RU2115433C1 - Mixed anthrax vaccine - Google Patents
Mixed anthrax vaccine Download PDFInfo
- Publication number
- RU2115433C1 RU2115433C1 SU5060604A RU2115433C1 RU 2115433 C1 RU2115433 C1 RU 2115433C1 SU 5060604 A SU5060604 A SU 5060604A RU 2115433 C1 RU2115433 C1 RU 2115433C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vaccine
- anthrax
- immunity
- live
- vaccination
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к лекарственным препаратам, содержащим антигены, в частности к сибиреязвенным вакцинам, и может быть использовано в медицине и ветеринарии. The invention relates to medicines containing antigens, in particular to anthrax vaccines, and can be used in medicine and veterinary medicine.
Уже известна адсорбированная сибиреязвенная вакцина (anthrax vaccine fdrorbed - далее адсорбированная вакцина), производимая Michigan Departament of Public Health (Lansing, Michigan 48909) по License N 99 (руководство по применению "Anthrax vaccine adsorbed"). Вакцина представляет собой специальный жидкий препарат, содержащий следующие компоненты:
протективный антиген Bacillus anthracis (ПА), получаемый при культивировании бескапсульного штамма сибиреязвенного микроба в синтетической среде;
гидрохлорид алюминия - 4,8 мг/доза вакцины;
формальдегид - 0,02%;
хлорид бензетония - 0,0025%.The adsorbed anthrax vaccine (anthrax vaccine fdrorbed - hereinafter adsorbed vaccine) manufactured by the Michigan Departament of Public Health (Lansing, Michigan 48909) under License N 99 (Anthrax vaccine adsorbed application manual) is already known. A vaccine is a special liquid preparation containing the following components:
protective antigen Bacillus anthracis (PA), obtained by culturing a capsule-free strain of anthrax microbe in a synthetic medium;
aluminum hydrochloride - 4.8 mg / dose of the vaccine;
formaldehyde - 0.02%;
benzethonium chloride - 0.0025%.
Вакцина выпускается в 5 мл флаконах. Каждый флакон содержит 10 доз (5 мл). The vaccine is available in 5 ml vials. Each vial contains 10 doses (5 ml).
Вакцина используется следующим образом. Выполняется первичная иммунизация, включающая три подкожные инъекции по 0,5 мл вакцины с интервалом в дне недели и затем три дополнительных подкожных инъекции по 0,5 мл вакцины через 6, 12 и 18 мес. При сформировании иммунитета рекомендуется выполнять ежегодно по одной бустерной подкожной инъекции по 0,5 мл. The vaccine is used as follows. The primary immunization is performed, including three subcutaneous injections of 0.5 ml of the vaccine with an interval of a day of the week and then three additional subcutaneous injections of 0.5 ml of the vaccine after 6, 12 and 18 months. When immunity is formed, it is recommended to perform annually one booster subcutaneous injection of 0.5 ml.
Недостатком адсорбированной вакцины является сложная схема ее применения и низкая защитная эффективность. Последнее обусловлено тем, что действие адсорбированной вакцины направлено лишь на предотвращение заключительного этапа инфекционного процесса - поражения макроорганизма токсичными продуктами сибиреязвенного микроба. Создание антитоксического иммунитета защищает от клинических проявлений заболевания, однако не исключает развития начальных стадий инфекционного процесса - колонизации Bacillus anthracis в области входных ворот и инвазии во внутреннюю среду организма. Низкая защитная эффективность адсорбированной вакцины обусловливает необходимость многократной вакцинации - отсюда и сложная схема применения такой вакцины. A disadvantage of an adsorbed vaccine is its complex application and low protective efficacy. The latter is due to the fact that the action of the adsorbed vaccine is aimed only at preventing the final stage of the infectious process - the defeat of the macroorganism by the toxic products of the anthrax microbe. The creation of antitoxic immunity protects against the clinical manifestations of the disease, but does not exclude the development of the initial stages of the infectious process - colonization of Bacillus anthracis in the area of the entrance gate and invasion of the internal environment of the body. The low protective efficacy of the adsorbed vaccine necessitates multiple vaccinations - hence the complex use of such a vaccine.
Общим существенным признаком с заявляемой вакциной является использование в качестве одного из иммуногенов протективного антигена Bacillus anthracis. Адсорбированная вакцина, производимая Michigan Departament of Public Healt, является коммерческим препаратом, разрешенным для использования в США и ряде других стран. A common essential feature with the claimed vaccine is the use of the protective antigen Bacillus anthracis as one of the immunogens. The adsorbed vaccine manufactured by the Michigan Departament of Public Healt is a commercial drug approved for use in the United States and several other countries.
Наиболее близкой к заявляемой является вакцина сибиреязвенная СТИ живая сухая (далее - живая вакцина). Вакцина представляет собой взвесь живых спор бескапсульного сибиреязвенного штамма СТИ в 30% глицерине (Инструкция по применению вакцины сибиреязвенной СТИ живой сухой). Выпускалась Предприятием по производству бактерийных препаратов Тбилисского НИИ вакцин и сывороток (380042, Тбилиси, ул. Готца 3) в виде лиофилизированного препарата, содержащего 4•109 - 5•109 живых спор в ампуле. Непосредственно перед использованием препарат разводится в 30% растворе глицерина. Вакцинация проводится двумя способами: накожным (плановая вакцинация) и подкожным безыгольным (по эпидемическим показаниям). Первичная иммунизация проводится двукратно с интервалом в 21 день, ревакцинация - через год однократно. Одна накожная прививочная доза должна содержать от 4•108 до 5•108, одна подкожная от 4•107 до 5•107 живых спор. Доза для ревакцинации та же, что и при первичном применении.Closest to the claimed is the vaccine anthrax STI live dry (hereinafter - the live vaccine). The vaccine is a suspension of live spores of the capsule-free anthrax strain STI in 30% glycerol (Instructions for use of the vaccine anthrax STI live dry). It was produced by the Enterprise for the Production of Bacterial Preparations of the Tbilisi Research Institute of Vaccines and Serums (380042, Tbilisi, 3 Gotts St.) in the form of a lyophilized preparation containing 4 • 10 9 - 5 • 10 9 live spores in an ampoule. Immediately before use, the drug is diluted in a 30% glycerol solution. Vaccination is carried out in two ways: subcutaneous (routine vaccination) and subcutaneous needleless (according to epidemic indications). Primary immunization is carried out twice with an interval of 21 days, revaccination - once a year. One subcutaneous inoculation dose should contain from 4 • 10 8 to 5 • 10 8 , one subcutaneous from 4 • 10 7 to 5 • 10 7 live spores. The dose for revaccination is the same as with the initial use.
