RU2153673C2 - Method for determining sensitization to allergens - Google Patents

Method for determining sensitization to allergens Download PDF

Info

Publication number
RU2153673C2
RU2153673C2 RU98110408A RU98110408A RU2153673C2 RU 2153673 C2 RU2153673 C2 RU 2153673C2 RU 98110408 A RU98110408 A RU 98110408A RU 98110408 A RU98110408 A RU 98110408A RU 2153673 C2 RU2153673 C2 RU 2153673C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
control
compared
allergen
allergens
sensitization
Prior art date
Application number
RU98110408A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU98110408A (en
Inventor
Р.М. Хайруллина
И.Д. Рыбаков
А.Б. Бакиров
Р.Р. Фархутдинов
Р.Ш. Хасанов
З.Р. Хаматдинова
Original Assignee
Республиканская детская клиническая больница
Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Республиканская детская клиническая больница, Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека filed Critical Республиканская детская клиническая больница
Priority to RU98110408A priority Critical patent/RU2153673C2/en
Publication of RU98110408A publication Critical patent/RU98110408A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2153673C2 publication Critical patent/RU2153673C2/en

Links

Images

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves incubating lymphocytes with or without allergens with following luminescence being measured. Whole blood is used. Measurements of luminescence intensity are done using luminol-dependent chemoluminescence before and after incubation. Index of sample with no allergen after incubation (in control) being greater than that before incubation (initial one), and allergen sample index after incubation (in case) being greater or less by 15 % when compared to the control, or drop in the control index value when compared to the initial one and increase or drop by 49 % or more when compared to the case samples being observed, conclusions are drawn concerning sensitization to an allergen. EFFECT: simplified method.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для выявления сенсибилизации организма к аллергенам в стационаре и поликлинике. The invention relates to medicine, namely to immunology and allergology, and can be used to detect sensitization of the body to allergens in a hospital and clinic.

Известен способ определения сенсибилизации к аллергенам путем проведения скарификационных и внутрикожных проб (см. Методы специфической диагностики аллергии у детей. Под ред. Потемкина А.М. - Л., 1988. - С. 40 -42): на предварительно обработанную 70%-ным спиртом кожу ладонной поверхности предплечья наносят капли специфических аллергенов отдельными шприцами на расстоянии 34 см друг от друга, затем через каждую каплю отдельной иглой или скарификатором делают две царапины длиной до 0,5 см, стараясь не повредить кровеносные сосуды. Результат оценивают каждые 15 - 20 мин. There is a method of determining sensitization to allergens by means of scarification and intradermal tests (see Methods for the specific diagnosis of allergies in children. Edited by Potemkin AM - L., 1988. - P. 40 -42): for pre-processed 70% - With alcohol, the skin of the palmar surface of the forearm is applied with drops of specific allergens with separate syringes at a distance of 34 cm from each other, then through each drop with a separate needle or scarifier two scratches up to 0.5 cm long are made, trying not to damage the blood vessels. The result is evaluated every 15 to 20 minutes.

Внутрикожные аллергические пробы ставят также на внутренней поверхности предплечья. Кожу обрабатывают 70%-ным спиртом, иглу вводят в поверхностный слой эпидермиса. При правильном введении аллергена на коже образуется белый бугорок (инфильтрат), который должен рассосаться в течение 15 - 20 мин. Intradermal allergic tests are also placed on the inner surface of the forearm. The skin is treated with 70% alcohol, the needle is inserted into the surface layer of the epidermis. With the correct introduction of the allergen, a white tubercle (infiltrate) forms on the skin, which should dissolve within 15 to 20 minutes.

Однако данные способы инвазивны, возможны местные и общие аллергические реакции, имеется большое количество противопоказаний (обострение аллергического заболевания, декомпенсированные состояния при заболеваниях сердца, печени, почек, системы крови, опухолевые состояния), необходимо подготовить больного (отмена антигистаминных средств, симпатомиметиков, глюкокортикоидов, гипоаллергенная диета) и специально обучить медперсонал, при этом внутрикожные пробы более чувствительны, но менее специфичны, чем скарификационные, так как дают большее число ложноположительных реакций. However, these methods are invasive, local and general allergic reactions are possible, there are a large number of contraindications (exacerbation of an allergic disease, decompensated conditions for diseases of the heart, liver, kidneys, blood system, tumor conditions), it is necessary to prepare the patient (withdrawal of antihistamines, sympathomimetics, glucocorticoids, hypoallergenic diet) and specifically train medical staff, while intradermal tests are more sensitive, but less specific than scarification, as they give more shee number of false-positive reactions.

