RU2143686C1 - Method and device for examining biological materials - Google Patents

Method and device for examining biological materials Download PDF

Info

Publication number
RU2143686C1
RU2143686C1 RU98109514A RU98109514A RU2143686C1 RU 2143686 C1 RU2143686 C1 RU 2143686C1 RU 98109514 A RU98109514 A RU 98109514A RU 98109514 A RU98109514 A RU 98109514A RU 2143686 C1 RU2143686 C1 RU 2143686C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
smears
tape
smear
cuvette
batch
Prior art date
Application number
RU98109514A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
А.А. Гусев
Г.И. Козинец
Original Assignee
Гусев Александр Анатольевич
Козинец Геннадий Иванович
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Гусев Александр Анатольевич, Козинец Геннадий Иванович filed Critical Гусев Александр Анатольевич
Priority to RU98109514A priority Critical patent/RU2143686C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2143686C1 publication Critical patent/RU2143686C1/en

Links

Images

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves producing biological material smears, placing them in examination zone and carrying out visual examination. The biological material smears are produced by placing them on flexible transparent ribbon. Each smear begin is positioned mainly with equal step. The ribbon is wound on the feeding reel and placed into a device for delivering smears to the examination zone. The device has movable casing, means for arranging a set of smears and means transporting them. The latter is manufactured as receiving and feeding cartridges mounted to enable sets of smears placed on a ribbon to be rotatable and movable through a cell. EFFECT: enhanced performance characteristics of medical laboratory personnel labor; high quality and objectiveness examination results. 7 cl, 3 dwg

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области медицины и биологии, может быть использовано для лабораторных исследований мазков крови, биологических жидкостей и суспензий, для распознавания и измерения диагностических характеристик цитологических препаратов. Изобретение найдет применение при проведении научных работ, биофизических экспериментов. Особенно целесообразно его использование при массовых гемоцитологических анализах.
FIELD OF THE INVENTION
The invention relates to medicine and biology, can be used for laboratory studies of blood smears, biological fluids and suspensions, for recognition and measurement of diagnostic characteristics of cytological preparations. The invention will find application in scientific research, biophysical experiments. Its use in mass hemocytological analyzes is especially advisable.

Уровень техники
Известны способ и устройство распознавания и измерения диагностических характеристик цитологических препаратов по патенту РФ 2088922, C1 (Медовый и др.), 27.08.97, G 01 N 33/48, позволяющие проводить анализ биологических материалов, в частности, распознавать увеличенные изображения клеток мазка периферической крови. Способ заключается в изготовлении мазка на предметном стекле, размещении его в поле зрения микроскопа посредством манипулятора стекол, съеме телевизионного сигнала, приведении его в цифровую форму и обработке цифрового изображения посредством анализатора клеточного изображения. Однако при осуществлении этого способа для анализа каждого цитологического препарата требуется установка каждого предметного стекла с использованием манипулятора, настройка фокусного расстояния оптической системы либо вручную, либо с применением сложной и дорогостоящей системы автофокусировки. Предметное стекло сложно разместить строго перпендикулярно к оптической оси объектива микроскопа. В результате при перемещении столика микроскопа изменяется расстояние от поверхности стекла до объектива и возникает необходимость настройки оптической системы от образца к образцу.
State of the art
A known method and device for the recognition and measurement of diagnostic characteristics of cytological preparations according to the patent of the Russian Federation 2088922, C1 (Honey et al.), 08/27/97, G 01 N 33/48, allowing the analysis of biological materials, in particular, to recognize enlarged images of peripheral smear cells blood. The method consists in making a smear on a glass slide, placing it in the field of view of the microscope using a glass manipulator, removing a television signal, digitizing it and processing a digital image using a cell image analyzer. However, when implementing this method, the analysis of each cytological preparation requires the installation of each slide using a manipulator, adjusting the focal length of the optical system either manually or using a complex and expensive autofocus system. A glass slide is difficult to place strictly perpendicular to the optical axis of the microscope objective. As a result, when moving the microscope stage, the distance from the glass surface to the lens changes and it becomes necessary to adjust the optical system from sample to sample.

