RU2126973C1 - Method of correcting disturbances in phosphoinositide exchange - Google Patents
Method of correcting disturbances in phosphoinositide exchange Download PDFInfo
- Publication number
- RU2126973C1 RU2126973C1 RU97116438A RU97116438A RU2126973C1 RU 2126973 C1 RU2126973 C1 RU 2126973C1 RU 97116438 A RU97116438 A RU 97116438A RU 97116438 A RU97116438 A RU 97116438A RU 2126973 C1 RU2126973 C1 RU 2126973C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- phosphoinositides
- inositol
- normal
- content
- phosphatidylinositol
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к способам коррекции нарушений фосфоинозитидного обмена при лечении связанных с ним заболеваний и может быть использовано в экспериментальной медицине. The invention relates to medicine, namely to methods for correcting disorders of the phosphoinositide metabolism in the treatment of related diseases and can be used in experimental medicine.
В последние годы интенсивно изучается роль основных компонентов биологических мембран - фосфоинозитидов - как в процессах нормального функционирования живой клетки, так и при возникновении и развитии заболеваний, сопровождающихся нарушением содержания фосфоинозитидов (Швец В.И., Степанов А. Е. , Крылова В.Н. и др. Мио-инозит и фосфоинозитиды.-М.:Наука, 1987.- 248 с.; Слюсарь Н.Н. Роль фосфоинозитидов и их метаболитов в онкогенезе: Дис. .. . докт. мед. наук. - СПб., 1993.- 286 с.; Berridge M.J. Oncogenes, inositol lipids and cellular proliferation //Biotechnol.- 1984.- V.2, N.6 - Р.541-546). Важная роль фосфоинозитидов в жизнедеятельности клеток связана с их непосредственным участием в регуляторной, транспортной, энергетической и пластической функциях биологических мембран (Швец В. И., Степанов А.Е., Крылова В.Н. и др. Мио-инозит и фосфоинозитиды.-М.:Наука, 1987.- 248 с.; Michell R.Н. Inositol phospholipids in membrane function.//Trands.Biochem.Sor. -1979. -V.4,N.6.-Р.128-131). Было доказано, что содержание фосфоинозитидов в крови отражает специфику изменений обменных процессов, происходящих в организме, поскольку установлено участие инозитсодержащих липидов в переходе клеток к неконтролируемому росту и трансформации (Berridge M.J. Inositol tryphosphate and diacylglycerole: two interacting second messengers //Annu Rev. Biochem.- 1987.- V.56.- Р.159-193; Слюсарь Н.Н. Роль фосфоинозитидов и их метаболитов в онкогенезе: Дис. ... докт.мед.наук.- СПб., 1993.- 286 с.). Было установлено, что при возникновении заболеваний, сопровождающихся развитием контролируемой и неконтролируемой пролиферацией наблюдаются количественные изменения содержания различных фосфоинозитидов и образующихся при их гидролизе вторичных мессенджеров (Дамиров М.М., Слюсарь Н.Н., Кулаков В.И. и др. Изменение фосфоинозитидного обмена в крови и ткани доброкачественных и злокачественных опухолей матки. //Акуш. и гинек.-1995. -N2.-С.39-41). Одновременно было отмечено, что происходит значительное снижение содержания одного из основных активаторов иммунокомпетентных клеток - фосфоинозитидов- у больных с доброкачественными и злокачественными заболеваниями различных локализаций по сравнению со здоровыми людьми (Слюсарь Н.Н. Изменение содержания прочносвязанных фосфоинозитидов в клетках крови и опухолевой ткани у мышей линии C57BL с карциномой Льюис и больных раком легкого//Эксперим.онкология. -1993.-Т.15.-N2.- С.51-59; Дамиров М.М., Кулаков В.И., Слюсарь Н.Н. Изменение содержания фосфоинолзитидов в форменных элементах крови и ткани эндометрия у больных с гиперпластическими процессами и раком эндометрия.// Акуш. и гинек.-1995.-N 4.-С.43-46). In recent years, the role of the main components of biological membranes - phosphoinositides - has been intensively studied both in the processes of normal functioning of a living cell and in the occurrence and development of diseases accompanied by a violation of the content of phosphoinositides (Shvets V.I., Stepanov A.E., Krylova V.N. . and others. Myo-inositol and phosphoinositides.-M.: Nauka, 1987.- 248 pp .; Slyusar N.N. Role of phosphoinositides and their metabolites in oncogenesis: Dis .... Doctor of Medical Sciences. 1993.- 286 p .; Berridge MJ Oncogenes, inositol lipids and cellular proliferation // Biotechnol.- 1984.- V.2, N.6 - P.541-546). The important role of phosphoinositides in the life of cells is associated with their direct participation in the regulatory, transport, energy and plastic functions of biological membranes (Shvets V.I., Stepanov A.E., Krylova V.N. et al. Myo-inositol and phosphoinositides .