RU2102416C1 - Method of lycopine producing - Google Patents

Method of lycopine producing Download PDF

Info

Publication number
RU2102416C1
RU2102416C1 RU95104293A RU95104293A RU2102416C1 RU 2102416 C1 RU2102416 C1 RU 2102416C1 RU 95104293 A RU95104293 A RU 95104293A RU 95104293 A RU95104293 A RU 95104293A RU 2102416 C1 RU2102416 C1 RU 2102416C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
lycopene
medium
strains
lycopine
liter
Prior art date
Application number
RU95104293A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU95104293A (en
Inventor
А.Ф. Ивакин
Е.П. Феофилова
А.И. Киселева
Н.А. Панова
В.В. Зырянов
А.С. Гаврилов
В.М. Терешина
Н.П. Кордюкова
Original Assignee
Акционерное общество открытого типа "Уралбиофарм"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Акционерное общество открытого типа "Уралбиофарм" filed Critical Акционерное общество открытого типа "Уралбиофарм"
Priority to RU95104293A priority Critical patent/RU2102416C1/en
Publication of RU95104293A publication Critical patent/RU95104293A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2102416C1 publication Critical patent/RU2102416C1/en

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: food industry. SUBSTANCE: mycelial fungus Blakeslia trispora is grown in the presence of compound of aminomethylpyridine class or natural stimulating agent (tobacco crumb) of lycopine formation. Lycopine-containing biomass is separated from cultural fluid, lycopine is extracted with sunflower oil, recrystallized with organic solvents followed by column chromatography on aluminium oxide. EFFECT: improved method of producing.

Description

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения ликопина. The invention relates to the field of biotechnology, in particular to a method for producing lycopene.

Ликопин является природным соединением (каротиноидом) и синтезируется растениями, водорослями и грибами. Ликопин имеет густую розовую окраску, переходящую в фиолетовый оттенок, что представляет большой интерес для пищевой промышленности, которая остро нуждается в природных безвредных красителях такого оттенка. Lycopene is a natural compound (carotenoid) and is synthesized by plants, algae and fungi. Lycopene has a thick pink color, turning into a purple hue, which is of great interest to the food industry, which is in urgent need of natural harmless dyes of this shade.

Использование ликопина для придания розового цвета пищевым изделиям обеспечивает им улучшенный товарный вид и позволяет одновременно обогатить продукты ценными биологическими свойствами, способствующими сохранению здоровья. Дело в том, что в последние годы показано, что ликопин присутствует в тканях человеческого организма, в частности в плазме, в количествах, больших, чем другие каротиноиды [1] Кроме того, установлено, что способность тушить синглетный кислород у ликопина выше не только по сравнению с другими каротиноидами, но и с такими известными антиоксидантами, как, например, α-токоферол [2] Эти данные заставили с новых позиций подойти к использованию ликопина не только как дефицитного красителя, но и мощного антиоксиданта. Известно, что соединения, способные ингибировать в организме процессы свободнорадикального окисления, влияют на иммунный статус организма, улучшая протекание ряда важнейших биологических процессов, в частности липидный метаболизм, пролиферацию, зрение и др. The use of lycopene to give pink color to food products provides them with an improved presentation and at the same time enriches the products with valuable biological properties that contribute to maintaining health. The fact is that in recent years it has been shown that lycopene is present in the tissues of the human body, in particular in plasma, in quantities larger than other carotenoids [1] In addition, it has been established that the ability to quench singlet oxygen in lycopene is higher not only compared with other carotenoids, but also with such well-known antioxidants as, for example, α-tocopherol [2] These data have made it possible to use lycopene not only as a deficient dye, but also a powerful antioxidant from a new perspective. It is known that compounds capable of inhibiting free radical oxidation in the body affect the immune status of the body, improving the course of a number of important biological processes, in particular lipid metabolism, proliferation, vision, etc.