Наиболее близким аналогом является способ по патенту США 4887892, A (BACUS), 19.12.89, G 02 B 21/08, который позволяет проводить анализ мазков крови визуально, получать изображения исследуемого биологического материала с помощью телевизионной камеры, анализировать и запоминать результаты анализа с помощью компьютерной системы. Мазок исследуемого материала согласно способу наносится на предметное стекло, которое затем устанавливается вручную или с помощью манипулятора на устройство для подачи мазков в зону исследований на оптически прозрачную платформу. С противоположной стороны (под платформой) размещена система формирования светового луча, включающая источник света, регулируемую ирисовую диафрагму и систему линз. Проба на предметном стекле освещается, свет попадает в линзу объектива микроскопа, затем через призму поступает на телевизионную камеру или на светочувствительный датчик, а также к окулярам микроскопа. Увеличенное изображение образца таким образом можно наблюдать визуально, преобразовать в аналоговый электрический сигнал на выходе датчика и получить и записать телевизионную картину. Аналоговый сигнал с датчика преобразуется в цифровой и отражает в этой форме количественные характеристики гемоглобина или иных составляющих исследуемого образца. Этот известный способ также не позволяет провести полную автоматизацию аналитического процесса. Требуется замена предметных стекол, настройка и фокусировка оптического оборудования и телевизионной системы. Поэтому анализ большого числа образцов с его использованием требует больших временных затрат, при этом затруднительно отрегулировать положение предметного стекла с целью обеспечения ортогональности оптической оси микроскопа к его поверхности. The closest analogue is the method according to US patent 4887892, A (BACUS), 12.19.89, G 02 B 21/08, which allows the analysis of blood smears visually, to obtain images of the biological material under investigation using a television camera, to analyze and memorize the results of analysis with using a computer system. A smear of the test material according to the method is applied to a glass slide, which is then installed manually or with the help of a manipulator on a device for feeding smears into the research area on an optically transparent platform. On the opposite side (under the platform) there is a system for generating a light beam, including a light source, an adjustable iris and a lens system. The sample on the slide is illuminated, the light enters the lens of the microscope objective, and then through the prism it enters the television camera or photosensitive sensor, as well as the eyepieces of the microscope. An enlarged image of the sample in this way can be observed visually, converted into an analog electrical signal at the output of the sensor and receive and record a television picture. The analog signal from the sensor is converted to digital and reflects in this form the quantitative characteristics of hemoglobin or other components of the test sample. This known method also does not allow for the complete automation of the analytical process. It requires the replacement of slides, the adjustment and focusing of optical equipment and a television system. Therefore, the analysis of a large number of samples with its use requires a lot of time, and it is difficult to adjust the position of the slide in order to ensure the orthogonality of the optical axis of the microscope to its surface.

В части устройства в качестве ближайшего аналога можно принять устройство для транспортировки партии мазков, используемое в микроскопе по патенту США 4836667, (Ozeki), 06.06.89, G 02 B 21/26. Это устройство содержит прозрачное подвижное основание, средство для размещения партии мазков и средство для перемещения партии мазков. Однако это устройство не может быть использовано в автоматическом режиме, требует ручного перемещения предметных стекол с мазками, с его помощью нельзя обрабатывать мазки, нанесенные на ленту, оно требует перемещения в поперечном направлении и дополнительной фокусировки оптической системы. Производительность клеточного анализа с его помощью низка, а точность проведения анализа невысокая. In the part of the device as the closest analogue, you can take the device for transporting a batch of smears used in the microscope according to US patent 4836667, (Ozeki), 06.06.89, G 02 B 21/26. This device contains a transparent movable base, means for placing a batch of smears and means for moving a batch of smears. However, this device cannot be used in automatic mode, it requires manual movement of glass slides with smears, it cannot be used to process smears applied to the tape, it requires moving in the transverse direction and additional focusing of the optical system. The productivity of cell analysis with its help is low, and the accuracy of the analysis is low.

Сущность изобретения
Настоящее изобретение решает задачу создания высокопроизводительного способа анализа биологических материалов, позволяющего провести автоматизацию процесса исследования с одновременным повышением объективности и точности анализа.
SUMMARY OF THE INVENTION
The present invention solves the problem of creating a high-performance method for the analysis of biological materials, allowing automation of the research process while increasing the objectivity and accuracy of the analysis.

Технический результат заключается в повышении производительности труда врача-лаборанта при одновременном повышении качества и объективности лабораторного исследования цитологических препаратов. The technical result consists in increasing the productivity of a laboratory doctor while improving the quality and objectivity of a laboratory study of cytological preparations.

Дополнительный технический результат заключается в повышении надежности и экономичности анализа большого числа мазков (100 - 200 и более). An additional technical result is to increase the reliability and efficiency of the analysis of a large number of strokes (100 - 200 or more).

Дополнительный технический результат состоит в том, что устраняется необходимость иметь дорогостоящую систему автофокусировки, поскольку конструкция устройства транспортировки мазков обеспечивает прохождение пленки строго на глубине фокусного расстояния от объектива. An additional technical result is that the need to have an expensive autofocus system is eliminated, since the design of the smear transport device allows the film to pass exactly at the depth of the focal length from the lens.

Технический результат достигается за счет того, что в способе исследования биологических материалов, заключающемся в изготовлении мазков биологического материала, размещении их в зоне исследования и осуществлении клеточного анализа, мазки биологических материалов изготавливают путем нанесения на гибкую прозрачную ленту, начало каждого последующего мазка осуществляют преимущественно через равные интервалы от начала предыдущего, наматывают ленту на подающую кассету, размещают на устройстве для транспортировки мазков в зону исследований и осуществляют последовательную подачу мазков в зону исследований, при этом в пределах одного мазка осуществляют медленную подачу ленты для поиска характерного цитологического изображения. The technical result is achieved due to the fact that in the method for the study of biological materials, which consists in making smears of biological material, placing them in the study area and performing cell analysis, smears of biological materials are made by applying to a flexible transparent tape, the beginning of each subsequent smear is carried out mainly through equal the intervals from the beginning of the previous one, wrap the tape on the feeding cassette, place it on the device for transporting smears into the area of research REPRESENTATIONS performed successively feeding strokes in research zone, wherein within one stroke is performed a slow feed belt for searching the characteristic cytological image.

В качестве ленты используют лавсановую пленку. As a tape, use mylar film.

В качестве ленты используют ацетилцеллюлозную пленку. As the tape using cellulose acetate film.

Для подачи ленты в поле зрения микроскопа используют шаговый двигатель. A stepper motor is used to feed the tape into the field of view of the microscope.

