RU2111002C1

RU2111002C1 - Agent showing immunotropic, wound-healing and antibacterial activity and a method of its preparing

Info

Publication number: RU2111002C1
Application number: RU97110560A
Authority: RU
Inventors: Ю.А. Зволинский; Р.Ю. Зволинский; М.Ю. Зволинский
Original assignee: Зволинский Юрий Антонович
Priority date: 1997-07-02
Filing date: 1997-07-02
Publication date: 1998-05-20

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: agent is clear liquid from pregnant women urine, its electric resistance is about 800-100 Ohm. Agent has a complex of hormones and steroids. Urine is settled at decreased temperature and precipitate is discarded. Supernatant is heated, incubated at 37-40 C, cooled and precipitate is removed. Solution is subjected for catalysis in electric field up to resistance 800-1000 Ohm followed by sterilizing filtration at decreased temperature. EFFECT: improved method of preparing, enhanced effectiveness of an agent. 7 cl, 2 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности. Группа изобретений касается биологически активного средства, регулирующего метаболические процессы и способа его получения. The invention relates to medicine, namely to the pharmaceutical industry. The group of inventions relates to a biologically active agent that regulates metabolic processes and a method for its preparation.

Актуальность поиска средств, нормализующих обмен веществ при различных патологических нарушениях в организме человека, обусловлена широким спектром препаратов, используемых для этой цели (Машковский М.Д. - Медицина, М.: 1993, т.1, с. 634-714, т. с. 3-192). The relevance of the search for drugs that normalize metabolism in various pathological disorders in the human body is due to a wide range of drugs used for this purpose (Mashkovsky M.D. - Medicine, M .: 1993, v. 1, p. 634-714, v. p. 3-192).

Теоретический анализ эффективности препаратов показывает, что подобные средства представляют собой либо вещества, полученные путем химического синтеза, либо вещества биологического происхождения с однонаправленным конкретным действием. A theoretical analysis of the effectiveness of drugs shows that such agents are either substances obtained by chemical synthesis or substances of biological origin with a unidirectional specific action.

Среди последних особую группу составляют соединения гормональной природы, которые управляют метаболическими процессами в организме как на стадии развития, так и в зрелом возрасте. В качестве таковых выступают гормоны, выделяемые передней долей гипофиза и влияющие на функции половых желез: фолликулостимулирующий гормон, лютеинизирующий гормон и пролактин. Among the latter, a special group is made up of compounds of a hormonal nature that control metabolic processes in the body both at the developmental stage and in adulthood. As such, hormones are secreted by the anterior pituitary gland and affecting the function of the gonads: follicle-stimulating hormone, luteinizing hormone and prolactin.

В медицинской практике в качестве препарата, обладающего активностью фолликулостимулирующего гормона, применяют гонадотропин сывороточный и гонадотропин менопаузный, а препаратом, обладающим активностью лютеинизирующего гормона, является гонадотропин хорионический, получаемый из мочи беременных женщин (патент США N 3852422, патент ГДР N 274355, авт. свид. СССР N 537681, заявка Японии N 60-45852). In medical practice, serum gonadotropin and menopausal gonadotropin are used as a drug with follicle-stimulating hormone activity, and chorionic gonadotropin obtained from the urine of pregnant women is used as a drug with luteinizing hormone activity (U.S. Patent No. 3852422, Patent GDR No. 274355, Auth. . USSR N 537681, Japanese application N 60-45852).

Поскольку использование известных высокоочищенных отдельных гормонов и стероидов не всегда давало положительный лечебный эффект, появились средства, которые содержат комплекс двух гормонов, как, например, в препарате пергонал, предназначенном для лечения эндокринного бесплодия. Кроме того, известно, что для лечения болезней иммунных комплексов и аллергических заболеваний оказались полезными выделенные из мочи человека протеазы мочевой кислоты (патент США N 4540569), а ингибиторы протеаз лечат воспалительные заболевания (патент США N 4479937). Показано также, что низкомолекулярные пептиды из мочи обладают противоопухолевой активностью (Европейский патент N 0069232). Since the use of known highly purified individual hormones and steroids did not always give a positive therapeutic effect, agents appeared that contain a complex of two hormones, as, for example, in the drug Pergonal, intended for the treatment of endocrine infertility. In addition, it is known that for the treatment of diseases of immune complexes and allergic diseases, uric acid proteases isolated from human urine (US Pat. No. 4,540,569) and protease inhibitors treat inflammatory diseases (US Pat. No. 4,479,937) proved to be useful. It was also shown that low molecular weight peptides from urine have antitumor activity (European patent N 0069232).