Известны способ определения сенсибилизации к аллергенам с помощью электродиагностического автоматического хемилюминесцентного аппарата CLAI ЗАО "МЕДЛАНД-Москва", содержащего набор сложных диагностических аллергенспецифических реактивов (20 панелей по 36 аллергенов в одном наборе), являющегося дорогостоящей, закрытой системой (использующей только реактивы данной фирмы), и хемилюминесцентный способ оценки неинфекционной аллергии "CIBA CORDING" с применением импортных реактивов и аппаратуры СП "Амерканд" (см. Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии: сб. трудов 1-ой Национальной конференции Российской Ассоциации аллергологов и клинических иммунологов (28 - 31 января 1997 г.) - М., 1997. - С. 698 - 699). Оба способа требуют подготовки больного к исследованию (отмена глюкокортикоидов за 7 дней до взятия крови), мониторинг негативного результата при положительном анамнезе, клиническое наблюдение при положительном результате, без данных анамнеза. A known method for determining sensitization to allergens using the CLAI electro-diagnostic automatic chemiluminescent apparatus of MEDLAND-Moscow CJSC, containing a set of complex diagnostic allergen-specific reagents (20 panels of 36 allergens in one set), is an expensive, closed system (using only reagents of this company), and chemiluminescent method for assessing non-infectious allergy "CIBA CORDING" using imported reagents and equipment of the joint venture "Amerkand" (see. Current problems of allergology, linicheskoy immunology and immunopharmacology: Proceedings of the 1st National Conference of the Russian Association of Allergology and Clinical Immunology (28 - 31 January 1997) - M., 1997. - S. 698 - 699).. Both methods require preparation of the patient for examination (cancellation of glucocorticoids 7 days before blood collection), monitoring of a negative result with a positive history, clinical observation with a positive result, without history.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к заявляемому изобретению является способ определения сенсибилизации к аллергенам (см. а.с. СССР N 1569705, кл. G 01 N 33/48, 20.01.87), заключающийся в выделении из крови больного лимфоцитов и определении их спонтанной хемилюминесценции и хемилюминесценции после 10 - 20 мин инкубации с 20 мкл раствора аллергена с последующим сравнением полученных показателей. Способ характеризуется трудоемкостью, большими временными и материальными затратами (реактивы, оборудование), процесс подсчета числа клеток является субъективным. The closest in technical essence and the achieved result to the claimed invention is a method for determining sensitization to allergens (see AS USSR N 1569705, CL G 01 N 33/48, 01.20.87), which consists in the isolation of lymphocytes from the patient’s blood and determination of their spontaneous chemiluminescence and chemiluminescence after 10 to 20 min of incubation with 20 μl of allergen solution, followed by a comparison of the obtained values. The method is characterized by laboriousness, high time and material costs (reagents, equipment), the process of counting the number of cells is subjective.

Задача изобретения заключается в упрощении способа определения сенсибилизации к аллергенам и снижении материальных затрат. The objective of the invention is to simplify the method of determining sensitization to allergens and reduce material costs.

Для этого в способе определения сенсибилизации к аллергенам путем инкубации лимфоцитов с аллергеном и без него с последующим измерением их хемилюминесценции, согласно изобретению используют цельную кровь, измеряют с помощью люминолзависимой хемилюминесценции интенсивность свечения ее до и после инкубации и при увеличении этого показателя пробы без аллергена после инкубации (в контроле) по сравнению с показателем пробы до инкубации (с исходным) и увеличении или снижении на 15% и более показателя пробы с аллергеном после инкубации (в опыте) по сравнению с контролем или при снижении показателя в контроле по сравнению с исходным и увеличении или снижении на 49% и более показателя в опыте по сравнению с контролем определяют сенсибилизацию к аллергену. To this end, in the method for determining sensitization to allergens by incubating lymphocytes with and without an allergen, followed by measuring their chemiluminescence, whole blood is used according to the invention, its luminescence chemiluminescence is measured using the luminescence chemiluminescence intensity before and after incubation and by increasing this sample without allergen after incubation (in control) compared with the sample before incubation (with the original) and an increase or decrease by 15% or more of the sample with the allergen after incubation (in experiment f) in comparison with the control or with a decrease in the indicator in the control compared with the initial one and an increase or decrease by 49% or more in the experiment compared with the control, sensitization to the allergen is determined.