- M.: Nauka, 1987.- 248 p .; Michell R.N. Inositol phospholipids in membrane function.//Trands.Biochem.Sor. -1979. -V.4, N.6.-P.128-131) . It was proved that the content of phosphoinositides in the blood reflects the specificity of changes in metabolic processes occurring in the body, since the participation of inositol-containing lipids in the transition of cells to uncontrolled growth and transformation (Berridge MJ Inositol tryphosphate and diacylglycerole: two interacting second messengers // Annu Rev. Biochem. - 1987.- V.56.- P.159-193; Slyusar N.N. Role of phosphoinositides and their metabolites in oncogenesis: Dis .... Doctor of Medical Science - St. Petersburg, 1993.- 286 p.) . It was found that in the event of diseases accompanied by the development of controlled and uncontrolled proliferation, quantitative changes in the content of various phosphoinositides and secondary messengers formed during their hydrolysis are observed (Damirov M.M., Slyusar N.N., Kulakov V.I. et al. Change in phosphoinositide exchange in the blood and tissue of benign and malignant tumors of the uterus. // Akush. and gynec.-1995. -N2.-C.39-41). At the same time, it was noted that there is a significant decrease in the content of one of the main activators of immunocompetent cells - phosphoinositides - in patients with benign and malignant diseases of various localization compared with healthy people (Slyusar N.N. Change in the content of tightly bound phosphoinositides in blood cells and tumor tissue in mice C57BL line with Lewis carcinoma and patients with lung cancer // Experimental Oncology. -1993.-T.15.-N2.- P.51-59; Damirov M.M., Kulakov V.I., Slyusar N.N. Change in the content of phosphoino zitidov in elements of blood and endometrial tissue in patients with hyperplastic processes and endometrial cancer .// Akusha. and ginek.-1995.-N 4.-S.43-46).
Известен способ коррекции нарушений фосфоинозитидного обмена путем внутрисосудистого облучения крови с помощью гелий-неонового лазерного облучения (Дамиров М.М., Бакулева Л.П., Слюсарь Н.Н. и др. Лазерная терапия в реабилитационном послеоперационном лечении у больных внутренним эндометриозом.// Акуш. и гинек.-1996.- N.2.- С.39-43). Однако известный способ не дает возможности эффективного восстанавливать возникающие нарушения обмена фосфоинозитидов и их метаболитов, а также оказывать воздействие в течение крайне непродолжительного времени (до 3-х месяцев). There is a method of correcting disturbances in phosphoinositide metabolism by intravascular irradiation of blood using helium-neon laser irradiation (Damirov M.M., Bakuleva L.P., Slyusar N.N. et al. Laser therapy in rehabilitation postoperative treatment in patients with internal endometriosis. / / Akush. And Gynec.-1996.- N.2.- P.39-43). However, the known method does not make it possible to effectively restore the occurring metabolic disturbances of phosphoinositides and their metabolites, and also have an effect for an extremely short time (up to 3 months).
В качестве ближайшего аналога принят способ коррекции нарушений фосфоинозитидного обмена (Слюсарь Н.Н. Изменение содержания фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма в иммунокомпетентных клетках у мышей с карциномой легкого Льюис и больных раком легкого при лазерном облучении крови и введении препаратов фосфатидилинозитов.// Эксперим.онкология.- 1992.- Т.14, N.4.- С. 60-66). Способ включает проведение исследования крови больного с последующим определением содержания фосфоинозитидов, при выявленном нарушении которого в организм больного вводят лекарственный препарат липостабил, содержащий в своем составе эссенциальные фосфолипиды, в сочетании с внутривенным лазерным облучением крови с помощью гелий-неонового лазера. As the closest analogue, a method for correcting disturbances in phosphoinositide metabolism has been adopted (Slyusar N.N. Change in the content of phosphoinositides and their metabolic products in immunocompetent cells in mice with Lewis lung carcinoma and patients with lung cancer by laser irradiation of blood and administration of phosphatidylinositis preparations. // Experimental Oncology .- 1992.- T.14, N.4.- S. 60-66). The method includes conducting a blood test of a patient with subsequent determination of the content of phosphoinositides, in case of a detected violation of which the drug lipostabil containing essential phospholipids is introduced into the patient's body, in combination with intravenous laser irradiation of blood using a helium-neon laser.
