, the content of carbon dioxide and ammonia in the air of the oral cavity both during nasal breathing and when breathing through the mouth increases at different speeds, which indicates the difference in the processes of mass transfer and evacuation of these products of enzymatic hydrolysis of urea (see drawing ) When rinsing the oral cavity with a urea solution or introducing it into the oral cavity together with other substances, for example, Dirol® Carbamide + chewing gum, an increase in the content of hydrolysis products in the gaseous environment of the oral cavity is clearly manifested both when breathing through the nose and when breathing through the mouth. Moreover, the content of ammonia and carbon dioxide in patients infected with HP temporarily rises from the second minute and returns to background values in less time than in the case of oral ingestion, that is, ingestion, mainly, into the esophagus and further into the stomach. In this case, the background weighted average concentration of carbon dioxide and ammonia is much lower than the current maximum values caused by the mass transfer to the gaseous medium of products of enzymatic hydrolysis of urea introduced from the outside. In subjects without HP invasion, the content of ammonia and carbon dioxide remains virtually unchanged. A similar picture is observed in the case of other urease producers.

Нами показано, что анализ воздуха, отобранного из ротовой полости при дыхании носом, следующий за внесением в ротовую полость или пищевод карбамида, характеризует инвазию верхних отделов ЖКТ уреазопродуцентными микроорганизмами, например HP, так как гидролиз карбамида нормального изотопного состава под действием эндогенной уреазы воспроизводит процесс, аналогичный естественному процессу, протекающему в организме у пациентов, инфицированных уреазоактивной микрофлорой. Такая диагностическая методика не нуждается в использовании каких-либо изотопных маркеров. Изменение содержания углекислого газа и аммиака легко контролируется доступными средствами газового анализа, в том числе и индикаторными трубками серийного производства. Проведение аналитической процедуры по определению содержания углекислого газа и аммиака предложенным методом несколько сокращает время исследования и позволяет снизить количество отбираемой для анализа газовой пробы. We have shown that the analysis of air taken from the oral cavity when breathing through the nose, following the introduction of carbamide into the oral cavity or esophagus, characterizes the invasion of the upper gastrointestinal tract by urease-producing microorganisms, for example, HP, since urea hydrolysis of normal isotopic composition under the action of endogenous urease reproduces the process. similar to the natural process that occurs in the body in patients infected with urease-active microflora. Such a diagnostic technique does not need to use any isotopic markers. The change in the content of carbon dioxide and ammonia is easily controlled by available gas analysis tools, including indicator tubes of serial production. The analytical procedure for determining the content of carbon dioxide and ammonia by the proposed method slightly reduces the study time and allows you to reduce the amount of gas sample taken for analysis.

Как упомянуто выше, содержание углекислого газа в окружающем или выдыхаемом воздухе является авторегулятором частоты дыхания. Кроме того, показано [Демиденко Е.Г., Иванов А.В., Милейко В.Е. Сб. докладов и тезисов докладов Второй всеросийской научно-практической конференции с международным участием "Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности" 20-22 мая 1997 г. в СПб, под ред. Проф. Н.И. Иванова, 3 т., МЦЕНТ СПб, 1997, т. 3, с. 179], что у пациентов, инфицированных HP, выделение аммиака в выдыхаемый воздух за счет гидролиза карбамида по концентрации сравнимо с санитарными нормативами для воздуха рабочей зоны и, следовательно, достаточно для того, чтобы влиять на процесс дыхания. Нами установлено, что при нагрузочном тестировании пациентов, инфицированных уреазопродуцентной микрофлорой, содержание углекислого газа в их ротовой полости (в выдыхаемом воздухе) после приема карбамида в количестве от 0,1 г и выше временно увеличивается до величины, превышающей те минимальные значения, которые сказываются на характеристиках дыхания. На экспериментальном материале, обследуемом параллельно различными диагностическими методами, показано, что нагрузка карбамидом в количествах 0,1; 0,2; 0,5; 1,0; 2,0 г и более у пациентов, инфицированных HP, приводит к временному изменению состава воздуха в ротовой полости (выдыхаемого воздуха). Это в свою очередь приводит к увеличению частоты дыхания в 1,5-2,0 раза и увеличению минутного объема выдыхаемого воздуха (расхода воздуха). У пациентов, не инфицированных уреазопродуцентной микрофлорой, подобный отклик отсутствует. При этом общеизвестно, что главный вклад в процесс ферментативного гидролиза вносит HP, который продуцирует достаточно много высокоактивной уреазы. Следовательно, повышенная частота дыхания и увеличенный объемный расход выдыхаемого воздуха также служат диагностическими критериями для оценки степени инвазии HP. Причем измерения частоты дыхания и объемного расхода выдыхаемого воздуха после введения карбамида в организм извне (нагрузка карбамидом) может быть проведено, как с помощью стандартной приборной базы, так и простой счетной процедурой или вольюмометрическими измерениями с помощью газового колокола. As mentioned above, the content of carbon dioxide in the surrounding or exhaled air is an autoregulator of the respiration rate. In addition, it is shown [Demidenko E.G., Ivanov A.V., Mileyko V.E. Sat reports and abstracts of the Second All-Russian scientific-practical conference with international participation "New in the ecology and life safety" May 20-22, 1997 in St. Petersburg, under the editorship of Prof. N.I. Ivanova, 3 t., ICTS SPb, 1997, t. 3, p. 179], that in patients infected with HP, the release of ammonia into the exhaled air due to the concentration of urea by hydrolysis is comparable in concentration with the sanitary standards for workplace air and, therefore, is sufficient to influence the breathing process. We found that during stress testing of patients infected with urease-producing microflora, the carbon dioxide content in their oral cavity (in exhaled air) after taking urea in an amount of 0.1 g or higher temporarily increases to a value exceeding those minimum values that affect breath characteristics. On the experimental material, examined simultaneously by various diagnostic methods, it was shown that the load of urea in quantities of 0.1; 0.2; 0.5; 1.0; 2.0 g or more in patients infected with HP leads to a temporary change in the composition of the air in the oral cavity (exhaled air). This, in turn, leads to an increase in the respiratory rate by 1.5-2.0 times and an increase in the minute volume of exhaled air (air flow). In patients not infected with urease-producing microflora, such a response is absent. It is well known that the main contribution to the process of enzymatic hydrolysis is made by HP, which produces quite a lot of highly active urease. Consequently, an increased respiratory rate and an increased volume flow of exhaled air also serve as diagnostic criteria for assessing the extent of HP invasion. Moreover, the measurement of the respiratory rate and volumetric flow rate of exhaled air after the introduction of urea into the body from the outside (load with urea) can be carried out using either a standard instrument base or a simple counting procedure or volumetric measurements using a gas bell.

