RU2147373C1 - Способ выявления скрытого метастазирования при увеальной меланоме - Google Patents
Способ выявления скрытого метастазирования при увеальной меланоме Download PDFInfo
- Publication number
- RU2147373C1 RU2147373C1 RU98111889A RU98111889A RU2147373C1 RU 2147373 C1 RU2147373 C1 RU 2147373C1 RU 98111889 A RU98111889 A RU 98111889A RU 98111889 A RU98111889 A RU 98111889A RU 2147373 C1 RU2147373 C1 RU 2147373C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- patients
- metastasis
- melanoma
- patient
- uveal melanoma
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 38
- 201000005969 Uveal melanoma Diseases 0.000 title claims description 22
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 title abstract description 3
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 title abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 7
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 49
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 claims description 30
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 20
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 19
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 14
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 description 14
- 230000007159 enucleation Effects 0.000 description 10
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 9
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 8
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 5
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 4
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 201000002742 malignant choroid melanoma Diseases 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 208000008636 Neoplastic Processes Diseases 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 206010008773 Choroid melanoma Diseases 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010040914 Skin reaction Diseases 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- 230000008076 immune mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 2
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 230000035483 skin reaction Effects 0.000 description 2
- 231100000430 skin reaction Toxicity 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 210000001745 uvea Anatomy 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 208000010667 Carcinoma of liver and intrahepatic biliary tract Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006313 Delayed Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N Dinitrochlorobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010073069 Hepatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002159 anterior chamber Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- FFBHFFJDDLITSX-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[2-hydroxy-4-(3-oxomorpholin-4-yl)phenyl]carbamate Chemical compound OC1=C(NC(=O)OCC2=CC=CC=C2)C=CC(=C1)N1CCOCC1=O FFBHFFJDDLITSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 201000008446 choroid epithelioid cell melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003237 epithelioid cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000010877 epithelioid cell melanoma Diseases 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 230000004402 high myopia Effects 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000004922 lacquer Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000002250 liver carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 208000026320 liver hemangioma Diseases 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000006911 nucleation Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000002661 proton therapy Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000003786 sclera Anatomy 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 210000001325 yolk sac Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, а именно к офтальмоонкологии, и предназначено для выявления скрытого метастазирования у больных увеальной меланомой с целью проведения адекватного лечения. Проводят определение скрытого метастазирования, исследуя иммунокомпетентные клетки в сыворотке периферической крови, при этом оценку проводят по количественному подсчету субпопуляций Т-лимфоцитов CD3, CD4, CD8 и индекса их соотношений, и при отклонении всех указанных показателей от нормы с формированием индекса равным и менее 1,0 или равным и более 2,0 констатируют наличие скрытого метастазирования. Способ обеспечивает высокую достоверность выявления процесса скрытого метастазирования и позволяет назначить адекватное лечение.
Description
Предлагаемое изобретение относится к офтальмологии, а именно к офтальмоонкологии, и предназначено для выявления скрытого метастазирования у больных увеальной меланомой с целью проведения адекватного лечения.
В настоящее время задача диагностики скрытого метастазирования при различных злокачественных новообразованиях остается чрезвычайно актуальной, она по-прежнему далека от разрешения, хотя предпринимаются попытки решить эту важнейшую в онкологии проблему для таких опухолей, как карцинома печени, рак желудка и поджелудочной железы.
Известен способ диагностики скрытого метастазирования больных со злокачественными опухолями с помощью определения в сыворотке периферической крови уровня ферментативной активности печени. Так, например, повышение активности аминотрансферазы, щелочной фосфатазы со снижением коэффициента де Ритиса может свидетельствовать в пользу наличия метастазов в печени при условии подтверждения наличия метастазирующих узлов диагностическими инструментальными методами, такими как ультразвуковое исследование, сцинтиграфия или компьютерная томография печени. То есть метод лишь подтверждает уже выявляемые явные метастазы и не срабатывает на этапе скрытого метастазирования ("Cellular and Molecular Immunology" W.B. Saunders Company - Second еdition. , p. 382).
Существует также другой способ определения метастазирования с помощью выявления в сыворотке крови повышенного титра раково-эмбриональных антигенов (РЭА) или альфа-фетапротеинов (АФП). АФП-гликопротеин с молекулярным весом в 70 kD синтезируется в норме в неонатальном периоде в печени и желточном мешке. У взрослых эти белки присутствуют в сыворотке периферической крови на низком уровне (до 5 мг/мл). Однако сывороточные уровни могут существенно повышаться у пациентов с гепатоцеллюлярной карциномой, гормонально-активными опухолями, раком желудка и поджелудочной железы и при рецидивах этих опухолей после лечения (Cellular and Molecular Immunology" W.B. Saunders Company - Second edition., p. 366).