Становится очевидным, что создавая средства, содержащие различные комбинации из гормонов и метаболитов, можно влиять на обмен веществ при различных патологических нарушениях. It becomes obvious that by creating funds containing various combinations of hormones and metabolites, it is possible to influence the metabolism in various pathological disorders.

Однако полученные к настоящему времени препараты не могут полностью удовлетворить потребности медицины, поскольку не обладают комплексом необходимых свойств, обеспечивающих возможность их эффективного применения. Кроме того, при использовании большинства из них требуется введение больших доз, что вызывает опасность побочных эффектов. However, the preparations obtained so far cannot fully satisfy the needs of medicine, since they do not possess a set of necessary properties that enable their effective use. In addition, the use of most of them requires the introduction of large doses, which causes a risk of side effects.

Задача изобретения - выбор условий получения из мочи беременных женщин препарата, обладающего широким спектром действия. The objective of the invention is the selection of conditions for obtaining from the urine of pregnant women a drug with a wide spectrum of action.

Согласно изобретению предлагается новое, не имеющее аналогов, средство, имеющее полигормональную природу, которое обладает одновременно иммунотропным, ранозаживляющим и антимикробным действием. Предлагаемый препарат не только является средством широкого действия, но в отличие от известных веществ, регулирующих обмен, обладает высокой активностью и не дает побочного действия. The invention proposes a new, unparalleled, agent having a polyhormonal nature, which has both immunotropic, wound healing and antimicrobial effects. The proposed drug is not only a broad-based agent, but, unlike the known substances that regulate metabolism, has high activity and does not give side effects.

Согласно изобретению создан принципиально новый, эффективный технологический процесс, который позволяет при минимальном количестве и простоте стадий получить продукт с высокой активностью. According to the invention, a fundamentally new, efficient technological process has been created, which allows to obtain a product with high activity with a minimum number and simplicity of stages.

В основе способа получения предлагаемого средства лежит использование в качестве материала мочи беременных женщин, при этом может быть полезной моча, взятая на любом сроке беременности от 1 до 9 мес. The method of obtaining the proposed product is based on the use of pregnant women as urine material, while urine taken at any gestational age from 1 to 9 months may be useful.

При реализации способа принципиально важным является этап отстаивания собранной мочи в течение 10-30 сут, предпочтительно от 15 до 20 сут при температуре от 4 до 10^oС, предпочтительно от 4 до 6^oС. Осадок, образовавшийся после отстоя, отделяют декантированием, а жидкую часть обрабатывают нагреванием при 37-40^oС, инкубируют, охлаждают, фильтруют и проводят катализ раствора в электрическом поле до достижения сопротивляемости порядка 800-1000 Ом. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации при давлении 0,2 атм через миллипоровские фильтры 0,2 мкм при пониженной температуре, ампулируют и хранят в холодильной камере.When implementing the method, the stage of settling the collected urine for 10-30 days, preferably from 15 to 20 days at a temperature of from 4 to 10 ^° C, preferably from 4 to 6 ^° C, is of fundamental importance ^. The precipitate formed after sedimentation is separated by decantation, and the liquid part is treated with heating at 37-40 ^o C, incubated, cooled, filtered and catalysed solution in an electric field to achieve a resistance of about 800-1000 Ohms. The resulting solution is subjected to sterilizing filtration at a pressure of 0.2 atm through 0.2 millipore Millipore filters at a reduced temperature, ampouled and stored in a refrigerator.