Для оценки скорости этого процесса мы изучили характер изменения концентрации аммиака и углекислого газа в воздухе ротовой полости после приема мочевины (карбамида) у здоровых обследуемых и лиц страдающих гастродуоденальными заболеваниями. Пациенты обследовались несколькими диагностическими методиками одновременно. To assess the speed of this process, we studied the nature of changes in the concentration of ammonia and carbon dioxide in the air of the oral cavity after taking urea (urea) in healthy subjects and people suffering from gastroduodenal diseases. Patients were examined by several diagnostic methods simultaneously.

Пример 1. У пациента, страдающего ассоциированной с Helicobacter pylori гастродуоденальной патологией (антральный гастрит и язва двенадцатиперстной кишки), установленной ранее в стационаре в ходе эндоскопического обследования с проведением биопсии (биоптат слизистой оболочки антрального отдела желудка) и биохимического уреазного теста, в состоянии покоя в течение одной минуты отбираются пробы воздуха. Пробы воздуха отбираются из ротовой полости двухканальным аспиратором через индикаторные трубки для определения аммиака и углекислого газа. При этом пациент дышит носом. Одновременно измеряется частота дыхания, объем выдоха, минутный объем дыхания (C_NH3 = 0,2 мг/м³, C_CO2 = 0,04 об.%, n = 16 вдохов в минуту, объем одного выдоха 230 см³, обьем минутного выдоха 3680 см³). После чего обследуемый пациент жует жевательную резинку Dirol® Carbamide+ в течение 2 мин. Затем у обследуемого, когда он дышит через нос, вновь измеряют содержание аммиака и углекислого газа в воздухе ротовой полости, частоту дыхания и объем выдоха поминутно. Содержание аммиака в воздухе ротовой полости обследуемого пациента существенно возрастает уже через 2-3 мин (C_NH3 = 1,8 ± 0,4 мг/м³) после внесения карбамида извне и возвращается к прежним показателям через 12-20 мин (C_NH3 = 0,2 ± 0,1 мг/м³). Содержание углекислого газа возрастает через 5-7 мин (C_CO2 = 1,6 ± 0,2 об.%), через 15-25 мин стабилизируется на уровне C_CO2 = 1,0 ± 0,3 об.% и возвращается к прежним показателям (C_CO2 = 0,1 ± 0,03 об.%) через 45-70 мин. При этом частота дыхания возрастает до 25-28 вдохов в минуту уже к 5-6-й минуте и плавно убывает, возвращаясь к прежним показателям через 25-30 мин. Объем одного выдоха постепенно увеличивается с 5-10-й минуты, достигая на 20-25-й минуте величины 300-320 см³, и колебалась в этих пределах в течение 10-15 мин, после чего плавно снижалась до исходного значения в течение 15 мин. Объем минутного выдоха возрастал с 5-6-й минуты, достиг максимальных значений на 15-20-й мин (5700-5800 см³), колебался в указанных пределах в течение 18-23 мин, после чего постепенно за 15-18 мин вернулся к исходным показателям. Параллельно наличие инвазии HP было подтверждено серологическими тестами по методу ELISE (тесты производства Bio-Rad) тестом с нагрузкой карбамидом нормального изотопного состава [патент РФ N 2100010, A 61 B 10/00, C 12 Q 1/58, "Способ неинвазивной хеликобактериозадиагностики ин виво", Корниенко Е. А. , Милейко В.Е. опубл. 27.12.97, Бюл. N 36] и тестом (PY-test производства Tri-med Specialties Co. USA) с радиоизотопным маркером [Peura D. A. , Pambianko D.J. Dye K.R., et al. Microdose urea breath test offersdiagnosis of Helicobacter pylori in 10 minutes. Am. J. Gastro. 1996, v. 91, N 2, p. 233-238].Example 1. In a patient suffering from gastroduodenal pathology associated with Helicobacter pylori (antral gastritis and duodenal ulcer), previously established in the hospital during an endoscopic examination with a biopsy (biopsy of the antrum mucosa) and resting biochemical urease test within one minute, air samples are taken. Air samples are taken from the oral cavity with a two-channel aspirator through indicator tubes to determine ammonia and carbon dioxide. In this case, the patient breathes through his nose. At the same time, the respiration rate, expiratory volume, minute respiratory volume (C _NH3 = 0.2 mg / m ³ , C _CO2 = 0.04 vol.%, N = 16 breaths per minute, one expiratory volume 230 cm ³ , minute expiratory volume are measured 3680 cm ³ ). After that, the examined patient chews Dirol® Carbamide + chewing gum for 2 minutes. Then, the subject, when he breathes through the nose, again measures the content of ammonia and carbon dioxide in the air of the oral cavity, the respiratory rate and expiratory volume per minute. The ammonia content in the air of the oral cavity of the examined patient increases significantly already after 2-3 minutes (C _NH3 = 1.8 ± 0.4 mg / m ³ ) after the carbamide is introduced from the outside and returns to its previous values after 12-20 minutes (C _NH3 = 0.2 ± 0.1 mg / m ³ ). The carbon dioxide content increases after 5-7 minutes (C _CO2 = 1.6 ± 0.2 vol.%), After 15-25 minutes it stabilizes at the level of C _CO2 = 1.0 ± 0.3 vol.% And returns to the previous indicators (C _CO2 = 0.1 ± 0.03 vol.%) after 45-70 min. At the same time, the respiratory rate increases to 25-28 breaths per minute already by the 5-6th minute and gradually decreases, returning to the previous indicators in 25-30 minutes. The volume of one exhalation gradually increases from the 5-10th minute, reaching 300-320 cm ³ at the 20-25th minute, and fluctuated within these limits for 10-15 minutes, after which it gradually decreased to the initial value over 15 min The volume of minute exhalation increased from the 5-6th minute, reached maximum values for the 15-20th minute (5700-5800 cm ³ ), fluctuated within the indicated limits for 18-23 minutes, after which it gradually returned over 15-18 minutes to baseline. In parallel, the presence of HP invasion was confirmed by serological tests according to the ELISE method (tests produced by Bio-Rad) with a test with a load of normal isotopic composition urea [RF patent N 2100010, A 61 B 10/00, C 12 Q 1/58, "Method for non-invasive Helicobacter pylori diagnostics in vivo ", Kornienko E.A., Mileyko V.E. publ. 12/27/97, Bull. N 36] and a test (PY-test manufactured by Tri-med Specialties Co. USA) with a radioisotope marker [Peura DA, Pambianko DJ Dye KR, et al. Microdose urea breath test offersdiagnosis of Helicobacter pylori in 10 minutes. Am. J. Gastro. 1996, v. 91, N 2, p. 233-238].