Реакция люминолзависимой хемилюминесценции со специфическими аллергенами в стандартных разведениях проводилась с оценкой результатов на хемилюминомере ХЛ-003 (производитель УГАТУ МНИЛ ТСМЭИ). За показатель интенсивности свечения принята величина светосуммы хемилюминесценции - площадь, измеряемая под кривой записи излучения за 5 мин, в условных единицах в мин по эталону СФХМ 1 (ГОСТ 9411-81), суммарный световой поток которого 5,1 • 105 квант в сек.The reaction of luminol-dependent chemiluminescence with specific allergens in standard dilutions was carried out with the evaluation of the results on the chemiluminometer HL-003 (manufacturer USATU MNIL TSMEI). The luminosity value of chemiluminescence was taken as an indicator of the luminescence intensity — the area measured under the radiation recording curve for 5 min, in arbitrary units per minute, according to the standard SFHM 1 (GOST 9411-81), the total luminous flux of which is 5.1 • 10 5 quanta per second.

Взаимосвязь определенных показателей светосуммы хемилюминесценции с характером реакции на аллерген изучалось методом корреляционного анализа. The relationship of certain indicators of the chemiluminescence light sum with the nature of the reaction to the allergen was studied by the method of correlation analysis.

Исходная выборка данных состояла из следующих показателей состояния иммунной системы: светосумма хемилюминесценции в исходной (спонтанная) и в контрольной пробах, в опытных пробах с аллергенами различных типов; биологические показатели - кожные пробы положительные и отрицательные (КП+, КП-). The initial data sample consisted of the following indicators of the state of the immune system: light sum of chemiluminescence in the initial (spontaneous) and control samples, in experimental samples with allergens of various types; biological indicators - skin tests positive and negative (KP +, KP-).

Путем сравнения результатов интегральной светимости контрольных проб с данными светимости при добавлении аллергенов исследовалась их корреляция с результатами кожных проб. By comparing the results of the integrated luminosity of control samples with the luminosity data when allergens were added, their correlation with the results of skin tests was studied.

Обследовано 100 человек, 23 из них были расценены как практически здоровые, а 77 имели то или иное аллергическое заболевание с сенсибилизацией к различным аллергенам, подтвержденной кожными пробами. Анализ данных проводился с использованием ППП Statistika for Windows (см. таблицу). 100 people were examined, 23 of them were regarded as practically healthy, and 77 had one or another allergic disease with sensitization to various allergens, confirmed by skin tests. Data analysis was carried out using Statistika for Windows RFP (see table).

Полученные значения парной корреляции между показателями хемилюминесценции как в контрольных пробах, так и в пробах с аллергенами с показателями кожных проб составили величины в пределах от 0,33 до 0,63 при уровне значимости p < 0,05, что свидетельствует о достаточно высокой степени статистической связи с указанными пробами и подтверждает возможность частичной замены кожных проб предлагаемым менее инвазивным способом. The obtained pair correlation values between chemiluminescence indices both in control samples and in allergen samples with skin samples showed values ranging from 0.33 to 0.63 at a significance level of p <0.05, which indicates a rather high degree of statistical connection with these samples and confirms the possibility of partial replacement of skin samples with the proposed less invasive method.

Светосумма спонтанной хемилюминесценции в группе здоровых составила 4,29 ± 0,79 у.е.•мин, у аллергиков 5,88 ± 0,73 у.е.•мин. По характеру изменения значений светосуммы контрольной пробы относительно исходной пробы обследованные были разделены на две группы: с уменьшением и с увеличением. Сенсибилизация к специфическому аллергену определялась также по изменению светосуммы опытной пробы с аллергеном по сравнению с контрольной. В группе больных с увеличением светосуммы контрольной пробы по сравнению с исходной сенсибилизацию устанавливали при увеличении или снижении на 15% и более светосуммы опытной пробы по сравнению с контрольной, а в группе с уменьшением светосуммы контрольной пробы по сравнению с исходной - при увеличении или снижении на 49% и более светосуммы опытной пробы по сравнению с контролем. The light sum of spontaneous chemiluminescence in the healthy group was 4.29 ± 0.79 cu • min, for allergy sufferers 5.88 ± 0.73 cu • min. According to the nature of the change in the values of the light sum of the control sample relative to the original sample, the examined were divided into two groups: with a decrease and with an increase. Sensitization to a specific allergen was also determined by the change in the light sum of the experimental sample with the allergen compared to the control. In the group of patients with an increase in the light sum of the control sample compared to the initial sensitization, a sensitization was established with an increase or decrease by 15% or more of the light sum of the experimental sample compared to the control, and in the group with a decrease in the light sum of the control sample compared to the initial one, with an increase or decrease by 49 % and more of the light sum of the experimental sample in comparison with the control.

Способ осуществляют следующим образом. The method is as follows.