Однако известный способ позволяет воздействовать лишь на отдельные фрагменты метаболизма фосфоинозитидов, не учитывая при этом многообразие различных фосфорилированных форм фосфоинозитидов и образующихся при их гидролизе вторичных мессенджеров, которые также влияют на функциональную активность клеток организма. Кроме того, недостатком указанного способа является непродолжительность его воздействия (до трех месяцев) для полного восстановления содержания фосфоинозитидов на длительный срок и невозможность определить их влияние на конкретные типы фосфоинозитидов при восстановлении метаболизма фосфоинозитидов. However, the known method allows you to affect only individual fragments of the metabolism of phosphoinositides, without taking into account the variety of different phosphorylated forms of phosphoinositides and secondary messengers formed during their hydrolysis, which also affect the functional activity of body cells. In addition, the disadvantage of this method is the short duration of its exposure (up to three months) for the complete restoration of the content of phosphoinositides for a long time and the inability to determine their effect on specific types of phosphoinositides during restoration of the metabolism of phosphoinositides.
Задачей изобретения является создание способа коррекции нарушений фосфоинозитидного обмена, позволяющего получить более выраженный и стойкий терапевтический эффект. The objective of the invention is to provide a method for correcting disorders of phosphoinositide metabolism, which allows to obtain a more pronounced and lasting therapeutic effect.
Сущность изобретения состоит в том, что в способе коррекции фосфоинозитидного обмена, включающем исследование крови больного с определением содержания фосфоинозитидов и последующее введение в его организм липидкоррегирующего активного вещества, в крови дополнительно определяют содержание инозитсодержащих вторичных мессенджеров и фосфорилированных форм фосфоинозитидов и при выявленном отклонении полученных величин от нормативных показателей в организм больного вводят внутривенно однократно суспензию липосом из расчета 20-40 мл/кг массы, содержание фосфоинозитидов в которой расcчитывают по формуле: С= 2,5 • (2 а + 4b + b1 + 3c + c1), где: C - количество фосфоинозитидов в нг, а - разница содержания фосфоинозитидов в норме и патологии, b - соотношение фосфатидилинозит-4,5-дифосфатов в норме и патологии, b1 - соотношение фосфатидилинозит-3,4-дифосфатов, фосфатидилинозит-3,4,5-трифосфатов в норме и патологии, c - соотношение инозит-1,4,5-трифосфатов в норме и патологии, c1 - соотношение инозит-1,3,4-трифосфатов, инозит-1,3,4,5-тетрафосфатов в норме и патологии. The essence of the invention lies in the fact that in the method of correction of phosphoinositide metabolism, including the study of the patient’s blood with the determination of the content of phosphoinositides and the subsequent introduction of lipid-correcting active substance into his body, the content of inositol-containing secondary messengers and phosphorylated forms of phosphoinositides is additionally determined in the blood and when the obtained values deviate from standard indicators, a suspension of liposomes is administered intravenously once a patient at the rate of 20-40 ml / kg mass, the content of phosphoinositides in which is calculated by the formula: C = 2.5 • (2 a + 4b + b1 + 3c + c1), where: C is the number of phosphoinositides in ng, and is the difference in the content of phosphoinositides in normal and pathology, b - the ratio of phosphatidylinositol-4,5-diphosphates is normal and pathological, b1 is the ratio of phosphatidylinositol-3,4-diphosphates, phosphatidylinositol-3,4,5-triphosphates is normal and pathological, c is the ratio of inositol-1,4,5-triphosphate normal and pathological, c1 is the ratio of inositol-1,3,4-triphosphates, inositol-1,3,4,5-tetraphosphates are normal and pathological.
Использование изобретения позволяет получить следующий технический результат. Using the invention allows to obtain the following technical result.
Способ позволяет значительно повысить терапевтический эффект при лечении заболеваний, сопровождающихся нарушением фосфоинозитидного обмена, снизить частоту неудовлетворительных результатов лечения. The method can significantly increase the therapeutic effect in the treatment of diseases accompanied by impaired phosphoinositide metabolism, reduce the frequency of unsatisfactory treatment results.
Полученный терапевтический эффект является более стойким, так как использование способа дает возможность на длительный срок (до 6 месяцев) восстанавливать содержание фосфоинозитидов в крови. The resulting therapeutic effect is more persistent, since the use of the method makes it possible for a long time (up to 6 months) to restore the content of phosphoinositides in the blood.
Высокая эффективность способа обусловлена тем, что авторы впервые предлагают вводить в организм больного липосомы, содержащие фосфоинозитиды в количественном соотношении, рассчитанном математически точно и индивидуально для каждого больного в зависимости от установленных нарушений фосфоинозитидного обмена. The high efficiency of the method is due to the fact that for the first time, the authors propose to introduce liposomes containing phosphoinositides into the patient's body in a quantitative ratio calculated mathematically accurately and individually for each patient, depending on the established disorders of the phosphoinositide metabolism.