Пример 2. Обследование проводили аналогично тому, как это описано в примере 1, с той лишь разницей, что обследуемым был доброволец, не имеющий гастродуоденальной патологии. Все показатели (концентрации углекислого газа и аммиака, частота дыхания, объем одиночного и объем минутного выдоха) в ходе обследования не имели существенных изменений (значимых отличий) на протяжении 40 мин, то есть до окончания обследования. Example 2. The examination was carried out in the same way as described in example 1, with the only difference being that the subject was a volunteer who did not have gastroduodenal pathology. All indicators (concentrations of carbon dioxide and ammonia, respiratory rate, volume of a single and volume of a minute exhalation) during the examination did not have significant changes (significant differences) for 40 minutes, that is, until the end of the examination.

Отсутствие HP инвазии у пациента подтверждается серологическими тестами по методу ELISE (тесты производства Bio-Rad) и дыхательными тестами, упомянутыми в примере 1. The absence of HP invasion in the patient is confirmed by serological tests according to the ELISE method (tests produced by Bio-Rad) and the breathing tests mentioned in example 1.

Пример 3. Обследование проводили аналогично тому, как это описано в примере 1, с той лишь разницей, что обследовался тот же самый пациент после курса антихеликобактерной терапии. После того как обследуемый в течение 2 мин жует жевательную резинку Dirol® Carbamide+, содержание аммиака в воздухе ротовой полости существенно возрастает уже через 2-3 мин (C_NH3 = 0,8 ± 0,2 мг/м³) и возвращается к прежним показателям через 8-12 мин (C_NH3 = 0,2 ± 0,1 мг/м³). Содержание углекислого газа поднимается через 5-7 мин (C_CO2 = 1,4 ± 0,2 об. %) и возвращается к прежним показателям через 15-25 минут (C_CO2 = 0,03 ± 0,01 об. %). При этом частота дыхания возрастает до 25-28 вдохов в минуту уже к 5-6-й минуте и плавно убывает, возвращаясь к прежним показателям через 25-30 мин.Example 3. The examination was carried out in the same way as described in example 1, with the only difference being that the same patient was examined after a course of anti-Helicobacter therapy. After the patient has chewed Dirol® Carbamide + chewing gum for 2 minutes, the ammonia content in the air of the oral cavity increases significantly after 2-3 minutes (C _NH3 = 0.8 ± 0.2 mg / m ³ ) and returns to its previous values after 8-12 minutes (C _NH3 = 0.2 ± 0.1 mg / m ³ ). The carbon dioxide content rises after 5-7 minutes (C _CO2 = 1.4 ± 0.2 vol.%) And returns to the previous level after 15-25 minutes (C _CO2 = 0.03 ± 0.01 vol.%). At the same time, the respiratory rate increases to 25-28 breaths per minute already by the 5-6th minute and gradually decreases, returning to the previous indicators in 25-30 minutes.

Пример 4. Обследование проводили аналогично тому, как это описано в примере 3, с той лишь разницей, что обследовался тот же пациент, но после повторного курса антихеликобактерной терапии. Обследуемый пациент жевал резинку Dirol® Carbamide+ в течение 2 мин. После чего содержание аммиака в воздухе ротовой полости практически не возросло (через 2-3 мин C_NH3 = 0,3 ± 0,1 мг/м³, через 5-8 мин C_NH3 = 0,4 ± 0,2 мг/м³) и возвратилось к прежним показателям через 8-12 мин (C_NH3 = 0,2 ± 0,1 мг/м³). Содержание углекислого газа в воздухе ротовой полости до внесения карбамида извне составляло (C_CO2 = 0,04 ± 0,01 об.%), через 5-7 мин оно практически не увеличилось (C_CO2 = 0,05 об.%). Не увеличилось оно и в последующие 35-40 мин (C_CO2 = 0,04 ± 0,01 об. %). При этом частота дыхания во время всего обследования практически не менялась.Example 4. The examination was carried out in the same way as described in example 3, with the only difference being that the same patient was examined, but after a second course of anti-Helicobacter therapy. Examined patient chewed Dirol® Carbamide + gum for 2 minutes. After that, the ammonia content in the air of the oral cavity practically did not increase (after 2-3 minutes C _NH3 = 0.3 ± 0.1 mg / m ³ , after 5-8 minutes C _NH3 = 0.4 ± 0.2 mg / m ³ ) and returned to its previous performance after 8-12 minutes (C _NH3 = 0.2 ± 0.1 mg / m ³ ). The carbon dioxide content in the air of the oral cavity before the introduction of urea from the outside was (C _CO2 = 0.04 ± 0.01 vol.%), After 5-7 minutes it practically did not increase (C _CO2 = 0.05 vol.%). It did not increase in the next 35-40 minutes (C _CO2 = 0.04 ± 0.01 vol.%). At the same time, the respiratory rate practically did not change during the entire examination.

