RU2167663C1

RU2167663C1 - Method of heparinoid preparing

Info

Publication number: RU2167663C1
Application number: RU2000110706A
Authority: RU
Inventors: А.Б. Лисицын; Р.В. Илюхина; И.В. Исаева; Л.А. Люблинская
Original assignee: Всероссийский научно-исследовательский институт мясной промышленности
Priority date: 2000-04-28
Filing date: 2000-04-28
Publication date: 2001-05-27

Abstract

FIELD: meet and medicinal industry. SUBSTANCE: method involves pig duodenum tissue milling, extraction, separation of extract, proteolysis, precipitation of active substance and drying. Proteolysis is carried out with addition of benzoic acid up to its concentration from 0.3% to 0.6%. After proteolysis heating is carried to 60-62 C with exposition at this temperature and the following cooling to 10-15 C. EFFECT: decreased bacterial seeding and increased stability of preparation. 2 tbl

Description

Изобретение относится к области производства биологически активных веществ из органов и тканей убойных животных, в частности гепариноида "Алиприла", и может быть использовано на предприятиях мясной и медицинской промышленности. The invention relates to the production of biologically active substances from the organs and tissues of slaughtered animals, in particular the Alipril heparinoid, and can be used in meat and medical industry enterprises.

Известен способ получения гепариноида, включающий измельчение ткани двенадцатиперстных кишок свиней, экстракцию, нагревание, отделение экстракта, протеолиз, осаждение активного вещества и сушку (1). A known method for producing heparinoid, including grinding tissue of pig duodenum, extraction, heating, separation of the extract, proteolysis, precipitation of the active substance and drying (1).

К недостаткам способа следует отнести высокую микробиологическую обсемененность и недостаточную стабильность получаемого препарата. The disadvantages of the method include high microbiological contamination and lack of stability of the resulting drug.

Задачей изобретения является снижение микробиологической обсемененности готового продукта, повышение его стабильности при хранении. The objective of the invention is to reduce the microbiological contamination of the finished product, increasing its stability during storage.

Для этого в способе получения гепариноида, включающем измельчение ткани двенадцатиперстных кишок свиней, экстракцию, отделение экстракта, протеолиз, осаждение активного вещества и сушку, протеолиз проводят с добавлением бензойной кислоты до ее концентрации в растворе от 0,3 до 0,6%, а после протеолиза производят нагревание до температуры 60-62^oC, с выдержкой при этой температуре в течение 60-70 мин и последующим охлаждением до температуры 10-15^oC.To this end, in a method for producing heparinoid, including grinding tissue of pig duodenum, extraction, separation of the extract, proteolysis, precipitation of the active substance and drying, proteolysis is carried out with the addition of benzoic acid to its concentration in solution from 0.3 to 0.6%, and after proteolysis produce heating to a temperature of 60-62 ^o C, with exposure at this temperature for 60-70 min and subsequent cooling to a temperature of 10-15 ^o C.

Приведенные технологические приемы позволяют уменьшить микробиологическую обсемененность гепариноида и увеличить срок его годности при стандартных условиях хранения. The given technological methods allow reducing the microbiological contamination of heparinoid and increasing its shelf life under standard storage conditions.

Ниже приведены примеры осуществления предлагаемого способа. Below are examples of the implementation of the proposed method.

Двенадцатиперстные кишки свиней измельчают и обрабатывают охлажденным ацетоном, получая сухие, обезжиренные двенадцатиперстные кишки. Pig duodenum is crushed and treated with chilled acetone to give dry, fat-free duodenal ulcer.

