RU2129436C1 - Adjuvants - Google Patents
Adjuvants Download PDFInfo
- Publication number
- RU2129436C1 RU2129436C1 RU97105810A RU97105810A RU2129436C1 RU 2129436 C1 RU2129436 C1 RU 2129436C1 RU 97105810 A RU97105810 A RU 97105810A RU 97105810 A RU97105810 A RU 97105810A RU 2129436 C1 RU2129436 C1 RU 2129436C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- adjuvants
- chr
- cooh
- fullerene
- amino acid
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к использованию аминокислотных и дипептидных производных фуллерена в качестве стимуляторов иммунного ответа - адъювантов, и может быть использовано в научно-исследовательской практике, а также в биологической промышленности при разработке и производстве вакцин. The invention relates to biotechnology, in particular to the use of amino acid and dipeptide derivatives of fullerene as stimulants of the immune response - adjuvants, and can be used in research practice, as well as in the biological industry in the development and production of vaccines.
Известно, что в качестве адъювантов применяются микроорганизмы, продукты их метаболизма, их суспензии в минеральных маслах (адъювант Фрейнда), гидроокись алюминия, нерастворимые неорганические соли, сапонины, а также экстракты растительного происхождения гидрофобной природы. It is known that microorganisms are used as adjuvants, their metabolic products, their suspensions in mineral oils (Freund's adjuvant), aluminum hydroxide, insoluble inorganic salts, saponins, and plant extracts of hydrophobic nature.
Однако известно также, что иммунизация с адъювантами, представляющими собой водно-масляные эмульсии и суспензии, часто приводит к нежелательным осложнениям, таким как местные инфильтрации, изъязвления и аллергические реакции [1 - 3]. However, it is also known that immunization with adjuvants, which are water-in-oil emulsions and suspensions, often leads to undesirable complications, such as local infiltrations, ulcerations, and allergic reactions [1–3].
Описано использование низкомолекулярного растворимого адъюванта, синтетического фрагмента пептидогликана из стенки микобактерий - N-ацетил-мурамил-Л-аланил-Д-изо-глутамина (МДП) [4]. The use of a low molecular weight soluble adjuvant, a synthetic fragment of peptidoglycan from the wall of mycobacteria, N-acetyl-muramyl-L-alanyl-D-iso-glutamine (MDP), has been described [4].
Использование водорастворимого адъюванта, МДП, исключает те нежелательные последствия, которые проявляются при иммунизации адъювантами на основе водно-масляных эмульсий и суспензий, однако имеет ряд недостатков иного характера, а именно наблюдается пирогенность [5] и нейрофармакологический эффект [3], стимулирующая активность проявляется лишь при относительно высоких дозах, причем для некоторых антигенов требуется ковалентное присоединение МДП к молекуле антигена. Кроме того, этот адъювант лишь заменяет бактериальный компонент в адъюванте Фрейнда, но не отменяет применение масляного компонента, и для ряда антигенов его применение неэффективно [6]. The use of a water-soluble adjuvant, MDP, eliminates the undesirable consequences that are manifested during immunization with adjuvants based on water-in-oil emulsions and suspensions, however, it has a number of other disadvantages, namely pyrogenicity [5] and neuropharmacological effect [3], stimulating activity is manifested only at relatively high doses, with some antigens requiring covalent attachment of MDP to the antigen molecule. In addition, this adjuvant only replaces the bacterial component in Freund's adjuvant, but does not cancel the use of the oil component, and its use is ineffective for a number of antigens [6].
Предлагаемое изобретение относится к использованию описанных ранее соединений, фуллереновых производных аминокислот и дипептидов общей формулы I в качестве адъювантов
C60-X,
где С60 - фуллереновое ядро;
X = NH-СHR-COOH, NH-(CH2)n-COOH,
NH-CHR-CO-NH-CHR-COOH,
где n = от 2 до 6, R - боковой радикал природной аминокислоты.The present invention relates to the use of the compounds described above, fullerene derivatives of amino acids and dipeptides of the general formula I as adjuvants
C 60 -X,
where C 60 is the fullerene core;
X = NH-CHR-COOH, NH- (CH 2 ) n -COOH,
NH-CHR-CO-NH-CHR-COOH,
where n = from 2 to 6, R is the side radical of a natural amino acid.
