RU2120741C1 - Nutrient medium for flax anthers culturing - Google Patents
Nutrient medium for flax anthers culturing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2120741C1 RU2120741C1 RU96112871A RU96112871A RU2120741C1 RU 2120741 C1 RU2120741 C1 RU 2120741C1 RU 96112871 A RU96112871 A RU 96112871A RU 96112871 A RU96112871 A RU 96112871A RU 2120741 C1 RU2120741 C1 RU 2120741C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- acid
- sulfate
- water
- agar
- potassium
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение находится к биотехнологии, в частности к культивированию in vitro льна, и может быть использовано при культивировании пыльников растений для получения нового исходного материала. The invention relates to biotechnology, in particular to in vitro cultivation of flax, and can be used in the cultivation of anther plants to obtain new starting material.
Известны многочисленные питательные среды для культивирования пыльников растений, которые содержат необходимые компоненты для индуцирования процесса образования каллуса и эмбриоидов на их основе (Ф.А. Калинин и др. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений. Киев: Наукова думка, 1980. С. 238-242). Показано, что нет универсальной питательной среды позволяющей получить достаточный результат на разных растениях, в связи с чем разрабатываются среды для конкретных видов растений (Биотехнология растений: культура клеток /Пер. с англ. В.И. Негрука; с предисл. Р.Г. Бутенко. М.: Агропромиздат. 1989. 280 с. (с. 41-43)). Применение основных хорошо зарекомендовавших себя сред таких как N6 (Cu С.С., 1978), МС (Murashige, Skoog, 1962), Монниера (Monnier М. , 1978), B5 (Gamborg O.L., 1965) и др. на льне сопровождалось образованием лишь отдельных случаев каллусирования пыльников или возникновения эмбриоидов на их основе.Numerous nutrient media for the cultivation of anthers of plants are known, which contain the necessary components to induce the formation of callus and embryoids based on them (F.A. Kalinin et al. Methods of tissue culture in plant physiology and biochemistry. Kiev: Naukova Dumka, 1980. P. 238-242). It was shown that there is no universal nutrient medium that allows to obtain a sufficient result on different plants, and therefore environments are developed for specific types of plants (Plant Biotechnology: cell culture / Transl. From English V.I. Negruka; from the foreword R.G. Butenko, Moscow: Agropromizdat. 1989.280 p. (P. 41-43). The use of the main well-proven media such as N 6 (Cu S.S., 1978), MS (Murashige, Skoog, 1962), Monnier (Monnier M., 1978), B 5 (Gamborg OL, 1965) and others on Flax was accompanied by the formation of only isolated cases of anther callus or the emergence of embryoids based on them.
Известна питательная среда (ближайший аналог) для культивирования пыльников льна, называемые A 22 (Nichteriein K., et al. New methods and recent progress in the breeding of fiax / Flax as a fibre and oil bearing crop. Proceedings of the FAO European regional workshop on flax.-Brno, Czechoslovakia, 18-20 June 1991. P. 175-183; Nichterlein K., Umbach H., Friedt W. Genotypic and exogenоus factors affecting shoot regeneration from anther callus of linseed (Linum usitatissimum L). Euphytica. 1991. 58. P. 157-164), которая содержит (мг/л): кальций хлористый двухводный - 435; калий фосфорнокислый однозамещенный - 170; калий азотнокислый - 1900; магний сернокислый семиводный - 370; аммоний азотнокислый - 165; железо сернокислое семиводное - 27,8; этилендиамин-тетрацитат натрия ((ЭДТА) одноводный - 37,3; кобальт хлористый шестиводный - 0,025; медь сернокислую пятиводную - 0,025; кислоту борную - 6,2; калий иодистый - 0,75; марганец сернокислый одноводный - 22,3; натрий молибденовокислый двухводный - 0,25; цинк сернокислый семиводный - 8,6; мензоинозит - 100; тиамин - 0,1; глутамин - 750; сахарозу - 60000; агарозу - 4000; 6-бензиладенин - 2,0; нафтилуксусную кислоту - 1,0. A culture medium is known (the closest analogue) for the cultivation of flax anthers, called A 22 (Nichteriein K., et al. New methods and recent progress in the breeding of fiax / Flax as a fiber and oil bearing crop. Proceedings of the FAO European regional workshop on flax.-Brno, Czechoslovakia, 18-20 June 1991. P. 175-183; Nichterlein K., Umbach H., Friedt W. Genotypic and exogenous factors affecting shoot regeneration from anther callus of linseed (Linum usitatissimum L). Euphytica . 1991. 58. P. 157-164), which contains (mg / l): calcium chloride two-water - 435; potassium phosphate monosubstituted - 170; potassium nitrate - 1900; magnesium sulphate heptahydrate - 370; ammonium nitrate - 165; ferrous sulphate - 27.8; sodium ethylene diamine tetracytate ((EDTA) - 37.3; hexavalent cobalt chloride - 0.025; pentahydrate copper - 0.025; boric acid - 6.2; potassium iodide - 0.75; manganese sulfate - 22.3; sodium molybdenum two-water - 0.25; zinc sulphate - 8.6; menzoinositol - 100; thiamine - 0.1; glutamine - 750; sucrose - 60,000; agarose - 4000; 6-benzyladenine - 2.0; naphthylacetic acid - 1.0 .