Готовый препарат представляет собой прозрачную жидкость. Проведенный химический анализ показал, что он включает комплекс различных гормонов и стероидов при следующем их содержании: ТТГ 0,08-1,3 мкМЕ/мл; ТТ₃ 0,98-2,0 нмоль/л; ТТ₄ 1,2 - 127,0 нмоль/л; СТ₃ 4,2 - 6,5 нмоль/л; СТ₄ 7,2 - 21,0 нмоль/л; кортизол 399 -1019 нмоль/л; ФСГ 8,25 - 27,7 мМЕ/мл; ЛГ 1,8 - 14,8 мМЕ/мл; пролактин 6,6 - 788 мМЕ/л; ХГЧ 11205 - 29500 мМЕ/мл; эстрадиол 18,984 - 315000 пм/л; прогестерон 5,4 - 2919 пм/л; эстриол 1,8 - 1,39 мг/сут. Препарат нетоксичен, не вызывает аллергической реакции.The finished product is a clear liquid. The chemical analysis showed that it includes a complex of various hormones and steroids with the following contents: TSH 0.08-1.3 μMU / ml; TT ₃ 0.98-2.0 nmol / L; TT ₄ 1.2 - 127.0 nmol / L; CT ₃ 4.2 - 6.5 nmol / l; CT ₄ 7.2 - 21.0 nmol / L; cortisol 399-1019 nmol / l; FSH 8.25 - 27.7 mIU / ml; LH 1.8 - 14.8 mIU / ml; prolactin 6.6 - 788 mIU / L; HCG 11205 - 29500 mIU / ml; estradiol 18.984 - 315000 pm / l; progesterone 5.4-2919 pm / l; estriol 1.8 - 1.39 mg / day. The drug is non-toxic, does not cause an allergic reaction.

Лекарственное средство имеетт действующее активное начало в количестве, эффективном для проявления иммуномодулирующего действия. Предпочтительное количество для обеспечения оптимального фармакологического эффекта при внутримышечном, внутривенном или подкожном введении составляет 0,5 - 10³ мл, при ежедневном введении либо через день в количестве от 1 до 10 инъекций до достижения положительного результата лечения.The drug has an active principle in an amount effective for the manifestation of an immunomodulatory effect. The preferred amount to ensure the optimal pharmacological effect for intramuscular, intravenous or subcutaneous administration is 0.5 to 10 ³ ml, with daily administration or every other day in an amount of 1 to 10 injections until a positive treatment result is achieved.

Пример 1. Мочу беременной женщины первого триместра собирают, отстаивают при 4-6^oС в течение 30 сут, декантируют верхний слой, примерно 2/3, нагревают до 40^oС и инкубируют примерно трое суток. После инкубации охлаждают до 18^oС, фильтруют раствор через бумажный фильтр или центрифугируют, а жидкую часть подвергают катализу в электрическом поле до достижения сопротивляемости раствора порядка 800-1000 Ом. Затем проводят стерилизующую фильтрацию через миллипоровские фильтры 0,2 мкм при давлении 0,2 атм, 18-19^oС. Полученный препарат ампулируют в жидком виде и хранят в холодильной камере.Example 1. The urine of a pregnant woman of the first trimester is collected, settled at 4-6 ^o C for 30 days, the upper layer is decanted, about 2/3, heated to 40 ^o C and incubated for about three days. After incubation, it is cooled to 18 ^{° C.} , the solution is filtered through a paper filter or centrifuged, and the liquid part is subjected to catalysis in an electric field until the resistance of the solution reaches about 800-1000 Ohms. Then sterilizing filtration is carried out through Millipore filters of 0.2 μm at a pressure of 0.2 atm, 18-19 ^o C. The resulting preparation is ampouled in liquid form and stored in a refrigerator.

Препарат получен с характеристикой, описанной выше. The drug is obtained with the characteristic described above.

Пример 2. Собирают мочу беременных женщин последнего триместра, отстаивают ее не менее 10 дней при 5-10^oС. Осадок отделяют, надосадочную жидкость нагревают и инкубируют при 37-40^oС трое суток, охлаждают до 20^oС, выделившийся осадок отделяют, раствор подвергают катализу в электрическом поле до достижения сопротивления 800-1000 Ом. Стерилизующую фильтрацию и ампулирование готового препарата проводят также, как в примере 1. Полученный препарат имеет характеристику, указанную выше.Example 2. The urine of pregnant women of the last trimester is collected, they are sedimented for at least 10 days at 5-10 ^o C. The precipitate is separated, the supernatant is heated and incubated at 37-40 ^o C for three days, cooled to 20 ^o C, the precipitate is separated, the solution is subjected to catalysis in an electric field until a resistance of 800-1000 Ohms is reached. Sterilizing filtration and ampoules of the finished product is carried out as in example 1. The resulting preparation has the characteristic described above.

Оценка антимикробной активности. Evaluation of antimicrobial activity.

Изучение активности препарата было проведено инвитро методом серийных разведений в соответствующей каждому микроорганизму питательной среде с последующим засевом тест-микробов на твердую питательную среду. The study of the activity of the drug was carried out in vitro by the method of serial dilutions in a nutrient medium corresponding to each microorganism, followed by inoculation of test microbes on a solid nutrient medium.