Производные фуллерена общей формулы I представляют собой относительно новый класс органических соединений. Иx синтезируют непосредственно присоединением остатков аминокислот или дипептидов к фуллереновому ядру [7]. Они представляют собой твердые порошкообразные вещества темно-коричневого цвета, растворимые в воде. Их биологические свойства в настоящее время широко изучаются. Derivatives of fullerene of the general formula I are a relatively new class of organic compounds. They are synthesized directly by the addition of residues of amino acids or dipeptides to the fullerene nucleus [7]. They are solid powdery substances of a dark brown color, soluble in water. Their biological properties are currently being widely studied.
Оценку адъювантных свойств соединений I осуществляют в две стадии. На 1-й стадии оценивают их антигенные свойства. Для этого получают гипериммунную сыворотку, иммунизируя кроликов и мышей препаратами различных производных фуллерена совместно с сильным адъювантом Фрейнда. Анализ сывороток проводят по стандартной методике методом ИФА. Assessment of the adjuvant properties of compounds I is carried out in two stages. At the 1st stage, their antigenic properties are evaluated. For this, hyperimmune serum is obtained by immunizing rabbits and mice with preparations of various fullerene derivatives together with Freund's strong adjuvant. Analysis of sera is carried out according to standard methods by ELISA.
На 2-й стадии определяют адъювантные свойства соединений I. Для этого одну группу мышей иммунизируют модельным антигеном - яичным альбумином (Ova), другие несколько групп - смесью Ova с различными соединениями I (Ova-I). At the 2nd stage, the adjuvant properties of compounds I are determined. For this, one group of mice is immunized with a model antigen - egg albumin (Ova), the other several groups - with a mixture of Ova with various compounds I (Ova-I).
Для выявления IgG - антител используют меченый пероксидазой анти-IgG мыши (Sigma). За титр принимается величина, обратная разведению образца, оптическая плотность (ОП) которого равна ОП образца нормальной сыворотки (перед иммунизацией), разведенного в 50 раз (ОП нормальной сыворотки ≤ 0.2, что достигается подбором условий ИФА). Эффективность адъюванта определяют как отношение титра анти-Ova-I-сыворотки к титру анти-Ova-сыворотки. To detect IgG antibodies, peroxidase-labeled mouse anti-IgG (Sigma) is used. The titer is the reciprocal of the dilution of a sample whose optical density (OD) is equal to the OD of a normal serum sample (before immunization) diluted 50 times (OD of normal serum ≤ 0.2, which is achieved by selection of ELISA conditions). Adjuvant efficacy is defined as the ratio of anti-Ova-I serum titer to anti-Ova serum titer.
Изобретение иллюстрируется нижеследующими примерами. The invention is illustrated by the following examples.
I. Определение иммуногенности. I. Determination of immunogenicity.
Получение сывороток. Getting serum.
Пример 1. Example 1
Для приготовления гипериммунной сыворотки 100 мкг препарата C60-Ser растворяют в 0.5 мл 0.05 М фосфатного буфера с pH 7.4. Первую иммунизацию проводят в полном адъюванте Фрейнда (Gibco, 1:1 об/об), последующие три иммунизации проводят в неполном адъюванте Фрейнда. Кролику породы шиншилла подкожно вводят препараты с двухнедельным интервалом. Забор крови осуществляют в те же интервалы, и полученные из крови образцы сывороток анализируют на антитела к C60-Ser иммуноферментным методом.To prepare hyperimmune serum, 100 μg of C 60 -Ser preparation is dissolved in 0.5 ml of 0.05 M phosphate buffer with a pH of 7.4. The first immunization is carried out in complete Freund's adjuvant (Gibco, 1: 1 v / v), the next three immunizations are carried out in Freund's incomplete adjuvant. Chinchilla rabbits are injected subcutaneously with a two-week interval. Blood sampling is carried out at the same intervals, and serum samples obtained from blood are analyzed for antibodies to C 60 -Ser enzyme-linked immunosorbent assay.
Пример 2. Example 2
Способ осуществляют как указано в примере 1, но в качестве антигена используют C60-Ala.The method is carried out as described in example 1, but C 60 -Ala is used as antigen.
Пример 3. Example 3
Способ осуществляют как указано в примерах 1 и 2, но в качестве антигена для получения антисыворотки используют дипептидное производное C60-Ala-Ala.The method is carried out as described in examples 1 and 2, but the dipeptide derivative of C 60 -Ala-Ala is used as the antigen to obtain antiserum.
