RU2116801C1 - Method of the porous collagen-containing material preparing - Google Patents
Method of the porous collagen-containing material preparing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2116801C1 RU2116801C1 RU95110213A RU95110213A RU2116801C1 RU 2116801 C1 RU2116801 C1 RU 2116801C1 RU 95110213 A RU95110213 A RU 95110213A RU 95110213 A RU95110213 A RU 95110213A RU 2116801 C1 RU2116801 C1 RU 2116801C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- collagen
- solution
- porous
- containing material
- water
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к области получения полимерных материалов медицинского назначения, конкретно - к способу получения пористого коллагенсодержащего материала. The invention relates to the field of production of polymeric materials for medical purposes, specifically to a method for producing porous collagen-containing material.
Пористые материалы на основе биополимера соединительных тканей человека и животных - коллагена - находят достаточно широкое применение в медицинской практике в качестве кровеостанавливающих средств, осушающих покрытий на раны, ожоги и трофические язвы, как каркас протезов кровеносных сосудов и др. Porous materials based on the biopolymer of the connective tissues of humans and animals - collagen - are widely used in medical practice as hemostatic agents, draining coatings on wounds, burns and trophic ulcers, as a frame for prostheses of blood vessels, etc.
Известны способы получения губчатых материалов из коллагенсодержащего сырья. Так, известен способ формирования пористого коллагенового материала, заключающийся в выделении коллагена из исходного сырья, его гомогенизации, набухании и растворении в холодной уксусной кислоте с получением 0,6%-ного коллоидного уксуснокислого раствора микрофибриллярного коллагена, который затем смешивают с 0,01 мас.% глутарового альдегида, 0,01 мас.% борной кислоты и 0,00015 мас.% хинозола, замораживают и сушат лиофильно, а далее стерилизуют радиационным способом дозой 1,25-2,5 Мрад. Под названием "Комбутек - 2" полученный препарат допущен к медицинскому применению для закрытия и окончательного лечения очищенных от мертвых тканей ран. Основными недостатками данного способа являются его высокая энергоемкость, длительность процесса, поскольку способ предусматривает лиофильное высушивание композиции с содержанием сухих веществ менее 0,7 мас.%, т.е. более 99% от исходного веса замороженной смеси необходимо удалить, сублимируя лед в вакууме. Кроме того, сама лиофильная сушка требует использования дорогого оборудования, что дополнительно удорожает способ. Known methods for producing spongy materials from collagen-containing raw materials. Thus, there is a known method for the formation of porous collagen material, which consists in isolating collagen from the feedstock, homogenizing it, swelling and dissolving in cold acetic acid to obtain a 0.6% colloidal acetic acid solution of microfibrillar collagen, which is then mixed with 0.01 wt. % glutaraldehyde, 0.01 wt.% boric acid and 0.00015 wt.% quinosole, are frozen and freeze-dried, and then sterilized by radiation at a dose of 1.25-2.5 Mrad. Under the name "Combutek-2", the resulting preparation is approved for medical use for closing and final treatment of wounds cleaned from dead tissue. The main disadvantages of this method are its high energy intensity, the duration of the process, since the method provides freeze drying of the composition with a solids content of less than 0.7 wt.%, I.e. more than 99% of the initial weight of the frozen mixture must be removed by sublimating ice in a vacuum. In addition, freeze drying itself requires the use of expensive equipment, which further increases the cost of the method.
Также известен способ, по которому перед замораживанием проводят осаждение волокон коллагена. Для этого уксуснокислый коллоидный раствор микрофибриллярного коллагена обрабатывают равным объемом насыщенного раствора сульфата натрия, содержащего формальдегид в концентрации 1-2 мас.%, осажденный поддубленный волокнистый преципитат промывают водой, подвергают механическому диспергированию, далее вводят глутаровый альдегид в расчете 0,1-1,0% на сухой остаток, полученную композицию замораживают в поддонах при температуре -5... -20oC в течение 10-15 ч, оттаивают, сформованный губчатый коллагеновый материал промывают водой и сушат на воздухе при комнатной температуре. Если необходимо, материал может быть простерилизован известными способами, например, радиационно. Основным достоинством этого способа является то, что коллагеновые волокна, сформированные на стадии приготовления композиции, после замораживания-оттаивания образуют губчатый материал, который после высушивания не теряет своей пористости. Однако данный способ имеет также ряд недостатков: многостадийность и длительность процесса, большой расход воды для промывки преципитата, наличие вредных стоков из-за присутствия в них формальдегида и солей, главным образом, сульфата натрия.A method is also known in which, prior to freezing, collagen fibers are precipitated. For this, an acetic colloidal solution of microfibrillar collagen is treated with an equal volume of a saturated solution of sodium sulfate containing formaldehyde in a concentration of 1-2 wt.%, The precipitated doubled fibrous precipitate is washed with water, subjected to mechanical dispersion, then glutaraldehyde is introduced in the calculation of 0.1-1.0 % on a dry residue, the resulting composition is frozen in pallets at a temperature of -5 ... -20 o C for 10-15 hours, thawed, the molded spongy collagen material is washed with water and dried in air at room temperature. If necessary, the material can be sterilized by known methods, for example, radiation. The main advantage of this method is that the collagen fibers formed at the stage of preparation of the composition, after freezing and thawing, form a spongy material, which after drying does not lose its porosity. However, this method also has a number of disadvantages: multi-stage and lengthy process, high water consumption for washing the precipitate, the presence of harmful effluents due to the presence of formaldehyde and salts, mainly sodium sulfate.