РЭА выявляются в повышенных титрах в сыворотке больных с карциномами толстого кишечника. Особенно часто это имеет место при указанной патологии на стадии метастазирования.
То есть перечисленные способы позволяют подтвердить или выявить наличие строго определенных типов опухолей, в том числе их рецидивов, или установить генерализацию уже имеющегося инструментально подтвержденного онкологического процесса.
Выявление метастазов у ракового больного в корне меняет тактику его лечения. Оперативное лечение при множественных метастазах при большинстве опухолей просто не показано. Возможна лишь химиотерапия, адъювантная иммунокорректирующая терапия в комбинации с симптоматической. То есть мы имеет дело с принципиально различными лечебными подходами при переходе неопластического процесса в стадию метастазирования.
Что касается увеальной меланомы, то на сегодняшний момент не существует маркера, позволяющего с известной долей вероятности выявлять латентный период метастазирования и таким образом определять тактику лечения больного с увеальной меланомой на этой стадии. Таким образом, задача определения скрытого метастазирования при увеальной меланоме до настоящего времени не ставилась.
Согласно последним данным (Eskelin S., Summanen P. et al. Diagnosis and Screening of Disseminated malignant uveal melanoma.- In Symposium Ophthalmooncology, 1987, Erusalim) первые признаки диссеминированных форм увеальной меланомы могут быть выявлены с помощью комплексного биохимического исследования сыворотки периферической крови с определением уровня ряда ферментов (S-GOT, S-GPT, S-AFOS, S-LDH) и ультразвукового метода. При этом только у 54% больных на фоне уже диагностированных инструментальными методами метастазов зафиксированы в сыворотке повышенные уровни ферментов (LDH-13, GOT-10, AFOS-8, GPT-7). Одновременные ультразвуковые исследования были неадекватно положительными у 27 пациентов (77%), включая 14 больных, у которых были нормальные энзимные уровни, и в двух случаях - отрицательными. Однако, несмотря на высокий процент выявления больных с метастазами (57%), способ имеет существенные недостатки. Данные можно принимать во внимание, если они подтверждены инструментальными методами (компьютерной томографией, УЗИ или сцинтиграфией), в противном случае повышение определяемого уровня ферментативной активности может быть обусловлено такими заболеваниями печени, как гепатит или цирроз и т. д. Кроме того, достаточно высок процент больных (43%), у которых обнаружены на фоне явных метастазов нормальные уровни ферментативной активности печени.
И, наконец, известно, что метастазы поражают печень только в 61% случаев [Packard R.B. Pattern of mortality in choroidal malignant melanoma// Br. J. Ophthalmol. - 1980-64.-P. 565-575; Zimmerman L.E., McLean I.W. An evaluation of enucleation in management of uveal melanomas// Am. J. Ophthamol.- 1979-87. -P. 741-760; Zimmerman L.E., McLean I.W. Do growth and onset of symptoms of uveal melanomas indicate subclinical metastasis?// Ophthalmol.- 1984.-Vol.91.-N 6.-P. 685-691].
По материалам Jensen, полученным при вскрытии 38 больных, только у 27 обнаружены метастазы в печень, при этом у 17 поражение печени было изолированным (Jensen O.A. Malignant melanoma of the uvea in Denmark// Acta Ophtalmol.- 1970-48.-P. 1113-1128; Jensen O.A. Malignant melanomas of the human uvea: 25-year follow-up of cases in Denmark, 1943-1952// Acta Ophthalmol.- 1982-60. -P. 161-182). Реже поражаются легкие (55%), головной мозг (22%), почки (44%), желудочно-кишечный тракт, кожа, подкожная клетчатка (Einchorn L. H. , Burgess M.A., Gottlieb J.A. Metastasis patterns of choroidal melanoma//Canser. -1974. -Vol. 34. -N 4.-P. 1001-1004). В довольно большом числе случаев многие органы поражаются одновременно.
Таким образом, для 49% больных с увеальной меланомой, метастазирующей в другие органы (легкие, кожу, кости), этот способ не может быть использован.
