RU2104552C1

RU2104552C1 - Method for preclinical diagnosis of antiphospholipid syndrome on basis of thromboelastographic study results of women with usual gynecological history

Info

Publication number: RU2104552C1
Application number: RU96104696A
Authority: RU
Inventors: Н.В. Путилова; Л.Н. Юрченко; Н.В. Башмакова; А.Д. Мазуров
Original assignee: Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества
Priority date: 1996-02-28
Filing date: 1996-02-28
Publication date: 1998-02-10

Abstract

FIELD: medicine; obstetrics; gynecology. SUBSTANCE: numeral values of the following thromboelastogram parameters are measured: $$$, where $$$ is thromboelastographic constant of thrombin contained in thrombocyte-rich plasma; $$$ is plasma recalcification time when extent of fibronolysis is evaluated under conditions of artificial blockade with epsilon-aminocaproic acid; $$$ is thrombodynamic potential index when extent of fibrinolysis is evaluated under conditions of artificial blockade with epsilon-aminocaproic acid. If total sum of products of these parameters multiplied by coefficients equal to, respectively, -0.059, +0.056, -0.039, and by constant equals to -0.910, is more than +1.1, it is possible to state presence of antophospholipid syndrome with probability rate 82% and with authenticity degree p = 0.02. If the same total sum value is less then -0.2, absence of disease is stated with the same probability rate and authenticity degree. If the same total sum value is less than +1.1 but more than -0.2, patient must be included into rink-exposed group. EFFECT: higher diagnostic accuracy.

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к гемостазиологическим аспектам акушерства и гинекологии, и может быть использовано врачами других специальностей. The invention relates to medicine, namely to the hemostasiological aspects of obstetrics and gynecology, and can be used by doctors of other specialties.

Прототипом данного изобретения являются описанные в отечественной литературе два способа определения волчаночного антикоагулянта (ВА), основанные на изменениях в системе гемостаза, вызванных присутствием этого агента: метод Макацария А.Д. (см. Акушерство и гинекология. 1993, N 6, с. 6 - 9) и метод Баркагана З.С. (1989). The prototype of this invention are described in the domestic literature two methods for determining lupus anticoagulant (VA), based on changes in the hemostatic system caused by the presence of this agent: Makatsaria A.D. (see Obstetrics and gynecology. 1993, N 6, p. 6 - 9) and the Barkagan method Z.S. (1989).

Эти методы, будучи по данным авторов достаточно высоко информативными, имеют ряд недостатков. Они трудоемки, требуют длительного времени для выполнения. Каждый из них включает в себя по 8 пробирочных тестов, предполагающих предварительную обработку исследуемой и контрольной плазмы. Высокая информативность указанных методов достигается лишь при соответствующих изменениях во всех тестах, причем учет результатов производится путем визуального наблюдения, что вносит элементы субъективизма в интерпретацию полученных данных, снижая тем самым их достоверность. К тому же, реактивы, используемые в проведении реакций, являются дорогостоящими и дефицитными, что не позволяет широко использовать их в практическом здравоохранении. These methods, being quite informative, according to the authors, have several disadvantages. They are laborious, require a long time to complete. Each of them includes 8 test tests, involving preliminary processing of the test and control plasma. The high information content of these methods is achieved only with appropriate changes in all tests, and the results are taken into account by visual observation, which introduces elements of subjectivity in the interpretation of the data obtained, thereby reducing their reliability. In addition, the reagents used in carrying out the reactions are expensive and scarce, which does not allow their widespread use in practical health care.

Аналогами предлагаемого изобретения являются описанные зарубежными авторами иммунологические исследования, имеющие своей целью выявление в крови антител, относящихся к антикоагулянтам волчаночного типа. В этих исследованиях используются весьма дорогостоящие и дефицитные моноклональные иммуноглобулины, применение которых для скрининга практически невозможно. Analogues of the present invention are immunological studies described by foreign authors, aimed at detecting antibodies in the blood related to lupus-type anticoagulants. In these studies, very expensive and scarce monoclonal immunoglobulins are used, the use of which for screening is almost impossible.

Таким образом, все вышеизложенное позволяет сделать вывод, что на сегодняшний день отсутствуют надежные и доступные для широкого применения методы диагностики антифосфолипидного синдрома. Thus, all of the above allows us to conclude that today there are no reliable and affordable methods for the diagnosis of antiphospholipid syndrome.