Пример 5. У того же обследуемого пациента, обследовавшегося ранее (пример 1) и страдающего гастродуоденальной патологией (антральный гастрит и язва двенадцатиперстной кишки), ассоциированной с Helicobacter pylori, до курса антихеликобактерной терапии из ротовой полости отбираются пробы воздуха. Пробы отбираются в состоянии покоя, когда он дышит ртом, в течение одной минуты аспиратором через индикаторную трубку для определения аммиака и через индикаторную трубку для определения углекислого газа. Одновременно измеряется частота дыхания (C_NH3 = 0,2 ± 0,1 мг/м³, C_CO2 = 0,7 ± 0,2 об.%, n = 18 вдохов в минуту). Затем обследуемый жует жевательную резинку Dirol® Carbamide+ в течение 2 мин. После чего у обследуемого при дыхании через рот вновь измеряют содержание аммиака и углекислого газа в воздухе ротовой полости и частоту дыхания поминутно. Содержание аммиака в воздухе ротовой полости существенно возрастает уже через 2-3 мин до C_NH3 = 1,5 ± 0,3 мг/м³ и возвращается к прежним показателям через 8-12 мин (C_NH3 = 0,5 ± 0,2 мг/м³). Содержание углекислого газа через 5-7 мин возрастает до C_CO2 = 1,6 ± 0,2 об.% и возвращается к прежним показателям через 15-25 мин (C_CO2 = 0,7 ± 0,1 об.%). При этом частота дыхания возрастает до 28-30 вдохов в минуту уже к 5-6-й минуте и плавно убывает, возвращаясь к прежним показателям через 25-30 мин.Example 5. In the same patient examined earlier (Example 1) and suffering from gastroduodenal pathology (antral gastritis and duodenal ulcer) associated with Helicobacter pylori, air samples are taken from the oral cavity before a course of anti-Helicobacter therapy. Samples are taken at rest, when he breathes through his mouth, for one minute with an aspirator through an indicator tube for determining ammonia and through an indicator tube for determining carbon dioxide. At the same time, the respiratory rate is measured (C _NH3 = 0.2 ± 0.1 mg / m ³ , C _CO2 = 0.7 ± 0.2 vol.%, N = 18 breaths per minute). The subject then chews Dirol® Carbamide + chewing gum for 2 minutes. After that, the content of ammonia and carbon dioxide in the air of the oral cavity and the breathing rate per minute are again measured in the subject while breathing through the mouth. The ammonia content in the air of the oral cavity increases significantly after 2-3 minutes to C _NH3 = 1.5 ± 0.3 mg / m ³ and returns to its previous values after 8-12 minutes (C _NH3 = 0.5 ± 0.2 mg / m ³ ). After 5-7 minutes, the carbon dioxide content increases to C _CO2 = 1.6 ± 0.2 vol.% And returns to the previous values after 15-25 minutes (C _CO2 = 0.7 ± 0.1 vol.%). In this case, the respiratory rate increases to 28-30 breaths per minute by the 5-6th minute and gradually decreases, returning to the previous indicators in 25-30 minutes.

Наличие HP инвазии у пациента подтверждается серологическими и дыхательными тестами, как и в примере 1. The presence of HP invasion in the patient is confirmed by serological and respiratory tests, as in example 1.

Пример 6. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 5 с той лишь разницей, что обследуемым был доброволец, который не имел гастродуоденальной патологии и инфицирования Helicobacter pylori, что ранее подтверждено в условиях стационара диагностическими методами, аналогичными описанным в примере 1. Все показатели (концентрации углекислого газа и аммиака, частота и объем дыхания) в ходе обследования не имели существенных изменений (значимых отличий) на протяжении 40 мин, то есть до окончания обследования. Example 6. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 5 with the only difference being that the subject was a volunteer who did not have gastroduodenal pathology and Helicobacter pylori infection, which was previously confirmed in a hospital with diagnostic methods similar to those described in example 1. All indicators (concentrations carbon dioxide and ammonia, respiratory rate and volume) during the examination did not have significant changes (significant differences) for 40 minutes, that is, until the end of the examination.

Отсутствие HP инвазии у пациента подтверждается параллельными исследованиями. The absence of HP invasion in the patient is confirmed by parallel studies.

Пример 7. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 1 с той лишь разницей, что обследовался другой HP инфицированный пациент, частота дыхания которого после нагрузки карбамидом существенно не изменялась. Другие базовые и нагрузочные показатели отличались между собой существенно, как и в примере 1. До приема карбамида содержание аммиака 0,6 ± 0,2 мг/м³, углекислого газа 0,05 ± 0,01 об.%, частота дыхания 17 вдохов в минуту, объем одиночного выдоха 220 см³, объем минутного выдоха 3740 см³. После приема карбамида в качестве нагрузки: 1,2 ± 0,4 мг/м³ (с 5-й по 15-ю минуту), 1,3 ± 0,2 об.% (с 25-й по 35-ю минуту), 410-460 см³, 7400-7800 см³ (с 25-й по 40-ю минуту) соответственно.Example 7. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 1 with the only difference being that another HP infected patient was examined whose respiratory rate did not change significantly after loading with urea. Other basic and load indicators differed significantly among themselves, as in example 1. Before taking urea, the content of ammonia was 0.6 ± 0.2 mg / m ³ , carbon dioxide was 0.05 ± 0.01 vol.%, Respiratory rate was 17 breaths per minute, the volume of a single exhalation is 220 cm ³ , the volume of a minute exhalation is 3740 cm ³ . After taking urea as a load: 1.2 ± 0.4 mg / m ³ (from the 5th to the 15th minute), 1.3 ± 0.2 vol.% (From the 25th to the 35th minute ), 410-460 cm ³ , 7400-7800 cm ³ (from the 25th to the 40th minute), respectively.