В своей теории мы отталкивались от того, что увеальная меланома является иммунозависимой опухолью [Char D.H., Christiansen M., Stein P. Immunology of melanoma //Jap. J. Ophthalmol.-1978-22-3.-P. 396-400]. Подтверждением иммуногенности является не только поведенческий характер опухоли, в виде возможных отсроченных метастазов спустя 30 лет после энуклеации или спонтанной регрессии первичного опухолевого узла [Scott R. Lambert, Devron H. Char. Spontaneous Regression of a Choroidal melanoma/ Arch. Ophthalmol.- Vol. 104, 1986.-P. 732-734]. Иммунный ответ был подтвержден серией опубликованных работ. Так, еще в 70-е годы выявлены изменения иммунной системы по типу повышенной чувствительности замедленного типа, т. е. зафиксирована несомненная заинтересованность иммунологической реактивности организма [Priluck I.A., Robertson D.H., Pritchard P.J. et al. Immune responsivness in patients with choroidal malignant melanoma// Am. S. Ophthalmol.-1979.-Vol.-87.-P. 215-220] . Char с сотр. выявили у пяти из семи больных с меланомой хориоидеи аномальное подавление миграции лейкоцитов, что соответствовало кожной реакции гиперчувствительности замедленного типа (РГЗТ) [Char D.H., Hollinshead A., Cogan D. G. Cutaneous delayed hypersensitivity reactions to soluble melanoma antigen in patients with ocular malignant melanoma//N. Eng. J. Med.-1974-291. -P. 274-277] . Ранее ими же была описана положительная реакция кожи с растворенным меланомным антигеном у 18 из 19 пациентов с увеальной меланомой (131).
Показано, что при реакции спонтанной бласттрансформации лимфоцитов показатели ее при увeальной меланоме достоверно превосходили данные контроля [Котелянский Э. О. , Желтовай В.В., Дворцина Л.И. Иммунологические исследования при увеальных меланомах// Сб.научн.работ: Офтальмоонкология.-М., 1983. -C. 68-72].
Отмечено, что в 75% случаев исходный уровень РГЗТ на динитрохлорбензол коррелирует с прогнозом увеальной меланомы [Зайцева Н.С., Стукалов С.Ю. Иммунологические и аллергические процессы в патологии органа зрения// Тез. V Всесоюзного съезда офтальмологов.- М., 1979.-T.4.-C.3-11].
Получено, что индекс бласттрансформации лимфоцитов уменьшается по мере прогрессирования опухолевого процесса [Нифонтова Т.П. Кожная реакция замедленной гиперчувствительности на 2-4-динитрохлорбензол у больных меланобластомой сосудистого тракта глаза/Офтальм.ж.-1981.-N 6.-C. 356-357].
Последнее десятилетие ознаменовалось существенными сдвигами в понимании эффекторных иммунных механизмов, возникающих в ответ на появление клеток увеальной меланомы. Так, получены подтверждения их в виде присутствия в строме опухоли тумор-инфильтрирующих лимфоцитов.
Изучение показателей клеточного иммунитета на уровне субпопуляций показало, что при злокачественных опухолях органа зрения отмечено снижение уровней субпопуляций Т3, Т4, индекса Т4/Т8 в 67% случаев. Иммунодефицит прогрессировал по мере увеличения объема опухоли и распространенности инфильтративного роста. Выявлена определенная корреляция этих показателей (Т8) с прогнозом заболевания [Гусев Г.А. Применение иммуномодуляторов в комплексном лечении злокачественных опухолей органа зрения.-Дисс. на соискан. канд. мед. наук.-М.-1991].
Rosenberger с соавт. также показали, что индекс CD4/CD8 меняется в зависимости от состояния опухоли.
Известно, что в определенный момент развития неопластического процесса устанавливается некоторое довольно шаткое равновесие между объемом опухоли и иммунной системой организма-опухоленосителя. Оно отражено в правиле конкоминантного иммунитета. Однако достаточно воздействия дополнительного агента, и прорыв в установленном балансе механизмов иммунной противораковой защиты обеспечен. Таким агентом может являться стресс для больного или вирусная инфекция и т.д. Чаша весов с опухолью на одной стороне стремительно опускается и начинается процесс метастазирования, которому не может противостоять иммунная система, находящаяся на грани полного истощения. В клинической иммунологии это состояние называется стадией иммунной декомпенсации. По нашему глубокому убеждению, показатели, характеризующие эту стадию, могут быть выявлены задолго до того, как сформируются метастазы, которые могут быть выявлены при инструментальных методах (ЯМР, КТ, УЗИ, сцинтиграфия).