Наиболее близким к заявляемому по принципу формирования пористой структуры коллагенового материала является принятый за прототип способ, согласно которому после получения уксуснокислого коллоидного раствора микрофибриллярного коллагена проводят осаждение волокнистого коллагена изменением pH уксуснокислого раствора до значений 4,0-5,0, осадок разбавляют водой до концентрации волокнистого коллагена в суспензии до 1,5-2,5%, тщательно перемешивают, прибавляют сшивающий агент (глутаровый альдегид) в количестве 0,05-1,10% от веса коллагена в суспензии, ее перемешивают, размещают в формах и замораживают при температуре -35...-65oC в течение 0,15-1 ч и/или при -4. . . -21oC в течение 10-15 ч. После оттаивания влажный губчатый материал отжимают от несвязанной жидкости и помещают в этанол и/или ацетон на 0,5-1,0 ч, периодически отжимая дегидратирующий органический растворитель и замачивая губку в нем вновь. Затем в стерильных условиях проводят досушивание материала.The closest to the claimed on the principle of the formation of the porous structure of collagen material is the method adopted as a prototype, according to which, after obtaining the acetic colloidal solution of microfibrillar collagen, fibrous collagen is precipitated by changing the pH of the acetic acid solution to 4.0-5.0, the precipitate is diluted with water to a fibrous concentration collagen in suspension up to 1.5-2.5%, mix thoroughly, a crosslinking agent (glutaraldehyde) is added in an amount of 0.05-1.10% by weight of collagen in suspension NZI, it is mixed, placed in molds and frozen at a temperature of -35 ...- 65 o C for 0.15-1 h and / or at -4. . . -21 o C for 10-15 hours. After thawing, the wet spongy material is squeezed from an unbound liquid and placed in ethanol and / or acetone for 0.5-1.0 hours, periodically squeezing the dehydrating organic solvent and soaking the sponge in it again. Then, under sterile conditions, the material is dried.
По сравнению с аналогами способ-прототип позволяет уменьшить число стадий получения губчатого коллагенсодержащего материала, сократить расход электроэнергии и ускорить процесс сушки материала, совместив его со стерилизацией; кроме того снижается количество вредных примесей в сточных водах. Compared with analogs, the prototype method allows to reduce the number of stages for producing spongy collagen-containing material, reduce energy consumption and speed up the drying process of the material, combining it with sterilization; in addition, the amount of harmful impurities in wastewater is reduced.
Однако этот способ имеет определенные недостатки:
- процесс сушки губчатого материала путем дегидратации требует большого расхода органического растворителя, который после использования необходимо регенерировать (например, перегонкой), что требует дополнительных затрат энергии и времени;
- использование органических растворителей в производственных условиях повышает пожароопасность и ухудшает условия труда персонала.However, this method has certain disadvantages:
- the drying process of the spongy material by dehydration requires a large consumption of organic solvent, which after use must be regenerated (for example, by distillation), which requires additional energy and time;
- the use of organic solvents in a production environment increases fire hazard and worsens the working conditions of personnel.
Задача предлагаемого способа: упрощение технологии и снижение расхода органических растворителей при сохранении губчатой структуры коллагенсодержащего материала, обладающего высокой водопоглощающей способностью, а также расширение номенклатуры производимых пористых коллагенсодержащих материалов. The objective of the proposed method: simplifying the technology and reducing the consumption of organic solvents while maintaining the spongy structure of collagen-containing material with high water absorption capacity, as well as expanding the range of manufactured porous collagen-containing materials.