Способ дает возможность индивидуально и комплексно корригировать выявленные нарушения фосфоинозитидного обмена, включающие в себя восстановление содержания всех фосфорилированных форм фосфоинозитидов и образующихся при их гидролизе вторичных мессенджеров. The method makes it possible to individually and comprehensively correct the revealed disturbances in phosphoinositide metabolism, including the restoration of the content of all phosphorylated forms of phosphoinositides and secondary messengers formed during their hydrolysis.
Способ является патогенетически обоснованным для лечения заболеваний, сопровождающихся нарушением фосфоинозитидного обмена, поскольку происходит воздействие на основные причины, приводящие к возникновению и прогрессированию установленных заболеваний. The method is pathogenetically substantiated for the treatment of diseases accompanied by impaired phosphoinositide metabolism, since there is an effect on the main causes leading to the onset and progression of established diseases.
Способ осуществляется следующим образом. Предварительно проводят исследование крови больного. С помощью хроматографических методов анализа определяют количественное содержание фосфоинозитидов - фосфатидилинозитов (ФИ), фосфатидилинозит-3-фосфатов (ФИФ'), фосфатидилинозит-4-фосфатов (ФИФ), фосфатидилинозит-4,5-дифосфатов (ФИДФ), фосфатидилинозит-3,4-дифосфатов (ФИДФ'), фосфатидилинозит-3,4,5-трифосфатов (ФИТФ), образующихся при их гидролизе вторичных мессенджеров - инозитол-1,4,5-трифосфатов (ИР3), инозитол-1,3,4-трифосфатов (ИР3'), инозитол-1,3,4,5-тетрафосфатов (ИР4), диацилглицеролов (ДГ). При выявленном отклонении полученных величин от нормативных показателей в организм больного вводят внутривенно однократно суспензию липосом из расчета 20-40 мл/кг массы. Содержание фосфоинозитидов, необходимое для внутривенного введения в составе липосом и восстановления их уровня в крови, определяют по формуле: C= 2,5 • ( 2а + 4b + b1 + 3c + c1), где: C - количество фосфоинозитидов в нг, а - разница содержания фосфоинозитидов в норме и патологии, b - соотношение фосфатидилинозит-4,5-дифосфатов в норме и патологии, b1 - соотношение фосфатидилинозит-3,4-дифосфатов, фосфатидилинозит-3,4,5-трифосфатов в норме и патологии, c - соотношение инозит-1,4,5-трифосфатов в норме и патологии, c1- соотношение инозит-1,3,4-трифосфатов, инозит-1,3,4,5-тетрафосфатов в норме и патологии. The method is as follows. A preliminary study of the patient's blood is carried out. Using chromatographic analysis methods, the quantitative content of phosphoinositides is determined - phosphatidylinositol (PI), phosphatidylinositol-3-phosphate (FIF '), phosphatidylinositol-4-phosphate (FIF), phosphatidylinositol-4,5-diphosphate (FIDF), phosphatidylinositol-3,4 -diphosphates (FIDF '), phosphatidylinositol-3,4,5-triphosphates (FITF) formed during their hydrolysis of secondary messengers - inositol-1,4,5-triphosphates (IR3), inositol-1,3,4-triphosphates ( IR3 '), inositol-1,3,4,5-tetraphosphates (IR4), diacylglycerols (DG). If there is a deviation of the obtained values from the normative indicators, a suspension of liposomes is administered intravenously once in the patient’s body at the rate of 20-40 ml / kg of weight. The content of phosphoinositides necessary for intravenous administration in the composition of liposomes and the restoration of their level in the blood is determined by the formula: C = 2.5 • (2a + 4b + b1 + 3c + c1), where: C is the number of phosphoinositides in ng, and - the difference in the content of phosphoinositides in norm and pathology, b - the ratio of phosphatidylinositol-4,5-diphosphates in norm and pathology, b1 - the ratio of phosphatidylinositol-3,4-diphosphates, phosphatidylinositol-3,4,5-triphosphates in norm and pathology, c - the ratio of inositol-1,4,5-triphosphates is normal and pathological, c1 is the ratio of inositol-1,3,4-triphosphates, inositol-1,3,4,5-tet afosfatov in health and disease.