Химический синтез ликопина в отличие от b-каротина представляется пока экономически невыгодным и достаточно сложным. Ликопин получают из растительного сырья, в частности из томатов Lycopersicon sp. [3] Однако этот метод обладает рядом недостатков: связан с сезонностью, зависит от климатических колебаний, грибной инфекции, в частности урожай томатов может быть полностью уничтожен грибом Phythophtora sp. Кроме того, выход ликопина не превышает 0,3-0,4 мг на г плодового тела, причем кроме основной all-trans-формы ликопина присутствует также неоликопин A и проликопин, что значительно затрудняет очистку целевого продукта [3]
Указанных недостатков может быть лишен микробиологический способ получения ликопина. Однако у бактерий, например, Streptomyces chresomyceticus var. rubescens процесс получения ликопина занимает около 8 суток [4] что приводит к удорожанию конечного продукта. Больше ликопина способны синтезировать грибы, и особенно мицелиальные, среди которых активным синтетиком ликопина является гриб Blakeslea trispora [5]
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является способ получения ликопина [6] согласно которому продуцентом является микроскопический гриб Blakeslea trispora (+) 701 и (-) 4 штаммы. Выращивание проводят на среде, содержащей глюкозу, аспарагин или бактопептон, дрожжевой и (или) картофельный экстракты, растительное масло 1-3% твин 20 или твин 21 и гетероциклические стимуляторы синтеза ликопина соединения класса аминопиридинов и никотин, при температуре 26-30oC в течение 48 час, далее добавляют гетероциклические стимуляторы ликопинообразования и твины. Ферментацию продолжают еще 24 час, при этом общее время процесса без учета выращивания посевного материала составляет 72 час. Далее биомассу отделяют от среды, промывают водой, растирают кварцевым песком под слоем ацетона, гомогенезируют, аликвотную часть, содержащую ликопин, отделяют на стеклянном фильтре N 1, к этому ацетоновому фильтрату добавляют гексан и воду, получают гексановый экстракт, концентрируют его на роторном испарителе. Выход ликопина 200-300 мг на 1 л среды. Чистота ликопина приблизительно 90% около 10% составляет b-каротин. Далее проводят хроматографирование в тонком слое окиси алюминия с использованием системы растворителей: н-гексан-ацетон (175:5).
Chemical synthesis of lycopene, in contrast to b-carotene, appears to be economically unprofitable and rather complicated. Lycopene is obtained from plant materials, in particular from tomatoes Lycopersicon sp. [3] However, this method has several disadvantages: it is related to seasonality, it depends on climatic fluctuations, fungal infection, in particular, the tomato crop can be completely destroyed by Phythophtora sp. In addition, the yield of lycopene does not exceed 0.3-0.4 mg per g of the fruit body, and in addition to the main all-trans form of lycopene, neolikopin A and prolicopin are also present, which makes it difficult to clean the target product [3]
The indicated disadvantages may be deprived of the microbiological method for producing lycopene. However, in bacteria, for example, Streptomyces chresomyceticus var. rubescens the process of obtaining lycopene takes about 8 days [4] which leads to a rise in price of the final product. More lycopene is able to synthesize fungi, and especially mycelial, among which the active synthetics of lycopene is Blakeslea trispora [5]
The closest in technical essence and the achieved effect is a method for producing lycopene [6] according to which the producer is the microscopic mushroom Blakeslea trispora (+) 701 and (-) 4 strains. The cultivation is carried out on a medium containing glucose, asparagine or bactopeptone, yeast and (or) potato extracts, vegetable oil 1-3% tween 20 or tween 21 and heterocyclic stimulators for the synthesis of lycopene compounds of the class of aminopyridines and nicotine, at a temperature of 26-30 o C for 48 hours, then add heterocyclic lycopene stimulants and twins. Fermentation is continued for another 24 hours, while the total process time, excluding seed cultivation, is 72 hours. Next, the biomass is separated from the medium, washed with water, triturated with quartz sand under a layer of acetone, homogenized, the aliquot containing lycopene is separated on a No. 1 glass filter, hexane and water are added to this acetone filtrate, a hexane extract is obtained, and concentrated on a rotary evaporator. The output of lycopene 200-300 mg per 1 liter of medium. A purity of lycopene of about 90%, about 10%, is b-carotene. Then chromatography is carried out in a thin layer of alumina using a solvent system: n-hexane-acetone (175: 5).

Недостатками данного способа являются недостаточно высокий выход ликопина, наличие в среде выращивания компонентов (аспарагин, твины, глюкоза), являющихся в настоящее время либо дефицитными, или дорогостоящими, использование штаммов, не прошедших специальную селекционную обработку и не способных поэтому к дальнейшему увеличению пигментной активности. Кроме того, в качестве стимуляторов ликопинообразования вносят гетероциклические соединения в количестве до 0,4% что может привести к обогащению целевого продукта производными пиридина, а также используют такое дефицитное и дорогостоящее соединение, как никотин. Не указано также соотношение (+) и (-) спор в посевном материале. Этот факт и то, что засев ферментационной среды ведется споровым материалом, получение которого не описано, может привести к невоспроизводимости результатов и снижению выходов целевого продукта. The disadvantages of this method are the insufficiently high yield of lycopene, the presence in the growth medium of components (asparagine, twins, glucose), which are currently either scarce or expensive, the use of strains that have not undergone special selection processing and are therefore not able to further increase pigment activity. In addition, heterocyclic compounds in an amount of up to 0.4% are introduced as lycopene stimulants, which can lead to enrichment of the target product with pyridine derivatives, and they also use a deficient and expensive compound such as nicotine. The ratio of (+) and (-) spores in the seed is also not indicated. This fact and the fact that the inoculation of the fermentation medium is carried out by spore material, the receipt of which is not described, can lead to irreproducibility of the results and lower yields of the target product.