Осуществляют медленную подачу ленты в пределах одного мазка в области, отстоящей от его начала на 2/3 - 3/4 длины мазка. Perform a slow feed of the tape within the same smear in the area separated from its beginning by 2/3 - 3/4 of the length of the smear.

Устройство для транспортировки партии мазков биологических материалов в зону исследований, содержит подвижный корпус, размещенные на нем средства для размещения партии мазков и средства для перемещения партии мазков, корпус в нем снабжен крышкой, к которой подпружинены прижимные валики, а средства перемещения партии мазков выполнены в виде двух подающей и приемной кассет, установленных на валах с возможностью синхронного вращения и перемещения ленты с нанесенной на ней партией мазков через кювету, установленную в сквозном отверстии корпуса и заполненную иммерсионным маслом, при этом дно кюветы выполнено из оптически прозрачного материала, на выходе кюветы со стороны приемной кассеты размещен валик для отжима иммерсионного масла, прижимные валики установлены с возможностью контакта с кюветой и прижима к нему ленты с мазками. A device for transporting a batch of smears of biological materials to the research area, contains a movable housing, means placed on it for hosting a batch of smears and means for moving a batch of smears, the housing therein is provided with a cover to which pressure rollers are spring loaded, and the means for moving the batch of smears are made in the form two feed and receiving cassettes mounted on the shafts with the possibility of synchronous rotation and movement of the tape with a batch of smears applied on it through a cuvette installed in the through hole to rpusa and filled with immersion oil, wherein the bottom of the cuvette is made of an optically transparent material, at the outlet of the cell by receiving the cassette for pressing the roller placed immersion oil, the pinch rollers are mounted for contact with the cuvette and pressing thereto tape strokes.

В устройстве корпус снабжен зажимами для крепления его к предметному столику микроскопа. In the device, the housing is equipped with clamps for attaching it to the microscope stage.

Перечень фигур чертежей
Сущность изобретения поясняется чертежами, где на фиг. 1 изображена схема системы, реализующей заявленный способ, на фиг. 2 - устройство для транспортировки мазков в зону исследований.
List of drawings
The invention is illustrated by drawings, where in FIG. 1 shows a diagram of a system that implements the claimed method, FIG. 2 - a device for transporting smears in the research area.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения
Устройство для транспортировки мазков включает в себя корпус 1, имеющий зажимы 2 для крепления на предметном столике 3 микроскопа, разъемную откидную или съемную крышку (крышки) 4, состоящую, например, из двух половин с закрепленными на них подпружиненными прижимными валиками 5 и валиком 6 отжима иммерсионного масла 7, кювету 8 для иммерсионного масла 7 с дном из оптически прозрачного материала, валы 9 для кассет 10 и 11 - приемной и подающей, располагающихся в соответствующих гнездах, моторы 12, 13 быстрой и шаговой перемотки ленты 14, систему управления 15 перемоткой и соответствующее программное обеспечение.
Information confirming the possibility of carrying out the invention
The smear transporting device includes a housing 1 having clamps 2 for mounting on a microscope stage 3, a detachable hinged or removable cover (s) 4, consisting, for example, of two halves with spring-loaded pinch rollers 5 fixed to them and an extraction roller 6 immersion oil 7, a cuvette 8 for immersion oil 7 with a bottom made of optically transparent material, shafts 9 for cassettes 10 and 11 - receiving and feeding, located in the respective sockets, motors 12, 13 of fast and step rewinding of the tape 14, the control system Ia 15 rewind and software.

Материал дна кюветы 16, пленки 14 и иммерсионное масло 7 подбирают таким образом, чтобы они имели максимально близкий (желательно равный) коэффициент преломления, например, п = 1,518. Все части устройства и пленка изготавливаются из материала, устойчивого к действию иммерсионного масла соответствующего вида. Для большинства масел этим требованиям отвечают металлы, силиконовая резина, ацетилцеллюлоза и целый ряд других видов пластмасс. Кроме того, желательно использование сортов масел с невысокой вязкостью. The bottom material of the cuvette 16, the film 14, and the immersion oil 7 are selected so that they have the closest (preferably equal) refractive index, for example, n = 1.518. All parts of the device and the film are made of a material resistant to the action of immersion oil of the corresponding type. For most oils, metals, silicone rubber, cellulose acetate and a number of other types of plastics meet these requirements. In addition, the use of low viscosity oils is desirable.

Устройство устанавливается и закрепляется на предметном столике 3 микроскопа при поднятом вверх объективе 17. Открываются боковые крышки 4 устройства, в кювету 16 заливается необходимое количество (до метки) иммерсионного масла 7. В соответствующее гнездо вставляется подающая кассета 10 с пленкой 14. Начальный участок пленки 14, не содержащий мазков, вытягивается из кассеты 10, протягивается над кюветой 16 и закрепляется в приемной кассете 11. Закрываются боковые крышки 4, при этом прижимные валики 5 опускаются в кювету 16 и прижимают пленку 14 к ее дну. Пленку 14 перематывают до появления под объективом 17 первого мазка. Опускают объектив 17, погружают его в иммерсионное масло 7 и фокусируют изображение. Включают автоматическую перемотку пленки 14 в соответствии с заданной программой. The device is mounted and fixed on the microscope stage 3 with the lens 17 raised up. The side covers 4 of the device are opened, the required amount (up to the mark) of immersion oil 7 is poured into the cuvette 16. The feed cartridge 10 with film 14 is inserted into the corresponding slot. The initial portion of the film 14 , not containing smears, is pulled out of the cassette 10, stretched over the cuvette 16 and fixed in the receiving cassette 11. The side covers 4 are closed, while the pressure rollers 5 are lowered into the cuvette 16 and press the film 14 to its bottom at. The film 14 is rewound until the first smear appears under the lens 17. Lower the lens 17, immerse it in immersion oil 7 and focus the image. Turn on automatic rewinding of the film 14 in accordance with a given program.