Были выявлены определенные закономерности изменений иммунологических показателей (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) в зависимости от стадийности процесса. Вместе с тем в ряде случаев были получены данные, которые не укладывались в установленную схему, они принимались за артефакты, допущенные при проведении иммунологических исследований, заносились в индивидуальные тематические карты, заведенные на каждого больного, но при обсчете результатов были исключены из анализа. Нами воспроизведены исследования у пациентов с этой же патологией. Наряду с подтвержденной, уже установленной указанными авторами тенденцией к изменениям иммунологических показателей в зависимости от стадии было обращено внимание на ряд пациентов в стадии генерализации процесса, у которых наличие метастазов подтверждалось инструментальными методами. Этот контингент больных имел характерные признаки, которые будут указаны ниже. Более того, такие показатели зафиксированы и в нескольких клинических случаях без диагностирования метастазов. Однако спустя 6-8 месяцев у них констатировали стадию генерализации. Были подняты тематические карты больных с аналогичными показателями, полученными Г. А. Гусевым за несколько лет до этого. Ретроспективный анализ подтвердил, что данные больных, не вошедшие в ранее анализируемый им материал и отброшенные как артефакты в сочетании с фактами об укороченном сроке их жизни и причинe смерти от генерализации процесса, свидетельствуют в пользу высказанного нами предположения.
Возможна диагностика скрытых симптомов метастазирования, до того как метастаз достигнет размера обнаружения. Более ранняя диагностика в таких случаях позволит провести иммунокорректирующую терапию и удлинить продолжительность жизни пациентов, кроме того, в ряде случаев позволит сделать правильный выбор в тактике ведения больного. Таким образом, обобщая полученные данные, возможно установить скрытое метастазирование увеальной меланомы на самом раннем этапе на основе изучения иммунологических показателей T-клеточного иммунитета конкретного больного. Указанный процесс с точки зрения иммунологии характеризуется всеми признаками иммунной декомпенсации (то есть отказом от дальнейшей борьбы с неопластическим процессом в силу истощения защитных резервов иммунной системы). Наступает резкий дефицит продукции T-хелперов при гипоплазии или гиперплазии T-супрессоров. Соответственно иммунологический индекс соотношений этих популяций либо стремительно падает ниже 1,0 либо столь же стремительно растет > 2.0. В процессе оценки иммунного статуса необходимо учитывать также и общий процент CD3, поскольку прогноз ухудшается, если процесс метастазирования протекает на фоне снижения пролиферации CD3.
Определяют субпопуляции T-лимфоцитов с помощью особо чувствительного метода с применением моноклональных антител. Панель моноклональных антител CD получают с помощью использования гибридомной технологии. Эти антитела способны с высокой точностью распознавать определенные клеточные компоненты иммунной системы. Антитела определенной специфичности связываются с флюоресцентной меткой (ТС-флюоресцеин-изоцианат). Обнаруживая на поверхности жизнеспособных клеток (лимфоцитов) экспрессированные уникальные антигенные детерминанты, меченные флюоресцеином моноклональные антитела образуют соединения с этими детерминантами и делают клетки узнаваемыми и определяемыми количественно.
CD3 распознаeт антиген, присутствующий на зрелых периферических лимфоцитах.
CD4 реагирует с популяцией человеческих T-лимфоцитов, которые обеспечивают индуктивные сигналы для пролиферации B-клеток и продукции ими антител, генерации цитотоксических клеток по отношению к антигенам I и II классов HLA. При различных патологических состояниях абсолютный и относительный уровни регуляторных популяций нарушаются. При этом отмечено, что активность T-хелперов не приводит к неограниченному разрастанию клонов B-клеток или цитотоксических лимфоцитов: по мере созревания клеток эффект лимфокинов, стимулирующих пролиферацию, ослабеваeт. Однако неудержимая гиперплазия T-супрессоров, тем не менее, имеет место при истощении сдерживающих факторов, она зафиксирована при генерализации ракового процесса.
CD8-клетки обеспечивают супрессивный и модулирующий иммунорегуляторный стимул для продукции эффекторных клеток, таких как антителопродуцирующие плазматические клетки и цитотоксические Т-клетки.