Недостатком живой вакцины является длительный латентный период и период нарастания (до 3 - 4 нед) и относительно короткий период высокой специфической резистентности, что проявляется "пробоем" иммунитета в первые 5 - 14 сут и через 3 мес после иммунизации (среди всех заболевших сибирской язвой от 6,4 до 27,7% составляли люди, ранее привитые живой вакциной - Бургасов с соавт.//Журн. микробиолог., эпидемиолог. и иммунолог. - 1976). The disadvantage of a live vaccine is a long latent period and a rise period (up to 3-4 weeks) and a relatively short period of high specific resistance, which is manifested by a “breakdown” of immunity in the first 5-14 days and 3 months after immunization (among all patients with anthrax from 6.4 to 27.7% were people previously vaccinated with a live vaccine - Burgasov et al. // Journal of Microbiologist, Epidemiologist and Immunologist - 1976).
Указанные недостатки обусловлены тем, что формирование поствакцинального иммунитета после применения живой вакцины связано с колонизацией, размножением и последующей диссеминацией по лимфатическим путям микробов вакцинного штамма. Наряду с этим, живая вакцина обеспечивает формирование специфического иммунитета, воздействующего в первую очередь на начальные этапы инфекции (антибактериальный иммунитет), и в случае генерализации процесса недостаточно эффективно предотвращает токсические эффекты, наблюдаемые на заключительной стадии заболевания. These disadvantages are due to the fact that the formation of post-vaccination immunity after the use of a live vaccine is associated with the colonization, reproduction and subsequent dissemination of the microbes of the vaccine strain along the lymphatic pathways. Along with this, a live vaccine provides the formation of specific immunity, which primarily affects the initial stages of infection (antibacterial immunity), and if the process is generalized, it does not effectively prevent the toxic effects observed at the final stage of the disease.
Общим существенным признаком с заявляемой вакциной является использование в качестве одного из иммуногенов живых спор Bacillus anthracis штамма СТИ. A common essential feature with the claimed vaccine is the use of the STI strain Bacillus anthracis as one of the immunogens.
Вакцина сибиреязвенная СТИ живая сухая - коммерческий препарат, разрешенный для использования в СССР (СНГ). The anthrax STI live dry vaccine is a commercial preparation approved for use in the USSR (CIS).
Задачей изобретения является создание в короткие сроки высокой и длительно сохраняющейся специфической невосприимчивости к возбудителю сибирской язвы. The objective of the invention is the creation in a short time of high and long-lasting specific immunity to the causative agent of anthrax.
Поставленная задача решается благодаря тому, что вакцина сибиреязвенная, содержащая споры бескапсульного вакцинного штамма Bacillus anthracis СТИ, дополнительно содержит ПА сибиреязвенного микроба. ПА сибиреязвенного микроба может быть сорбирован на носителе и/или находиться в простой смеси со спорами вакцинного штамма Bacillus anthracis. Соотношение компонентов в одной прививочной дозе коммерческого варианта вакцины следующее:
живых спор Bacillus anthracis СТИ - 40 - 60 млн,
ПА сибиреязвенного микроба - 30 - 40 ИД50,
геля гидроокиси алюминия не более - 2,5 мг,
где ИД50 - среднеэффективная иммунизирующая единица для белых мышей (ИД50 см. в Дербин М.И. с соавт.//Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. - 1977. N 2 - С. 63 - 67).The problem is solved due to the fact that the anthrax vaccine, containing spores of the capsule-free vaccine strain of Bacillus anthracis STI, additionally contains PA anthrax microbe. The anthrax microbe PA can be adsorbed on a carrier and / or in a simple mixture with the spores of the vaccine strain Bacillus anthracis. The ratio of components in one vaccination dose of a commercial variant of the vaccine is as follows:
live spores of Bacillus anthracis STI - 40-60 million,
PA anthrax microbe - 30 - 40 ID 50 ,
aluminum hydroxide gel no more than 2.5 mg,
where ID 50 is a medium-efficient immunizing unit for white mice (ID 50 see M. Derbin et al. // Journal of Microbiol., Epidemiol. and Immunol. - 1977. N 2 - P. 63 - 67).
Доза для иммунизации людей содержится в 0,5 мл предложенной вакцины. Первичная иммунизация проводится один раз в год подкожно. The dose for immunizing people is contained in 0.5 ml of the proposed vaccine. Primary immunization is carried out once a year subcutaneously.