Готовят физиологический раствор с люминолом 5 • 105M из расчета 2 мл на одну пробу. У больного натощак производят забор крови из локтевой вены в пластиковую посуду по 1 мл и добавляют гепарин из расчета 50 ед. гепарина на 1 мл крови: содержащий 5000 ед. препарат разводят в десять раз в физиологическом растворе, отбирают 0,1 мл и добавляют 1 мл крови. Хранят в течение 4 - 8 час при 2 - 4oC.Prepare a saline solution with luminol 5 • 10 5 M at the rate of 2 ml per sample. A patient on an empty stomach produce blood from the cubital vein into a plastic dish of 1 ml and add heparin at the rate of 50 units heparin per 1 ml of blood: containing 5000 units. the preparation is diluted ten times in physiological saline, 0.1 ml is taken and 1 ml of blood is added. Store for 4 to 8 hours at 2 - 4 o C.

0,1 мл гепаринизированной крови помещают в стеклянную кювету с 2 мл физиологического раствора с люминолом, подогретого до 37oC, и регистрируют спонтанную (исходную) хемилюминесценцию за 5 мин. К 0,1 мл гепаринизированной крови 2-ой пробы (контрольной) добавляют 0,01 мл физиологического раствора и инкубируют в термостате при 37oC в течение 20 мин, после чего переносят в стеклянную кювету с 2 мл физиологического раствора с люминолом, подогретого до 37oC, и производят замер хемилюминесценции за 5 мин для контроля неспецифического воздействия температурного фактора. В остальные пробы (опытные) к 0,1 мл гепаринизированной крови добавляют по 0,01 мл раствора исследуемых аллергенов и инкубируют при 37oC в термостате в течение 20 мин, затем помещают в стеклянную кювету с 2 мл раствора с люминолом, подогретого до 37oC, и регистрируют хемилюминесценцию за 5 мин. Сопоставляя полученные результаты, выявляют сенсибилизацию к аллергену при увеличении показателя в контроле по сравнению с исходным и увеличении или снижении на 15% и более показателя в опыте по сравнению с контролем или при снижении показателя в контроле по сравнению с исходным и увеличении или снижении на 49% и более показателя в опыте по сравнению с контролем (таблица).0.1 ml of heparinized blood is placed in a glass cuvette with 2 ml of physiological solution with luminol, heated to 37 o C, and spontaneous (initial) chemiluminescence is recorded in 5 minutes. 0.01 ml of physiological saline is added to 0.1 ml of heparinized blood of the second sample (control) and incubated in a thermostat at 37 ° C for 20 min, after which it is transferred to a glass cuvette with 2 ml of saline with luminol, heated to 37 o C, and measure chemiluminescence for 5 min to control the non-specific effects of the temperature factor. In the remaining samples (experimental) to 0.1 ml of heparinized blood add 0.01 ml of a solution of the investigated allergens and incubated at 37 o C in a thermostat for 20 minutes, then placed in a glass cuvette with 2 ml of a solution with luminol, heated to 37 o C, and record chemiluminescence for 5 minutes Comparing the results obtained, sensitization to the allergen is detected with an increase in the control compared to the initial one and an increase or decrease by 15% or more in the experiment compared to the control or a decrease in the control compared to the original and an increase or decrease by 49% and more than the indicator in the experiment compared with the control (table).

Хемилюминесценцию проб измеряют на хемилюминомере ХЛ-003. The chemiluminescence of the samples is measured on a chemiluminometer XL-003.

Пример 1. Больной А., 10 лет. Example 1. Patient A., 10 years old.

Диагноз: поллиноз; бронхиальная астма, атопическая форма, внеприступный период. Diagnosis: hay fever; bronchial asthma, atopic form, out of contact period.

Считает себя больным с 6 лет. Заболевание началось в конце мая 1991 года остро с приступообразного мучительного кашля с выделением скудной, трудноотходящей мокроты слизистого характера, ощущения нехватки воздуха, субфебрильной температуры. Ребенок был госпитализирован в центральную районную больницу с диагнозом: астматический бронхит. После проведенного лечения состояние улучшилось. В дальнейшем отмечались повторяющиеся приступы одышки, кашля с вязкой, трудноотходящей мокротой слизистого характера, субфебрильной температурой, цианозом губ и слизистых 1-3 раза в весенне-осенний период. Постепенно увеличивалась тяжесть состояния, ребенок принимал вынужденное положение с фиксацией пояса верхних конечностей. Лечился как амбулаторно, так и в стационаре. Проведено два курса специфической гипосенсибилизации. В настоящий момент поступает для проведения третьего курса специфической гипосенсибилизации. Considers herself sick since 6 years. The disease began at the end of May 1991 acutely with a paroxysmal excruciating cough with the release of scanty, difficult sputum of mucous character, a feeling of lack of air, low-grade fever. The child was hospitalized in the central district hospital with a diagnosis of asthmatic bronchitis. After the treatment, the condition improved. Subsequently, repeated attacks of shortness of breath, cough with viscous, difficult-to-discharge sputum of a mucous nature, low-grade fever, cyanosis of the lips and mucous membranes 1-3 times in the spring-autumn period were noted. The severity of the condition gradually increased, the child took a forced position with the fixation of the belt of the upper extremities. He was treated both on an outpatient basis and in a hospital. Two courses of specific desensitization were performed. Currently enters for the third course of specific desensitization.