Пленка 14 протягивается через кювету 16 с заданной в зависимости от потребностей исследования скоростью (обычно 0,1 - 2,5 мм/сек). При этом происходит ее смачивание иммерсионным маслом 7 с обоих сторон. В результате между прозрачным дном кюветы 16, пленкой 14 и объективом 17 создается оптически однородная среда с заданным коэффициентом преломления, что обеспечивает высокую разрешающую способность и светосилу оптической системы 18. Кроме того, благодаря адгезивным явлениям пленка 14 в процессе движения прилегает к дну кюветы 16, сохраняется постоянным ее расстояние до объектива 17. После прохождения кюветы 16 пленка 14 проходит через валики 6 для отжима иммерсионного масла 7 и использованное масло стекает обратно в кювету 16, благодаря чему достигается его экономичное использование. Затем пленка 14 наматывается на приемную кассету 11, и при необходимости возможен ее повторный анализ. Если необходимо длительное хранение анализированного материала, пленку извлекают из приемной кассеты, осторожно протирают от остатков иммерсионного масла и подсушивают на воздухе в защищенном от пыли месте в течение 1 - 2 часов, после чего сворачивают обратно в кассету. The film 14 is stretched through the cuvette 16 with a given speed depending on the needs of the study (usually 0.1 - 2.5 mm / s). When this occurs, it is wetted with immersion oil 7 on both sides. As a result, an optically homogeneous medium with a given refractive index is created between the transparent bottom of the cuvette 16, the film 14, and the lens 17, which provides high resolution and aperture ratio of the optical system 18. In addition, due to adhesive phenomena, the film 14 adheres to the bottom of the cuvette 16 during movement, its distance to the lens 17 remains constant. After passing through the cell 16, the film 14 passes through the rollers 6 to squeeze out the immersion oil 7 and the used oil flows back into the cell 16, due to which it reaches Its economical use is provided. Then the film 14 is wound on the receiving cassette 11, and if necessary, its re-analysis is possible. If long-term storage of the analyzed material is necessary, the film is removed from the receiving cassette, carefully wiped off the remnants of immersion oil and dried in air in a place protected from dust for 1 to 2 hours, and then rolled back into the cassette.

Возможны разнообразные режимы работы устройства в зависимости от анализируемого цитологического материала (мазки крови, красного костного мозга, спинномозговой жидкости и др.), задач исследования используемой компьютерной техники и программного обеспечения. В качестве примера приведем режим работы, целесообразный при анализе мазка крови с целью подсчета лейкоцитарной формулы. Мазки изготавливаются на пенке таким образом, чтобы расстояние от начала одного мазка до начала другого сохранялось строго постоянным, и мазки были разделены промежутками чистой пленки. Первый мазок выставляется в поле зрения микроскопа вручную, как это было описано выше. Затем осуществляется покадровая подача пленки с помощью шагового двигателя 12 на расстояние, соответствующее размерам поля зрения телекамеры (обычно 30 - 100 мкм при использовании объектива 100x), т.е. сканирование мазка. При этом осуществляется оцифровка и ввод в компьютер изображения каждого кадра, компьютерный анализ изображения с опознаванием различных типов клеток (нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, лейкоцитов, моноцитов и др.) и подсчет количества как каждого вида клеток, так и их суммарного числа. После обнаружения заданного количества клеток (100 лейкоцитов при различных гемоцитологических исследованиях, 200 - 500 или более при необходимости повышенной точности анализа), рассчитывается процентное количество выявленных видов лейкоцитов и информация о пациенте записывается в память либо выводится на печать. Сканирование данного мазка прекращается и осуществляется быстрая перемотка ленты на расстояние, соответствующее началу следующего мазка, зафиксированное в памяти компьютера. Затем начинается анализ следующего мазка. Перед началом каждого мазка могут быть нанесены специальные метки, несущие информацию о пациенте (его номер, фамилию, диагноз и т.д.). Такие метки могут быть считаны анализатором изображения и введены в память компьютера. В качестве меток могут опознаваться и не содержащие клеток участки чистой пленки между соседними мазками. Кроме того, может быть предусмотрен выбор оптимального участка внутри мазка. Так, для мазков крови оптимальным при подсчете лейкоцитарной формулы обычно является участок, начинающийся на расстоянии 2 - 3 мм от конца мазка (от так называемой щеточки) и продолжающийся на 7 - 15 мм в глубь мазка. Наиболее информативная область мазка лежит в пределах от 2/3 - 3/4 от начала мазка и практически до его конца. There are various modes of operation of the device depending on the analyzed cytological material (blood smears, red bone marrow, cerebrospinal fluid, etc.), the tasks of studying the used computer equipment and software. As an example, we will cite the mode of operation that is appropriate in the analysis of a blood smear in order to count the leukocyte formula. Smears are made on foam so that the distance from the beginning of one smear to the beginning of another is kept strictly constant, and the strokes are separated by gaps in a clean film. The first smear is set in the field of view of the microscope manually, as described above. Then, the film is fed frame-by-frame using a stepper motor 12 at a distance corresponding to the dimensions of the field of view of the camera (usually 30 - 100 microns when using a 100x lens), i.e. smear scan. At the same time, the image of each frame is digitized and input into the computer, the computer analyzes the image with recognition of various types of cells (neutrophils, eosinophils, basophils, leukocytes, monocytes, etc.) and counts the number of each type of cell and their total number. After detecting a given number of cells (100 leukocytes in various hemocytological studies, 200 - 500 or more, if necessary, increased accuracy of the analysis), the percentage of detected types of leukocytes is calculated and information about the patient is recorded in memory or printed out. Scanning of this smear stops and the tape is quickly rewound to a distance corresponding to the beginning of the next smear, recorded in the computer's memory. Then the analysis of the next smear begins. Before the start of each smear, special marks can be applied that carry information about the patient (his number, surname, diagnosis, etc.). Such marks can be read by the image analyzer and entered into the computer memory. As labels, cell-free sections of a clean film between adjacent smears can also be recognized. In addition, the selection of the optimal area within the smear may be provided. So, for blood smears, the optimum when calculating the leukocyte formula is usually the area starting at a distance of 2–3 mm from the end of the smear (from the so-called brush) and continuing at 7–15 mm deep into the smear. The most informative area of the smear ranges from 2/3 - 3/4 from the beginning of the smear and almost to its end.