Затем сухое сырье помещают в емкость с мешалкой и производят экстракцию известным способом растворами едкого калия и хлористого калия при перемешивании и определенных температурных режимах. Осадок отделяют, а раствор обрабатывают протеолитическим ферментом (панкреатином) с добавлением бензойной кислоты до ее концентрации в растворе от 0,3 до 0,6%. Then the dry raw materials are placed in a container with a stirrer and extraction is carried out in a known manner with solutions of caustic potassium and potassium chloride with stirring and certain temperature conditions. The precipitate is separated, and the solution is treated with a proteolytic enzyme (pancreatin) with the addition of benzoic acid to its concentration in the solution from 0.3 to 0.6%.

Протеолиз ведут при pH 7,8-8,0 и температуре 38-40^oC в течение 6 ч, после чего выдерживают раствор без нагрева 15-16 ч. Затем раствор нагревают до температуры 60-62^oC и выдерживают при этой температуре 60-70 мин, после чего охлаждают до температуры 10-15^oC, осадок отделяют. Раствор при pH 7,0 обрабатывают охлажденным ацетоном или охлажденным этиловым спиртом при перемешивании.Proteolysis is carried out at a pH of 7.8-8.0 and a temperature of 38-40 ^o C for 6 hours, after which the solution is kept without heating for 15-16 hours. Then the solution is heated to a temperature of 60-62 ^o C and kept at this temperature 60 -70 min, then cooled to a temperature of 10-15 ^o C, the precipitate is separated. The solution at pH 7.0 is treated with chilled acetone or chilled ethyl alcohol with stirring.

Затем смесь отстаивают 18-20 ч при температуре не выше 5^oC. Жидкость отделяют, осадок собирают и высушивают ацетоном или этиловым спиртом, получая рассыпчатый порошок гепариноида "Алиприл".Then the mixture is left to stand for 18-20 hours at a temperature not exceeding 5 ^o C. The liquid is separated, the precipitate is collected and dried with acetone or ethyl alcohol, obtaining a friable Alipril heparinoid powder.

Примеры осуществления способа согласно изобретению приведены в табл. 1. Examples of the method according to the invention are given in table. 1.

Осуществление способа в соответствии с параметрами, приведенными в примерах 1, 2, 3, обеспечивает получение препарата более высокого качества (с низкой микробиологической загрязненностью, более стойкого при хранении). The implementation of the method in accordance with the parameters given in examples 1, 2, 3, provides a higher quality drug (with low microbiological contamination, more stable during storage).

Сравнительные данные качественных показателей гепариноида, полученного известным и предлагаемым способами, приведены в табл. 2. Comparative data on the qualitative indicators of heparinoid obtained by known and proposed methods are shown in table. 2.

Из таблицы видно, что предлагаемый способ позволяет получить препарат, в котором содержание глюкозамина, ответственного за фармакологическое действие гепариноида, сохраняется в течение 30 мес при температуре 10^oC, а микробиологическая обсемененность соответствует требованиям изменения N 1 Госфармакопеи XI изд., вып. 2, категория 3е.The table shows that the proposed method allows to obtain a drug in which the content of glucosamine, responsible for the pharmacological action of heparinoid, is stored for 30 months at a temperature of 10 ^o C, and microbiological insemination meets the requirements of change No. 1 Gosfarmakopei XI ed., Issue. 2, category 3e.

Источники информации
1. Илюхина Р.В. и др. в Сборнике научных трудов Всероссийского НИИ мясной промышленности (ВНИИМП) им. В.М. Горбатова, Москва, 2000 г., стр. 109.Sources of information
1. Ilyukhina R.V. etc. in the Collection of scientific works of the All-Russian Research Institute of the Meat Industry (VNIIMP) named after V.M. Gorbatova, Moscow, 2000, p. 109.

Claims

A method of producing heparinoid, including grinding pig pig duodenum, extraction, separation of the extract, proteolysis, precipitation of the active substance and drying, characterized in that proteolysis is carried out with the addition of benzoic acid to its concentration in solution of 0.3-0.6%, and after proteolysis produce heating to a temperature of 60 - 62 ^o C with exposure at this temperature for 60 - 70 min and subsequent cooling to a temperature of 10 - 15 ^o C.