Указанная задача решается тем, что сформированный при замораживании пористый коллагенсодержащий материал оттаивают, обрабатывают водным раствором щелочного агента при pH 10-12 и 0,1-1,0%-ным раствором формальдегида, промывают до нейтральной реакции среды, отжимают несвязанную влагу и окончательно высушивают при 20-60oC. При необходимости перед окончательным высушиванием материала проводят его пропитку раствором лекарственного и/или антисептического препарата, а также прессование при 40-100 кг/см2.This problem is solved by the fact that the porous collagen-containing material formed during freezing is thawed, treated with an aqueous solution of an alkaline agent at pH 10-12 and with a 0.1-1.0% formaldehyde solution, washed to a neutral reaction of the medium, squeezed unbound moisture and finally dried at 20-60 o C. If necessary, before the final drying of the material, it is impregnated with a solution of a medicinal and / or antiseptic preparation, as well as pressing at 40-100 kg / cm 2 .
Конкретно, заявляемый способ осуществляется следующим образом. Specifically, the inventive method is as follows.
1) Проводят выделение коллагена из коллагенсодержащего сырья по известному способу, т.е. осуществляют щелочно-солевую экстракцию измельченного сырья для удаления неколлагеновых компонентов с последующей его промывкой от раствора экстрагента. 1) Isolation of collagen from collagen-containing raw materials by a known method, i.e. carry out alkaline salt extraction of crushed raw materials to remove non-collagen components, followed by washing it from the extractant solution.
2) Готовят уксуснокислую дисперсию коллагена согласно способу [2], т.е. помещают проэкстрагированную и промытую коллагеновую массу в среду водной уксусной кислоты и после набухания в ней проводят механическую дезинтеграцию с получением коллоидного раствора микрофибриллярного коллагена. 2) Prepare an acetic acid dispersion of collagen according to the method [2], i.e. put the extracted and washed collagen mass into the medium of aqueous acetic acid and, after swelling, carry out mechanical disintegration to obtain a colloidal solution of microfibrillar collagen.
3) Проводят изоэлектрическое осаждение волокнистого коллагенового преципита, его смешение с глутаровым альдегидом и замораживание реакционной массы по способу, т.е. готовят композицию известного состава и осуществляет ее криогенное структурирование в известных режимах. 3) Isoelectric precipitation of fibrous collagen precipitate is carried out, it is mixed with glutaraldehyde and the reaction mixture is frozen by the method, i.e. prepare a composition of known composition and carries out its cryogenic structuring in known modes.
4) После оттаивания полученный пористый коллагеновый материал обрабатывают водным раствором щелочного агента при pH 10-12 и 0,1-1,0%-ным раствором формальдегида, после чего промывают до нейтральной реакции среды и отжимают несвязанную влагу, причем промывка может быть совмещена с пропиткой материала растворами лекарственных и/или антисептических препаратов, а отжим несвязанной влаги может проявиться в режиме механического прессовывания при 40-100 кг/см2.4) After thawing, the resulting porous collagen material is treated with an aqueous solution of an alkaline agent at a pH of 10-12 and a 0.1-1.0% formaldehyde solution, then it is washed until the medium is neutral and the unbound moisture is squeezed out, moreover, the washing can be combined with the impregnation of the material with solutions of medicinal and / or antiseptic drugs, and the extraction of unbound moisture may occur in the mechanical pressing mode at 40-100 kg / cm 2 .
5) Окончательную сушку проводят при температуре 20-60oC.5) The final drying is carried out at a temperature of 20-60 o C.
Приведенная совокупность технических решений для получения пористого коллагенсодержащего материала не известна из уровня техники, поэтому заявляемый способ отвечает критерию новизна. The above set of technical solutions for obtaining a porous collagen-containing material is not known from the prior art, therefore, the claimed method meets the criterion of novelty.
Использование конкретных режимов реализации заявляемого способа обусловлено следующими моментами. The use of specific modes of implementation of the proposed method is due to the following points.