Для приготовления липосом используют хроматографически чистые фосфолипиды, выделенные из головного мозга быка: фосфатидилхолин (ФХ), фосфоинозитиды (ФИН), образованные из фосфатидилинозитов (ФИ), фосфатидилинозит-4,5-дифосфатов (ФИДФ), фосфатидилинозит-3,4- дифосфатов (ФИДФ'), фоcфатидилинозит-3,4,5-трифосфатов (ФИТФ), и инозитолтри-четырефосфаты, образованные из инозитол-1,4,5-трифосфатов (ИР3), инозитол-1,3,4-трифосфата (ИР3'), инозитол-1,3,4,5-четырефосфатов (ИР4) в молярном отношении 4: 1: 0,02. Смесь хлороформных растворов указанных ФХ, ФИН и инозитолтри-четырефосфатов упаривают в вакууме досуха, а затем суспендируют в среде, содержащей 150 мМ NaCl. Дисперсию фосфолипидов обрабатывают ультразвуком при охлаждении на дезинтеграторе Sonic-300 ("Fisher", США) в течение 10 минут (мощность 225 Вт). Для осаждения липосом суспензию центрифугируют при 20000 д в течение 40 минут. Для стерилизации полученных липосом перед использованием in vivo их продавливали через ядерный фильтр Nuclepor (США) с диаметром пор 0,2 мкм. Chromatographically pure phospholipids isolated from the brain of a bovine are used to prepare liposomes: phosphatidylcholine (PX), phosphoinositides (FIN), formed from phosphatidylinositol (PI), phosphatidylinositol-4,5-diphosphate (FIDF), phosphatidylinositol-3,4-diphosphate ( FIDF '), phosphatidylinositol-3,4,5-triphosphates (FITF), and inositol triphosphates formed from inositol-1,4,5-triphosphates (IR3), inositol-1,3,4-triphosphate (IR3') , Inositol-1,3,4,5-four-phosphates (IR4) in a molar ratio of 4: 1: 0.02. A mixture of chloroform solutions of the indicated PF, FIN and inositol trisphosphates is evaporated to dryness in vacuo and then suspended in a medium containing 150 mM NaCl. The dispersion of phospholipids is treated with ultrasound while cooling on a Sonic-300 disintegrator (Fisher, USA) for 10 minutes (power 225 W). To precipitate liposomes, the suspension is centrifuged at 20,000 d for 40 minutes. To sterilize the obtained liposomes before in vivo use, they were pressed through a Nuclepor nuclear filter (USA) with a pore diameter of 0.2 μm.
В опытах использовали 1070 мышей обоего пола линии C57BL массой 25 г: из них 820 - с карциномой легкого Льюис (карциному легкого Льюис (33LL) прививали в заднюю лапку введением 0,02 мл взвеси клеток (3 • 105) и 250 интактных мышей. Введение препарата в хвостовую вену мышей осуществлялось однократно на 8-10 сутки после прививки из расчета 50-100 мкл препарата на 25 г веса животного, что соответствует 20-40 мл/кг массы. В препарате распределение инозитсодержащих липидов было следующим: из фосфоинозитидов в процентном и абсолютном значениях ФИ составляли 94,4% (164,3 нг), ФИДФ - 3,4% (5,3 нг), ФИДФ - 1% (1,75 нг), ФИТФ - 1,56% (2,76 нг); из инозитолтри-четырефосфатов: ИР3 - 68,2% (0,015 нг), ИР3' - 18,2% (0,004 нг), ИР4 - 13,6% (0,003 нг).1070 mice of both sexes of the C57BL line weighing 25 g were used in experiments: 820 of them with Lewis lung carcinoma (Lewis lung carcinoma (33LL) was inoculated into the hind paw by introducing 0.02 ml of cell suspension (3 × 10 5 ) and 250 intact mice. The drug was injected into the tail vein of mice once for 8-10 days after inoculation at the rate of 50-100 μl of the drug per 25 g of animal weight, which corresponds to 20-40 ml / kg of body weight. and the absolute values of FI were 94.4% (164.3 ng), f DF - 3.4% (5.3 ng), FIDF - 1% (1.75 ng), FITF - 1.56% (2.76 ng); from inositol triphosphates: IR3 - 68.2% (0.015 ng), IR3 '- 18.2% (0.004 ng), IR4 - 13.6% (0.003 ng).
Проведенные исследования in vitro на клетках крови, выделенных из крови мышей с карциномой легкого Льюис, с помощью радиоактивных меток 14 C-фосфатидилхолин, меченных 32 P, myo -[2-3Н]-инозитола, [ γ- 32P] АТФ [3 H] различных фосфоинозитидов, а также флюоресцентных зондов показало включение фосфоинозитидов во всех клетках крови. In vitro studies on blood cells isolated from the blood of mice with Lewis lung carcinoma using radioactive labels of 14 C-phosphatidylcholine labeled with 32 P, myo - [2-3H] -inositol, [γ- 32P] ATP [3 H] various phosphoinositides, as well as fluorescent probes, showed the inclusion of phosphoinositides in all blood cells.