Недостатком этих сред является низкий выход каллусирующих пыльников льна-долгунца и пыльников с эмбриоидами. Увеличение частоты образования капсулирующих пыльников у льна очень важно, так как технология культуры пыльников in vitro довольно дорогостоящая, к тому же селекционеры не всегда располагают достаточным количеством ценного растительного материала. Повышение же частоты каллусогенеза позволяет уменьшить объем приготовления среды, лабораторной техники, объем растительного материала, расход рабочего времени и создает базу для технологии массового получения регенерантов в культуре пыльников льна. The disadvantage of these environments is the low yield of callus anthers of flax and anthers with embryoids. An increase in the incidence rate of encapsulating anthers in flax is very important, since the technology of anther culture in vitro is quite expensive, and breeders do not always have enough valuable plant material. Increasing the frequency of callusogenesis can reduce the volume of preparation of the medium, laboratory equipment, the volume of plant material, the consumption of working time and creates the basis for the technology of mass production of regenerants in the anther flax culture.
Заявляемое изобретение направлено на устранение вышеотмеченных недостатков и от его использования может быть получен следующий технический результат: увеличение выхода каллусирующих пыльников с 5,8% до 11,5% (или в два раза больше). The invention is aimed at eliminating the above drawbacks and from its use the following technical result can be obtained: an increase in the yield of callus anthers from 5.8% to 11.5% (or twice as much).
Указанный технический результат достигается за счет того, что в питательную среду, включающую следующие компоненты: кальций хлористый двухводный, калий фосфорнокислый однозамещенный, калий азотнокислый, магний сернокислый семиводный, аммоний азотнокислый, железо сернокислое семиводное, этилендиамин-тетрацитат натрия ((ЭДТА) одноводный, кобальт хлористый шестиводный, медь сернокислую пятиводную, кислоту борную, калий иодистый, марганец сернокислый одноводный, натрий молибденовокислый семиводный, мезоинозит, тиамин, глутамин, сахарозу, уплотнитель 6-бензиладенин, кислоту нафтилуксусную и бидистиллированную воду, дополнительно вводят пантотенат кальция (4,0), кислоту никотиновую (0,5), пиридоксин (0,5), аспарагин (250), глицин (2,0), серин (125), кислоту индолилуксусную (0,3) и в качестве уплотнителя она содержит агар-агар (700). The specified technical result is achieved due to the fact that in a nutrient medium that includes the following components: calcium chloride, two-water, potassium phosphate, monosubstituted, potassium nitrate, magnesium sulfate, hydrochloride, ammonium nitrate, iron sulfate, hydrochloride, ethylene diamine-tetracytate (EDTA) hexahydrate chloride, copper sulfate, pentahydrate, boric acid, potassium iodide, manganese sulfate, aqueous, sodium molybdenum, seven-hydrogen, mesoinositol, thiamine, glutamine, sucrose , sealant 6-benzyladenine, naphthylacetic acid and bidistilled water, calcium pantothenate (4.0), nicotinic acid (0.5), pyridoxine (0.5), asparagine (250), glycine (2.0), serine are additionally introduced (125), indolylacetic acid (0.3) and it contains agar-agar (700) as a sealant.
Способ иллюстрируется следующими примерами. The method is illustrated by the following examples.