1) Согласно предлагаемому изобретению после оттаивания сформированного пористого коллагенсодержащего материала проводят его обработку водным раствором щелочного агента при pH 10-12 и 0,1-1,0%-ным водным раствором формальдегида. При pH < 10 процесс дубления материала происходит, как показали эксперименты, с недостаточной эффективностью, поэтому при высушивании в заявляемых режимах имеет место частичное ороговение конечного материала. При pH > 12 дубление происходит слишком быстро по поверхности материала и поэтому неравномерно, кроме того, далее для промывки материала до нейтральной реакции среды требуется большое количество воды. При концентрации раствора формальдегида ниже 0,1% после обработки пористый коллагеновый материал обладает неудовлетворительными физико-механическими свойствами - при высушивании в заявляемых режимах он теряет свою пористость. При концентрации водного раствора формальдегида выше 1% после обработки пористый коллагеновый материал становится жестким (малоэластичным), и требуется большое количество воды для отмывки избытка формальдегида. 1) According to the invention, after thawing of the formed porous collagen-containing material, it is treated with an aqueous solution of an alkaline agent at a pH of 10-12 and 0.1-1.0% aqueous formaldehyde solution. At pH <10, the process of tanning of the material occurs, as shown by experiments, with insufficient efficiency, therefore, when drying in the claimed modes, partial keratinization of the final material takes place. At pH> 12, tanning occurs too quickly on the surface of the material and therefore is uneven, in addition, further, a large amount of water is required to wash the material until the medium is neutral. When the concentration of formaldehyde solution is below 0.1% after processing, the porous collagen material has unsatisfactory physical and mechanical properties - when dried in the claimed modes, it loses its porosity. When the concentration of an aqueous solution of formaldehyde is higher than 1% after treatment, the porous collagen material becomes hard (low elastic), and a large amount of water is required to wash off the excess formaldehyde.
2) При осуществлении заявляемого способа возможна стадия пропитки пористого коллагенсодержащего материала раствором лекарственного и/или антисептического препарата с последующей сушкой этого материала. Для обработки могут использоваться растворы противовоспалительных и ранозаживляющих веществ (например, дексаметазона, гидрокортизона, ацетилсалициловой кислоты и др. ), антибиотиков (например, тетрациклина, оксалина, левомицина и проч.), антисептиков типа борной кислоты, резорцина или хинозола, антибактериальных средств (например, фурацилина, этазола и т.п.). Растворы готовятся как на воде, так и на основе органических растворителей (например, этилового спирта, ацетона и др.) в зависимости от растворимости соответствующего препарата. После обработки лекарственными препаратами излишки раствора удаляются и коллагенсодержащий материал высушивается в заявляемых режимах. Причем, если температура этой стадии поддерживается ниже 20oC, то сушка идет слишком медленно, что сильно удлиняет время производства конечного материала, а повышение температуры выше 60oC будет приводить к термической денатурации коллагена в составе коллагенсодержащего материала и, поэтому, не допустимо.2) When implementing the proposed method, it is possible to impregnate a porous collagen-containing material with a solution of a medicinal and / or antiseptic drug, followed by drying of this material. For processing, solutions of anti-inflammatory and wound healing substances (e.g., dexamethasone, hydrocortisone, acetylsalicylic acid, etc.), antibiotics (e.g. tetracycline, oxalin, levomycin, etc.), antiseptics such as boric acid, resorcinol or chinosole, antibacterial agents (e.g. , furatsilina, etazola, etc.). Solutions are prepared both on water and on the basis of organic solvents (for example, ethyl alcohol, acetone, etc.), depending on the solubility of the corresponding preparation. After treatment with drugs, the excess solution is removed and the collagen-containing material is dried in the inventive modes. Moreover, if the temperature of this stage is maintained below 20 o C, then drying is too slow, which greatly lengthens the production time of the final material, and an increase in temperature above 60 o C will lead to thermal denaturation of collagen in the composition of the collagen-containing material and, therefore, is not permissible.
3) В заявляемом способе предусматривается также возможность проведения механического прессования сформированного и дубленного пористого коллагенового материала при давлении 40-100 кг/см2. При этом увеличивается компактность и эластичность материала без, как оказалось, ухудшения влагопоглощающей способности.3) The claimed method also provides the possibility of mechanical pressing of the formed and tanned porous collagen material at a pressure of 40-100 kg / cm 2 . This increases the compactness and elasticity of the material without, as it turned out, the deterioration of moisture absorption.
Ниже приводятся конкретные примеры реализации заявляемого способа. The following are specific examples of the implementation of the proposed method.