Проведены скарификационные кожные пробы с аллергенами:
Домашняя пыль - +++
Перо подушки - ++
Лещина - +++
Береза - ++
Дуб - ++
Ольха - +++
Ребенку проведено исследование согласно предлагаемому изобретению. Утром натощак взята и гепаринизирована венозная кровь в количестве 1 мл. 0,1 мл гепаринизированной крови поместили с 2 мл подогретого до 37oC физиологического раствора с люминолом в стеклянную кювету и произвели замер спонтанной (исходной) хемилюминесценции за 5 мин. К 0,1 мл гепаринизированной крови 2-ой пробы добавили 0,01 мл физиологического раствора и инкубировали в термостате при 37oC в течение 20 мин, затем перенесли с 2 мл подогретого до 37oC физиологического раствора с люминолом в стеклянную кювету и замерили хемилюминесценцию (контрольную) за 5 мин. В остальные 6 проб (опытных) к 0,1 мл гепаринизированной крови добавили по 0,01 мл стандартных растворов соответствующих аллергенов и инкубировали при 37oC в термостате в течение 20 мин, после чего поместили в стеклянную кювету с 2 мл подогретого до 37oC физиологического раствора с люминолом и произвели замер хемилюминесценции за 5 мин. Получены следующие результаты:
исходная светосумма хемилюминесценции (1-й пробы) 3,75 у.е.•мин;
светосумма контрольной пробы (2-й) 1,75 у.е.•мин - уменьшение показателя относительно исходного;
светосумма 3-й пробы с аллергеном домашней пыли 2,7 у.е.•мин - увеличение на 54% по сравнению с контрольным показателем,
светосумма 4-й пробы с аллергеном пера подушки 2,61 у.е.•мин - увеличение показателя на 49,1% по сравнению с контролем,
светосумма 5-й пробы с аллергеном лещины 2,83 у.е.•мин - увеличение показателя на 61,7% по сравнению с контролем,
светосумма 6-й пробы с аллергеном березы 2,78 у.е.•мин - увеличение на 58,9% по сравнению с показателем в контроле,
светосумма 7-й пробы с аллергеном дуба 3,78 у.е.•мин - увеличение на 116% по сравнению с контролем,
светосумма 8-ой пробы с аллергеном ольхи 3,37 у.е.•мин - увеличение на 92,6% по сравнению с контролем.
Scarification skin tests with allergens were performed:
Household dust - +++
Feather pillow - ++
Hazel - +++
Birch - ++
Oak - ++
Alder - +++
The child conducted a study according to the invention. In the morning on an empty stomach, venous blood was taken and heparinized in an amount of 1 ml. 0.1 ml of heparinized blood was placed with 2 ml of physiological saline solution with luminol heated to 37 ° C in a glass cuvette and spontaneous (initial) chemiluminescence was measured in 5 minutes. 0.01 ml of physiological saline was added to 0.1 ml of heparinized blood of the 2nd sample and incubated in a thermostat at 37 ° C for 20 min, then transferred from 2 ml of saline saline heated to 37 ° C in a glass cuvette and measured chemiluminescence (control) for 5 minutes In the remaining 6 samples (experimental), 0.1 ml of standard solutions of the corresponding allergens were added to 0.1 ml of heparinized blood and incubated at 37 ° C in an incubator for 20 minutes, after which they were placed in a glass cuvette with 2 ml of heated to 37 ° C C saline with luminol and measured chemiluminescence for 5 minutes The following results were obtained:
initial light sum of chemiluminescence (1st sample) 3.75 conventional units • min;
light sum of the control sample (2nd) 1.75 conventional units • min - decrease in the indicator relative to the initial one;
light sum of the 3rd sample with a house dust allergen 2.7 cu • min - an increase of 54% compared to the control indicator,
the light sum of the 4th test with a feather pill allergen 2.61 cu • min - an increase of 49.1% compared with the control,
the light sum of the 5th test with hazel allergen 2.83 cu • min - an increase of 61.7% compared with the control,
the light sum of the 6th sample with a birch allergen 2.78 cu • min - an increase of 58.9% compared with the control value,
the light sum of the 7th test with an oak allergen 3.78 cu • min - an increase of 116% compared with the control,
the light sum of the 8th test with an alder allergen is 3.37 cu • min - an increase of 92.6% compared with the control.