Пример 1. Пыльники льна культивируют на среде, известной ранее, которую готовят по следующей технологии. В 400 мл бидистиллированной воды добавляют 7000 мг агар-агара и путем кипячения готовят агаровый гель. Затем в него добавляют растворенные в бидистиллированной воде ингредиенты (мг/л): кальций хлористый двухводный - 435; калий фосфорнокислый однозамещенный - 170; калий азотнокислый - 1900; магний сернокислый семиводный - 370; аммоний азотнокислый - 165; железо сернокислое семиводное - 27,8; этилендиамин-тетрацитат натрия ((ЭДТА) одноводный - 37,3; кобальт хлористый шестиводный - 0,025; медь сернокислую пятиводную - 0,025; кислоту борную - 6,2; калий иодистый - 0,75; марганец сернокислый одноводный - 22,3; натрий молибденовокислый двухводный - 0,24; цинк сернокислый семиводный - 8,6; мезоинозит - 100; тиамин - 0,1; глутамин - 750; сахарозу - 60000; агарозу - 4000; 6-бензиладенин - 2,0; нафтилуксусную кислоту - 1,0. Общий объем приготавливаемой среды доводится до 1000 мл добавлением бидистиллированной воды. Затем среду тщательно перемешивают. Раствором NaOH устанавливают pH среды 5,5-5,6. Example 1. Anthers of flax are cultivated on a medium previously known, which is prepared according to the following technology. In 400 ml of double-distilled water, 7000 mg of agar-agar was added and the agar gel was prepared by boiling. Then, the ingredients (mg / l) dissolved in bidistilled water are added to it: calcium chloride, two-water - 435; potassium phosphate monosubstituted - 170; potassium nitrate - 1900; magnesium sulphate heptahydrate - 370; ammonium nitrate - 165; ferrous sulphate - 27.8; sodium ethylene diamine tetracytate ((EDTA) - 37.3; hexavalent cobalt chloride - 0.025; pentahydrate copper - 0.025; boric acid - 6.2; potassium iodide - 0.75; manganese sulfate - 22.3; sodium molybdenum two-water - 0.24; zinc sulphate - 8.6; meso-inositol - 100; thiamine - 0.1; glutamine - 750; sucrose - 60,000; agarose - 4000; 6-benzyladenine - 2.0; naphthylacetic acid - 1.0 The total volume of the prepared medium is brought up to 1000 ml by the addition of double-distilled water, then the medium is thoroughly mixed. H medium 5.5-5.6.
Горячую питательную среду разливают в большие биологические пробирки, которые закрывают алюминиевой фольгой и автоклавируют при 0,75 атм. два раза по 15 минут. Пыльники льна высаживают на застывшую агаризованную поверхность в стерильных условиях. Пробирки с пыльниками помещают в термостат при температуре 23-27oC и отсутствие света. Через 28 дней подсчитывают количество пыльников, давших каллус объемом более 5 мм3 (табл.).Hot nutrient medium is poured into large biological tubes, which are sealed with aluminum foil and autoclaved at 0.75 atm. twice for 15 minutes. Flax anthers are planted on a frozen agarized surface under sterile conditions. Test tubes with anthers are placed in a thermostat at a temperature of 23-27 o C and the absence of light. After 28 days, count the number of anthers that gave a callus of more than 5 mm 3 (table).