В качестве примера нами проведен сравнительный анализ влияния внутрисосудистого лазерного облучения крови (ВЛОК) в сочетании с липостабилом (известный способ, I группа) и разработанного способа коррекции нарушенного содержания фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма путем использования липосом с включенными в их состав в расчетных единицах ФИ, ФИДФ, ФИДФ', ФИТФ, ИР3, ИР3', ИР4 (группа II) на цельную кровь и опухоль у 950 мышей без и с карциномой легкого Льюис (3LL). В изучаемых группах липосомы с включенными в их состав фосфоинозитидами вводили в хвостовую вену однократно на 8-10 сутки после перевивки опухоли; ВЛОК и липостабил по известной методике (Слюсарь Н.Н. Изменение содержания фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма в иммунокомпетентных клетках у мышей с карциномой легкого Льюис и больных раком легкого при лазерном облучении крови и введении препаратов фосфатидилинозитов. // Эксперим.онкология.- 1992.- Т.14, N.4.- С.60-66), использовали в эти же сроки. As an example, we carried out a comparative analysis of the effect of intravascular laser irradiation of blood (VLOK) in combination with lipostabil (a known method, group I) and the developed method for correcting the disturbed content of phosphoinositides and their metabolic products by using liposomes with PIs included in their composition, FIDF, FIDF ', FITF, IR3, IR3', IR4 (group II) for whole blood and tumor in 950 mice without and with Lewis lung carcinoma (3LL). In the studied groups, liposomes with phosphoinositides included in their composition were injected into the tail vein once for 8-10 days after tumor inoculation; VLOK and lipostabil by a known method (Slyusar N.N. Change in the content of phosphoinositides and their metabolic products in immunocompetent cells in mice with Lewis lung carcinoma and patients with lung cancer with laser irradiation of blood and administration of phosphatidylinositis preparations. // Exper. Oncology. 1992. - T.14, N.4.- S.60-66), used at the same time.
Анализ полученных данных позволил установить, что использование предложенного нами способа коррекции нарушенного содержания фосфоинозитидов дало возможность восстановить их количество в цельной крови у мышей II группы до уровня, как у интактных мышей, в то время как при использовании известного способа (ВЛОК + липостабил) полной нормализации содержания фосфоинозитидов не происходило (табл.1). Следует отметить, что использование предложенного нами способа позволило восстановить уровень фосфоинозитидов в клетках крови, чего не достигалось при использовании известного способа. Восстановление уровня фосфоинозитидов, ИР3, ИР3' и ИР4 в крови и клетках крови у мышей II группы сопровождалось отчетливым восстановлением их содержания в ткани, пораженной опухолью (табл.2); при использовании известного способа, хотя и имелась отчетливая тенденция к восстановлению показателей фосфоинозитидов в опухоли, тем не менее, полной нормализации не происходило. Положительный эффект от использования предложенного нами способа можно объяснить тем, что в липосомы включались основные фосфоинозитиды - ФИ, количество которых при образовании опухоли в крови снижается, а также другие фосфоинозитиды - ФИДФ, ФИДФ', ФИТФ и продукты их гидролиза ИР3, ИР3', ИР4, изменяя при это метаболизм фосфоинозитидов. Analysis of the obtained data allowed us to establish that the use of our proposed method for correcting the impaired phosphoinositide content made it possible to restore their amount in whole blood in group II mice to the level as in intact mice, while using the known method (VLOK + lipostable) full normalization the content of phosphoinositides did not occur (Table 1). It should be noted that the use of our proposed method allowed us to restore the level of phosphoinositides in the blood cells, which was not achieved using the known method. The restoration of the level of phosphoinositides, IR3, IR3 'and IR4 in the blood and blood cells of group II mice was accompanied by a clear restoration of their content in the tissue affected by the tumor (Table 2); when using the known method, although there was a clear tendency to restore indicators of phosphoinositides in the tumor, however, complete normalization did not occur. The positive effect of the use of our proposed method can be explained by the fact that the main phosphoinositides — PHI — were included in the liposomes, the amount of which decreases when a tumor forms in the blood, as well as other phosphoinositides — FIDF, FIDF ', FITF and their hydrolysis products IR3, IR3', IR4 while changing the metabolism of phosphoinositides.