II. Проведение иммуноферментного анализа. II. Enzyme-linked immunosorbent assay.
Для проведения ИФА производные фуллерена, указанные в примерах 1 - 3, растворяют в 60 мМ карбонат-бикарбонатном буфере (pH 9.6) и наносят на планшеты GREINER в концентрации 20 мкг/мл. После инкубации в течение 1.5 ч при 37oC планшеты отмывают от несвязавшихся компонентов фосфатно-солевым буфером (ФСБ) pH 7.4 с 0.05% твин-20. Тестируемые сыворотки, полученные соответственно по примерам 1 - 3, разводят в 50 раз раствором 0.5% бычьего сывороточного альбумина (Sigma) с 0.05% твин-20 в ФСБ и инкубируют с адсорбированными на планшете препаратами в течение 30 мин при 37oC. После инкубации планшеты 4 раза отмывают раствором ФСБ/0.05% твин-20. Раствор конъюгата анти-lgG кролика с пероксидазой (Sigma) в рабочем разведении инкубируют в лунках планшета 30 мин при 37oC и проводят аналогичную отмывку. Для выявления иммунных комплексов используют проявляющую смесь: 4 мг о-фенилендиамина/10 мл 0.1 М цитратфосфатного буфера/80 мкл 3% H2O2. Реакцию останавливают 2N H2SO4, и оптическую плотность в лунках измеряют при 492 нм, используя автоматический сканер Multiscan Plus (Flow Laboratories, Швейцария). Величину фонового поглощения (Cut off) оценивают как среднее значение величины оптической плотности для нормальных кроличьих сывороток (n=5)+3SD. Титр сывороток оценивали при двоичном разведении сывороток, первичное разведение составляло 1:50. Данные приведены в таблице 1.For ELISA, the fullerene derivatives described in Examples 1-3 are dissolved in 60 mM carbonate-bicarbonate buffer (pH 9.6) and applied to GREINER plates at a concentration of 20 μg / ml. After incubation for 1.5 hours at 37 ° C, the plates are washed from unbound components with phosphate-buffered saline (PBS) pH 7.4 with 0.05% tween-20. The test sera obtained respectively in examples 1 to 3, are diluted 50 times with a solution of 0.5% bovine serum albumin (Sigma) with 0.05% tween-20 in PBS and incubated with preparations adsorbed on the tablet for 30 min at 37 o C. After incubation the tablets are washed 4 times with a solution of FSB / 0.05% tween-20. A solution of rabbit anti-IgG conjugate with peroxidase (Sigma) in working dilution was incubated in the wells of the plate for 30 minutes at 37 ° C and a similar washing was carried out. To detect immune complexes, a developing mixture is used: 4 mg of o-phenylenediamine / 10 ml of 0.1 M citrate phosphate buffer / 80 μl of 3% H 2 O 2 . The reaction was stopped with 2N H 2 SO 4 and the absorbance in the wells was measured at 492 nm using a Multiscan Plus automated scanner (Flow Laboratories, Switzerland). The value of the background absorption (Cut off) is estimated as the average value of the optical density for normal rabbit sera (n = 5) + 3SD. Serum titer was evaluated by binary dilution of sera, primary dilution was 1:50. The data are shown in table 1.
Как показывают 4 серии иммунизаций, приведенных в таблице 1, аминокислотные и дипептидные производные фуллерена не обладают антигенными свойствами, что, вероятно, обусловлено его особой чужеродностью, т.е. резким отличием их структур от структур природных антигенов и отсутствием подходящих клонов лимфоцитов в природном репертуаре. As the 4 series of immunizations shown in Table 1 show, the amino acid and dipeptide derivatives of fullerene do not possess antigenic properties, which is probably due to its special foreignness, i.e. a sharp difference between their structures and the structures of natural antigens and the absence of suitable lymphocyte clones in the natural repertoire.
III. Определение адъювантных свойств. III. Determination of adjuvant properties.
1. Получение сывороток. 1. Getting serum.
Пример 1. Example 1
Одну группу мышей (7 животных) породы Fl (CBA/BALB/c) иммунизируют внутрибрюшинно 3-кратно через 3-недельные интервалы, вводя в каждую мышь 30 μг Ova в 0.5 мл 0.05 М фосфатного буфера с pH 7.4. One group of mice (7 animals) of Fl breed (CBA / BALB / c) was immunized intraperitoneally 3 times at 3-week intervals, injecting 30 μg of Ova into each mouse in 0.5 ml of 0.05 M phosphate buffer with pH 7.4.
Другую группу мышей (7 животных) иммунизируют аналогичным способом, однако используя на каждую мышь 10 μг Ova с 330 μг C60-Ser /соотношение 3: 100 (в/в)/.Another group of mice (7 animals) was immunized in a similar way, however, using 10 μg Ova with 330 μg C 60 -Ser / ratio of 3: 100 (w / w) / for each mouse.