Пример 1. Example 1
В 2%-ный уксуснокислый коллоидный раствор коллагена при перемешивании прибавляют 1,5 M раствор гидроксида натрия до достижения pH 5. Выпавший осадок волокнистого коллагена разбавляют водой до концентрации суспензии по белку 1,5%, прибавляют глутаровый альдегид в количестве 0,5 мас.% по отношению к количеству коллагена, тщательно перемешивают реакционную массу и слоем 5 мм разливают на поддон, который помещают на 45 мин в морозильную камеру с температурой -30oC. Замороженный образец переносят в морозильную камеру с температурой -6oC и выдерживают там 10 ч. После оттаивания препарат обрабатывают раствором едкого натрия при pH 10 в присутствии 1,0%-ного раствора формальдегида, после чего отжимают и промывают водой до нейтральной реакции среды, снова отжимают несвязанную воду и сушат при температуре 60oC с принудительной циркуляцией воздуха. Плотность полученного пористого материала - 0,031 г/см3, влагоудерживающая способность - 5300%.In a 2% colloidal acetic acid collagen solution, 1.5 M sodium hydroxide solution is added with stirring until pH 5 is reached. The precipitated fibrous collagen precipitate is diluted with water to a suspension concentration of 1.5% protein, glutaraldehyde is added in an amount of 0.5 wt. % relative to the amount of collagen, the reaction mixture is thoroughly mixed and a layer of 5 mm is cast in a tray which was placed for 45 minutes in a -30 freezer with a temperature chamber o C. The frozen sample was transferred to a freezer at -6 o C and kept t m 10 h. After thawing, the preparation was treated with a solution of sodium hydroxide at pH 1.0 in the presence of 10% formaldehyde solution and then drained and washed with water to neutral pH, again press the unbound water, and dried at 60 o C with forced circulation air. The density of the obtained porous material is 0.031 g / cm 3 , the water-holding ability is 5300%.
Пример 2. Example 2
К 2,5%-ному уксуснокислому коллоидному раствору коллагена при перемешивании прибавляют насыщенный водный раствор гидроксида кальция (известковое молоко) до pH 4,0. Выпавший осадок волокнистого коллагена разбавляют водой до концентрации суспензии по белку 2,5%, прибавляют глутаровый альдегид в количестве 0,05% от веса коллагена, перемешивают реакционную массу, заливают в форму слоем толщиной 10 мм и замораживают при -62oC в течение 9 мин. Замороженный препарат переносят в камеру с температурой -21oC, где выдерживают 15 ч. После оттаивания препарат обрабатывают раствором едкого калия при pH 11 в присутствии 0,75%-ного раствора формальдегида, после чего отжимают и промывают водой до нейтральной реакции среды, снова отжимают несвязанную воду. Затем проводят пропитку пористого материала водным раствором ацетилсалициловой кислоты, после чего сушат при температуре 50oC. Плотность полученного пористого материала - 0,032 г/см3, влагоудерживающая способность - 2700%.A saturated aqueous solution of calcium hydroxide (milk of lime) is added to a 2.5% acetic acid colloidal collagen solution with stirring to pH 4.0. The precipitated fibrous collagen precipitate is diluted with water to a suspension concentration of 2.5% protein, glutaraldehyde is added in an amount of 0.05% by weight of collagen, the reaction mixture is stirred, poured into a mold with a thickness of 10 mm and frozen at -62 ° C for 9 min The frozen preparation is transferred to a chamber with a temperature of -21 o C, where it is kept for 15 hours. After thawing, the preparation is treated with potassium hydroxide solution at pH 11 in the presence of a 0.75% formaldehyde solution, then squeezed and washed with water until the medium is neutral, again squeeze unbound water. Then, the porous material is impregnated with an aqueous solution of acetylsalicylic acid, and then dried at a temperature of 50 o C. The density of the obtained porous material is 0.032 g / cm 3 , the water-holding capacity is 2700%.
Пример 3. Example 3
В 1,5%-ный уксуснокислый коллоидный раствор коллагена при перемешивании вводят 2 M водный раствор едкого калия до достижения pH 4,5. Выпавший осадок волокнистого коллагена разбавляют водой до концентрации суспензии по белку 2,0%, прибавляют глутаровый альдегид в количестве 0,1% от веса коллагена, перемешивают реакционную массу, разливают ее в формы слоем толщиной 3 мм и замораживают при -35oC в течение 1 ч. Далее замороженные препараты выдерживают при -10oC в течение 12 ч. После оттаивания пористый препарат обрабатывают раствором гидроксида лития при pH 12 в присутствии 0,1%-ного раствора формальдегида, после чего отжимают и промывают водой до нейтральной реакции среды, снова отжимают несвязанную воду. Затем проводят пропитку пористого материала 2%-ным водным раствором борной кислоты и 0,01%-ным раствором хинозола, после чего сушат в камере при температуре 40oC. Плотность полученного пористого материала - 0,073 г/см3, влагоудерживающая способность - 4500%.In a 1.5% colloidal acetic acid collagen solution, a 2 M aqueous solution of potassium hydroxide is added with stirring until a pH of 4.5 is reached. The precipitated fiber collagen precipitate is diluted with water to a suspension concentration of 2.0% protein, glutaraldehyde is added in an amount of 0.1% by weight of collagen, the reaction mixture is stirred, it is poured into molds with a 3 mm thick layer and frozen at -35 o C for 1 hour. Then, frozen preparations are kept at -10 ° C for 12 hours. After thawing, the porous preparation is treated with a solution of lithium hydroxide at pH 12 in the presence of a 0.1% formaldehyde solution, then squeezed and washed with water until the medium is neutral, again otzh mayutsya unbound water. Then, the porous material is impregnated with a 2% aqueous solution of boric acid and a 0.01% solution of quinosol, and then dried in a chamber at a temperature of 40 o C. The density of the obtained porous material is 0.073 g / cm 3 , water-holding capacity is 4500% .