Сопоставляя значения показателей косвенных тестов и уровни защищенности против подкожного и аэрогенного заражения вирулентными культурами сибиреязвенного микроба, определенные на экспериментальных животных, с динамикой клеточных и гуморальных показателей специфической резистентности у людей, можно экстраполировать, что напряженный иммунитет после однократного применения заявляемой сибиреязвенной вакцины обеспечивает защиту от развития инфекции не менее чем у 80 - 90% привитых. Прочный иммунитет формируется к 7 - 10 сут и сохраняется в течение 6 мес, а через 9 - 12 мес определяется примерно у 50 - 70% вакцинированных. Наряду с этим, высокий уровень специфической резистентности после однократного применения живой вакцины (прототип) развивается к 21 сут у 55 - 65%, сохраняется до 4 мес у 30 - 40%, до 6 мес - у 15 - 20% и до 9 - 12 мес - лишь у 5 - 10% привитых. После аппликации адсорбированной вакцины (аналог) иммунитет формируется к 7 - 10 сут у 70 - 80% и сохраняется до 4 месяцев только у 10 - 15% вакцинированных. Comparing the values of the indices of indirect tests and the levels of protection against subcutaneous and aerogenic infection with virulent cultures of the anthrax microbe determined in experimental animals with the dynamics of cellular and humoral indicators of specific resistance in humans, it can be extrapolated that strained immunity after a single application of the claimed anthrax vaccine provides protection against development infections in at least 80 - 90% of vaccinated. Strong immunity is formed by 7–10 days and lasts for 6 months, and after 9–12 months, approximately 50–70% of vaccinees are determined. Along with this, a high level of specific resistance after a single application of a live vaccine (prototype) develops by 21 days at 55 - 65%, lasts up to 4 months at 30 - 40%, up to 6 months - at 15 - 20% and up to 9 - 12 months - only 5 - 10% of vaccinated. After application of an adsorbed vaccine (analogue), immunity is formed by 7–10 days in 70–80% and lasts up to 4 months only in 10–15% of vaccinees.
Между совокупностью существенных признаков заявляемого объекта и достигаемым техническим результатом существует причинно-следственная связь, а именно:
1. Полноценный иммунитет против сибирской язвы предполагает наличие специфической защищенности против агрессивного воздействия спор, вегетативных клеток (антибактериальный иммунитет) и экзотоксина (антитоксический иммунитет) - что достигается в заявленном изобретении сочетанием обоих антигенных компонентов в одном вакцинном препарате и проявляется высокой и длительно сохраняющейся специфической невосприимчивостью к заражению возбудителем сибирской язвы.Between the set of essential features of the claimed object and the achieved technical result there is a causal relationship, namely:
1. Full immunity against anthrax suggests the presence of specific protection against the aggressive effects of spores, vegetative cells (antibacterial immunity) and exotoxin (antitoxic immunity) - which is achieved in the claimed invention by a combination of both antigenic components in one vaccine preparation and is manifested by high and long-lasting specific immunity to infection with the causative agent of anthrax.
2. Короткие сроки формирования специфической невосприимчивости обусловлены действием на иммунную систему макроорганизма ПА, тогда как использование только живых спор вакцинного штамма Bacillus anthracis предполагает длительный латентный период в иммунном ответе на их введение. 2. The short period of formation of specific immunity is due to the action of the PA macroorganism on the immune system, while the use of only live spores of the vaccine strain Bacillus anthracis suggests a long latent period in the immune response to their introduction.
Изобретение позволяет:
1. Повысить безопасность персонала, работающего в эпидемических очагах сибирской язвы и в лабораторных условиях.The invention allows:
1. To increase the safety of personnel working in the epidemic foci of anthrax and in laboratory conditions.
2. Сократить расходы на иммунизацию людей и животных. 2. Reduce the cost of immunizing people and animals.
3. Проводить иммунизацию на фоне антибактериальной терапии сибирской язвы. 3. To carry out immunization against the background of antibacterial therapy for anthrax.
Предложенную вакцину получают следующим образом. The proposed vaccine is prepared as follows.
Споровую суспензию Bacillus anthracis штамма СТИ-1 разводят стерильным физиологическим раствором хлористого натрия до концентрации 200 ± 40 млн спор в 1 мл, а препараты сорбированного протективного антигена - до содержания 140±20 ИД50 в 1 мл для белых мышей. Равные объемы разведенных препаратов сводят в одной емкости и тщательно перемешивают в течение 15 - 20 мин. Полученный полуфабрикат вакцины разливают по 5,0 мл в ампулы емкостью 10,0 мл. Все операции проводятся с выполнением правил асептики.The spore suspension of Bacillus anthracis strain STI-1 is diluted with sterile physiological solution of sodium chloride to a concentration of 200 ± 40 million spores in 1 ml, and preparations of the sorbed protective antigen are diluted to a content of 140 ± 20 ID 50 in 1 ml for white mice. Equal volumes of diluted preparations are reduced in one container and mixed thoroughly for 15 to 20 minutes. The resulting semi-finished vaccine is poured into 5.0 ml in ampoules with a capacity of 10.0 ml. All operations are carried out with the implementation of aseptic rules.
Вакцина названа "Вакцина сибиреязвенная комбинированная". The vaccine is called "Anthrax combined vaccine."