На основании данных сделано заключение о наличии сенсибилизации больного к пыльцевым аллергенам лещины, березы, дуба, ольхи, а также бытовой сенсибилизации к домашней пыли и перу подушки. Based on the data, it was concluded that there is a sensitization of the patient to pollen allergens of hazel, birch, oak, alder, as well as household sensitization to house dust and feather pillows.

Пример 2. Больная Ш., 6 лет. Example 2. Patient S., 6 years old.

Диагноз: атопический дерматит, респираторный аллергоз. Diagnosis: atopic dermatitis, respiratory allergosis.

Больна с детства, неоднократно лечилась в условиях стационара. Ухудшение состояния отмечает в летнее время: появляются гиперемия и высыпания на коже лица, туловища, конечностей, сильный зуд, кашель, заложенность носа. В зимний период проявления заболевания затухают. В настоящий момент поступила для определения аллергена с целью проведения специфической гипосенсибилизации. Sick since childhood, was repeatedly treated in a hospital. Deterioration of the condition is noted in the summer: hyperemia and rashes appear on the skin of the face, trunk, extremities, severe itching, coughing, nasal congestion. In winter, the manifestations of the disease die out. At the moment, she has been admitted to determine the allergen in order to conduct specific hyposensitization.

Проведены скарификационные кожные пробы с аллергенами:
Трава ежи - +++
Ольха - ++
Лещина - Отр.
Scarification skin tests with allergens were performed:
Hedgehog grass - +++
Alder - ++
Hazel - Neg.

Ясень - Отр. Ash - Neg.

Лисохвост - Отр. Foxtail - Neg.

Дуб - Отр. Oak - Neg.

Клен - Отр. Maple - Neg.

Береза - +
Домашняя пыль - +
Перо подушки - +
Исследование проведено согласно указанной методике.
Birch - +
Household dust - +
Feather pillows - +
The study was conducted according to the specified methodology.

Получены следующие результаты:
исходная светосумма хемилюминесценции (1-й пробы) составила 1,71 у.е. •мин;
светосумма контрольной (2-й) пробы) 2,2 у.е.•мин - увеличение относительно исходной;
3-я проба (трава ежи) - 2,55 у.е.•мин, увеличение на 15,9% по сравнению с контролем,
4-я проба (ольха) - 1,77 у.е.•мин, уменьшение на 19,5% по сравнению с контролем,
5-я проба (лещина) - 2,05 у.е.•мин, уменьшение на 6,8% по сравнению с контролем,
6-я проба (ясень) - 2,1 у.е.•мин, уменьшение на 4,5% по сравнению с контролем,
7-я проба (лисохвост) - 2,32 у.е.•мин, увеличение на 5,45% по сравнению с контролем,
8-я проба (дуб) - 2,37 у.е.•мин, увеличение на 7,7% по сравнению с контролем,
9-я проба (клен) - 2,3 у.е.•мин, увеличение на 4,5%,
10-я проба (береза) - 1,81 у.е.•мин, уменьшение на 17,7% по сравнению с контролем,
11-я проба (домашняя пыль) - 1,82 у.е.•мин, уменьшение на 17,2% по сравнению с контролем,
12-я проба (перо подушки) - 3,45 у.е.•мин, увеличение на 56,8% по сравнению с контролем.
The following results were obtained:
the initial light sum of chemiluminescence (1st sample) was 1.71.e. • min;
light sum of the control (2nd) sample) 2.2 cu • min - increase relative to the initial one;
3rd test (hedgehog grass) - 2.55 cu • min, an increase of 15.9% compared with the control,
4th test (alder) - 1.77 cu • min, a decrease of 19.5% compared with the control,
5th test (hazel) - 2.05 cu • min, a decrease of 6.8% compared with the control,
6th test (ash) - 2.1 cu • min, a decrease of 4.5% compared with the control,
7th test (foxtail) - 2.32 cu • min, an increase of 5.45% compared with the control,
8th test (oak) - 2.37 cu • min, an increase of 7.7% compared with the control,
9th test (maple) - 2.3 cu • min, an increase of 4.5%,
10th test (birch) - 1.81 cu • min, a decrease of 17.7% compared with the control,
11th test (house dust) - 1.82 cu • min, a decrease of 17.2% compared with the control,
The 12th test (feather pillow) - 3.45 cu • min, an increase of 56.8% compared with the control.

Таким образом, у больной Ш. выявлена сенсибилизация к пыльцевым аллергенам травы ежи, ольхи, березы, бытовая сенсибилизация к домашней пыли и перу подушки, так как увеличение или снижение (уменьшение) показателя исследуемой пробы по сравнению с контролем составляет величину, большую 15%, при одновременном увеличении показателя в контроле по сравнению с исходным. Thus, in patient Sh., Sensitization to hedgehog, alder, and birch grass pollen allergens was detected, household sensitization to house dust and feather pillows, since an increase or decrease (decrease) in the test sample compared with the control is a magnitude greater than 15%, while increasing the indicator in the control compared to the original.