Забор крови осуществляют в те же 3-недельные интервалы, и полученные из крови образцы сывороток анализируют в ИФА, как описано в п. II. Для выявления IgG-антител используют меченый пероксилазой анти-IgG мыши (Sigma). Полученные результаты приведены в таблице 2. Blood sampling is carried out at the same 3-week intervals, and serum samples obtained from blood are analyzed in ELISA, as described in paragraph II. To detect IgG antibodies, peroxylase-labeled mouse anti-IgG (Sigma) is used. The results are shown in table 2.
Пример 2. Example 2
Способ осуществляют как описано в примере III.1, но в качестве антигена используют смесь 10 μг Ova с 30 μг C60-Ala /весовое соотношение 1:3/.The method is carried out as described in example III.1, but a mixture of 10 μg Ova with 30 μg C 60 -Ala / weight ratio 1: 3 / is used as antigen.
Пример 3. Example 3
Способ осуществляют как описано в примере III.1, но в качестве антигена используют смесь 15 μг Ova с 105 μг C60-Ala-Ala /весовое соотношение 1:7/.The method is carried out as described in example III.1, but a mixture of 15 μg Ova with 105 μg C 60 -Ala-Ala / weight ratio 1: 7 / is used as antigen.
Пример 4. Example 4
Способ осуществляют как описано в примере III.1, но в качестве антигена используют смесь 10 μг Ova с 200 μг C60- ε -аминокапроновая кислота (C60-ε-Acp) /весовое соотношение 1:20/.The method is carried out as described in example III.1, but a mixture of 10 μg Ova with 200 μg C 60 - ε-aminocaproic acid (C 60 -ε-Acp) / weight ratio 1: 20 / is used as antigen.
Пример 5. Example 5
Способ осуществляют как описано в примере III.1, 2, но в качестве антигена используют смесь 20 μг Ova с 260 μг C60-Phe-Lys /соотношение 1:13/.The method is carried out as described in example III.1, 2, but a mixture of 20 μg Ova with 260 μg C 60 -Phe-Lys / ratio 1: 13 / is used as antigen.
Пример 6. Example 6
Способ осуществляют как описано в примере III.1, 2, но в качестве антигена используют смесь 20 μг Ova с 60 μг C60-Lys-Tyr /соотношение 1:3/.The method is carried out as described in example III.1, 2, but a mixture of 20 μg Ova with 60 μg C 60 -Lys-Tyr / ratio 1: 3 / is used as antigen.
Пример 7. Example 7
Способ осуществляют как описано в примере III.1, 2, но в качестве антигена используют смесь 45 μг Ova с 300 μг C60-Ala-Arg /соотношение 3:20/.The method is carried out as described in example III.1, 2, but a mixture of 45 μg Ova with 300 μg C 60 -Ala-Arg / ratio 3: 20 / is used as antigen.
Пример 8. Example 8
Способ осуществляют как описано в примере III.1, 2, но в качестве антигена используют смесь 20 μг Ova с 100 μг C60-Lys-Ala /соотношение 1:5/.The method is carried out as described in example III.1, 2, but a mixture of 20 μg Ova with 100 μg C 60 -Lys-Ala / ratio 1: 5 / is used as antigen.
Пример 9. Example 9
Способ осуществляют как описано в примерах III.1, 2, но в качестве антигена используют смесь 20 μг Ova с 120 μг C60-Ala-Thr при соотношении 1:6.The method is carried out as described in examples III.1, 2, but a mixture of 20 μg Ova with 120 μg C 60 -Ala-Thr is used as antigen in a ratio of 1: 6.
Определение токсичности. Determination of toxicity.
Эксперименты с эритроцитами человека показали, что даже в высоких дозах - 400 мкМ - они не обладают гемолитическими свойствами, клетки в процессе инкубации не агглюцинируют и их морфология не изменяется. Введение мышам высокой дозы этих соединений (80 мг/кг) не влияет на жизнеспособность и поведение мышей в течение 6 месяцев. Experiments with human erythrocytes showed that even at high doses - 400 μM - they do not have hemolytic properties, the cells do not agglutinate during the incubation process, and their morphology does not change. The administration to mice of a high dose of these compounds (80 mg / kg) does not affect the viability and behavior of mice for 6 months.