Вакцина сибиреязвенная комбинированная представляет собой жидкий препарат, разделяющийся при стоянии на бесцветную надосадочную жидкость и осадок светло-бежевого или светло-коричневого цвета. При встряхивании вакцины образуется гомогенная суспензия, медленно оседающая при стоянии. Появление мутности, цветности и опалесценции надосадочной жидкости, а также посторонних частиц, неразбивающихся комков и хлопьев не допускается. Стандартизацию содержания монокомпонентов в одной дозе препарата осуществляют по общему количеству, количеству живых и нормально окрашивающихся по Цилю-Нильсену спор, антигенной активности, а также по содержанию общего азота и окиси алюминия. Штамм Bacillus anthracis СТИ-1 содержит одну плазмиду с молекулярной массой 100 - 120 МД. Концентрация спор вакцинного штамма СТИ в препарате составляет 80 - 120 млн/мл, количество живых и нормально окрашивающихся по Цилю-Нильсену спор находится в пределах 90 - 95%, содержание ПА - 60 - 80 среднеэффективных иммунизирующих единиц для белых мышей (ИД50)/мл, антигенная активность со специфическим гамма-глобулином - не менее 50 единиц/мл, содержание общего азота - не более 0,4 мг/мл и окиси алюминия - не более 5 мг/мл. Препарат не должен содержать посторонней микрофлоры, иметь pH 7,2 ± 0,1 и обладать высокой иммуногенностью, индекс резистентности (ИР - отношение ЛД50 для привитых к ЛД50 непривитых животных) для морских свинок не менее 25000. Срок годности вакцины - два года с возможным продлением, в случае положительных результатов переконтроля, еще на один год.The anthrax combined vaccine is a liquid preparation that separates when standing on a colorless supernatant and a precipitate of light beige or light brown color. When the vaccine is shaken, a homogeneous suspension forms, which slowly settles upon standing. The appearance of turbidity, color and opalescence of the supernatant, as well as foreign particles, indestructible lumps and flakes are not allowed. The standardization of the content of monocomponents in one dose of the drug is carried out according to the total number, number of live and normally stained by Ziehl-Nielsen spores, antigenic activity, as well as the content of total nitrogen and aluminum oxide. The strain Bacillus anthracis STI-1 contains one plasmid with a molecular weight of 100 - 120 MD. The concentration of spores of the STI vaccine strain in the preparation is 80 - 120 million / ml, the number of live and normally stained Ziehl-Nielsen spores is in the range of 90 - 95%, the PA content is 60 - 80 of the average effective immunizing units for white mice (ID 50 ) / ml, antigenic activity with specific gamma globulin - not less than 50 units / ml, total nitrogen content - not more than 0.4 mg / ml and aluminum oxide - not more than 5 mg / ml. The drug should not contain extraneous microflora, have a pH of 7.2 ± 0.1 and have high immunogenicity, resistance index (IR - ratio of LD 50 for vaccinated to LD 50 unvaccinated animals) for guinea pigs not less than 25,000. The shelf life of the vaccine is two years with a possible extension, in the case of positive results of the re-control, for another year.
Возможность осуществления заявляемого изобретения показана следующими примерами. The possibility of carrying out the claimed invention is shown by the following examples.
Пример 1. Получение вакцины сибиреязвенной комбинированной. Example 1. Obtaining a vaccine anthrax combined.
Споровую суспензию Bacillus anthracis СТИ разводят стерильным физиологическим раствором хлористого натрия до концентрации 200 ± 40 млн спор в 1 мл, а препараты сорбированного ПА - до содержания 140 ± 20 ИД50 в 1 мл для белых мышей. Равные объемы разведенных препаратов сводят в одной емкости и тщательно перемешивают в течение 15 - 20 мин. Полученный полуфабрикат вакцины разливают по 0,5 мл в ампулы емкостью 10,0 мл. Все операции проводятся с выполнением правил асептики.The spore suspension of Bacillus anthracis STI is diluted with sterile physiological solution of sodium chloride to a concentration of 200 ± 40 million spores in 1 ml, and preparations of adsorbed PA to a content of 140 ± 20 ID 50 in 1 ml for white mice. Equal volumes of diluted preparations are reduced in one container and mixed thoroughly for 15 to 20 minutes. The resulting semi-finished vaccine is poured into 0.5 ml in ampoules with a capacity of 10.0 ml. All operations are carried out with the implementation of aseptic rules.
Пример 2. Напряженность поствакцинального иммунитета после иммунизации заявляемой вакциной и вакцинами-аналогами. Example 2. The intensity of post-vaccination immunity after immunization with the inventive vaccine and vaccines analogues.
Для определения напряженности поствакцинального иммунитета животных иммунизировали различными дозами заявляемой вакцины и вакцин-аналогов. Вакцинацию живой (прототип) и адсорбированной химической (аналог) вакцинами проводили дважды с интервалом в 21 сут, а для заявляемой - однократно. Заражение животных проводили подкожно на 21 сут после последней прививки, путем введения нарастающих количеств спор 2-й вакцины Ценковского (от 100 тыс до 1 млрд). Напряженность иммунитета определяли по показателю ИР, показателю превентивных свойств сыворотки крови (ПСС см. Бургасов П.Р. и др. // Журн. микробиол. , эпидемиол. и иммунол - 1972. - N 6. - С. 142 - 147), титрам иммунофлюоресцирующих антител (ИФ, см. Фофанов П.Е. и др. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1981.-N6.- С. 108 - 110) и интенсивности внутрикожной аллергической пробы (АП, см. Шляхов Э.Н. Сибиреязвенная аллергия. - Кишинев, 1968) с антраксином. Результаты приведены в табл. 1. To determine the intensity of post-vaccination immunity, animals were immunized with various doses of the claimed vaccine and analog vaccines. Vaccination of live (prototype) and adsorbed chemical (analogue) vaccines was carried out twice with an interval of 21 days, and once for the claimed one. Infection of animals was carried out subcutaneously on 21 days after the last vaccination, by introducing increasing amounts of spores of the 2nd Zenkovsky vaccine (from 100 thousand to 1 billion). Immunity intensity was determined by the indicator of IR, the indicator of the preventive properties of blood serum (PSS see Burgasov P.R. and others // Journal of microbiol., Epidemiol. And immunol - 1972. - N 6. - P. 142 - 147), titers of immunofluorescent antibodies (IF, see Fofanov P.E. et al. // Journal of Microbiol., Epidemiol. and Immunobiol. -1981.-N6.- P. 108 - 110) and the intensity of the intradermal allergic test (AP, cm Shlyakhov EN Siberian-ulcer allergy. - Chisinau, 1968) with anthraxin. The results are shown in table. one.
Анализ данных, приведенных в табл. 1, показывает, что эффективность заявляемой вакцины, примененной однократно, в 5 - 15,3 раза выше по сравнению с двукратными прививками только живой или только адсорбированной вакцинами. Напряженность поствакцинального иммунитета находится в прямой зависимости от величины доз применяемых препаратов. Наибольшей эффективностью обладает препарат заявляемой вакцины, содержащей в своем составе 50 млн живых спор, 30 - 40 среднеэффективных иммунизирующих единиц (ИД50) ПА для белых мышей (адсорбирован на 2,0 - 2,5 мг гидроокиси алюминия).Analysis of the data given in table. 1, shows that the effectiveness of the claimed vaccine, applied once, is 5 - 15.3 times higher compared with double vaccinations with only live or only adsorbed vaccines. The intensity of post-vaccination immunity is in direct proportion to the dose rates of the drugs used. The most effective is the preparation of the claimed vaccine containing 50 million live spores, 30 - 40 medium-efficient immunizing units (ID 50 ) of PA for white mice (adsorbed on 2.0 - 2.5 mg of aluminum hydroxide).