Пример 4. Example 4
Суспензию волокнистого коллагена получают по п.3, доводя pH системы до 4,8. Далее разбавляют образец до содержания белка 2,4% вводят глутаровый альдегид в количестве 1,01% от веса коллагена, перемешивают реакционную массу, разливают слоем толщиной 4 мм в круглые формы диаметром 8 см и замораживают при -45oC в течение 30 мин. Замороженные образцы затем выдерживают при -8oC в течение 14 ч. После оттаивания препараты обрабатывают раствором едкого натрия при pH 10,5 в присутствии 0,5%-ного раствора формальдегида, после чего отжимают и промывают водой до нейтральной реакции среды, снова отжимают несвязанную воду. Затем обрабатывают 2%-ным спиртовым раствором гидрохлорида тетрациклина и спрессовывают при давлении 40 кг/см2 в течение 10 мин. Далее пористый материал досушивают при температуре 35oC. Плотность пористого материала - 0,53 г/см3, влагоудерживающая способность - 2900%.A suspension of fibrous collagen is obtained according to claim 3, bringing the pH of the system to 4.8. Then, the sample is diluted to a protein content of 2.4%; glutaraldehyde is introduced in an amount of 1.01% by weight of collagen, the reaction mixture is stirred, poured into a 4 mm thick layer in circular forms with a diameter of 8 cm and frozen at -45 ° C for 30 minutes. Frozen samples are then kept at -8 ° C for 14 hours. After thawing, the preparations are treated with sodium hydroxide solution at pH 10.5 in the presence of a 0.5% formaldehyde solution, then squeezed and washed with water until the medium is neutral, squeezed again unbound water. Then it is treated with a 2% alcohol solution of tetracycline hydrochloride and pressed at a pressure of 40 kg / cm 2 for 10 minutes. Next, the porous material is dried at a temperature of 35 o C. The density of the porous material is 0.53 g / cm 3 , water-holding capacity is 2900%.
Пример 5. Example 5
Получают волокнистый коллаген по п. 1 при pH 4,3. Далее разбавляют суспензию до содержания белка 1,8%, прибавляют глутаровый альдегид в количестве 0,75% от веса коллагена, после перемешивания реакционную массу разливают в формы слоем 5 мм и замораживают при температуре -65oC в течение 20 мин. Замороженные образцы затем выдерживают при -15oC в течение 10 ч. После оттаивания препараты обрабатывают раствором едкого натрия при pH 11,5 в присутствии 0,25%-ного раствора формальдегида, после чего отжимают и промывают водой до нейтральной реакции среды, снова отжимают несвязанную воду. Затем проводят пропитку 2%-ным спиртовым раствором левомицитина, содержащим также 0,1% метилурацила, спрессовывают при давлении 70 кг/см2 и досушивают при 20oC. Плотность полученного пористого материала - 0,62 г/см3, влагоудерживающая способность - 2700%.Get fibrous collagen according to claim 1 at a pH of 4.3. Then, the suspension is diluted to a protein content of 1.8%, glutaraldehyde is added in an amount of 0.75% by weight of collagen, after stirring, the reaction mass is poured into molds with a 5 mm layer and frozen at -65 ° C for 20 minutes. Frozen samples are then kept at -15 o C for 10 hours. After thawing, the preparations are treated with a sodium hydroxide solution at pH 11.5 in the presence of a 0.25% formaldehyde solution, then squeezed and washed with water until the medium is neutral, squeezed again unbound water. Then impregnation is carried out with a 2% alcohol solution of chloramphenicol containing also 0.1% methyluracil, compressed at a pressure of 70 kg / cm 2 and dried at 20 o C. The density of the obtained porous material is 0.62 g / cm 3 , water-holding capacity is 2700%.