Таким образом, заявляемые в качестве адъювантов фуллереновые производные аминокислот и дипептидов, как видно из таблицы 2, хорошо стимулируют иммунный ответ на белковый антиген. Как показало тестированиеб указанные производные не обладают собственной иммуногеностью, гемолитическими свойствами, они нетоксичны при введении в высоких дозах. Thus, the fullerene derivatives of amino acids and dipeptides claimed as adjuvants, as can be seen from Table 2, well stimulate the immune response to a protein antigen. As shown by testing, these derivatives do not have their own immunogenicity, hemolytic properties, they are non-toxic when administered in high doses.
Cписок литературы
1. Иммунологические адъюванты. Доклад научной группы ВОЗ. М., 1978.References
1. Immunological adjuvants. Report of the WHO scientific team. M., 1978.
2. Murhay R., Cohen P. and Hardegree M.C.//Ann. Allergy, 1972, 30, 146. 2. Murhay R., Cohen P. and Hardegree M.C.//Ann. Allergy, 1972, 30, 146.
3. Chedid L. //Ann. Inst. Pasteur/Lmmunol., 1985, 136 D, 283 - 291. 3. Chedid L. // Ann. Inst. Pasteur / Lmmunol., 1985, 136 D, 283 - 291.
4. Merser C. , Sinay P. and Adam A.// Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975, 66, 1316 - 1322. 4. Merser C., Sinay P. and Adam A. // Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975, 66, 1316 - 1322.
5. Kotani S., Watanabe Y., Shimono T., Harada K., Shiba T., Kusumoto S., Yokogawa K, and Taniguchi M.//Biken J., 1976, 19, 9 - 13. 5. Kotani S., Watanabe Y., Shimono T., Harada K., Shiba T., Kusumoto S., Yokogawa K, and Taniguchi M. // Biken J., 1976, 19, 9-13.
6. Иванов Б.Б. Создание иммунопотенциирующих систем для пептидных экспериментальных вакцин. Канд. диссертация, 1992. 6. Ivanov B. B. Creation of immunopotentiating systems for experimental peptide vaccines. Cand. dissertation, 1992.
7. В.С.Романова, В.А.Цыряпкин, Ю.А.Ляховецкий, З.Н.Парнес, М.Е.Вольпин// Изв. РАН, сер. Xим., 1994, 1151. 7. V.S. Romanova, V.A. Tsyryapkin, Yu.A. Lyakhovetsky, Z.N. Parnes, M.E. Volpin // Izv. RAS, ser. Chem., 1994, 1151.
Claims (1)
C60-X,
где C60 - фуллереновое ядро,
X = NH - CHR - COOH, NH - (CH2)nCOOH, NH - CHR - CO - NH - CHR - COOH;
n = от 2 до 6;
R - боковой радикал природной аминокислоты,
в качестве адъювантов.The use of fullerene derivatives of amino acids and dipeptides of the General formula
C 60 -X,
where C 60 is a fullerene core,
X = NH - CHR - COOH, NH - (CH 2 ) n COOH, NH - CHR - CO - NH - CHR - COOH;
n = 2 to 6;
R is a side radical of a natural amino acid,
as adjuvants.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU97105810A RU2129436C1 (en) | 1997-04-10 | 1997-04-10 | Adjuvants |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU97105810A RU2129436C1 (en) | 1997-04-10 | 1997-04-10 | Adjuvants |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU97105810A RU97105810A (en) | 1999-04-10 |
RU2129436C1 true RU2129436C1 (en) | 1999-04-27 |
Family
ID=20191868
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU97105810A RU2129436C1 (en) | 1997-04-10 | 1997-04-10 | Adjuvants |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2129436C1 (en) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102552901A (en) * | 2010-12-24 | 2012-07-11 | 国家纳米科学中心 | Application of fullerene derivative, as well as vaccine adjuvant and vaccine preparation thereof |
RU2462474C2 (en) * | 2010-12-09 | 2012-09-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научный центр "Институт иммунологии" Федерального медико-биологического агентства | Method of producing fullerene adducts |
CN103495164A (en) * | 2010-12-24 | 2014-01-08 | 国家纳米科学中心 | Applications of fullerene derivatives, vaccine adjuvant, and vaccine preparation thereof |
RU2513098C1 (en) * | 2012-12-04 | 2014-04-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Нанолек" | Method of producing water-soluble non-agglomerative fullerene immunostimulating nanoparticle and water-soluble non-agglomerative fullerene immunostimulating nanoparticle |
-
1997