Всего для изучения микробиологической активности брали 7 культур. На питательную среду проводили посев микроорганизмов в концентрации 10², 10₃ и т.д. в 1 мл пептонной воды, тщательно растирали шпателем. Определялась задержка роста микроорганизмов по сравнению с контролем. Результаты исследований приведены в табл. 1. Как следует из табл. 1, предлагаемое средство проявляет антимикробную активность широкого спектра действия.In total, 7 cultures were taken to study microbiological activity. Microorganisms were sown on a nutrient medium at a concentration of 10 ² , 10 ₃ , etc. in 1 ml of peptone water, thoroughly rubbed with a spatula. The growth retardation of microorganisms was determined in comparison with the control. The research results are given in table. 1. As follows from the table. 1, the proposed tool exhibits antimicrobial activity of a wide spectrum of action.

Изучение ранозаживляющей активности. The study of wound healing activity.

Средство, полученное согласно изобретению, было применено в хирургической клинике в отделении плановой экстренной и гнойной хирургии. The agent obtained according to the invention was used in a surgical clinic in the department of elective emergency and purulent surgery.

Исследована группа больных с длительно незаживающими ранами различной этиологии (посттравматические, постнагноительные, варикозные, нейротрофические). A group of patients with long-term non-healing wounds of various etiologies (post-traumatic, post-suppurative, varicose, neurotrophic) was studied.

Ранозаживляющая активность оценивалась по скорости эпителизации поверхности пораженного участка кожи. В результате лечения у всех больных наблюдалось купирование воспаления, на вторые-третьи сутки раны очищались от гноя и нежизнеспособных тканей, на десятые-двенадцатые происходила полная эпителизация раневого дефекта у 80% больных. Wound healing activity was evaluated by the rate of epithelization of the surface of the affected area of the skin. As a result of treatment, relief of inflammation was observed in all patients, on the second or third day the wounds were cleaned of pus and non-viable tissues, on the tenth or twelfth complete epithelization of the wound defect occurred in 80% of patients.

Оценка иммунотропного действия средства. Assessment of the immunotropic effect of the drug.

Средством, полученным согласно изобретению, было также проведено лечение амбулаторно 56 больных добровольцев с диагнозом хронический бронхит, сахарный диабет, нейродермит, церебральный арахноидит, деформирующий остеоортроз, вирусный гепатит, ишемический инсульт, тромбофлебит, пародонтит. Для оценки эффективности лечения изучалась динамика клинической картины, проведены клинико-биохимические и иммунохимические исследования крови, изменение объема этиотропной и патогенетической терапии. В 36 случаях отмечен высокоэффективный результат, в 12 - удовлетворительный, и в 8 случаях - без эффекта. При применении предлагаемого средства терапевтический эффект наблюдался как при шокотерапии, так и в сочетании с другими методами лечения, независимо от длительности заболевания. Ухудшение самочувствия не наблюдалось, аллергических и токсический реакций не было, непереносимости препарата не установлено. Улучшение самочувствия у 36 больных сопровождалось исчезновением или уменьшением клинических признаков и симптомов заболеваний и было подтверждено нормализацией клинико-биохимических показателей крови, а также результатами исследования иммунологического статуса.. The agent obtained according to the invention also treated outpatiently 56 sick volunteers with a diagnosis of chronic bronchitis, diabetes mellitus, neurodermatitis, cerebral arachnoiditis, deforming osteoarthrosis, viral hepatitis, ischemic stroke, thrombophlebitis, periodontitis. To evaluate the effectiveness of treatment, the dynamics of the clinical picture was studied, clinical, biochemical and immunochemical blood tests were conducted, as well as a change in the volume of etiotropic and pathogenetic therapy. In 36 cases, a highly effective result was noted, in 12 - satisfactory, and in 8 cases - without effect. When using the proposed tool, the therapeutic effect was observed both with shock therapy and in combination with other methods of treatment, regardless of the duration of the disease. Deterioration of health was not observed, allergic and toxic reactions were not, intolerance to the drug has not been established. Improving health in 36 patients was accompanied by the disappearance or reduction of clinical signs and symptoms of diseases and was confirmed by the normalization of clinical and biochemical blood parameters, as well as the results of a study of immunological status ..