Пример 8. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 5, но с другим пациентом, у которого частота в силу его физиологических особенностей дыхания после нагрузки карбамидом уменьшалась с 20 до 16 выдохов в минуту, в то время как объем одиночного выдоха и минутный объем выдоха увеличивались, как и другие контролируемые показатели, в 1,5-1,7 раз. Example 8. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 5, but with another patient, whose frequency, due to its physiological characteristics of breathing after loading with urea, decreased from 20 to 16 exhalations per minute, while the volume of a single exhalation and the minute exhalation volume increased , like other controlled indicators, 1.5-1.7 times.

Пример 9. Обследование проводили аналогично примеру 5 с той лишь разницей, что у обследуемого в силу его физиологических особенностей после нагрузки объем одиночного выдоха уменьшился, а остальные контролируемые показатели возросли в 1,5-2 раза. Example 9. The examination was carried out analogously to example 5 with the only difference being that, due to his physiological characteristics, the volume of a single exhalation after the load decreased, and the rest of the controlled parameters increased 1.5-2 times.

Пример 10. Обследование проводили аналогично примеру 5. У обследуемого в силу физиологических особенностей объем одиночного выдоха остался неизменным, а остальные контролируемые показатели возросли в 1,5-2 раза. Example 10. The examination was carried out analogously to example 5. The subject, due to physiological characteristics, the volume of a single exhalation remained unchanged, and the rest of the controlled indicators increased by 1.5-2 times.

Пример 11. Обследование проводили аналогично примеру 1 с той разницей, что вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ходе обследования для внесения карбамида в ротовую полость обследуемый ополаскивал рот 20%-ным раствором мочевины в воде и выплевывал раствор. При этом нагрузочные показатели концентраций увеличились по сравнению с аналогичными показателями по примеру 1 в 2-3 раза. Example 11. The examination was carried out analogously to example 1 with the difference that instead of chewing gum Dirol® Carbamide + during the examination to introduce carbamide into the oral cavity, the subject rinsed his mouth with 20% urea in water and spat out the solution. At the same time, load indicators of concentrations increased in comparison with similar indicators in example 1 by 2-3 times.

Пример 12. Обследование проводили аналогично примеру 2 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). Результаты по настоящему примеру не отличались от примера 2. Example 12. The examination was carried out analogously to example 2 with the difference that during the examination, instead of chewing gum Dirol® Carbamide +, carbamide was introduced into the oral cavity in the form of a 20% solution in water (mouth was rinsed and the solution was spit out). The results of the present example did not differ from example 2.

Пример 13. Обследование проводили аналогично примеру 3 и у того же пациента с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). При этом нагрузочные концентрации увеличились по сравнению с аналогичными показателями по примеру 1 в 2-3 раза. Example 13. The examination was carried out analogously to example 3 and in the same patient with the difference that during the examination, instead of Dirol® Carbamide + chewing gum, urea was introduced into the oral cavity in the form of a 20% solution in water (the mouth was rinsed and the solution was spit out). In this case, the load concentration increased in comparison with the same parameters as in example 1 by 2-3 times.

Пример 14. Обследование проводили аналогично примеру 4 и у того же пациента с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). При этом нагрузочные концентрации увеличились по сравнению с аналогичными показателями по примеру 1 в 2-3 раза. Example 14. The examination was carried out analogously to example 4 and in the same patient with the difference that during the examination, instead of chewing gum Dirol® Carbamide +, urea was introduced into the oral cavity in the form of a 20% solution in water (mouth was rinsed and the solution was spit out). In this case, the load concentration increased in comparison with the same parameters as in example 1 by 2-3 times.

Пример 15. Обследование проводили аналогично примеру 5 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). При этом нагрузочные концентрации увеличились по сравнению с аналогичными показателями по примеру 5 в 2-3 раза. Example 15. The examination was carried out analogously to example 5 with the difference that during the examination, instead of chewing gum Dirol® Carbamide +, carbamide was introduced into the oral cavity in the form of a 20% solution in water (mouth was rinsed and the solution was spit out). In this case, the load concentration increased in comparison with the same parameters as in example 5 by 2-3 times.

Пример 16. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 6 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). Результаты по настоящему примеру не отличались от примера 6. Example 16. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 6 with the difference that during the examination, instead of chewing gum Dirol® Carbamide +, urea was introduced into the oral cavity in the form of a 20% solution in water (mouth was rinsed and the solution was spit out). The results of the present example did not differ from example 6.

Пример 17. Обследование проводили аналогично примеру 7 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). При этом нагрузочные концентрации увеличились по сравнению с аналогичными показателями по примеру 7 в 2-3 раза, а характеристики дыхания соответствовали таковым по примеру 7. Example 17. The examination was carried out analogously to example 7 with the difference that during the examination, instead of chewing gum Dirol® Carbamide +, carbamide was introduced into the oral cavity in the form of a 20% solution in water (mouth was rinsed and the solution was spit out). In this case, the stress concentration increased in comparison with the same parameters in example 7 by 2-3 times, and the respiration characteristics corresponded to those in example 7.

Пример 18. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 8 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20% раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). При этом нагрузочные концентрации увеличились по сравнению с аналогичными показателями по примеру 7 в 2-3 раза, а характеристики дыхания соответствовали таковым по примеру 8. Example 18. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 8 with the difference that during the examination, instead of Dirol® Carbamide + chewing gum, urea was introduced into the oral cavity as a 20% solution in water (rinsed mouth and the solution was spit out). In this case, the stress concentration increased in comparison with the same parameters in example 7 by 2-3 times, and the respiration characteristics corresponded to those in example 8.