Пример 3. Больной Б., 6 лет. Example 3. Patient B., 6 years old.

Диагноз: бронхиальная астма, инфекционно-аллергическая форма, межприступный период. Diagnosis: bronchial asthma, infectious-allergic form, interictal period.

С 3 месяцев экссудативно-катаральный диатез. После 6 месяцев наблюдались частые заболевания, сопровождавшиеся сухим, приступообразным, длительным кашлем. Впервые одышка появилась в возрасте 2,5 лет во время перенесенной бронхопневмонии. После начала посещения детского дошкольного учреждения у ребенка ежегодные повторные бронхиты, с 4-х лет с астматическим компонентом. Выраженная аллергическая реакция на пенициллин по типу крапивницы. Дважды лечился в условиях стационара. Наследственный анамнез отягощен: мать ребенка страдает бронхиальной астмой. From 3 months, exudative-catarrhal diathesis. After 6 months, frequent diseases were observed, accompanied by a dry, paroxysmal, prolonged cough. Dyspnea first appeared at the age of 2.5 years during bronchopneumonia. After the start of visiting the kindergarten, the child has annual repeated bronchitis, from 4 years old with an asthmatic component. Severe allergic reaction to penicillin by the type of urticaria. He was twice treated in a hospital. The hereditary history is burdened: the mother of the child suffers from bronchial asthma.

При обследовании аллергологом были проведены скарификационные кожные пробы со специфическими аллергенами:
Библиотечная пыль - +
Домашняя пыль - +++
Перо подушки - +
Куриное яйцо - Отр.
When examined by an allergist, scarification skin tests with specific allergens were performed:
Library Dust - +
Household dust - +++
Feather pillows - +
Chicken Egg - Neg.

Измерение хемилюминесценции проб крови по предлагаемому способу выявило сенсибилизацию к бытовым аллергенам: библиотечной и домашней пыли, перу подушки. Measurement of the chemiluminescence of blood samples by the proposed method revealed sensitization to household allergens: library and house dust, feather pillows.

Исходная светосумма хемилюминесценции 5,51 у.е.•мин;
светосумма хемилюминесценции в контроле 7,71 у.е.•мин - увеличение по сравнению с исходной;
3-я проба (библиотечная пыль) - 11,27 у.е.•мин, увеличение на 46,2% по сравнению с контролем,
4-я проба (домашняя пыль) - 11,23 у.е.•мин - увеличение на 45,7% по сравнению с контролем,
5-я проба (перо подушки) - 11,07 у.е.•мин - увеличение на 43,6% по сравнению с контролем,
6-я проба (куриное яйцо) - 7,02 у.е.•мин - снижение на 8,95% по сравнению с контролем.
The initial light sum of chemiluminescence 5.51 cu • min;
the light sum of chemiluminescence in the control is 7.71 cu • min - increase compared to the initial one;
3rd sample (library dust) - 11.27 cu • min, an increase of 46.2% compared with the control,
4th sample (house dust) - 11.23 cu • min - an increase of 45.7% compared with the control,
5th test (feather pillow) - 11.07 cu • min - an increase of 43.6% compared with the control,
6th test (chicken egg) - 7.02 cu • min - a decrease of 8.95% compared with the control.

В данном случае показатель в контроле увеличился по сравнению с исходным и показатели в пробах с аллергенами библиотечной пыли, домашней пыли, пера подушки увеличились более чем на 15% по сравнению с контролем, что позволяет судить о сенсибилизации больного Б. к бытовым аллергенам, исследованным нами. In this case, the indicator in the control increased compared to the initial one and the indicators in the samples with allergens of library dust, house dust, feather pillows increased by more than 15% compared with the control, which allows us to judge the sensitization of patient B. to household allergens studied by us .

Предлагаемый способ определения сенсибилизации к аллергенам в сравнении с известными обладает следующими преимуществами:
- меньшая инвазивность;
- простота в исполнении, снижение материальных затрат, отсутствие подготовки и зависимости от его состояния;
- возможность использования реактивов различных фирм.
The proposed method for determining sensitization to allergens in comparison with the known has the following advantages:
- less invasiveness;
- simplicity in execution, reduction of material costs, lack of training and dependence on its condition;
- the possibility of using reagents of various companies.

Разработанный способ может быть использован для выявления сенсибилизации больных к различным аллергенам в качестве скриннинг-теста в иммуноаллергологическом отделении стационара или в поликлинике. The developed method can be used to detect sensitization of patients to various allergens as a screening test in the immuno-allergological department of a hospital or in a clinic.