Количественный подсчет CD4, CD8, CD3, а также определение иммунорегуляторного индекса, который представляет собой соотношение CD4/CD8, позволяют произвести оценку состояния иммунной системы конкретного больного (стадии компенсации, субкомпенсации или декомпенсации). Учитывая роль иммунных эффекторных механизмов противораковой защиты вообще и хелперов/супрессоров в частности, определение стадии иммунной декомпенсации у больного увеальной меланомой позволяет предположить с большой долей вероятности начало метастазирования. По данным литературы, а также фактического материала отдела офтальмологии и радиологии, известно, что средняя продолжительность жизни больного с момента начала метастазирования от шести месяцев до двух лет [Seddon J. M. et al. Death from uveal melanoma. Number of epithelioid cells and inverse SD of nucleolar area as prognostic factors// Arch.Ophthalmol.-1987, June. -105(6).-P. 801-806] и составляет в среднем 113 дней. Ретроспективный анализ полученных иммунологических данных у больных, пролеченных в стационаре 10 или менее лет назад, поиск коррелятивных взаимосвязей с продолжительностью жизни позволили установить, что наше предположение верно. Эти данные и легли в основу предложенного метода.
Этапы выполнения реакции.
Способ осуществляется следующим образом.
У больного определяют в периферической крови субпопуляции CD3, CD4, CD8 с помощью метода моноклональных антител [Frank C. Hay, Leslie Hudson "Practical Immunology".- 1987, Blackwell Scientific Publications]:
1. Забирают периферическую кровь в объеме 5 мл из локтевой вены в пробирку, содержащую ЭДТА.
1. Забирают периферическую кровь в объеме 5 мл из локтевой вены в пробирку, содержащую ЭДТА.
2. Производят маркировку пробирок (количество последних на одного больного равно числу определяемых типов субпопуляций плюс одна контрольная).
3. В пробирку, содержащую 100 мкл хорошо перемешанной цельной крови, вносят 100 мкл PBS (фосфатный буферный раствор, приготовленный согласно официальной прописи) и помещают пробирку в ледяную баню.
4. В каждую пробирку вносят 7 мкл соответствующего типа моноклональных антител, растворенных в дистиллированной воде предварительно в соответствии с инструкцией.
5. Затем в течение 15-30 с, осторожно встряхивая пробирки, смешивают компоненты. Манипуляцию повторяют пять раз с минутным интервалом.
6. Пробирки изымают из ледяной бани, добавляют в каждую из них 2 мл лизирующего раствора, который представляет собой один из компонентов коммерческого набора. Его готовят накануне согласно инструкции, данной фирмой-поставщиком оборудования. Пробирки помещают в шейкер после каждого добавления.
7. Производят инкубацию исследуемых образцов при комнатной температуре в течение 5-10 мин до получения прозрачного "лакового" раствора.
8. Пробирки центрифугируют в течение 5 мин при 400Х и удаляют супернатант из каждой пробирки. При недостаточном эффекте клетки отмывают до 7-8 раз.
9. Пробирки помещают в ледяную баню.
10. Количественное измерение субпопуляций производят на лазерном цитофлюорометре "Спектрум-3" фирмы "Орто Диагностик Системс", США.
11. Получают показатели CD3, CD4, CD8, высчитывают индекс соотношения CD4/CD8. И при выявлении изменений, которые могут быть расценены как характерныe для стадии декомпенсации иммунной системы (количественное отклонение CD3, CD4, CD8 и индекса их соотношений в сторону менее и равно 1,0 или более и равно 2,0), считают, что такого пациента следует отнести к группе риска по скрытому метастазированию, даже если инструментального подтверждения не получено. Ему следует срочно назначить иммунокорректирующую терапию.
Пример 1. Больной Ф., 1927 года рождения. Поступил с диагнозом: увеальная меланома (T4NoMo) ОД. ОС - здоров. При поступлении произведена оценка иммунологического статуса по CD3, CD4, CD8 и соотношению CD4/CD8. Иммунологические данные на момент поступления позволяют сказать, что больной наxодился в стадии иммунной декомпенсации: CD3-62.1; CD4-34, CD8-27.5, CD4/CD8= 0.78, что свидетельствовало о наличии скрытого метастазирования. Произведена энуклеация. Патологический диагноз: иридоцилио-хориоидальная меланома эпителиоидно-клеточная меланома, врастающая в угол передней камеры и формирующий эписклеральный узел. Смерть больного наступила от генерализации процесса спустя 1 год 5 месяцев после нуклеации. Метастазы обнаружены в печени.