Пример 19. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 9 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). При этом нагрузочные концентрации увеличились по сравнению с аналогичными показателями по примеру 7 в 2-3 раза, а характеристики дыхания соответствовали таковым по примеру 9. Example 19. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 9 with the difference that during the examination, instead of chewing gum Dirol® Carbamide +, carbamide was introduced into the oral cavity in the form of a 20% solution in water (mouth rinsed and the solution was spit out). In this case, the stress concentration increased in comparison with the same parameters in example 7 by 2-3 times, and the respiration characteristics corresponded to those in example 9.

Пример 20. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 10 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 20%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). При этом нагрузочные концентрации увеличились по сравнению с аналогичными показателями по примеру 7 в 2-3 раза, а характеристики дыхания соответствовали таковым по примеру 10. Example 20. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 10 with the difference that during the examination, instead of chewing gum Dirol® Carbamide +, carbamide was introduced into the oral cavity in the form of a 20% solution in water (mouth was rinsed and the solution was spit out). In this case, the stress concentration increased in comparison with the same parameters in example 7 by 2-3 times, and the respiration characteristics corresponded to those in example 10.

Пример 21. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 1 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде 5%-ного раствора в воде (ополаскивали рот и выплевывали раствор). При этом анализируемые показатели не отличались от показателей по примеру 1. Example 21. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 1 with the difference that during the examination, instead of Dirol® Carbamide + chewing gum, urea was introduced into the oral cavity in the form of a 5% solution in water (the mouth was rinsed and the solution was spit out). In this case, the analyzed indicators did not differ from the indicators in example 1.

Пример 22. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 1 с той лишь разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ карбамид вносили в ротовую полость в виде гранул в количестве 0,1 г. Показатели аналогичны таковым по примеру 1. Example 22. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 1 with the only difference being that instead of chewing gum Dirol® Carbamide + carbamide was introduced into the oral cavity in the form of granules in the amount of 0.1 g during the examination. The indicators are similar to those in example 1.

Пример 23. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 1 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде гранулированного кристаллического карбамида в количестве 1 г. Все анализируемые показатели превышают аналогичные показатели по примеру 1. После приема карбамида в качестве нагрузки: 2,0 ± 0,4 мг/м³ (с 5-й по 15-ю минуту), 1,9 ± 0,3 об.% (с 25-й по 35-ю минуту), частота достигает максимального значения к 15-й минуте (n = 25); объем одиночного выдоха - 500-530 см³, объемный расход (объем минутного выдоха) - 8400-8600 см³ (с 25-й по 40-ю минуту) соответственно.Example 23. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 1 with the difference that during the examination, instead of Dirol® Carbamide + chewing gum, urea was introduced into the oral cavity in the form of granular crystalline urea in an amount of 1 g. All analyzed parameters exceeded the same parameters as in example 1. After taking urea as a load: 2.0 ± 0.4 mg / m ³ (from the 5th to the 15th minute), 1.9 ± 0.3 vol.% (From the 25th to the 35th minute ), the frequency reaches its maximum value by the 15th minute (n = 25); the volume of a single exhalation is 500-530 cm ³ , the volumetric flow rate (volume of a minute exhalation) is 8400-8600 cm ³ (from the 25th to the 40th minute), respectively.

Пример 24. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 1 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевания резинки Dirol® Carbamide+ ополаскивали рот раствором карбамида (0,5 г в 10 мл воды) и проглатывали его. Полученные результаты были аналогичны результатам по примеру 1. Example 24. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 1 with the difference that during the examination, instead of chewing Dirol® Carbamide + gum, they rinsed the mouth with a urea solution (0.5 g in 10 ml of water) and swallowed it. The results were similar to those of example 1.

Пример 25. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 2 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевания резинки Dirol® Carbamide+ ополаскивали рот раствором карбамида (0,5 г в 10 мл воды) и проглатывали его. Полученные результаты были аналогичны результатам по примеру 2. Example 25. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 2 with the difference that during the examination, instead of chewing gum, Dirol® Carbamide + was rinsed with a carbamide solution (0.5 g in 10 ml of water) and swallowed. The results obtained were similar to the results of example 2.

Пример 26. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 11 с той разницей, что в ходе обследования вместо жевания резинки Dirol® Carbamide+ ополаскивали рот раствором карбамида (0,5 г в 5 мл воды) и проглатывали его. Полученные результаты были аналогичны результатам по примеру 11. Example 26. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 11 with the difference that during the examination, instead of chewing gum, Dirol® Carbamide + was rinsed with a urea solution (0.5 g in 5 ml of water) and swallowed. The results obtained were similar to the results of example 11.