Эффективность заявляемой вакцины по сравнению с вакцинами-аналогами была оценена в экспериментах на кроликах при подкожном заражении животных на 21 сут возрастающим количеством спор вирулентного штамма. The effectiveness of the claimed vaccine compared with vaccines-analogues was evaluated in experiments on rabbits with subcutaneous infection of animals at 21 days with an increasing number of spores of the virulent strain.
Анализ данных, приведенных в табл. 2, показывает, что заявляемая вакцина в равнозначных дозах обеспечивает формирование в 7,5 - 28 раз более напряженного иммунитета по сравнению с вакциной-прототипом (живой) и аналогом (химической). Наибольшей эффективностью, как и в опытах на морских свинках, обладал препарат заявляемой вакцины, содержащий в своем составе 50 млн живых спор и 30 - 40 ИД50 ПА для белых мышей.Analysis of the data given in table. 2, shows that the claimed vaccine in equivalent doses provides the formation of 7.5 - 28 times more intense immunity compared to the prototype vaccine (live) and analogue (chemical). The most effective, as in experiments on guinea pigs, was the preparation of the claimed vaccine, containing 50 million live spores and 30 - 40 ID 50 PA for white mice.
Пример 3. Динамика поствакцинального иммунитета после иммунизации заявляемой вакциной и вакцинами-аналогами. Example 3. The dynamics of post-vaccination immunity after immunization with the claimed vaccine and vaccines-analogues.
Эксперименты по исследованию динамики развития иммунитета после однократного подкожного применения заявляемой вакцины, содержащей в объеме 0,5 мл 40 - 60 млн живых спор, 30 - 40 ИД50 ПА и 2,0 - 2,5 мг окиси алюминия, проводили на кроликах и обезьянах павианах гамадрилах. В качестве контроля служили группы животных, которым однократно подкожно вводили только две человеко-дозы вакцины СТИ (100 млн спор) или только адсорбированную вакцину (60 - 80 ИД50 ПА). Заражение животных осуществляли подкожным введением спор вирулентной тест-культуры Bacillus anthracis. Результаты приведены в табл. 3 и 4.Experiments to study the dynamics of the development of immunity after a single subcutaneous application of the inventive vaccine containing 0.5 ml of 40-60 million live spores, 30-40 ID 50 PAs and 2.0-2.5 mg of aluminum oxide were carried out on rabbits and monkeys baboons hamadrilah. As a control, we used groups of animals to which only two human doses of the STI vaccine (100 million spores) or only the adsorbed vaccine (60 - 80 ID 50 PA) were subcutaneously administered. Infection of animals was carried out by subcutaneous administration of spores of the virulent test culture of Bacillus anthracis. The results are shown in table. 3 and 4.
Анализ результатов, приведенных в табл. 3 и 4, показал, что уже через 5 сут после однократной иммунизации заявляемой вакциной защищенными от заражения возбудителем сибирской язвы были 39,1%, а через 7 сут - 81,1% кроликов. Дальнейшее повышение поствакцинального иммунитета определялось на 10 сут - свыше 94% кроликов и обезьян были устойчивыми против инфицирования вирулентной тест-культурой Bacillus anthracis. Высокий уровень специфической резистентности, обеспечивающий выживаемость после заражения свыше 84% обезьян, сохранялся в течение 6 мес, а через год после вакцинации напряженный иммунитет выявлялся у 57,1% животных. Analysis of the results given in table. 3 and 4, showed that already 5 days after a single immunization with the claimed vaccine, 39.1% were protected from infection by the causative agent of anthrax, and after 7 days - 81.1% of rabbits. A further increase in post-vaccination immunity was determined on 10 days - over 94% of rabbits and monkeys were resistant to infection by the virulent test culture of Bacillus anthracis. A high level of specific resistance, which ensures survival after infection of more than 84% of monkeys, remained for 6 months, and a year after vaccination, intense immunity was detected in 57.1% of animals.
Наряду с этим, на 7 сут после однократной иммунизации вакциной СТИ (прототип) устойчивыми к заражению были лишь 20% кроликов, а на 10 сут - 46,7% кроликов и 38,9% обезьян. Достаточно выраженный иммунитет формировался только через 3 - 4 нед у 73,3% и 83,8% павианов гамадрилов, сохранялся до 3 мес у 44% кроликов и 50% обезьян. После заражения, проведенного через 6 и 12 мес, выживало соответственно лишь 33,3% и 7,7% павианов гамадрилов. Along with this, on the 7th day after a single immunization with the STI vaccine (prototype), only 20% of the rabbits were resistant to infection, and on the 10th day - 46.7% of the rabbits and 38.9% of the monkeys. A sufficiently pronounced immunity was formed only after 3–4 weeks in 73.3% and 83.8% of hamadril baboons, and remained in place for 3 months in 44% of rabbits and 50% of monkeys. After infection after 6 and 12 months, only 33.3% and 7.7% of hamadril baboons survived, respectively.
Однократное применение адсорбированной вакцины (аналог) сопровождалось быстрым развитием напряженного иммунитета, обеспечивающего выживаемость 73,3 - 93,3% кроликов и обезьян при инфицировании животных на 7 - 10 сут, который, однако, сохранялся лишь непродолжительное время. A single use of an adsorbed vaccine (analogue) was accompanied by the rapid development of intense immunity, ensuring the survival of 73.3 - 93.3% of rabbits and monkeys after infection of animals for 7-10 days, which, however, lasted only a short time.