Иммуномодулирующее действие предлагаемого препарата оценивали в динамике до и во время лечения. При этом исследовались следующие показатели. Количество сывороточных иммуноглобулинов JgА, JgM, JgB, содержание В-лимфоцитов, Т-лимфоцитов, абсолютное содержание Т-хелперов и Т-супрессоров и их соотношение. The immunomodulatory effect of the proposed drug was evaluated in dynamics before and during treatment. The following indicators were investigated. The number of serum immunoglobulins JgA, JgM, JgB, the content of B-lymphocytes, T-lymphocytes, the absolute content of T-helpers and T-suppressors and their ratio.

В табл. 2 представлены данные, иллюстрирующие иммунокорректирующее действие препарата, полученного согласно изобретению, при лечении некоторых из вышеуказанных патологий. Значения рассчитаны по среднестатистическим показателям величин, приведенных в табл. 2 (p 0,05). In the table. 2 presents data illustrating the immunocorrective effect of the drug obtained according to the invention in the treatment of some of the above pathologies. The values are calculated according to the average indicators of the values given in table. 2 (p 0.05).

Полученные результаты свидетельствуют о восстановлении в периферической крови содержания субпопуляции Т-лимфоцитов, до уровня нормальных показателей. Основным показателем иммуномодулирующей активности является содержание Т-хелперов и Т-супрессоров, значение которого после проведения курса лечения приходит к норме. The results obtained indicate the restoration in the peripheral blood of the content of a subpopulation of T-lymphocytes to the level of normal indicators. The main indicator of immunomodulating activity is the content of T-helpers and T-suppressors, the value of which after the course of treatment comes to normal.

Практическая применимость изобретения иллюстрируется следующими примерами. The practical applicability of the invention is illustrated by the following examples.

Пример 1. Больной К., 25 лет, диагноз - церебральный арахноидит, гипертензивный синдром. Жалобы на головную боль в теменновисочной области, головокружение, плохой сон, раздражительность. Example 1. Patient K., 25 years old, diagnosed with cerebral arachnoiditis, hypertensive syndrome. Complaints of a headache in the parietal-temporal region, dizziness, poor sleep, irritability.

Проведен курс заявленным средством внутримышечной инъекцией по 2,0 мл в течение 40 дней через день. В результате лечения самочувствие и настроение ровное, аппетит и сон нормализовались, головокружение и головные боли не беспокоят. A course of the claimed means was administered by intramuscular injection of 2.0 ml for 40 days every other day. As a result of the treatment, his state of health and mood are even, his appetite and sleep returned to normal, dizziness and headaches do not bother.

Пример 2. Больная Р., 3 года, диагноз - хронический бронхит. Беспокоил почти постоянный сухой кашель, одышка, слабость. После внутримышечной инъекции средства в дозе 0,5-1,0 мл в течение 7 дней наблюдалось значительное улучшение самочувствия: нормализовался сон, появился аппетит. Ребенок стал подвижнее, общительнее. Нет кашля, одышка не беспокоит. Example 2. Patient R., 3 years old, the diagnosis of chronic bronchitis. Worried by an almost constant dry cough, shortness of breath, weakness. After intramuscular injection of the drug in a dose of 0.5-1.0 ml for 7 days, a significant improvement in health was observed: sleep was normal, appetite appeared. The child has become more mobile, sociable. No coughing, shortness of breath does not bother.

Пример 3. Больная Т., 64 года, диагноз - сахарный диабет, инсулинозависимая форма, перенесла острое нарушение мозгового кровообращения. Назначен курс 22 инъекции внутримышечно по 2,0 мл через день в сочетании с традиционной терапией. В результате лечения больная сначала с помощью, а затем самостоятельно встает и передвигается. Наблюдавший больную невропатолог отметил ранний восстановительный период. Example 3. Patient T., 64 years old, diagnosed with diabetes mellitus, an insulin-dependent form, suffered an acute violation of cerebral circulation. A course of 22 intramuscular injections of 2.0 ml every other day was prescribed in combination with traditional therapy. As a result of treatment, the patient first with the help, and then independently gets up and moves. The neurologist who observed the patient noted an early recovery period.