При стандартизированном изготовлении мазков с их фиксированными размерами этот участок может определяться автоматически, смещением на фиксированное расстояние от начала мазка, например, смещением на 40 мм от начала мазка при длине мазков 50 мм. Если мазки недостаточно стандартизированы по длине вследствие различной вязкости крови у пациентов и других причин, выбор оптимального участка скрининга может осуществляться следующим образом. После автоматического обнаружения начала мазка, как это было описано выше, происходит быстрая перемотка пленки до конца мазка, который опознается компьютером по исчезновению клеток крови и появлению чистой пленки. После этого осуществляется обратная перемотка пленки на расстоянии 2 - 3 мм, и в этом же направлении производится скрининг мазка на глубину 10 - 15 мм. После окончания скрининга пленка автоматически перематывается к началу следующего мазка и цикл повторяется. Наконец возможен автоматический выбор оптимального участка мазка по плотности расположения эритроцитов, по интенсивности окраски мазка, по средним размерам клеточных элементов и другим признакам. In the standardized manufacture of smears with their fixed sizes, this area can be determined automatically by shifting by a fixed distance from the beginning of the smear, for example, by shifting 40 mm from the beginning of the smear with the length of the strokes 50 mm. If smears are not sufficiently standardized in length due to different blood viscosity in patients and other reasons, the selection of the optimal screening site can be carried out as follows. After automatic detection of the beginning of the smear, as described above, the film is quickly rewound to the end of the smear, which is recognized by the computer by the disappearance of blood cells and the appearance of a clean film. After that, the film is rewound at a distance of 2–3 mm, and smear is screened in the same direction to a depth of 10–15 mm. After the screening is completed, the film is automatically rewound to the beginning of the next smear and the cycle repeats. Finally, it is possible to automatically select the optimal area of the smear according to the density of the location of red blood cells, the intensity of the color of the smear, the average size of cellular elements and other signs.

Наиболее рационально использование устройства с движением пленки лишь по одной координате - длине. Это вполне возможно при анализе мазков крови, костного мозга и других биологических жидкостей, изготовленных общепринятыми методами. В этих условиях целесообразно делать более длинные и узкие мазки - шириной 5 - 10 мм и длиной 70 - 100 мм. Если необходимо движение и по двум координатам - длине и ширине, описанное устройство должно быть дополнено системой перемещения пленки по второй координате, аналогичной той, которая используется в устройстве - ближайшем аналоге. Однако это приведет к усложнению устройства. Кроме того, при установке устройства на предметном столике 3 необходимо добиться строго перпендикулярного расположения поперечной оси дна кюветы 16 и оптической оси объектива 17. Это может быть достигнуто путем оснащения устройства специальными микрометрическими винтами, регулирующими высоту расположения устройства на предметном столике микроскопа. В противном случае при перемещении пленки 14 по ширине будет изменяться расстояние от пленки до объектива 17, и возникнет необходимость в системе автофокусировки. The most rational use of the device with the movement of the film in only one coordinate - the length. This is quite possible in the analysis of blood smears, bone marrow and other biological fluids made by conventional methods. Under these conditions, it is advisable to make longer and narrower strokes - 5-10 mm wide and 70-100 mm long. If movement is required in two coordinates - length and width, the described device should be supplemented with a system for moving the film along a second coordinate, similar to that used in the device - the closest analogue. However, this will complicate the device. In addition, when installing the device on the stage 3, it is necessary to achieve a strictly perpendicular arrangement of the transverse axis of the bottom of the cuvette 16 and the optical axis of the lens 17. This can be achieved by equipping the device with special micrometric screws that adjust the height of the device on the microscope stage. Otherwise, when moving the film 14 in width, the distance from the film to the lens 17 will change, and there will be a need for an autofocus system.