Пример 27. У пациента с Helicobacter pylori ассоциированной гастродуоденальной патологией (антральный гастрит и язва двенадцатиперстной кишки), которая была установлена ранее в ходе эндоскопического обследования в стационаре с проведением биопсии и биохимического уреазного теста с биоптатом слизистой оболочки антрального отдела желудка, отбирается проба воздуха. Проба отбирается в состоянии покоя, из ротовой полости в течение одной минуты через индикаторную трубку для определения аммиака и через индикаторную трубку для определения углекислого газа (C_NH3 = 0,2 ± 0,1 мг/м³, C_CO2 = 0,04 ± 0,01 об.%). Пациент при этом дышит носом. После чего он жует жевательную резинку Dirol® Carbamide Effect в течение 2 мин. Затем у обследуемого (дыхание через нос) вновь измеряют содержание аммиака и углекислого газа в воздухе ротовой полости. Содержание аммиака существенно повышается уже через 2-3 мин после нагрузки карбамидом (C_NH3 = 1,6 ± 0,3 мг/м³) и возвращается к прежним показателям через 8-12 мин (C_NH3 = 0,2 ± 0,1 мг/м³). Содержание углекислого газа возрастает через 5-7 мин (C_CO2 = 1,8 ± 0,2 об.%) и возвращается к исходным показателям через 15-25 мин (C_CO2 = (0,03±0,01)% об.). Параллельно наличие инвазии HP было подтверждено серологическими и дыхательными тестами по примеру. Через 4 недели после проведенной антихеликобактерной терапии у этого же пациента было проведено повторное исследование концентраций аммиака и углекислого газа до и после жевания Dirol® Carbamide Effect. Концентрация аммиака до и после нагрузки (через 5-10 мин) составила соответственно 0,2 ± 0,1 мг/м³ и 1,8 ± 0,3 мг/м³, в то время как концентрация углекислого газа существенно не изменялась, составляя 0,2-0,4 об.% в течение последующих 20 мин. Результаты газоаналитических измерений свидетельствовали о недостаточной эффективности терапии. При этом результат уреазного теста с биоптатом слизистой оболочки антрального отдела желудка был отрицательным. В предпринятом через 6 месяцев после терапии третьем исследовании концентраций газов после жевания Dirol® Carbamide Effect соответствовала 2,0 ± 0,4 мг/м³ для аммиака и 1,8 ± 0,2 об.% для углекислого газа, что свидетельствовует о наличии ивазии HP. Инвазия HP параллельно подтвердилась другими методами, включая биохимический уреазный тест с биоптатом из антрального отдела желудка, который ранее был отрицательным. Повторная антихеликобактерная терапия, проведенная согласно рекомендациям "Стандарты (протоколы) диагностики и лечения болезней органов пищеварения", утвержденных приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации N 125 от 17.04.98, привела к нормализации показателей. Повышение содержания аммиака и углекислого газа в выдыхаемом воздухе, а также увеличение частоты дыхания или объемного расхода выдыхаемого воздуха после приема карбамида по результатам вышеописанных дыхательных тестов отсутствовало. Параллельно выполняемые тесты по оценке уреазной активности биоптата также свидетельствовали об эффективности выбранной схемы терапии. Однако серологический тест оставался положительным. Диагностические исследования еще через 4 месяца после повторной терапии не выявили инвазии HP. Причем серологический тест был, как и другие тесты, отрицательным.Example 27. In a patient with Helicobacter pylori associated gastroduodenal pathology (antrum gastritis and duodenal ulcer), which was established earlier during an endoscopic examination in a hospital with a biopsy and biochemical urease test with a biopsy of the antrum mucosa, an air sample is taken. The sample is taken at rest, from the oral cavity for one minute through an indicator tube for determining ammonia and through an indicator tube for determining carbon dioxide (C _NH3 = 0.2 ± 0.1 mg / m ³ , C _CO2 = 0.04 ± 0.01 vol.%). The patient breathes with his nose. After which he chews Dirol® Carbamide Effect chewing gum for 2 minutes. Then, the test subject (breathing through the nose) again measures the content of ammonia and carbon dioxide in the air of the oral cavity. The ammonia content increases significantly already after 2-3 minutes after loading with urea (C _NH3 = 1.6 ± 0.3 mg / m ³ ) and returns to its previous values after 8-12 minutes (C _NH3 = 0.2 ± 0.1 mg / m ³ ). The carbon dioxide content increases after 5-7 minutes (C _CO2 = 1.8 ± 0.2 vol.%) And returns to the initial values after 15-25 minutes (C _CO2 = (0.03 ± 0.01)% vol. ) In parallel, the presence of HP invasion was confirmed by serological and respiratory tests according to the example. 4 weeks after anti-Helicobacter therapy, the same patient was re-examined for ammonia and carbon dioxide concentrations before and after chewing with Dirol® Carbamide Effect. The ammonia concentration before and after the load (after 5-10 min) was 0.2 ± 0.1 mg / m ³ and 1.8 ± 0.3 mg / m ³ , respectively, while the carbon dioxide concentration did not change significantly, amounting to 0.2-0.4 vol.% over the next 20 minutes The results of gas analytical measurements indicated the lack of effectiveness of therapy. At the same time, the result of the urease test with a biopsy of the mucous membrane of the antrum was negative. In the third study of gas concentrations after chewing 6 months after therapy, Dirol® Carbamide Effect corresponded to 2.0 ± 0.4 mg / m ³ for ammonia and 1.8 ± 0.2 vol.% For carbon dioxide, which indicates the presence of Ivasia HP. HP invasion was simultaneously confirmed by other methods, including a biochemical urease test with a biopsy from the antrum, which was previously negative. Repeated anti-Helicobacter therapy, carried out according to the recommendations "Standards (protocols) for the diagnosis and treatment of digestive diseases", approved by order of the Ministry of Health of the Russian Federation N 125 dated 04/17/98, led to the normalization of indicators. There was no increase in the content of ammonia and carbon dioxide in the exhaled air, as well as an increase in the respiration rate or volume flow rate of the exhaled air after taking urea according to the results of the above-described breathing tests. Parallel tests to evaluate the urease activity of the biopsy specimen also testified to the effectiveness of the chosen treatment regimen. However, the serological test remained positive. Diagnostic studies 4 months after repeated therapy did not reveal HP invasion. Moreover, the serological test was, like other tests, negative.

Пример 28. Процедуру обследования проводили аналогично описанной в примере 1 с той лишь разницей, что в ходе обследования вместо жевательной резинки Dirol® Carbamide+ в ротовую полость карбамид вносили в виде гранулированного кристаллического карбамида в количестве 0,1 г. Результат теста был отрицательным. Затем у того же пациента провели аналитическую процедуру аналогично тому, как это описано в примере 1. Показатели аналогичны таковым по примеру 1, то есть указывали на наличие инвазии ПР. Через час аналитическую процедуру повторили аналогично тому, как это делалось в примере 1, но перед проведением процедуры ротовую полость тщательно прополоскали 1%-ным раствором перикиси водорода. Результат теста был отрицательным. Параллельно проведенные в стационаре дыхательные тесты и уреазный тест с биоптатом, как и гистологические исследования, не указывали на наличие инвазии HP. Серололгический тест указывал на наличие инвазии HP. Пациенту не проводили антихеликобактерной терапии. Через 6 месяцев повторное обследование всеми вышеописанными диагностическими методиками подтвердило наличие инвазии HP. Example 28. The examination procedure was carried out similarly to that described in example 1 with the only difference that during the examination, instead of Dirol® Carbamide + chewing gum, urea was introduced into the oral cavity in the form of granular crystalline urea in an amount of 0.1 g. The test result was negative. Then, the same patient underwent an analytical procedure in the same way as described in example 1. The indicators are similar to those in example 1, that is, they indicated the presence of invasion of PR. An hour later, the analytical procedure was repeated in the same way as in Example 1, but before the procedure, the oral cavity was thoroughly rinsed with a 1% hydrogen peroxide solution. The test result was negative. In parallel, in-patient breath tests and a urease test with a biopsy, as well as histological studies, did not indicate the presence of HP invasion. A serologic test indicated HP invasion. The patient was not given anti-helicobacter therapy. After 6 months, a re-examination with all the above diagnostic methods confirmed the presence of HP invasion.