Целью данного изобретения является разработка более эффективного способа получения ликопина из мицелия грибов, удешевление процесса и расширение числа продуцентов. The aim of this invention is to develop a more effective method for producing lycopene from mycelium of fungi, cheaper process and expand the number of producers.

Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что мицелиальные грибы, относящиеся к порядку Phycomycetes, семейству Choanephoraceae - Blakeslea trispora A-732-3(+) и A-732-2(-) [7] (+)8 и (-)8A [8] выращивают раздельно в течение 48 час и в соотношении 1:9 соответственно, далее вносят в ферментационную среду и культивирование (+) и (-) штаммов продолжают в течение 3 сут при температуре 27-28oC. Используют мучную среду, содержащую кукурузной муки 17,3 г на 1 л среды, соевой муки 40 г на 1 л среды, KH2PO4 0,5 г на л среды и 4% подсолнечного масла и стимулятор ликопиноообразования не используемое ранее производное пиридина или природный производственный отход табачную крошку. Выход ликопина составляет по данным спектрофотометрического метода 0,4-0,7 г на 1 л среды. Далее ликопинсодержащую биомассу, отделенную от культуральной жидкости, подвергают экстракции по принципу противотока подсолнечным маслом при соотношении биомасса: масло (1:1) при 85oC в течение 30 мин. Для кристаллизации ликопина насыщенный экстракт выдерживают при 12-15oC в течение 3 сут. Кристаллы отделяют отстаиванием и получают 0,8%-ную суспензию кристаллического ликопина в масле. Далее препарат дважды промывают этанолом в соотношение 1: 5 при 50o и получают кристаллы, содержащие 47% ликопина. Дальнейшая очистка производится перекристаллизацией из толуола кипящим абсолютным этанолом. В результате получают кристаллический 97% ликопин.The essence of the invention lies in the fact that the mycelial fungi belonging to the order Phycomycetes, the family Choanephoraceae - Blakeslea trispora A-732-3 (+) and A-732-2 (-) [7] (+) 8 and (-) 8A [8] grown separately for 48 hours and in a ratio of 1: 9, respectively, then introduced into the fermentation medium and cultivation of (+) and (-) strains is continued for 3 days at a temperature of 27-28 o C. Use flour medium containing cornmeal 17.3 g to 1 liter of medium, soya flour 40 g per 1 liter of medium, KH 2 PO 4 0.5 g per liter of medium and 4% sunflower oil and do not use the stimulator likopinooobrazovaniya e previously pyridine derivative or natural production waste tobacco shreds. The yield of lycopene is 0.4-0.7 g per 1 liter of medium according to the spectrophotometric method. Next, the lycopene-containing biomass, separated from the culture fluid, is subjected to countercurrent extraction with sunflower oil at a ratio of biomass: oil (1: 1) at 85 o C for 30 minutes For crystallization of lycopene, the saturated extract is kept at 12-15 o C for 3 days. The crystals are separated by settling and get a 0.8% suspension of crystalline lycopene in oil. Next, the drug is washed twice with ethanol in a ratio of 1: 5 at 50 o and get crystals containing 47% lycopene. Further purification is carried out by recrystallization from toluene with boiling absolute ethanol. The result is a crystalline 97% lycopene.

При необходимости для получения более очищенного ликопина используют для отделения оставшихся примесей каротиноидов колоночную хроматографию на окиси алюминия 3-4 степени по Брокману в системе растворителей н-гексан-ацетон (50:1). После элюции растворителем (10%-й этанол в н-гексане) ликопина с сорбента получают препарат ликопина, практически не содержащий примеси каротиноидов. If necessary, to obtain more purified lycopene, column chromatography on aluminum oxide of 3-4 degrees according to Brockman in the n-hexane-acetone solvent system (50: 1) is used to separate the remaining carotenoid impurities. After elution with a solvent (10% ethanol in n-hexane) of lycopene, a lycopene preparation containing almost no carotenoid impurity is obtained from the sorbent.