Пример 6. Example 6
Приготовление реакционной массы, стадию замораживания и обработки формальдегидом осуществляют аналогичную примеру 1. Влажный пористый препарат пропитывают ацетоновым раствором 0,02% фурацилина и 0,05% гидрокортизона, далее прессуют при давлении 100 кг/см2 и сушат при 25oC. Плотность полученного пористого материала - 0,51 г/см2, влагоудерживающая способность - 3100%.The preparation of the reaction mass, the stage of freezing and processing with formaldehyde is carried out similarly to example 1. The wet porous preparation is impregnated with an acetone solution of 0.02% furatsilina and 0.05% hydrocortisone, then pressed at a pressure of 100 kg / cm 2 and dried at 25 o C. The density obtained porous material - 0.51 g / cm 2 , water-holding capacity - 3100%.
Пример 7. Example 7
Влажный пористый коллагенсодержащий материал получают по пр.2, после его промывки отжимают несвязанную влагу и промывают препарат 0,5%-ным раствором дексаметазона, а затем высушивают при 45oC. Плотность полученного пористого материала - 0,049 г/см3, влагоудерживающая способность - 3000%.Wet porous collagen-containing material is obtained according to pr. 2, after washing, unbound moisture is squeezed out and the preparation is washed with a 0.5% dexamethasone solution, and then dried at 45 o C. The density of the obtained porous material is 0.049 g / cm 3 , the water-holding capacity is 3000%
Пример 8. Example 8
Влажный пористый коллагенсодержащий материал получают по пр.3, после его промывки отжимают несвязанную влагу, прессуют при 60 кг/см2 и сушат при 30oC. Плотность полученного пористого материала - 0,44 г/см3, влагоудерживающая способность - 4200%.Wet porous collagen-containing material is obtained according to Project 3, after washing, unbound moisture is squeezed out, pressed at 60 kg / cm 2 and dried at 30 o C. The density of the obtained porous material is 0.44 g / cm 3 , water-holding capacity is 4200%.
Пример 9. Example 9
Пористый коллагенсодержащий материал получают в соответствии с методикой пр. 4, но пропитку проводят спиртовым раствором 1% оксалина и 0,07% резорцина, а сушку при 40oC. Плотность полученного пористого материала - 0,52 г/см3, влагоудерживающая способность - 2800%.Porous collagen-containing material is obtained in accordance with the procedure of Ex. 4, but the impregnation is carried out with an alcohol solution of 1% oxalin and 0.07% resorcinol, and drying at 40 o C. The density of the obtained porous material is 0.52 g / cm 3 , water-holding capacity is 2800%.
Пример 10. Example 10
Пористый коллагенсодержащий материал получают согласно пр.5, но пропитку проводят 0,6% водным раствором этазола, прессование при 100 кг/см2, а сушку при 55oC. Плотность полученного пористого материала - 0,61 г/см3, влагоудерживающая способность - 2300%.Porous collagen-containing material is obtained according to Project 5, but the impregnation is carried out with a 0.6% aqueous solution of ethazole, pressing at 100 kg / cm 2 and drying at 55 o C. The density of the obtained porous material is 0.61 g / cm 3 , water-holding capacity - 2300%.
Предлагаемое изобретение имеет следующие преимущества по сравнению с известными способами получения пористых коллагенсодержащих материалов:
- поскольку используемая в заявляемом способе последовательность операций при получении пористого коллагенсодержащего материала дает возможность проводить высушивание конечного продукта при 20-60oC и при этом он не теряет пористой хорошо набухающей структуры, то по сравнению с аналогами предлагаемое изобретение характеризуется существенным удешевлением и упрощением способа в целом, т.к. энергоемкое, длительное и дорогое лиофильное высушивание исключается из процесса;
- по сравнению со способом-прототипом заявляемый способ характеризуется резким сокращением расхода органических растворителей вплоть до полного исключения их использования, что помимо удешевления способа, повышает его пожаробезопасность;
- структура коллагенсодержащего материала, получаемого согласно заявляемому способу, такова, что имеется возможность пропитки целевого продукта растворами лекарственных препаратов, а также проведения его прессования перед окончательным высушиванием, т.е. заявляемое техническое решение дает возможность существенно расширить номенклатуру производимых пористых коллагенсодержащих материалов.The present invention has the following advantages compared with known methods for producing porous collagen-containing materials:
- since the sequence of operations used in the inventive method for producing a porous collagen-containing material makes it possible to dry the final product at 20-60 o C and at the same time does not lose a porous well-swelling structure, compared to analogues, the present invention is characterized by a significant reduction in cost and simplification of the method in whole since energy-intensive, lengthy and expensive freeze drying is excluded from the process;
- compared with the prototype method, the inventive method is characterized by a sharp reduction in the consumption of organic solvents up to the complete exclusion of their use, which, in addition to reducing the cost of the method, increases its fire safety;