Учитывая, что продолжительность жизни больного с момента энуклеации до момента смерти укладывается в сроки длительности процесса метастазирования, можно с известной долей вероятности утверждать, что на момент энуклеации больной находился в стадии скрытого метастазирования. И это состояние характеризовалось признаками иммунной декомпенсации. Поскольку при поступлении в стационар для каждого больного обязательно прохождение инструментальных методов обследования (рентгенография грудной клетки, УЗИ, сцинтиграфия или томография печени) для подтверждения стадии NоMо, то очевидно, что инструментальные методы оказались нечувствительными на этой стадии, в то время как иммунологический метод был более чувствителен.
Пример 2. Больная К., 1934 года рождения. Поступила в стационар с диагнозом: миопия высокой степени, цилиохориоидальная меланома (Т4NоMо), состояние после протонотерапии правого глаза. Обследована для оценки иммунного статуса. Данные иммунологического исследования: CD3-70.1; CD4-40.2; CD8-27.5; CD4/CD8=1.46. Незначительное снижение CD3 и CD4 свидетельствовало о субкомпенсации иммунных механизмов. Произведена энуклеация. Гистологически верифицирована меланома хориоидеи смешанно-клеточного строения с формированием эписклерального узла.
18 месяцев спустя после энуклеации больная была вновь обследована на контрольной явке в амбулаторных условиях. По данным рентгенографии органов грудной клетки и УЗИ печени, данных за процесс метастазирования нет. Иммунологические данные: CD3-62; CD4-27.0; CD8-46.9; CD4/CD8= 0.57. На иммунограмме установлены все признаки декомпенсации иммунной системы, что позволило заподозрить начало метастазирования без инструментального доказательства. Выводы оказались верны. Смерть больной наступила от генерализации процесса спустя 10 месяцев после обследовании. Таким образом, учитывая среднестатистическую продолжительность жизни с момента начала метастазирования, можно утверждать, что на момент иммунологического обследования больная находилась в стадии скрытого метастазирования. И этот момент совпал с признаками иммунной декомпенсации, указанными выше.
Пример 3. Больная С., 1930 года рождения. Оперирована в Московской офтальмологической больнице с диагнозом: меланома хориоидеи (T3NоMо) правого глаза. Произведена энуклеация правого глазного яблока. Патогистологическое заключение N 815: эпителиоидно-клеточная меланома хориоидеи с врастанием в эмиссарий, диссеминацией опухолевых комплексов по эписклере. УЗИ печени, рентгенография органов грудной клетки в марте 1996 года исключили метастазы. Полтора года спустя почувствовала слабость. Была направлена на иммунологическое обследование, которое выявило признаки декомпенсации: CD3-59.0 (при норме 65-80%); CD4-39.6 (при норме 30-50%), CD8-16.9, CD4/CD8=2.34 (при норме 1.2-1.8). Направлена в том же месяце на повторное исследование печени. Получено заключение: множественные гемангиомы печени (!?). Учитывая отсутствие таковых при проведении УЗИ в более ранние сроки, а также данные иммунограммы больной, по настоятельной просьбе врача проведена сцинтиграфия печени. Получено подтверждение наличия метастазов в печени с тенденцией к слиянию. Спустя еще 4 месяца у больной появились метастазы в кожу лобной области с одновременным рецидивом меланомы в культе в правой орбите. Повторное иммунологическое исследование спустя месяц после первого показало полное истощение механизмов иммунной защиты: CD3-58.3, CD4-46.53, CD8-11.8, CD4/CD8=3.94. В качестве паллиативного метода лечения больной предложена ИЛ-2 терапия, которая и была проведена. До настоящего момента жива, но имеет все признаки генерализации процесса.
Пример 4. Г., 1926 года рождения. Поступила в стационар с диагнозом: меланома хориоидеи правого глаза (T3-4NоMо). Левый глаз здоров. Произведена энуклеация. Верифицирована смешанноклеточная меланома с прорастанием до наружных слоев склеры. На момент энуклеации всеми доступными инструментальными методами метастазы не выявлены. Иммунологическое обследование проведено постфактум, спустя 1 год 8 месяцев. Данные иммунограммы от 1 января 1987 года: CD3-71.4, CD4-45.9, CD8-29.1, CD4/CD8=1.5.
1 год спустя: CD3-66.8, CD4-56.2, CD8-35.4, CD4/CD8=1.6. Метастазов не выявлено. Сведений о смерти не поступало.