Способ осуществляют с помощью устройства для транспортировки мазков следующим образом. Пробу крови или иной биологической жидкости наносят на лавсановую пленку 14, ацетилцеллюлозную или иную прозрачную ленту последовательными мазками через равные интервалы. Предварительно выбирают длину "кадра", размечают ленту на кадры с помощью красителя. Мазки начинают строго от начала кадра. После высыхания мазков ленту 14 наматывают на подающую кассету 10 устройства для транспортировки мазков в зону исследований. Свободный конец ленты 14 протягивают под прижимными валиками 5, проводят через направляющие валики и кювету 16 с иммерсионным маслом 7 и закрепляют на приемной части механизма - кассете 11. Приемная и подающая кассеты 10 и 11 съемно размещены на валах 9, синхронно перемещаемых двигателем 12, 13 или ручным механизмом, и подают ленту 14 в зону исследований. Включают источник 20 света, размещенный с противоположной объективу 17 оптической системы 18 стороны, объектив 17 устанавливают на фиксированном расстоянии от ленты 14, настраивают и производят фокусировку однократно, обеспечивая таким образом оптимальное изображение мазка. Включают автоматическую покадровую подачу ленты 14, подачу осуществляет шаговый двигатель 12 с заданным временным интервалом. В зону оптической видимости объектива 17 подают отрезки ленты 14 с нанесенными на нее мазками крови. Интенсивность освещения поля, в котором находится образец, регулируют изменением раскрытия ирисовой диафрагмы, производят фокусировку системы 21 формирования светового луча. Изображение пробы исследуемо гемоцитологического материала наблюдают визуально через окуляры 22 микроскопа, подают на телевизионную камеру 23, с помощью которой можно записать видеоизображение, и на светочувствительный датчик 24. Датчик 24 генерирует электрический аналоговый сигнал, пропорциональный количественным характеристикам исследуемой пробы (например, количеству гемоглобина крови). На дисплее 25 наблюдают укрупненное изображение образца, на экране 26 отображаются результаты анализа. Можно получить распечатку результатов анализа с помощью принтера 27. Компьютер системы управления 15 управляет ходом аналитического процесса, подает команды на включение шагового двигателя 12 и подачу пленки с нанесенной на нее пробой в пределах одного кадра, запоминает результаты анализа каждой пробы. Для повышения разрешающей способности устройства предусмотрена система подачи иммерсионного масла. Она выполнена в виде кюветы 16, в которую залито масло и в котором размещены прижимные валики 5, лента 14 при вращении кассеты 10 смачивается маслом и, проходя по кювете 16 прилипает к ней, воздушный зазор между кюветой 16, объективом 17 и лентой 14 устраняется. The method is carried out using a device for transporting smears as follows. A sample of blood or other biological fluid is applied to the mylar 14, cellulose acetate or other transparent tape in successive strokes at regular intervals. Pre-select the length of the "frame", mark the tape into frames using dye. Smears start strictly from the beginning of the frame. After the smears have dried, the tape 14 is wound on the supply cassette 10 of the device for transporting smears into the research area. The free end of the tape 14 is pulled under the pinch rollers 5, passed through the guide rollers and the cuvette 16 with immersion oil 7 and fixed on the receiving part of the mechanism - the cartridge 11. The receiving and feeding cassettes 10 and 11 are removably placed on the shafts 9, synchronously moved by the engine 12, 13 or a manual mechanism, and feed the tape 14 into the research area. The light source 20 is turned on, placed on the opposite side of the lens 17 of the optical system 18, the lens 17 is mounted at a fixed distance from the tape 14, set up and focus once, thus providing an optimal smear image. Turn on the automatic frame-by-frame feed of the tape 14, the feed is carried out by a stepper motor 12 with a predetermined time interval. In the optical visibility zone of the lens 17 serves segments of the tape 14 with blood smears applied to it. The intensity of illumination of the field in which the sample is located is controlled by changing the opening of the iris diaphragm, and the system 21 for generating the light beam is focused. The image of the sample of the studied hemocytological material is observed visually through the eyepieces 22 of the microscope, fed to a television camera 23, with which you can record a video image, and to the photosensitive sensor 24. The sensor 24 generates an electrical analog signal proportional to the quantitative characteristics of the sample (for example, the amount of hemoglobin in the blood) . An enlarged image of the sample is observed on the display 25, and the analysis results are displayed on the screen 26. You can get a printout of the results of the analysis using the printer 27. The control system computer 15 controls the progress of the analytical process, gives commands to turn on the stepper motor 12 and feed the film with the sample deposited on it within one frame, remembers the results of the analysis of each sample. To increase the resolution of the device, an immersion oil supply system is provided. It is made in the form of a cuvette 16, in which oil is poured and in which the pressure rollers 5 are placed, the tape 14 is moistened with oil when the cassette 10 is rotated, and adheres to it passing through the cuvette 16, the air gap between the cuvette 16, the lens 17 and the tape 14 is eliminated.