- the structure of the collagen-containing material obtained according to the claimed method is such that it is possible to impregnate the target product with solutions of drugs, as well as press it before final drying, i.e. The claimed technical solution makes it possible to significantly expand the range of produced porous collagen-containing materials.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95110213A RU2116801C1 (en) | 1995-06-15 | 1995-06-15 | Method of the porous collagen-containing material preparing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95110213A RU2116801C1 (en) | 1995-06-15 | 1995-06-15 | Method of the porous collagen-containing material preparing |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU95110213A RU95110213A (en) | 1997-12-10 |
| RU2116801C1 true RU2116801C1 (en) | 1998-08-10 |
Family
ID=20169023
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU95110213A RU2116801C1 (en) | 1995-06-15 | 1995-06-15 | Method of the porous collagen-containing material preparing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2116801C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005121251A1 (en) * | 2004-06-07 | 2005-12-22 | Zakrytoe Aktsionernoe Obshchestvo 'ostashkovsky Kozhevenny Zavod' | Sheet porous collagen-containing material and method for the production thereof |
| RU2704248C1 (en) * | 2018-10-02 | 2019-10-25 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет инженерных технологий" (ФГБОУ ВО "ВГУИТ") | Method of producing porous collagen material |
-
1995
- 1995-06-15 RU RU95110213A patent/RU2116801C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| RU, C1 2034572 (Малое предприятие "Поликом") 10.05.95, A 61 L 15/132. RU, C1 2053796 (Институт пищевых веществ РАН), 10.02.96, A 61 L 15/32. RU C1, 2070560 (ТОО Научно-производственное предприятие "КОПО"), 20.12.96, C 08 H 1/06. DE A1 3719177 (Gleich Anmeder) 29.12.88, A 61 L 27/00. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005121251A1 (en) * | 2004-06-07 | 2005-12-22 | Zakrytoe Aktsionernoe Obshchestvo 'ostashkovsky Kozhevenny Zavod' | Sheet porous collagen-containing material and method for the production thereof |
| RU2704248C1 (en) * | 2018-10-02 | 2019-10-25 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет инженерных технологий" (ФГБОУ ВО "ВГУИТ") | Method of producing porous collagen material |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4412947A (en) | Collagen sponge | |
| CN100372579C (en) | Cross-linked apatite/collagen porous body containing self-organized apatite/collagen composite and its production method | |
| US4948540A (en) | Method of preparing collagen dressing sheet material | |
| EP0081440B1 (en) | Process for preparing forms of native or non-crosslinked collagen with a preserved helicoidal structure, in association with mucopolysaccharides, and their use in the cosmetic, pharmaceutical, analytical and other fields | |
| DE3203957C2 (en) | ||
| KR20030086254A (en) | A method of preparing a collagen sponge, a device for extracting a part of a collagen foam, and an elongated collagen sponge | |
| CN101342381A (en) | Preparation method for anti-inflammation adhesion-proof hemostatic sponge | |
| RU2704248C1 (en) | Method of producing porous collagen material | |
| JPH04305600A (en) | Spongy collagen, method of manufacturing same, method of applying active substance and percutaneously applied agent | |
| CN110639050A (en) | Silk fibroin nanofiber and preparation method of silver-loaded antibacterial dressing based on silk fibroin nanofiber | |
| CN107320762B (en) | Collagen/bacterial cellulose composite membrane dressing and preparation method thereof | |
| JP4551761B2 (en) | Keratin-derived orthopedic material | |
| CN107137758B (en) | Microfiber collagen hemostatic material and preparation method thereof | |
| RU2116801C1 (en) | Method of the porous collagen-containing material preparing | |
| CN109045346A (en) | A kind of preparation method of medical collagen sponge | |
| JPH0611810B2 (en) | Porous chitin molding and method for producing the same | |
| WO2017100878A1 (en) | Process for producing asymmetric membranes, membranes thus produced and use thereof | |
| CN109111591A (en) | It is a kind of carry medicine styptic sponge preparation method and its preparation load medicine styptic sponge | |
| CN106540310A (en) | A kind of absorbability rapid hemostatic material and preparation method thereof | |
| CN108452366B (en) | Cod skin gelatin composite hemostatic dressing and preparation method thereof | |
| CN114949329B (en) | Preparation method of surface modified silk fibroin-aloin double-layer fiber membrane | |
| CN113750287B (en) | Water-soluble hemostatic sponge and preparation method thereof | |
| RU2053796C1 (en) | Method of preparing spongy collagen-containing material | |
| CN114350162A (en) | Gradient pore structure silk fibroin film and preparation method thereof | |
| CN107412845B (en) | Giant salamander secretion biomembrane and preparation method and application thereof |