При анализе среднегрупповых показателей косвенных тестов иммунитета у кроликов и обезьян, привитых различными вакцинами, можно сделать заключение о том, что иммунитет, формирующийся после однократного применения адсорбированной вакцины, характеризуется более высокими показателями ПСС, и наоборот - подкожное введение живой вакцины вызывает более интенсивное образование антител, выявляемых ИФ-методом. Наряду с этим, однократная иммунизация животных заявляемой вакциной сопровождалась развитием высокого уровня специфической резистентности, определяемой как по ППС, так и по ИФ-тестам. When analyzing the group-average indices of indirect immunity tests in rabbits and monkeys vaccinated with various vaccines, we can conclude that the immunity that forms after a single use of an adsorbed vaccine is characterized by higher PSS, and vice versa - subcutaneous administration of a live vaccine causes a more intense formation of antibodies detected by the IF method. Along with this, a single immunization of animals with the claimed vaccine was accompanied by the development of a high level of specific resistance, determined both by PPP and by IF-tests.
Пример 4. Безвредность и реактогенность заявляемой вакцины. Example 4. The safety and reactogenicity of the claimed vaccine.
Безвредность и реактогенность заявляемой вакцины изучали в экспериментах на 120 кроликах и 36 обезьянах павианах гамадрилах в соответствии с требованиями ГИСК им. Л.А.Тарасевича в сравнении с живой и адсорбированной вакцинами. Все препараты применяли однократно подкожно по 5 прививочных доз шприцевым и безыгольным методами. Наблюдение за животными осуществлялось в течение 21 сут. The safety and reactogenicity of the claimed vaccine was studied in experiments on 120 rabbits and 36 monkeys, baboons hamadril in accordance with the requirements of GISK them. L.A. Tarasevich in comparison with live and adsorbed vaccines. All preparations were used subcutaneously once in a dose of 5 vaccination doses using syringe and needleless methods. Observation of animals was carried out for 21 days.
На 2 - 6 сут после вакцинации наблюдалось (для всех вакцин) кратковременное и незначительное (6 - 8%) снижение массы животных, восстановление которой происходило уже к 8 - 10 сут. На месте аппликации заявляемой и адсорбированных вакцин формировались типичные "узелки-депо" без признаков инфильтрации и некроза. Изменения показателей периферической крови характеризовались умеренным и кратковременным (3 - 14 сут) повышением СОЭ и увеличением общего количества лейкоцитов. Повышение в ряде случаев температуры тела у животных не превышало 1oC от принятых физиологических значений. Указанные выше изменения регистрировались примерно с одинаковой частотой у всех групп животных.On 2 - 6 days after vaccination there was observed (for all vaccines) a short-term and insignificant (6 - 8%) decrease in the mass of animals, the restoration of which had already occurred by 8 - 10 days. Typical “nodal depots” without signs of infiltration and necrosis were formed at the site of application of the claimed and adsorbed vaccines. Changes in peripheral blood parameters were characterized by a moderate and short-term (3-14 days) increase in ESR and an increase in the total number of leukocytes. The increase in some cases of body temperature in animals did not exceed 1 o C from the accepted physiological values. The above changes were recorded with approximately the same frequency in all groups of animals.
При гистологическом исследовании не было обнаружено каких-либо проявлений патологического характера на месте введения препаратов и во внутренних органах. A histological examination did not reveal any manifestations of a pathological nature at the injection site and in the internal organs.
Таким образом, сравнительными исследованиями установлено, что заявляемая сибиреязвенная вакцина, как и применяемые в настоящее время для иммунизации людей и животных препараты живой (прототип) и адсорбированной (аналог) вакцин, является безвредной и умеренно реактогенной. Thus, comparative studies have found that the claimed anthrax vaccine, as well as currently used for immunization of humans and animals, live (prototype) and adsorbed (analogue) vaccines, is harmless and moderately reactogenic.
Пример 5. Прививочная доза у человека. Example 5. The vaccination dose in humans.
Определение величины прививочной дозы заявляемой вакцины осуществляли по принципу выбора минимально дозы, обеспечивающей формирование у привитых высокого уровня специфической защиты и не вызывающей повышенного числа поствакцинальных реакций. С этой целью испытывали три дозы препарата: предварительно выбранную в экспериментах на модельных животных и содержащую в объеме 0,5 мл 40 - 60 млн живых спор, 30 - 40 ИД50 ПА и 2 - 2,5 мг окиси алюминия, а также дозы в два раза меньше и в два раза больше по сравнению с ней. Прививочные дозы живой и адсорбированных вакцин составляли соответственно 50 млн живых спор и 37 ИД50 ПА. Каждую дозу вакцины вводили 20 добровольцам (опыт был согласован со специалистами ГИСК им. Л.А. Тарасевича). Результаты исследования приведены в табл. 5.The determination of the vaccination dose of the claimed vaccine was carried out according to the principle of selecting the minimum dose, which ensures the formation of a high level of specific protection in vaccinees and not causing an increased number of vaccine reactions. For this purpose, three doses of the drug were tested: pre-selected in experiments on model animals and containing in the volume of 0.5 ml 40-60 million live spores, 30-40 ID 50 PA and 2-2.5 mg alumina, as well as doses in two times less and two times more compared to her. Vaccination doses of live and adsorbed vaccines were 50 million live spores and 37 ID 50 PA, respectively. Each dose of the vaccine was administered to 20 volunteers (the experience was agreed with the specialists of the GISK named after L.A. Tarasevich). The results of the study are given in table. 5.