- 1997-04-10 RU RU97105810A patent/RU2129436C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Иммунологические адъюванты. Доклад научной группы. BОЗ М., 1978, с.3 и далее. Романова В.С., Цыряпкин В.А., Ляховецкий Ю.А., Парнес З.Н., Вольпин М.Е. Изв. РАН, сер.Химия, 1994, 1151. * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2462474C2 (en) * | 2010-12-09 | 2012-09-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научный центр "Институт иммунологии" Федерального медико-биологического агентства | Method of producing fullerene adducts |
CN102552901A (en) * | 2010-12-24 | 2012-07-11 | 国家纳米科学中心 | Application of fullerene derivative, as well as vaccine adjuvant and vaccine preparation thereof |
CN103495164A (en) * | 2010-12-24 | 2014-01-08 | 国家纳米科学中心 | Applications of fullerene derivatives, vaccine adjuvant, and vaccine preparation thereof |
CN102552901B (en) * | 2010-12-24 | 2014-03-12 | 国家纳米科学中心 | Application of fullerene derivative to prepare gene transmission vector |
CN103495164B (en) * | 2010-12-24 | 2015-02-04 | 国家纳米科学中心 | Applications of fullerene derivatives, vaccine adjuvant, and vaccine preparation thereof |
RU2513098C1 (en) * | 2012-12-04 | 2014-04-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Нанолек" | Method of producing water-soluble non-agglomerative fullerene immunostimulating nanoparticle and water-soluble non-agglomerative fullerene immunostimulating nanoparticle |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4550019A (en) | Manufacture and use of fowl egg antibodies | |
Chu et al. | Production and characterization of antibodies against microcystins | |
Kaattari et al. | Salmonid spleen and anterior kidney harbor populations of lymphocytes with different B cell repertoires | |
MAcLEOD et al. | The occurrence during acute infections of a protein not normally present in the blood: III. Immunological properties of the C-reactive protein and its differentiation from normal blood proteins | |
EP1630168B1 (en) | Molecular mimetics of meningococcal B peptides | |
Julius et al. | Isolation of antigen-binding cells from unprimed mice: demonstration of antibody-forming cell precursor activity and correlation between precursor and secreted antibody avidities | |
US4816253A (en) | Novel mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent | |
Schirrmacher et al. | IMMUNE RESPONSES AGAINST NATIVE AND CHEMICALLY MODIFIED ALBUMINS IN MICE: I. Analysis of Non-Thymus-Processed (B) and Thymus-Processed (T) Cell Responses against Methylated Bovine Serum Albumin | |
Harris et al. | The genesis of antibodies | |
Braun et al. | Antigenic determinants of murein lipoprotein and its exposure at the surface of Enterobacteriaceae | |
Shibata et al. | Immunological cross-reactivities of cephalothin and its related compounds with benzylpenicillin (penicillin G) | |
US4567041A (en) | Mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent | |
Rubin et al. | THE IMMUNE RESPONSE AGAINST HAPTEN-AUTOLOGOUS PROTEIN CONJUGATES IN THE MOUSE: III. Specificity of Cooperating Non-Thymus-Processed (B) and Thymus-Processed (T) Lymphocytes | |
Jones | Kinetics of antibody responses to cell wall mannan and a major cytoplasmic antigen of Candida albicans in rabbits and humans | |
FI107515B (en) | Process for preparing a liposomal immunogenic carrier for antigen | |
Dietrich | The immune response to heterologous red cells in mice | |
RU2129436C1 (en) | Adjuvants | |
Beutin et al. | Rapid visual detection of Escherichia coli and Vibrio cholerae heat-labile enterotoxins by nitrocellulose enzyme-linked immunosorbent assay | |
Nan Scott et al. | Enzyme-linked immunosorbent assays in murine cryptococcosis | |
Poskitt et al. | The appearance of non-specific antibody-forming cells in the efferent lymph draining antigen-stimulated single lymph nodes. | |
ŁUOWSKI et al. | Biological properties of lipid A from Shigella sonnei | |
US4609630A (en) | Method for improving the specificity of immunoassays | |
Barber et al. | Contributions to the study of Salmonella. Immunological specificity of proteins separated from Salmonella typhi | |
CN110927376B (en) | Magnetic immunochemistry luminescence detection kit of olaquindox and application thereof | |
Perlman et al. | STUDIES ON THE FLEXNER GROUP OF DYSENTERY BACILLI: IV. THE SEROLOGICAL AND TOXIC PROPERTIES OF THE SOMATIC ANTIGENS |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20070411 |