Программы анализа изображения для различных биологических жидкостей заложены в компьютер и выбираются в зависимости от типа жидкости и исследуемой ее характеристики. Заявленным способом проводят исследования мазков крови, спинномозговой жидкости: 1) подсчитывается количество эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов на единицу площади мазка, 2) измеряется площадь эритроцитов, их оптическая плотность, площадь и оптическая плотность пеллора (углубления) эритроцитов, анализируется форма эритроцитов, 3) подсчитывается процентный состав различных типов лейкоцитов, 4) для каждого типа лейкоцитов определяется площадь клетки, площадь ядра, их оптическая плотность и цветность, ядерно-цитоплазматический индекс, количество гранул в цитоплазме и интенсивность их окраски, 5) определяется количество патологически измененных лейкоцитов. При исследовании спинномозговой жидкости: 1) подсчитывают количество и процентное соотношение лимфоцитов, липофагов, нейтрофилов, эозинофилов, эпителиальных клеток, опухолевых клеток; 2) определяют площади ядер цитоплазмы перечисленных типов клеток, их ядерно-цитоплазматический индекс, интенсивность и цветность окраски. Кроме того, заявленный способ применим для исследований мочи, мокроты, мазков экссудатов и транссудатов. При этом время проведения анализа целого ряда последовательных изображений мазков значительно сокращается. Особую актуальность и применимость способ будет иметь при проведении массовых обследований населения, когда число исследуемых проб велико и необходимо обеспечить высокую точность и объективность анализа. Image analysis programs for various biological fluids are embedded in a computer and are selected depending on the type of fluid and its characteristics studied. The claimed method conducts the study of blood smears, cerebrospinal fluid: 1) the number of red blood cells, platelets, white blood cells per unit area of the smear is calculated, 2) the area of red blood cells, their optical density, the area and optical density of the pellor (deepening) of red blood cells are measured, the shape of red blood cells is analyzed, 3) the percentage composition of various types of leukocytes is calculated; 4) for each type of leukocytes, the cell area, nucleus area, their optical density and color, nuclear cytoplasmic index, the number of granules in the cytoplasm and the intensity of their color, 5) the number of pathologically altered leukocytes is determined. In the study of cerebrospinal fluid: 1) count the number and percentage of lymphocytes, lipophages, neutrophils, eosinophils, epithelial cells, tumor cells; 2) determine the area of the nuclei of the cytoplasm of the listed cell types, their nuclear cytoplasmic index, the intensity and color of the color. In addition, the claimed method is applicable for studies of urine, sputum, smears of exudates and transudates. At the same time, the analysis time for a number of consecutive smear images is significantly reduced. Of particular relevance and applicability, the method will have when conducting mass surveys of the population, when the number of samples studied is large and it is necessary to ensure high accuracy and objectivity of the analysis.

Источники информации
1. RU 2088922, C1 (Медовый и др.), G 01 N 33/48, 27.08.97.
Sources of information
1. RU 2088922, C1 (Honey et al.), G 01 N 33/48, 08.27.97.

2. US 4887892, A (BACUS), G 02 B 21/08, 19.12.89. 2. US 4887892, A (BACUS), G 02 B 21/08, 12.19.89.

3. US 5546323, A (BACUS), G 02 N 1/02, 13.08.96. 3. US 5546323, A (BACUS), G 02 N 1/02, 08/13/96.

4. США 4836667, /Ozeki/, 06.06.89н 4.US 4836667, / Ozeki /, 06.06.89n

Claims (7)

1. Способ исследования биологических материалов, заключающийся в изготовлении мазков биологического материала, размещении их в зоне исследования и осуществлении клеточного анализа, отличающийся тем, что мазки биологических материалов изготавливают путем нанесения на гибкую прозрачную ленту, каждый последующий мазок начинают преимущественно через равный интервал от начала предыдущего, наматывают ленту на подающую катушку, размещают на устройстве для транспортировки мазков в зону исследований и осуществляют последовательную подачу мазков в зону исследований, при этом в пределах одного мазка осуществляют медленную подачу ленты для поиска характерного цитологического изображения. 1. A method for the study of biological materials, which consists in making smears of biological material, placing them in the study area and performing cell analysis, characterized in that smears of biological materials are made by applying to a flexible transparent tape, each subsequent smear begins mainly at an equal interval from the beginning of the previous , wrap the tape on the feed reel, place it on the device for transporting smears into the research area and carry out sequential feeding azkov in research zone, wherein within one stroke is performed a slow feed belt for searching the characteristic cytological image. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве ленты используют ацетилцеллюлозную пленку. 2. The method according to p. 1, characterized in that as the tape using cellulose acetate film. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве ленты используют лавсановую пленку. 3. The method according to claim 1, characterized in that the polyester film is used as a tape. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что подачу ленты в зону исследований осуществляют с помощью шагового двигателя. 4. The method according to claim 1, characterized in that the supply of the tape to the research area is carried out using a stepper motor. 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что медленную подачу ленты с мазками крови осуществляют в области, отстоящей от начала мазка на 2/3 - 3/4 его длины. 5. The method according to claim 1, characterized in that the slow feed of the tape with blood smears is carried out in the area spaced from the beginning of the smear by 2/3 - 3/4 of its length. 6. Устройство для транспортировки партии мазков биологических материалов в зону исследований, содержащее подвижный корпус, размещенные на нем средства для размещения партии мазков и средства для перемещения партии мазков, отличающееся тем, что корпус снабжен крышкой, к которой подпружинены прижимные валики, а средства перемещения партии мазков выполнены в виде двух подающей и приемной кассет, установленных на валках с возможностью синхронного вращения и перемещения ленты с нанесенной на ней партией мазков через кювету, установленную в сквозном отверстии корпуса и заполненную иммерсионным маслом, при этом дно кюветы выполнено из оптически прозрачного материала, на выходе из кюветы со стороны приемной кассеты размещен валик для отжима имперсионного масла, прижимные валики установлены с возможностью контакта с кюветой и прижима к нему ленты с мазками. 6. A device for transporting a batch of smears of biological materials to the research area, containing a movable housing, means for hosting a batch of smears and means for moving a batch of smears, characterized in that the housing is provided with a cover to which the pressure rollers are spring loaded, and means for moving the batch smears are made in the form of two feed and receiving cassettes mounted on rolls with the possibility of synchronous rotation and movement of the tape with a batch of smears applied on it through a cuvette installed in a through hole of the casing and filled with immersion oil, while the bottom of the cuvette is made of optically transparent material, at the outlet of the cuvette from the side of the receiving cassette there is a roller for squeezing the impersion oil, pinch rollers are installed with the possibility of contact with the cuvette and pressing the tape with smears to it. 7. Устройство по п.6, отличающееся тем, что корпус снабжен зажимами для крепления его к предметному столику микроскопа. 7. The device according to claim 6, characterized in that the housing is equipped with clamps for attaching it to the microscope stage.
RU98109514A 1998-05-19 1998-05-19 Method and device for examining biological materials RU2143686C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98109514A RU2143686C1 (en) 1998-05-19 1998-05-19 Method and device for examining biological materials