Приведенные в табл. 5 данные показывают, что предварительно выбранная величина прививочной дозы заявляемой вакцины в экспериментах на модельных животных (1,0) обеспечивает формирование высокого уровня специфического иммунитета у людей. Увеличение прививочной дозы препарата в два раза (2,0) вызывало лишь незначительный рост среднегрупповых показателей изученных тестов. Наряду с этим, уменьшение прививочной дозы заявляемой вакцины в два раза (0,5) сопровождалось существенным снижением значений среднегрупповых показателей ПСС, ИФ и АП, а их индивидуальные положительные (защитные) уровни определялись соответственно только у 12, 14 и 15 привитых. Кроме того, у 3 из 20 вакцинированных отрицательными одновременно были все исследованные тесты. Given in the table. 5 data show that the pre-selected vaccination dose of the inventive vaccine in experiments on model animals (1.0) provides the formation of a high level of specific immunity in humans. A double increase in the vaccination dose of the drug (2.0) caused only a slight increase in the average group parameters of the studied tests. Along with this, a decrease in the vaccination dose of the claimed vaccine by half (0.5) was accompanied by a significant decrease in the mean group values of PSS, IF and AP, and their individual positive (protective) levels were determined only in 12, 14 and 15 vaccinated, respectively. In addition, 3 of the 20 vaccinated negative simultaneously had all the tests tested.
Применение живой споровой (прототип) и адсорбированной (аналог) вакцин по данным косвенных методов вызывало у людей формирование менее напряженного иммунитета по сравнению с заявляемой вакциной. Антитела в непрямой реакции иммунолюоресценции в титрах 1/2 - 1/4 после введения живой вакцины выявлялись у 13 и защитный уровень ПСС - у 8 привитых, а после аппликации адсорбированной вакцины - соответственно у 12 и 10 человек. Кроме того, у 5 и 4 добровольцев, привитых соответственно живой и адсорбированной вакцинами, отрицательными были все три косвенных теста оценки иммунитета. The use of live spore (prototype) and adsorbed (analog) vaccines according to indirect methods caused the formation of less intense immunity in humans compared to the claimed vaccine. Antibodies in the indirect immunolorescence reaction in
Таким образом, в результате проведенных исследований в наблюдениях на добровольцах выбрана величина прививочной дозы заявляемой вакцины для человека, содержащая в объеме 0,5 мл 40...60 млн живых спор вакцинного штамма СТИ, 30 - 40 ИД50 ПА и не более 2,5 мг окиси алюминия. По показателю реактогенности заявляемая вакцина не отличается от живой и адсорбированной вакцин, а по иммунологической эффективности существенно их превосходит.Thus, as a result of studies in observations on volunteers, the size of the vaccination dose of the claimed vaccine for humans was selected, containing 0.5 ml of 40 ... 60 million live spores of the STI vaccine strain, 30 - 40 ID 50 PA and not more than 2, 5 mg alumina. In terms of reactogenicity, the claimed vaccine does not differ from live and adsorbed vaccines, and in terms of immunological effectiveness they significantly exceed them.
Заявляемая вакцина является коммерческим препаратом, разрешенным для использования в Российской Федерации приказом N 132 от 16.04.92 г. Министерства здравоохранения Российской Федерации. The inventive vaccine is a commercial drug that is approved for use in the Russian Federation by order N 132 dated 04.16.92 of the Ministry of Health of the Russian Federation.
Для производства вакцины в Научно-исследовательском институте микробиологии Министерства обороны Российской Федерации построена технологическая линия. A technological line has been built for the production of vaccines at the Research Institute of Microbiology of the Ministry of Defense of the Russian Federation
Вакцина применяется следующим образом. The vaccine is administered as follows.
Вакцинацию проводят подкожным способом. Ампулу встряхивают до образования равномерной взвеси. Место прививки обрабатывают этиловым спиртом либо его смесью с эфиром. Вводимая доза - 0,5 мл. Vaccination is carried out subcutaneously. The ampoule is shaken until a uniform suspension is formed. The vaccination site is treated with ethyl alcohol or its mixture with ether. The administered dose is 0.5 ml.
Прививки проводит средний медицинский персонал под руководством врача. Периодичность введения - 1 раз в год. Vaccinations are conducted by nurses under the supervision of a physician. The frequency of administration is 1 time per year.
Противопоказания:
1. Острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения. Прививки проводят не ранее, чем через 1 мес после выздоровления (ремиссии). После вирусного гепатита и менингококковой инфекции прививки проводят не ранее, чем через 6 мес.Contraindications:
1. Acute infectious and non-infectious diseases, chronic diseases in the acute stage. Vaccinations are carried out not earlier than 1 month after recovery (remission). After viral hepatitis and meningococcal infection, vaccinations are carried out no earlier than 6 months later.
2. Туберкулез в активной форме. 2. Tuberculosis in active form.
3. Аллергические заболевания (бронхиальная астма, астматический бронхит и др.). 3. Allergic diseases (bronchial asthma, asthmatic bronchitis, etc.).
4. Болезни сердечно-сосудистой системы, печени и почек в стадии декомпенсации. 4. Diseases of the cardiovascular system, liver and kidneys in the stage of decompensation.
5. Прогредиентные заболевания нервной системы, травма нервной системы с остаточными явлениями, эпилепсия с частыми припадками, инсульт. 5. Progressive diseases of the nervous system, trauma to the nervous system with residual effects, epilepsy with frequent seizures, stroke.
6. Диффузные болезни соединительной ткани. 6. Diffuse diseases of the connective tissue.
7. Болезни кожи. 7. Diseases of the skin.
Болезни крови. Blood disease.
9. Злокачественные новообразования. 9. Malignant neoplasms.
10. Иммунодефициты. 10. Immunodeficiencies.
11. Беременность. 11. Pregnancy.
Форма выпуска: по 5 мл в ампуле. Release form: on 5 ml in an ampoule.
Условия хранения и транспортировки: хранится в темном сухом месте, при температуре не выше 10oC. Разрешается транспортировать всеми видами крытого транспорта при температуре не выше 10oC.Storage and transportation: stored in a dark, dry place, at a temperature not exceeding 10 o C. It is allowed to transport all types of covered vehicles at a temperature not exceeding 10 o C.