Пример 2. Условия проведения эксперимента аналогичны описанным в примере 1, но содержание компонентов в предлагаемой среде, следующее (мг/л): кальций хлористый двухводный - 435; калий фосфорнокислый однозамещенный - 170; калий азотнокислый - 1900; магний сернокислый семиводный - 370; аммоний азотнокислый - 1650; железо сернокислое семиводное - 27,8; этилендиамин-тетрацитат натрия ((ЭДТА) одноводный - 37,3; кобальт хлористый шестиводный - 0,025; медь сернокислая пятиводная - 0,025; кислота борная - 6,2; калий иодистый - 0,75; марганец сернокислый одноводный - 22,3; натрий молибденовокислый двухводный - 0,25; цинк сернокислый семиводный - 8,6, мезоинозит - 100; тиамин - 0,1; глутамин - 25; пантотенат кальция - 4,0; кислота никотиновая - 0,5; пиридоксин - 0,5; аспарагин - 250; глицин - 2,0; серин - 125; сахароза - 50000; агар-агар - 7000; 6-бензиладенин - 1,0; нафтилуксусная кислота - 0,5; кислота индолилуксусная - 0,3. Example 2. The experimental conditions are similar to those described in example 1, but the content of the components in the proposed environment, the following (mg / l): calcium chloride, two-water - 435; potassium phosphate monosubstituted - 170; potassium nitrate - 1900; magnesium sulphate heptahydrate - 370; ammonium nitrate - 1650; ferrous sulphate - 27.8; sodium ethylenediamine tetracytate ((EDTA) monohydrate - 37.3; hexavalent cobalt chloride - 0.025; copper sulfate pentahydrate - 0.025; boric acid - 6.2; potassium iodide - 0.75; manganese sulfate monohydrate - 22.3; sodium molybdenum two-water - 0.25; zinc sulphate - 8.6, mesoinositol - 100; thiamine - 0.1; glutamine - 25; calcium pantothenate - 4.0; nicotinic acid - 0.5; pyridoxine - 0.5; asparagine - 250; glycine - 2.0; serine - 125; sucrose - 50,000; agar-agar - 7000; 6-benzyladenine - 1.0; naphthylacetic acid - 0.5; indolylacetic acid - 0.3.
Как следует из экспериментальных данных, использование предлагаемого варианта питательной среды обеспечивает увеличение каллусогенеза относительно известных питательных сред минимум в 2 раза. As follows from experimental data, the use of the proposed nutrient medium provides an increase in callusogenesis relative to known nutrient media at least 2 times.
Claims (1)
Кальций хлористый двухводный - 435
Калий фосфорнокислый однозамещенный - 170
Калий азотнокислый - 1900
Магний сернокислый семиводный - 370
Аммоний азотнокислый - 1650
Железо сернокислое семиводное - 27,8
Этилендиамин-тетрацитат натрия (ЭДТА) одноводный - 37,3
Кобальт хлористый шестиводный - 0,025
Медь сернокислая пятиводная - 0,025
Кислота борная - 6,2
Калий иодистый - 0,75
Марганец сернокислый одноводный - 22,3
Натрий молибденовокислый двухводный - 0,25
Цинк сернокислый семиводный - 8,6
Мезоинозит - 100
Пантотенат кальция - 4
Кислота никотиновая - 0,5
Пиридоксин - 0,5
Тиамин - 0,1
Аспарагин - 250
Глицин - 2
Глутамин - 25
Серин - 125
Сахароза - 50000
Агар-агар - 7000
6-Бензиладенин - 1
Кислота нафтилуксусная - 0,5
Кислота индолилуксусная - 0,3
Бидистиллированная вода - Остальное до 1 ллFlax anther cultivation culture medium, including calcium chloride, two-water, potassium phosphate, monosubstituted, potassium nitrate, magnesium sulfate, hydrochloride, ferrous sulfate, ethylenediamine tetra citrate, sodium hydrogen sulfate, hydrochloric acid, hydrogen sulfate, hydrochloric acid, hydrochloric acid iodide, manganese sulfate monohydrate, sodium molybdenum dihydrate, zinc sulfate hemihydrate, mesoinositol, thiamine, glutamine, sucrose, sealant, 6-benzylade in, neftiluksusnuyu acid and bidistilled water, characterized in that it additionally contains calcium pantothenate, nicotinic acid, pyridoxine, asparagine, glycine, serine, indoleacetic acid, and as a sealant agar with the following ratio of components, mg / l:
Two-water calcium chloride - 435
Monosubstituted potassium phosphate - 170
Potassium nitrate - 1900
Magnesium sulfate heptahydrate - 370
Ammonium nitrate - 1650
Iron sulfate seven-water - 27.8
Ethylene diamine tetracytate sodium (EDTA) monohydrate - 37.3
Hex cobalt chloride - 0.025
Copper sulfate pentahydrate - 0,025
Boric acid - 6.2
Potassium iodide - 0.75
Monohydrate manganese sulfate - 22.3
Two-water sodium molybdenum acid - 0.25
Zinc sulphate heptahydrate - 8.6
Mesoinositis - 100
Calcium pantothenate - 4
Nicotinic acid - 0.5
Pyridoxine - 0.5
Thiamine - 0.1
Asparagine - 250
Glycine - 2
Glutamine - 25
Serene - 125
Sucrose - 50,000