Таким образом, полученные данные с ретроспективным анализом продолжительности жизни больных с увеальной меланомой позволяют утверждать, что с помощью иммунологических исследований в рамках указанных параметров возможно раннее выявление признаков иммунной декомпенсации, предшествующих или сопровождающих латентный период метастазирования. Ценность предлагаемого метода заключается в том, что он позволяет осуществить доинструментальную диагностику скрытого метастазирования с большой долей вероятности, что дает возможность сделать правильный выбор вида лечения и своевременно провести адекватную иммунокоррекцию с целью удлинения продолжительности жизни этого тяжелого контингента больных. Метод достаточно информативен и малотрудоемок при большой практической ценности.
Claims (1)
- Способ определения скрытого метастазирования при увеальной меланоме, включающий исследование иммунокомпетентных клеток в сыворотке периферической крови, при этом оценку проводят по количественному подсчету клеток субпопуляций Т-лимфоцитов CD 3, CD 4, CD 8 и индекса их соотношения CD 4 / CD 8 и при отклонении всех указанных показателей от нормы с формированием индекса, равным и менее 1,0 или равным и более 2,0, констатируют наличие скрытого метастазирования.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98111889A RU2147373C1 (ru) | 1998-06-19 | 1998-06-19 | Способ выявления скрытого метастазирования при увеальной меланоме |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98111889A RU2147373C1 (ru) | 1998-06-19 | 1998-06-19 | Способ выявления скрытого метастазирования при увеальной меланоме |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU98111889A RU98111889A (ru) | 2000-03-10 |
| RU2147373C1 true RU2147373C1 (ru) | 2000-04-10 |
Family
ID=20207551
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU98111889A RU2147373C1 (ru) | 1998-06-19 | 1998-06-19 | Способ выявления скрытого метастазирования при увеальной меланоме |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2147373C1 (ru) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2197731C2 (ru) * | 2001-02-26 | 2003-01-27 | Московский НИИ глазных болезней им. Гельмгольца | Способ прогнозирования клинического течения увеальной меланомы |
| RU2207573C2 (ru) * | 2001-08-27 | 2003-06-27 | Новичков Евгений Владимирович | Способ прогнозирования продолжительности жизни больных печеночно-клеточной карциномой |
| RU2240560C1 (ru) * | 2003-03-06 | 2004-11-20 | Лихванцева Вера Геннадьевна | Способ прогнозирования метастазирования увеальной меланомы на основе маркеров вах и ki-67 |
| RU2242766C1 (ru) * | 2003-03-06 | 2004-12-20 | Лихванцева Вера Геннадьевна | Способ прогнозирования метастазирования увеальной меланомы на основе маркеров апоптоза вах и bcl-2 |
| RU2327420C1 (ru) * | 2006-12-12 | 2008-06-27 | ГУ Научно-исследовательский институт глазных болезней РАМН | Способ одновременной верификации и прогнозирования течения увеальной меланомы |
| RU2703979C1 (ru) * | 2019-03-20 | 2019-10-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт глазных болезней" | Способ прижизненного выявления прорастания меланомы хориоидеи в сетчатку |
| RU2790468C1 (ru) * | 2022-05-04 | 2023-02-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Южно-Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО ЮУГМУ Минздрава России) | Способ прогнозирования появления отдаленных метастазов меланомы хориоидеи |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3341367A1 (de) * | 1982-11-16 | 1984-05-24 | Taniguchi, Masaru, Chiba | Melanomdiagnosemittel mit gehalt an monoklonem spezifischen antikoerper |
| US4507391A (en) * | 1982-04-02 | 1985-03-26 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Method for detecting the presence of GD3 ganglioside |
-
1998
- 1998-06-19 RU RU98111889A patent/RU2147373C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4507391A (en) * | 1982-04-02 | 1985-03-26 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Method for detecting the presence of GD3 ganglioside |
| DE3341367A1 (de) * | 1982-11-16 | 1984-05-24 | Taniguchi, Masaru, Chiba | Melanomdiagnosemittel mit gehalt an monoklonem spezifischen antikoerper |