Claims (1)
Живые споры Bacillus anfracis СТИ - 40 - 60 млн
Протективный антиген сибиреязвенного микроба - 30 - 40 ИД 50
Гель гидроокиси алюминия - Не более 2,5 мг
Физиологический раствор - До 0,5 млоThe combined anthrax vaccine containing live spores of the capsule-free strain of Bacillus anfhracis STI, characterized in that it additionally contains the antiseptic anthrax of the anthrax microbe in the following ratio of components in a single vaccination dose:
Live spores of Bacillus anfracis STI - 40-60 million
Protective antigen of anthrax microbe - 30 - 40 ID 50
Aluminum hydroxide gel - Not more than 2.5 mg
Saline - Up to 0.5 ml
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5060604 RU2115433C1 (en) | 1992-08-28 | 1992-08-28 | Mixed anthrax vaccine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5060604 RU2115433C1 (en) | 1992-08-28 | 1992-08-28 | Mixed anthrax vaccine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2115433C1 true RU2115433C1 (en) | 1998-07-20 |
Family
ID=21612484
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5060604 RU2115433C1 (en) | 1992-08-28 | 1992-08-28 | Mixed anthrax vaccine |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2115433C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2798291A1 (en) * | 1999-09-10 | 2001-03-16 | Pasteur Institut | ACELLULAR IMMUNOGENIC COMPOSITIONS AND ACELLULAR VACCINAL COMPOSITIONS AGAINST BACILLUS ANTHRACIS |
| EP1958960A2 (en) | 2001-12-05 | 2008-08-20 | Bhatnagar, Rakesh | A process for the preparation of a non-toxic anthrax vaccine |
| US8409590B2 (en) | 2004-02-11 | 2013-04-02 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Anthrax antigens and methods of use |
| RU2607369C1 (en) * | 2015-07-09 | 2017-01-10 | Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство обороны Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное учреждение "48 Центральный научно-исследовательский институт" Министерства обороны Российской Федерации | Method for producing pathogenic biological agent simulators |
-
1992
- 1992-08-28 RU SU5060604 patent/RU2115433C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Инструкция по применению вакцины сибиреязвенной СТИ живой сухой от 03.03.88. * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2798291A1 (en) * | 1999-09-10 | 2001-03-16 | Pasteur Institut | ACELLULAR IMMUNOGENIC COMPOSITIONS AND ACELLULAR VACCINAL COMPOSITIONS AGAINST BACILLUS ANTHRACIS |
| WO2001019395A1 (en) * | 1999-09-10 | 2001-03-22 | Institut Pasteur | Acellular immunogenic compositions and acellular vaccine compositions against bacillus anthracis |
| EP1958960A2 (en) | 2001-12-05 | 2008-08-20 | Bhatnagar, Rakesh | A process for the preparation of a non-toxic anthrax vaccine |
| US8409590B2 (en) | 2004-02-11 | 2013-04-02 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Anthrax antigens and methods of use |
| RU2607369C1 (en) * | 2015-07-09 | 2017-01-10 | Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство обороны Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное учреждение "48 Центральный научно-исследовательский институт" Министерства обороны Российской Федерации | Method for producing pathogenic biological agent simulators |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE60032622T2 (en) | COMPOSITION AND METHOD FOR CANCER ANTIGEN IMMUNOTHERAPY | |
| US8591910B2 (en) | Chemically programmable immunity | |
| JPH09511737A (en) | Immunotherapeutic agents and their use | |
| US4152412A (en) | Marking vaccine | |
| RU2115433C1 (en) | Mixed anthrax vaccine | |
| ES2388684T3 (en) | Vaccine Adjuvants | |
| JPS625922A (en) | Preparation of non toxin immunogenic prescription for pertussis toxin and manufacture of pertussis vaccine | |
| EP1645283A1 (en) | Combination vaccine | |
| Polish Typhoid Committee | Evaluation of typhoid vaccines in the laboratory and in a controlled field trial in Poland: Preliminary report | |
| EP2327420A2 (en) | Monoparaimmunity inducers based on attenuated rabbit myxoma viruses | |
| Gay et al. | AN EXPERIMENTAL STUDY OF METHODS OF PROPHYLACTIC IMMUNIZATION AGAINST TYPHOID FEVER: STUDIES IN TYPHOID IMMUNIZATION. V | |
| JP2004508424A (en) | Immunomodulatory preparation | |
| Rowan-Kelly et al. | The chemotherapeutic value of sulphadiazine in treatment of Acanthamoeba meningoencephalitis in mice | |
| Smith et al. | The weak immunogenicity of Fusobacterium necrophorum | |
| RU2112544C1 (en) | Vaccine against anthrax and emphysematous carbuncle alive associated and method for prophylaxis against these diseases | |
| JP4729475B2 (en) | Subcutaneous ganglioside vaccine composition | |
| Jarosova et al. | Effects of oil-based adjuvants on the immune response of pigs after dermal administration of antigen and evaluation of the immunization level after a subsequent Actinobacillus pleuropneumoniae challenge in pigs | |
| RU2330681C1 (en) | Polyvalent corpuscular antigen for production of medical and preventive biological products for brucellosis | |
| RU1777084C (en) | Method for prevention of pseudotuberculosis | |
| Sleptsov et al. | Structure and biological properties of artificial vaccinating compounds for treating brucellosis in agricultural animals | |
| CECIL | Immunization against pneumonia | |
| RU2056861C1 (en) | Mixed vaccine against anthrax and foot-and-mouth and a method of anthrax and foot-and-mouth prophylaxis | |
| EA029938B1 (en) | Vaccine against strangles in horses | |
| Munster et al. | Effect of lymphocytotherapy on the course of experimental Pseudomonas sepsis. | |
| RU2108110C1 (en) | Vaccine against cattle brucellosis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20100608 |
|
| REG | Reference to a code of a succession state |
Ref country code: RU Ref legal event code: PC43 Effective date: 20100608 |
|
| REG | Reference to a code of a succession state |
Ref country code: RU Ref legal event code: PC43 Effective date: 20120510 |