Введение расчетных единиц фосфоинозитидов исходя из их значений до лечения позволило полностью нормализовать их уровень в крови, что в дальнейшем отразилось на содержании фосфоинозитидов в ткани, пораженной опухолью. Следствием перечисленного явилось значительное возрастание продолжительности жизни животных, а также снижение количества и объема метастазов по разработанному нами способу в сравнении с таковыми у мышей I группы (табл.3). Авторами изобретения проведен анализ изменения содержания фосфоинозитидов при инкубации in vitro клеток крови с липосомами, в которые были включены в расчетных единицах меченные фосфоинозитиды у 100 больных с раком легкого, матки, молочной железы, желудка и прямой кишки. Получены следующие данные: 1) уровень ФИ был восстановлен во всех клетках крови, а в лимфоцитах превышал в среднем в 1,4 раза их содержание у здоровых людей; 2) выравнивание количества фосфорилированных в D-3 и D-4 позициях инозитольного кольца ФИ фосфорилированных форм фосфоинозитидов; 3) уровень вторичного мессенджера ИР3 в среднем в 1,1 раза превышал количество ИР3' и ИР4 в исследуемых клетках крови. Проведенные in vitro исследования на клетках крови позволили установить, что введение липосом с включенными в их состав фосфоинозитидами нормализуют метаболизм фосфоинозитидов в клетках крови. The introduction of calculated units of phosphoinositides based on their values before treatment made it possible to completely normalize their level in the blood, which subsequently affected the content of phosphoinositides in the tissue affected by the tumor. The consequence of the above was a significant increase in the life expectancy of animals, as well as a decrease in the number and volume of metastases according to our method in comparison with those in group I mice (Table 3). The authors of the invention analyzed the changes in the content of phosphoinositides during in vitro incubation of blood cells with liposomes, in which the labeled phosphoinositides were included in the calculated units in 100 patients with cancer of the lung, uterus, breast, stomach and rectum. The following data were obtained: 1) the level of PI was restored in all blood cells, and in lymphocytes exceeded on average 1.4 times their content in healthy people; 2) alignment of the amount of phosphorylated phosphorylated forms of phosphoinositides in D-3 and D-4 positions of the inositol ring of FI; 3) the level of the secondary messenger IR3 was on average 1.1 times higher than the number of IR3 'and IR4 in the studied blood cells. In vitro studies on blood cells have established that the administration of liposomes with phosphoinositides included in their composition normalizes the metabolism of phosphoinositides in blood cells.
Приготовленная по предлагаемому способу суспензия липосом с включенными в его состав инозитсодержащими липидами обладает низкой токсичностью. В экспериментах на мышах не было установлено эмбриотоксического и тератогенного действия препарата на протяжении всего срока беременности. Приведенный экспериментальный материал подтверждает возможность использования способа коррекции нарушений фосфоинозитидного обмена в клинической практике. Prepared by the proposed method, a suspension of liposomes with inositol-containing lipids included in its composition has low toxicity. In experiments in mice, the embryotoxic and teratogenic effects of the drug were not established throughout the entire period of pregnancy. The given experimental material confirms the possibility of using the method of correction of phosphoinositide metabolic disorders in clinical practice.
В табл. 1 и 2 результаты выражены для ФИ, ФИФ, ФИФ', ФИДФ, ФИДФ', ФИТФ в нмоль фосфора соответствующего фосфоинозитида на 1 мг белка; для ИР3, ИР3', ИР4 - в пмоль соответствующего липида на 1 мг белка. In the table. 1 and 2, the results are expressed for FI, FIF, FIF ', FIDF, FIDF', FITF in nmol of phosphorus of the corresponding phosphoinositide per 1 mg of protein; for IR3, IR3 ', IR4 - in pmol of the corresponding lipid per 1 mg of protein.
Claims (1)
C = 2,5 (2a + 4b + b1 + 3с + с1),
где C - количество фосфоинозитидов в нг;
a - разница содержания фосфоинозитидов в норме и патологии;
b - соотношение фосфатидилинозит-4,5-дифосфатов в норме и патологии;
b1 - соотношение фосфатидилинозит -3,4-дифосфатов, фосфатидил-инозит-3,4,5-трифосфатов в норме и патологии;
с - соотношение инозит-1,4,5-трифосфатов в норме и патологии;
с1 - соотношение инозит-1,3,4-трифосфатов, инозит-1,3,4,5-тетрафосфатов в норме и патологии.A method for correcting disturbances in phosphoinositide metabolism, including examining the patient’s blood with determining the content of phosphoinositides and the subsequent introduction of a lipid-correcting active substance into his body, characterized in that the content of inositol-containing secondary messengers and phosphorylated forms of phosphoinositides is additionally determined in the blood and if the obtained values deviate from standard values in the patient’s body is injected intravenously with a suspension of liposomes at the rate of 20-40 ml / kg weight, with Erzhanov phosphoinositides which is calculated by the formula