Пример 1. Готовят споровый посевной материал, используя для этих целей картофельно-морковную среду, которую засевают A-732-3(+) и A-732-3(-) штаммами Blakeslea trispora. Выращивание спорового материала ведут на косячках в стеклянных пробирках (L 20 см, d 2 см) в течение 6-7 сут при температуре 28-29oC. Полученными спорангиоспорами (+) и (-) штаммов раздельно засевают ферментационные колбы, содержащие гидролизную среду указанного ниже состава. Ферментацию ведут в течение 48 час на качалках, работающих со скоростью 200 оборотов в минуту.Example 1. Prepare spore seed, using for this purpose a potato-carrot medium, which is seeded with A-732-3 (+) and A-732-3 (-) strains of Blakeslea trispora. The growth of spore material is carried out on shoals in glass tubes (L 20 cm, d 2 cm) for 6-7 days at a temperature of 28-29 o C. The obtained sporangiospores (+) and (-) strains separately seeded fermentation flasks containing hydrolysis medium the composition below. Fermentation is carried out for 48 hours on a rocking chair, operating at a speed of 200 rpm.

Состав гидролизной среды: 47 г соевой муки, 23 г кукурузной муки, добавленные в колбу, содержащую 1 л воды, далее вносят 2,8 мл концентрированной серной кислоты и стерилизуют при 1 атм 1,5 час. После стерилизации устанавливают pH 6,7-6,8 и добавляют 0,5 г KH2PO4.The composition of the hydrolysis medium: 47 g of soy flour, 23 g of corn flour, added to a flask containing 1 l of water, then add 2.8 ml of concentrated sulfuric acid and sterilized at 1 atm for 1.5 hours. After sterilization, the pH is adjusted to 6.7-6.8 and 0.5 g of KH 2 PO 4 is added.

Раздельно выращенные на гидролизной среде (+) и (-) штаммы гриба подвергают в стерильных условиях обработке в специальных колбах с отбойниками (встряхивают на качалке в течение 1 час). Далее разбитый на отдельные фрагменты мицелий (+) и (-) штаммов используют для засева в соотношении 1:9 соответственно. Ферментацию ведут на мучной среде указанного выше состава в течение 72 час на качалках при температуре 27-28oC. Стимулятором ликопинообразования является ранее не используемое соединение - 2-амино-6-метилпиридин, которое в концентрации 0,005% вносят в ферментационную среду при 0 час ферментации, т.е. вместе с посевным материалом (48-часовыми мицелиями).Separately grown on hydrolysis medium (+) and (-) the fungal strains are subjected to sterile treatment in special flasks with chippers (shake on a rocking chair for 1 hour). Further, the mycelium (+) and (-) strains, broken into separate fragments, are used for seeding in a ratio of 1: 9, respectively. Fermentation is carried out on a flour medium of the above composition for 72 hours on a rocking chair at a temperature of 27-28 o C. The stimulator of lycopene formation is a previously unused compound - 2-amino-6-methylpyridine, which at a concentration of 0.005% is introduced into the fermentation medium at 0 hour fermentation, i.e. together with seed (48-hour mycelia).

Выход ликопина составляет 0,7 г на 1 л среды, при этом соотношение ликопина к одновременно образовавшемуся b-каротину составляет 11:1. The yield of lycopene is 0.7 g per 1 liter of medium, while the ratio of lycopene to the simultaneously formed b-carotene is 11: 1.

Пример 2. То же, что в примере 1, но 2-амино-6-метилпиридин вносят в концентрации 0,01% Выход ликопина составляет 0,63 г на 1 л среды. Example 2. The same as in example 1, but 2-amino-6-methylpyridine contribute at a concentration of 0.01%. The yield of lycopene is 0.63 g per 1 liter of medium.

Пример 3. То же, что в примере 1, но 2-амино-6-метилпиридин вносят в количестве 0,002% Выход ликопина составляет 0,60 г на 1 л среды. Example 3. The same as in example 1, but 2-amino-6-methylpyridine contribute in an amount of 0.002%. The yield of lycopene is 0.60 g per 1 liter of medium.

Пример 4. То же, что в примере 1, но в качестве продуцентов используют штаммы (+) 8A и (-) 8A Blakeslea trispora. Выход ликопина составляет 0,64 г на 1 л среды. Example 4. The same as in example 1, but as producers use strains (+) 8A and (-) 8A Blakeslea trispora. The yield of lycopene is 0.64 g per 1 liter of medium.