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98109514A RU2143686C1 (en) 1998-05-19 1998-05-19 Method and device for examining biological materials

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2143686C1 true RU2143686C1 (en) 1999-12-27

Family

ID=20206202

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU98109514A RU2143686C1 (en) 1998-05-19 1998-05-19 Method and device for examining biological materials

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2143686C1 (en)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2459573C2 (en) * 2008-04-23 2012-08-27 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Test system
CN106353158A (en) * 2016-08-29 2017-01-25 梅木精密工业(珠海)有限公司 Automatic smear machine
US9731295B2 (en) 2012-05-22 2017-08-15 Bit Group France Fluid connection device for biological analysis apparatuses, suitable fluidic component and biological analysis device equipped with same
CN109870452A (en) * 2019-03-26 2019-06-11 浙江索奥环境技术有限公司 A kind of Ecology health assessment instrument
RU2755247C1 (en) * 2018-05-28 2021-09-14 Ханчжоу Чживэй Информэйшн Текнолоджи Ко., Лтд. Method for digitising a bone marrow punctate smear

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SU 1501929 15.08.89. *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2459573C2 (en) * 2008-04-23 2012-08-27 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Test system
US9731295B2 (en) 2012-05-22 2017-08-15 Bit Group France Fluid connection device for biological analysis apparatuses, suitable fluidic component and biological analysis device equipped with same
RU2640501C2 (en) * 2012-05-22 2018-01-09 С2 Диагностик Device for fluid communication for biological analysis devices, correct component for fluid and biological analysis device equipped therewith
CN106353158A (en) * 2016-08-29 2017-01-25 梅木精密工业(珠海)有限公司 Automatic smear machine
RU2755247C1 (en) * 2018-05-28 2021-09-14 Ханчжоу Чживэй Информэйшн Текнолоджи Ко., Лтд. Method for digitising a bone marrow punctate smear
CN109870452A (en) * 2019-03-26 2019-06-11 浙江索奥环境技术有限公司 A kind of Ecology health assessment instrument

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU650433B2 (en) Process and apparatus for counting particles
US8067245B2 (en) Automated microscope for blood cell analysis
EP3244250B1 (en) Testing equipment with dual cameras
US4207554A (en) Method and apparatus for automated classification and analysis of cells
US4125828A (en) Method and apparatus for automated classification and analysis of cells
JP2019049751A (en) Fully automatic rapid microscope slide scanner
JPH06281553A (en) Method and equipment for automated calibration of biological specimen
JPH0662406A (en) Method and apparatus for automatic verification of biological sample
CN208766110U (en) Pathology multiple target point intelligent auxiliary diagnosis system
RU2143686C1 (en) Method and device for examining biological materials
Deutsch et al. Apparatus for high‐precision repetitive sequential optical measurement of living cells
Stein et al. Spectre II: General-Purpose Microscope Input for a Computer: Modular design and digital control facilitate optical measurements in biology.
DE112007001907T5 (en) Method for cell analysis
JP2001174456A (en) Device and method for subclassification of leukocyte
EP0990896B1 (en) Large area image analysing apparatus
US20230221178A1 (en) Apparatus and a method for fluorescence imaging
Bloch A method for studying the dynamics of transcapillary transfer quantitatively at the microscopic level in situ in living organs
Rogers Photometrie measurements of grain density in autoradiographs
US20110313746A1 (en) Method for preparing a processed virtual analysis plate
US6121599A (en) Device for use in the optical investigation of surfaces
US7504252B2 (en) Apparatus and methods for scanning and producing biological specimen film strips
EP0545348A1 (en) Blood cell analyzer
US5831763A (en) Holder for high resolution sample imaging
WO2020167959A1 (en) Apparatuses, systems and methods for microscope sample holders
CN218331137U (en) Portable blood cell typing counting assembly