Пациенту был назначен стандартный курс антихеликобактерной терапии. Исследования, проведенные через 6 недель после окончания терапевтического курса, подтвердили эффективность терапии, как и в примере 27. The patient was prescribed a standard course of anti-Helicobacter therapy. Studies conducted 6 weeks after the end of the therapeutic course confirmed the effectiveness of therapy, as in example 27.

Пример 29. Проводили аналогично тому, как это описано в примере 28, у другого добровольца с той лишь разницей, что вместо санирования ротовой полости раствором перикиси водорода для того, чтобы исключить влияние уреазопродуцентов персистирующих в ротовой полости, кристаллический карбамид пациенту давали принять в легкорастворимой капсуле. Результаты аналогичны результатам по примеру 28. Example 29. Carried out in the same way as described in example 28, with another volunteer, with the only difference being that instead of sanitizing the oral cavity with a solution of hydrogen peroxide in order to exclude the influence of urease producers that persist in the oral cavity, crystalline urea was given to the patient in an easily soluble capsule . The results are similar to the results of example 28.

Из вышеизложенного следует, что изменения показателей дыхания (увеличение частоты дыхания, объема одиночного выдоха, расхода воздуха - минутного объема выдоха), и особенно увеличение объемного расхода, связанные с внесением в организм карбамида извне, однозначно характеризует уреазную активность микрофлоры верхних отделов ЖКТ, в частности уреазную активность, обусловленную инвазией HP. Повышение содержания аммиака и углекислого газа в воздухе полости рта, связанное с внесением в организм карбамида, также характеризует уреазную активность in vivo. Предлагаемые диагностические подходы пригодны для контроля терапии, причем последний из них позволяет способствовать раннему выявлению случаев реинфекции, связанных с персистированием HP в полости рта. It follows from the foregoing that changes in respiration indicators (increase in respiration rate, single expiration volume, air flow rate - minute expiration volume), and especially an increase in volume flow rate associated with the introduction of urea from the outside, uniquely characterizes the urease activity of the microflora of the upper gastrointestinal tract, in particular urease activity due to HP invasion. An increase in the content of ammonia and carbon dioxide in the air of the oral cavity associated with the introduction of urea into the body also characterizes urease activity in vivo. The proposed diagnostic approaches are suitable for monitoring therapy, the latter of which allows the early detection of cases of reinfection associated with persistent HP in the oral cavity.

С использованием вышеописанной методики было обследовано 32 человека. Из них 5 пациентов составили контрольную группу не страдающих гастродуоденальной патологией, 12 пациентов по данным других анализов не инфицированы Helicobacter pylori, 15 пациентов были инфицированы Helicobacter pylori. Селективность метода составила 96%, чувствительность 95%. Это соответствует другим аналитическим уреазным методикам с применением аналогичных тестов. Using the above methodology, 32 people were examined. Of these, 5 patients constituted a control group not suffering from gastroduodenal pathology, 12 patients according to other tests were not infected with Helicobacter pylori, 15 patients were infected with Helicobacter pylori. The selectivity of the method was 96%, sensitivity 95%. This is consistent with other analytical urease techniques using similar tests.

Claims

1. A method for determining the urease activity of Helicobacter pylori (HP) in vivo, comprising introducing urea into the body, characterized in that the respiratory rate is measured before urea is introduced into the body, and the presence of urease activity is determined by the introduction of urea and after increasing the respiratory rate.

2. A method for determining the urease activity of Helicobacter pylori (HP) in vivo, comprising introducing carbamide into the body and monitoring its hydrolysis by gas analytical measurements, characterized in that the volumetric flow rate is measured before carbamide is introduced into the body and from 5-10 minutes after its introduction exhaled air and its increase relative to the initial value determine the presence of urease activity.

3. A method for determining the urease activity of Helicobacter pylori (HP) in vivo, comprising introducing carbamide into the body and controlling its hydrolysis by the presence of gaseous hydrolysis products in the air, characterized in that the carbon dioxide content of the normal isotopic composition in the air of the oral cavity is measured up to and after the introduction of urea and by changing the carbon dioxide content of the normal isotopic composition in the air of the oral cavity, the presence of urease activity is determined.

4. A method for determining the urease activity of Helicobacter pylori (HP) in vivo by determining the content of urea hydrolysis products in the gas phase, characterized in that in the air of the oral cavity of the subject during the breathing through the nose, the carbon dioxide content of the normal isotopic composition is measured before and after carbamide application and the increase in the content of gaseous products determines the presence of urease activity.

5. A method for determining the urease activity of Helicobacter pylori (HP) in vivo according to claims 1 to 4, characterized in that the carbamide of a normal isotopic composition is introduced into the oral cavity in the form of chewing gum.

6. A method for determining the urease activity of Helicobacter pylori (HP) in vivo by determining the content of urea hydrolysis products in the gas phase, characterized in that the localization of urease activity in the body and the effectiveness of therapy are carried out by measuring the content of the examined oral cavity during breathing through the nose carbon dioxide of normal isotopic composition before and after the introduction of urea and the ammonia content of normal isotopic composition before and after the introduction of urea and to increase the content of gaseous products determine the presence of urease activity.