Пример 4. Больной Р., 1936 года рождения. Диагноз: хронический простатит. Назначен курс внутримышечных инъекций через день в течение 40 дней в количестве по 2,0 мл. Объективно улучшение гемодинамических показателей. Больной отмечает нормализацию аппетита и сна, восстановление половой активности, общее улучшение самочувствия. Example 4. Patient R., born in 1936. Diagnosis: chronic prostatitis. A course of intramuscular injections every other day for 40 days in an amount of 2.0 ml was prescribed. Objectively improving hemodynamic parameters. The patient notes the normalization of appetite and sleep, the restoration of sexual activity, a general improvement in well-being.

Пример 5. Больная М. , 1942 года рождения. Диагноз: язвенная болезнь 12-перстной кишки, обострение. Назначен курс из 10 в/м инъекций через день по 2,0 мл. После проведенного лечения объективно живот мягкий, безболезненный, язва зарубцевалась, жалоб не предъявляет, боли не беспокоят, сон и аппетит нормализовались. Example 5. Patient M., born in 1942. Diagnosis: peptic ulcer of the duodenum, exacerbation. A course of 10 i / m injections every other day at 2.0 ml was prescribed. After the treatment, the stomach was objectively soft, painless, the ulcer healed, no complaints, no pain, sleep and appetite returned to normal.

Пример 6. Больная К. , 21 года, диагноз: нейродермит. Больна с 4 лет. Объективно кожные высыпания на огибательных участках конечностей, на лице, на боковых поверхностях шеи, кожный зуд. После проведения курса 20 в/м инъекций по 2,0 мл через день кожные поражения исчезли, зуд прекратился. Example 6. Patient K., 21 years old, diagnosis: atopic dermatitis. Sick since 4 years. Objectively, skin rashes on the envelope of the limbs, on the face, on the lateral surfaces of the neck, skin itching. After a course of 20 i / m injections of 2.0 ml every other day, the skin lesions disappeared, the itching stopped.

Пример 7. Больная С., 45 лет. Посттравматический остеохондроз пояснично-крестцового отделов позвоночника. Жалобы на постоянные ноющие и ломящие боли в упоминавшихся отделах позвоночника. После применения заявленного средства по 3,0 мл в количестве 15 инъекций через два дня, боли не беспокоят, сон нормализовался. Восстановилась работоспособность. Example 7. Patient S., 45 years old. Post-traumatic osteochondrosis of the lumbosacral spine. Complaints of constant aching and breaking pains in the mentioned parts of the spine. After applying the claimed funds for 3.0 ml in the amount of 15 injections in two days, the pain does not bother, the sleep returned to normal. Performance restored.

Claims

1. A tool with immunotropic, wound healing and antimicrobial activity, characterized in that it is a clear liquid obtained from the urine of pregnant women, having a resistance of about 800-1000 Ohms and including a complex of hormones and steroids:
TSH - 0.08 - 1.3 microns IU / ml
TT ₃ - 0.98 - 2.0 nmol / L
TT ₄ - 4.2 - 127.0 nmol / L
CT ₃ - 4.2 - 6.5 nmol / L
CT ₄ - 7.2 - 21.0 nmol / L
Cortisol - 399 - 1019 nmol / L
FSH - 8.25 - 27.7 mIU / ml
LH - 1.8 - 14.8 mIU / ml
Prolactin - 6.6 - 788 mIU / L
HCG - 11205 - 29500 mIU / ml
Estradiol - 18.984 - 315000 pm / L
Progesterone - 5.4 - 2919 pm / L
Estriol - 1.8 - 1.39 mg / day
2. A method of obtaining funds having immunotropic, wound healing and antimicrobial activity, namely, that the urine of pregnant women is defended at a low temperature, the precipitate formed is separated, and the supernatant is heated and incubated at the same temperature, then it is cooled, the precipitate formed is separated, and the solution is subjected to catalysis in an electric field to achieve a resistance of 800 - 1000 Ohms, then sterilizing filtration is carried out at a low temperature.

3. The method according to p. 2, characterized in that the urine of pregnant women of 1 trimester is used.

4. The method according to claim 2 or 3, characterized in that the urine is defended at a temperature of 4 - 10 ^o C for 10 to 30 days.

5. The method according to claim 2 or 3, characterized in that the supernatant is heated to 37-40 ^o C and incubated at this temperature for up to 3 days.

6. The method according to claim 2 or 3, characterized in that the supernatant after incubation is cooled to 18 - 20 ^o C.

7. The method according to claim 2 or 3, characterized in that the sterilizing filtration is carried out through millipore filters (0.2 μm), at a pressure of 0.2 atm and a temperature of 18 - 19 ^o C.