| GB2133543A (en) * | 1982-11-16 | 1984-07-25 | Masaru Taniguchi | Monoclonal antibody specific to human melanoma |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Котелянский Э.О. и др. Иммунологические исследования при увеальных меланомах. Сборник научных работ. "Офтальмоонкология". - М.: 1983, с.68-69. 2. * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2197731C2 (ru) * | 2001-02-26 | 2003-01-27 | Московский НИИ глазных болезней им. Гельмгольца | Способ прогнозирования клинического течения увеальной меланомы |
| RU2207573C2 (ru) * | 2001-08-27 | 2003-06-27 | Новичков Евгений Владимирович | Способ прогнозирования продолжительности жизни больных печеночно-клеточной карциномой |
| RU2240560C1 (ru) * | 2003-03-06 | 2004-11-20 | Лихванцева Вера Геннадьевна | Способ прогнозирования метастазирования увеальной меланомы на основе маркеров вах и ki-67 |
| RU2242766C1 (ru) * | 2003-03-06 | 2004-12-20 | Лихванцева Вера Геннадьевна | Способ прогнозирования метастазирования увеальной меланомы на основе маркеров апоптоза вах и bcl-2 |
| RU2327420C1 (ru) * | 2006-12-12 | 2008-06-27 | ГУ Научно-исследовательский институт глазных болезней РАМН | Способ одновременной верификации и прогнозирования течения увеальной меланомы |
| RU2703979C1 (ru) * | 2019-03-20 | 2019-10-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт глазных болезней" | Способ прижизненного выявления прорастания меланомы хориоидеи в сетчатку |
| RU2790468C1 (ru) * | 2022-05-04 | 2023-02-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Южно-Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО ЮУГМУ Минздрава России) | Способ прогнозирования появления отдаленных метастазов меланомы хориоидеи |
| RU2828566C1 (ru) * | 2024-03-04 | 2024-10-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России) (RU) | Способ оценки риска метастазирования после энуклеации глаза с большими меланомами хориоидеи |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Coupland et al. | T-cell and T/natural killer-cell lymphomas involving ocular and ocular adnexal tissues: a clinicopathologic, immunohistochemical, and molecular study of seven cases | |
| Smirniotopoulos et al. | Differential diagnosis of leukokoria: radiologic-pathologic correlation. | |
| Farrow et al. | Autoantibodies and the hepatitis-associated antigen in acute infective hepatitis | |
| Cohen et al. | Burkitt's tumor in the United States | |
| Cadeau et al. | Increased incidence of placenta-like alkaline phosphatase activity in breast and genitourinary cancer | |
| Burkes et al. | Rectal lymphoma in homosexual men | |
| Lobo et al. | Pseudo‐hypopyon as the presenting feature in B‐cell and T‐cell intraocular lymphoma | |
| Donoso et al. | Metastatic uveal melanoma: pretherapy serum liver enzyme and liver scan abnormalities | |
| RU2147373C1 (ru) | Способ выявления скрытого метастазирования при увеальной меланоме | |
| Razavi et al. | Psychosocial correlates of oestrogen and progesterone receptors in breast cancer | |
| Burtin et al. | Decreased blood histamine levels in patients with solid malignant tumours | |
| RU2147129C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики увеальной меланомы от прогрессирующего невуса хориоидеи | |
| Sharma et al. | Clinical Focus Series: Lesions of Sarcoidosis: A Problem Solving Approach | |
| Stillman | Jaundice | |
| Fu et al. | Primary plasmablastic lymphoma of the gastrointestinal tract: A series of 13 HIV-negative cases and a review of literature | |
| Conn et al. | The syndrome of hypertension, hyperreninemia and secondary aldosteronism associated with renal juxtaglomerular cell tumor (primary reninism) | |
| Coupland | Uveal lymphoproliferative tumors | |
| Nonomura et al. | T cell lymphoma presenting clinical and morphological features resembling polymorphic reticulosis and lymphomatoid granulomatosis | |
| Felberg et al. | Gamma-glutamyl transpeptidase in the prognosis of patients with uveal malignant melanoma | |
| Guan et al. | Prognostic significance of the dynamic change of programmed death-ligand 1 expression in patients with multiple myeloma | |
| Fonkalsrud et al. | Pancreatoduodenectomy for Islet-Cell Tumor of the Pancreas in Infancy and Childhood: Case Report With Five-Year Survival | |
| Hitchcock et al. | Diagnosis of Asymptomatic Malignant Disease: A Report of Six and One-Half Years' Operation of the Cancer Detection Center, University of Minnesota | |
| Niemetz et al. | Polycystic disease of the liver; report of two cases diagnosed by peritoneoscopy | |
| Maugh | Biochemical markers: early warning signs of cancer | |
| Patton et al. | Tumors of the testis: diagnosis and treatment |