Цель изобретения заключается в разработке способа диагностик АФС, основанного на анализе изменений в системе гемостаза, вызванных циркуляцией в крови волчаночного антикоагулянта (ВА), регистрируемых инструментальными методами исследования, ориентированный на имеющееся в арсенале лечебных учреждений лабораторно-диагностическое оборудование. Эта цель достигается комплексной оценкой коагуляционной способности крови и богатой тромбоцитами плазмы на тромбоэластографе в условиях низкоконтактной активации (H. Hartert, 1952) и высококонтактной активации гемокоагуляции (H. Hartert, 1952, в модификации В.А. Суханова с соавт., 1979), а также оценка характера протеолиза в условиях искусственной блокады действия фибринолитической системы эпсилон-аминокапроновой кислотой (В.А. Суханов с соавт., 1985). The purpose of the invention is to develop a method for the diagnosis of APS based on the analysis of changes in the hemostatic system caused by circulating lupus anticoagulant (VA) in the blood, recorded by instrumental methods of research, focused on the laboratory diagnostic equipment available in the arsenal of medical institutions. This goal is achieved by a comprehensive assessment of blood coagulation ability and platelet-rich plasma on a thromboelastograph under conditions of low-contact activation (H. Hartert, 1952) and high-contact hemocoagulation activation (H. Hartert, 1952, modified by V. A. Sukhanov et al., 1979), and also an assessment of the nature of proteolysis under conditions of artificial blockade of the action of the fibrinolytic system of epsilon-aminocaproic acid (V.A. Sukhanov et al., 1985).

Сравнительный анализ тестов гемостазиограмм выявил, что наиболее информативными являются следующие параметры тромбоэластограмм:
- K (богатой тромбоцитами плазмы),
- R (фибринолиза в условиях искусственной блокады эпсилон-аминокрапроновой кислотой),
- ИТП (фибринолиза в условиях искусственной блокады эпсилон-аминокапроновой кислотой).A comparative analysis of hemostasiogram tests revealed that the following parameters of thromboelastograms are the most informative:
- K (platelet rich plasma),
- R (fibrinolysis under conditions of artificial blockade with epsilon-aminocaproic acid),
- ITP (fibrinolysis in conditions of artificial blockade with epsilon-aminocaproic acid).

При математической обработке данных исследований было выведено решающее правило для определения ВА
S=K(PRP)•K1 + R(PRP+ЭАКК)•K2 + ИТП(PRP+ЭАКК)•К3 + const
где PRP - богатая тромбоцитами плазма;
PRP+ЭАКК - фибринолиз в условиях искусственной блокады эпсилон-аминокапроновой кислотой;
K1, K2, K3 - коэффициенты, при K1 = -0,059, K2 = +0,056, K3 = -0,039, const = -0,910.In the mathematical processing of research data, a decisive rule was derived for determining VA
S = K (PRP) • K1 + R (PRP + EACC) • K2 + ITP (PRP + EACC) • K3 + const
where PRP is platelet rich plasma;
PRP + EAKK - fibrinolysis under conditions of artificial blockade with epsilon-aminocaproic acid;
K1, K2, K3 - coefficients, with K1 = -0.059, K2 = +0.056, K3 = -0.039, const = -0.910.

Далее установлено, что при S > +1,1 можно сделать достоверное заключение о присутствии в крови больного антикоагулянтов волчаночного типа (ВА+), при S < -0,2, с той же степенью достоверности можно сделать заключение от отсутствии в крови антикоагулянтов волчаночного типа (ВА), при -0,2 < S < +1,1 больные относятся к группе риска по гемокоагуляционным осложнениям, связанным с присутствием в крови антикоагулянтов волчаночного типа. Таким больным необходимо дополнительное обследование в специальных лабораториях с использованием моноклональных иммуноглобулинов для уточнения диагноза. It was further established that at S> +1.1, a reliable conclusion can be made about the presence of lupus-type anticoagulants in the patient’s blood (BA +), at S <-0.2, with the same degree of reliability, a conclusion can be drawn from the absence of lupus anticoagulants in the blood type (VA), at -0.2 <S <+1.1, patients are at risk for hemocoagulation complications associated with the presence of lupus-type anticoagulants in the blood. Such patients need additional examination in special laboratories using monoclonal immunoglobulins to clarify the diagnosis.

При невозможности проведения дополнительного обследования такие больные нуждаются в проведении терапии АФС с последующим повторным обследованием по нашей методике. If it is impossible to conduct an additional examination, such patients need to undergo therapy with APS followed by a second examination according to our methodology.

Предлагаемый нами способ диагностики АФС дает вероятность правильного диагноза в 82% случаев, при уровне значимости p ≤ 0,02, тогда как ранее предложенные пробирочные тесты гемостазиограмм (Макацария А.Д., 1993, Баркаган З.С., 1989) в 75% случаев при уровне значимости p ≤ 0,05. Our proposed method for the diagnosis of APS gives the probability of a correct diagnosis in 82% of cases, with a significance level of p ≤ 0.02, whereas previously proposed test tests of hemostasiograms (Makatsaria AD, 1993, Barkagan Z.S., 1989) in 75% cases at a significance level of p ≤ 0.05.

Кроме того, метод позволяет выделить пограничные состояния на уровне группы риска. In addition, the method allows one to identify borderline states at the risk group level.