C = 2.5 (2a + 4b + b1 + 3c + s1),
where C is the number of phosphoinositides in ng;
a - the difference in the content of phosphoinositides in normal and pathology;
b - the ratio of phosphatidylinositol-4,5-diphosphates in normal and pathological conditions;
b1 - the ratio of phosphatidylinositol-3,4-diphosphates, phosphatidyl-inositol-3,4,5-triphosphates in normal and pathological conditions;
C is the ratio of inositol-1,4,5-triphosphates in normal and pathological conditions;
C1 - the ratio of inositol-1,3,4-triphosphates, inositol-1,3,4,5-tetraphosphates in normal and pathological conditions.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU97116438A RU2126973C1 (en) | 1997-10-07 | 1997-10-07 | Method of correcting disturbances in phosphoinositide exchange |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU97116438A RU2126973C1 (en) | 1997-10-07 | 1997-10-07 | Method of correcting disturbances in phosphoinositide exchange |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2126973C1 true RU2126973C1 (en) | 1999-02-27 |
| RU97116438A RU97116438A (en) | 1999-04-20 |
Family
ID=20197704
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU97116438A RU2126973C1 (en) | 1997-10-07 | 1997-10-07 | Method of correcting disturbances in phosphoinositide exchange |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2126973C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2535094C2 (en) * | 2008-08-06 | 2014-12-10 | Юниверситат Де Лез Иль Балеар | Composition, containing crystallisation-inhibiting substances |
-
1997
- 1997-10-07 RU RU97116438A patent/RU2126973C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Слюсарь Н.Н. Изменение содержания фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма в иммунокомпетентных клетках у мышей с карциномой легкого Льюис и больных раком легкого при лазерном облучении крови и введении препаратов фосфатидилинозитов, Экспериментальная онкология. 1992, т.14, N 4, с.60 - 66. 2. Дамиров М.М. и др. Лазерная терапия в реабилитационном послеоперационном лечении у больных внутренним эндометриозом. Акушерство и гинекология. 1996, N 2, с.39 - 43. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2535094C2 (en) * | 2008-08-06 | 2014-12-10 | Юниверситат Де Лез Иль Балеар | Composition, containing crystallisation-inhibiting substances |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Trump et al. | Cellular change in human disease: A new method of pathological analysis | |
| REWCASTLE et al. | Vacuolar myopathy: clinical, histochemical, and microscopic study | |
| US5021234A (en) | Agent and product for the diagnosis and treatment of tumors and for the treatment of weaknesses of the cellular and humoral immune defense | |
| EP0196415B1 (en) | Trichostatins a and c as antitumour drugs | |
| Sieber et al. | Dye-mediated photosensitization of murine neuroblastoma cells | |
| Nesbitt | Acute porphyria | |
| Stein et al. | Tumor-caused changes in host protein synthesis under different dietary situations | |
| Carmichael et al. | Whole body protein turnover, synthesis and breakdown in patients with colorectal carcinoma | |
| Feldman et al. | Chemotherapeutic testing in experimental tuberculosis: Suggested outline of laboratory procedures for testing antituberculosis substances in experimentally infected animals | |
| Arant et al. | Case studies of siblings with juxtaglomerular hyperplasia and secondary aldosteronism associated with severe azotemia and renal rickets—Bartter's syndrome or disease? | |
| Grollman et al. | Reduction of elevated blood pressure by administration of renal extracts | |
| Shanahan Jr et al. | Cytotoxic activity of sera from scleroderma and other connective tissue diseases. Lack of cellular and disease specificity | |
| JPH08502039A (en) | Compositions and methods for reducing muscle deterioration | |
| Takahashi et al. | Clinical trials of a new antitumor polypeptide: neocarzinostatin (NCS) | |
| Milo et al. | Acute intermittent porphyria in pregnancy | |
| Herrmann et al. | Phase I trial of the thioether phospholipid analogue BM 41.440 in cancer patients | |
| Davidson et al. | The effects of antitumor drugs upon P32 incorporation into nucleic acids of mouse tumors | |
| RU2126973C1 (en) | Method of correcting disturbances in phosphoinositide exchange | |
| EP0166436A2 (en) | Use of dolichol or its ester in medicines | |
| Fichtner et al. | Antineoplastic activity of alkylphosphocholines (APC) in human breast carcinomas in vivo and in vitro; use of liposomes | |
| RU2112504C1 (en) | Agent "vitaprost" for prostate gland disease treatment | |
| Burr et al. | Blastomycosis of the prostate with miliary dissemination treated by stilbamidine | |
| Holt | The extra nuclear control of mitosis & cell function. A theory of cellular organisation: Observations of the effects of alcohol, insulin, glucose analogues, hypoglycaemic agents, 434 MHz and ionizing electromagnetic radiation and other agents upon normal and cancer cells which reveal their possible sites of action | |
| EP0087744B1 (en) | Lipid metabolism improving agents | |
| US20030152551A1 (en) | 2-Methyl-3-butenyl-1-pyrophosphoric acid salt and agent for treating lymphocytes |