Agar Agar - 7000
6-Benzyladenine - 1
Naphthylacetic acid - 0.5
Indolylacetic acid - 0.3
Double-distilled water - The rest is up to 1 l
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96112871A RU2120741C1 (en) | 1996-06-27 | 1996-06-27 | Nutrient medium for flax anthers culturing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96112871A RU2120741C1 (en) | 1996-06-27 | 1996-06-27 | Nutrient medium for flax anthers culturing |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU96112871A RU96112871A (en) | 1998-10-27 |
| RU2120741C1 true RU2120741C1 (en) | 1998-10-27 |
Family
ID=20182453
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU96112871A RU2120741C1 (en) | 1996-06-27 | 1996-06-27 | Nutrient medium for flax anthers culturing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2120741C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111642396A (en) * | 2020-06-15 | 2020-09-11 | 张家口市农业科学院(河北省高寒作物研究所) | Culture medium and culture method suitable for linum sarmentosum anther and ovary |
-
1996
- 1996-06-27 RU RU96112871A patent/RU2120741C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Nichterlein K., et al. New methods and recent progress in the breeding of flax/Flax as a fibre and oil bearing crop. Proceedings of the FAO European regional workshop on flax.- Brno, Czechoslovakia, 18-20 june 1991. p. 175-183. Nichterlein K., Umbrach H., Friedt W. Genotypic and exogenous factors affecting shoot regeneration from anther callus of linseed (Linum usitatissimum L). Euphytica, 1991. 58. p. 157-164. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111642396A (en) * | 2020-06-15 | 2020-09-11 | 张家口市农业科学院(河北省高寒作物研究所) | Culture medium and culture method suitable for linum sarmentosum anther and ovary |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lane | Regeneration of apple plants from shoot meristem-tips | |
| Becwar et al. | Maturation, germination, and conversion of Norway spruce (Picea abies L.) somatic embryos to plants | |
| Gupta et al. | Plantlet regeneration via somatic embryogenesis from subcultured callus of mature embryos of Picea abies (Norway spruce) | |
| Price et al. | Somatic embryogenesis in suspension cultures of Gossypium klotzschianum Anderss | |
| Gamborg et al. | Organogenesis in callus from shoot apices of Pisum sativum | |
| Preil et al. | Toward mass propagation by use of bioreactors | |
| Ghazi et al. | Somatic embryogenesis and plant regeneration from embryogenic callus of soybean, Glycine max L. | |
| JPS6147121A (en) | Regeneration of soybean | |
| US4354327A (en) | Tissue culture method for asexual propagation of pine trees and medium for use therewith | |
| Groll et al. | Secondary somatic embryogenesis of cassava on picloram supplemented media | |
| Kulothungan et al. | Somatic embryogenesis in cell suspension culture of cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp) | |
| RU2120741C1 (en) | Nutrient medium for flax anthers culturing | |
| CA1297294C (en) | Method of multiplicating bulbous plants | |
| EP0362408A1 (en) | Method of culturing plant organs and culture vessel therefor | |
| Yang et al. | In vitro culture of vanhoutte's spirea explants from ‘secondary cultures’ and dormant stems forced in solutions containing plant growth regulators | |
| KR890008314A (en) | How to Re-differentiate Cotton from Cultured Cells | |
| Bose et al. | A note on the micro-propagation of tuberose from scale stem section | |
| Brady et al. | The effect of the suspensor and gibberellic acid on Phaseolus vulgaris embryo protein content | |
| Singh et al. | Plant regeneration in callus and suspension cultures of Brassica campestris cv. Yellow Sarson | |
| KR100398749B1 (en) | Method for mass propagation of Wild Korean ginseng (Panax ginseng C.A.Meyer) by biotechnological technique | |
| CN100411508C (en) | Cultivation method for highly effective plant tissue differentiation and regeneration | |
| Park et al. | Histological study of callus formation and root regeneration from mung bean (Vigna radiata W.) | |
| Ali et al. | Micropropagation of Tribulus terrestris L., an important medicinal plant | |
| Chen et al. | Direct shoot organogenesis and plant regeneration from cotyledonary node of kenaf (Hibiscus cannabinus L.) | |
| UA136523U (en) | METHOD OF INDUCATION OF CALYUS FABRIC OF RYZHY SPRING |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080628 |