Пример 1. Больная Тюлебаева И.В., 36 лет. В анамнезе две регистрирующие беременности в сроках 11 и 8 недель. В 1994 году нами диагностирован АФС по изменениям в системе гемостаза, вызванным циркуляцией в крови ВА. В 1995 году на фоне проводимой коррегирующей терапии наступила беременность, которая завершилась рождением живой, доношенной девочки массой 3250 г, длиной 50 см. В течение беременности проводился контроль и коррекция действия ВА на систему гемостаза. Example 1. Patient Tyulebaeva I.V., 36 years old. A history of two reporting pregnancies at 11 and 8 weeks. In 1994, we diagnosed AFS by changes in the hemostatic system caused by the circulation of VA in the blood. In 1995, against the background of the corrective therapy, pregnancy occurred, which ended in the birth of a live, full-term girl weighing 3250 g, length 50 cm. During pregnancy, control and correction of the effect of VA on the hemostatic system was carried out.

Пример 2. Больная Черняева А.И., 24 лет. В анамнезе 1 медицинский аборт и 3 регрессирующих беременности в сроках 12, 16 и 10 недель. Example 2. Patient Chernyaeva A.I., 24 years old. A history of 1 medical abortion and 3 regressive pregnancies at 12, 16 and 10 weeks.

Неоднократно обследовалась в центрах по невынашиванию беременности. В 1994 году нами был выявлен АФС, проведена коррекция изменений в системе гемостаза вне беременности. В 1995 году наступила беременность, в течение которой продолжалась терапия, направленная на устранение изменений в системе гемостаза, вызванных циркуляцией ВА. Беременность закончилась в феврале 1996 года срочными родами. Родился мальчик массой 3570 г, длиной 51 см. She was repeatedly examined in miscarriage centers. In 1994, we identified AFS, and corrected changes in the hemostatic system outside of pregnancy. In 1995, pregnancy began, during which therapy continued, aimed at eliminating changes in the hemostatic system caused by VA circulation. Pregnancy ended in February 1996 with an urgent delivery. A boy was born weighing 3570 g, 51 cm long.

Таким образом, предлагаемый нами метод диагностики АФС по выявлению изменений в системе гемокоагуляции, вызванных присутствием в крови ВА и регистрируемых на тромбоэластографе, является экономически выгодным, т.к. не требует специальных реактивов, наиболее точен, а также сокращает время постановки диагноза при использовании минимального количества исследуемого материала. Thus, our proposed method for the diagnosis of APS to detect changes in the hemocoagulation system caused by the presence of VA in the blood and recorded on a thromboelastograph is economically advantageous, because It does not require special reagents, it is the most accurate, and also reduces the time of diagnosis when using the minimum amount of test material.

Метод может быть предложен для широкого использования в акушерско-гинекологической практике. The method can be proposed for widespread use in obstetric and gynecological practice.

Источники информации
1. Баркаган З.С., Г.В. Сердюк Г.В. Опыт применения этапного плазмафереза для предупреждения потери плода женщинами, в крови которых циркулируют антикоагулянты волчаночного типа // Тер. архив. - 1989, N 7, с. 124 - 128.Sources of information
1. Barkagan Z.S., G.V. Serdyuk G.V. The experience of using staged plasmapheresis to prevent fetal loss in women whose blood lupus-type anticoagulants circulate // Ter. archive. - 1989, N 7, p. 124 - 128.

2. Макацария А. Д. Вопросы патогенеза диагностики и терапии осложнений беременности, связанных с циркуляцией волчаночного антикоагулянта // Акушерство - гинекология. - 1993, N 6, с. 6 - 9. 2. Makatsaria A. D. Issues of the pathogenesis of diagnosis and therapy of pregnancy complications associated with the circulation of lupus anticoagulant // Obstetrics - gynecology. - 1993, N 6, p. 6 - 9.

3. Прудникова Л.З., Сайковская Т.В. Волчаночный антикоагулянт, методические подходы к определению // Лабораторное дело. - 1988, N 8, с. 38 - 40. 3. Prudnikova L.Z., Saykovskaya T.V. Lupus anticoagulant, methodological approaches to determination // Laboratory. - 1988, N 8, p. 38 - 40.

Claims

A method for the diagnosis of antiphospholipid syndrome (APS) to identify a characteristic set of changes in the hemocoagulation system, characterized in that, in order to reduce the cost of the study and improve the accuracy of the method, measure the parameters of thromboelastograms K (PRP), R (PRP + E-ACC) , ITP (PRP + E-ACC), where K (PRP) is the thromboelastographic constant of thrombin for platelet-rich plasma, R (PRP + E-ACC) is the plasma recalcification time for evaluating fibrinolysis under the conditions of artificial blockade with epsilon-aminocaproic acid, ITP (PP + E -AKK) index with thrombodynamic potential in assessing fibrinolysis under conditions of artificial blockade with epsilon-aminocaproic acid and, if the sum of the products of these parameters by the coefficients respectively -0.059, +0.056, -0.039 and a constant equal to -0.910 exceed +1.1, then the presence of antiphospholipid syndrome, if the value of the amount is less than -0.2, the absence of the disease is ascertained, and with the amount less than +1.1, but more than -0.2, the patient is referred to the risk group.