Claims (1)

Способ определения сенсибилизации к аллергенам путем инкубации лимфоцитов с аллергеном и без него с последующим измерением их хемилюминесценции, отличающийся тем, что используют цельную кровь, с помощью люминолзависимой хемилюминесценции измеряют интенсивность свечения ее до и после инкубации и при увеличении этого показателя в контроле по сравнению с исходным и увеличении или снижении на 15% и более показателя в опыте по сравнению с контролем или при снижении показателя в контроле по сравнению с исходным и увеличении или снижении на 49% и более показателя в опыте по сравнению с контролем определяют сенсибилизацию к аллергену. A method for determining sensitization to allergens by incubating lymphocytes with and without an allergen, followed by measuring their chemiluminescence, characterized in that they use whole blood, using luminol-dependent chemiluminescence, the intensity of its luminescence is measured before and after incubation and when this indicator is increased in control compared to the original and an increase or decrease by 15% or more of the indicator in the experiment compared with the control or when the indicator in the control is lower than the initial one and the increase or decrease by 49% and more than the indicator in the experiment compared with the control determine the sensitization to the allergen.
RU98110408A 1998-06-01 1998-06-01 Method for determining sensitization to allergens RU2153673C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98110408A RU2153673C2 (en) 1998-06-01 1998-06-01 Method for determining sensitization to allergens

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98110408A RU2153673C2 (en) 1998-06-01 1998-06-01 Method for determining sensitization to allergens

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU98110408A RU98110408A (en) 2000-02-27
RU2153673C2 true RU2153673C2 (en) 2000-07-27

Family

ID=20206693

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU98110408A RU2153673C2 (en) 1998-06-01 1998-06-01 Method for determining sensitization to allergens

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2153673C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2575567C2 (en) * 2014-04-22 2016-02-20 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения им. Н.И. Пирогова Минздрава России in vitro DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR PSEUDOALLERGEN HYPERSENSITIVITY AND SELECTING ANTIALLERGIC MEDICINES

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2575567C2 (en) * 2014-04-22 2016-02-20 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения им. Н.И. Пирогова Минздрава России in vitro DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR PSEUDOALLERGEN HYPERSENSITIVITY AND SELECTING ANTIALLERGIC MEDICINES

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hopp et al. The Presence of Airway Reactivity before the Development of Asthma1-3
Sears et al. Atopy in childhood. I. Gender and allergen related risks for development of hay fever and asthma
Lynch et al. Allergic reactivity and socio‐economic level in a tropical environment
Patterson et al. Reagin-mediated asthma in rhesus monkeys and relation to bronchial cell histamine release and airway reactivity to carbocholine.
El-Shalakany et al. Clinical significance of saliva urea and creatinine levels in patients with chronic kidney disease
Fry et al. The outcome of acute otitis media.(A report to the Medical Research Council).
Suh et al. Bronchial hyperresponsiveness to methacholine and adenosine 5′‐monophosphate, and the presence and degree of atopy in young children with asthma
Ownby et al. Development and comparative evaluation of a multiple-antigen RAST as a screening test for inhalant allergy
Ortolani et al. Correlation of the specific IgE in serum and nasal secretions with clinical symptoms in atopies
RU2407451C1 (en) Method of diagnosing bronchial asthma in children of early age using data of induces sputum cytology
Østergaard et al. Basophil histamine release in the diagnosis of house dust mite and dander allergy of asthmatic children: comparison between prick test, RAST, basophil histamine release and bronchial provocation
RU2153673C2 (en) Method for determining sensitization to allergens
Van Vleck et al. A study of the reactions of human polymorphonuclear leukocytes to various allergens
González-Pérez et al. Precision medicine in mite allergic rhinitis
Kawade et al. Assessment of perceived distress due to nasopharyngeal swab collection in healthy Indian infants participating in a clinical trial
RU2676477C1 (en) Method for predicting risk of development of bronchial asthma in children
Krayenbuhl et al. Nasal response to allergen and hyperosmolar challenge
Businco et al. Intradermal skin tests with Dermatophagoides pteronyssinus in asthmatic children: correlation with specific IgE and bronchial provocation tests
RU2807381C1 (en) Method for differential diagnosis of bronchial asthma phenotypes
Godwin Eczema and allergy: how useful is allergy testing?
Felsen Laboratory studies in epilepsy
Faraj et al. Histamine‐Dependent Allergy Blood Test: Clinical Evaluation
Van Niekerk The prevalence of asthma in urban and rural Black children: an epidemiological survey
RU1803873C (en) Method for diagnosing allergy
RU2586040C1 (en) Method of diagnosing idiopathic gastric and duodenal ulcers