Пример 5. То же, что в примере 1, но в качестве стимулятора ликопинообразования вносят ранее не использованное соединение 2-амино-5-метилпиридин в концентрации 0,01% т.е. 0,1 г на 1 л среды. Выход ликопина составляет 0,61 г на 1 л среды. Example 5. The same as in example 1, but as a stimulator of lycopene formation make previously unused compound 2-amino-5-methylpyridine at a concentration of 0.01% ie 0.1 g per 1 liter of medium. The yield of lycopene is 0.61 g per 1 liter of medium.

Пример 6. То же, что в примере 5, но стимулятор ликопинообразования вносят в концентрации 0,005% т.е. 0,05 г на 1 л среды. Выход ликопина составляет 0,49 г на 1 л среды. Example 6. The same as in example 5, but the stimulator of lycopene formation is introduced at a concentration of 0.005%, i.e. 0.05 g per 1 liter of medium. The yield of lycopene is 0.49 g per 1 liter of medium.

Пример 7. То же, что в примере 5, но стимулятор ликопинообразования вносят в концентрации 0,025% т.е. 0,25 г на 1 л среды. Выход ликопина составляет 0,57 г на 1 л среды. Example 7. The same as in example 5, but the stimulator of lycopene formation is introduced at a concentration of 0.025% ie 0.25 g per 1 liter of medium. The yield of lycopene is 0.57 g per 1 liter of medium.

Пример 8. То же, что в примере 1, но в качестве стимулятора ликопинообразования используют природный отход от производства табака - табачную крошку, которую в количестве 1% т.е. 10 г на 1 л среды вносят в ферментационную мучную среду. Выход ликопина составляет 0,4 г на 1 л среды. Example 8. The same as in example 1, but as a stimulator of lycopene formation using natural waste from tobacco production - tobacco chips, which in the amount of 1% i.e. 10 g per 1 liter of medium is added to the fermentation flour medium. The yield of lycopene is 0.4 g per 1 liter of medium.

Пример 9. То же, что в примере 1, но соотношение (+) и (-) мицелиев в посевном материале составляет 1:4 соответственно. Выход ликопина составляет 0,63 г на 1 л среды. Example 9. The same as in example 1, but the ratio of (+) and (-) mycelia in the seed is 1: 4, respectively. The yield of lycopene is 0.63 g per 1 liter of medium.

Пример 10. То же, что и в примере 8, но соотношение посевных (+) и (-) мицелиев составляет 1:4 соответственно. Выход ликопина составляет 3,9 г на 1 л среды. Example 10. The same as in example 8, but the ratio of inoculum (+) and (-) mycelia is 1: 4, respectively. The yield of lycopene is 3.9 g per 1 liter of medium.

Пример 11. То же, что в примере 1, но в качестве штаммов-продуцентов используют (-) 4 и (+) 701 штаммы Blakeslea trispora. Выход ликопина составляет 0,38 г на 1 л среды. Example 11. The same as in example 1, but (producer) use (-) 4 and (+) 701 strains of Blakeslea trispora as producer strains. The yield of lycopene is 0.38 g per 1 liter of medium.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет значительно повысить выход целевого продукта за счет использования новых стимуляторов ликопинообразования, относящихся к аминометилпроизводным пиридина, и одновременно снизить их концентрацию в среде выращивания; за счет установления оптимальных соотношений (+) и (-) мицелиев в посевном материале; расширить число применяемых штаммов-продуцентов, используя при этом более продуктивные штаммы грибов, а также удешевить стоимость конечного продукта, особенно, учитывая тот факт, что в качестве стимулятора ликопина предлагается вводить отход от производства табака табачную крошку. Необходимо отметить, что по технологии выращивания и схеме выделения конечного продукта предлагаемый способ более соответствует заводским условиям, чем прототип. Thus, the proposed method can significantly increase the yield of the target product through the use of new lycopene formation stimulants related to aminomethyl pyridine derivatives, and at the same time reduce their concentration in the growing medium; by establishing optimal ratios of (+) and (-) mycelia in the seed; expand the number of producer strains used, while using more productive fungal strains, as well as reduce the cost of the final product, especially considering the fact that as a stimulant of lycopene, it is proposed to introduce tobacco crumb as a waste from tobacco production. It should be noted that according to the growing technology and the allocation scheme of the final product, the proposed method is more consistent with factory conditions than the prototype.

Источники информации
1. Goodruch J. Barker C. Phelps R. J. Chem. Educ. 1993, v. 70, N 6, P. A158.
Sources of information
1. Goodruch J. Barker C. Phelps RJ Chem. Educ. 1993, v. 70, No. 6, P. A158.

2. Mascio P.Di. Kaiser S. Sies H. Arch. Biochem. Biophys. 1989, v. 264, N 2, P. 532. 2. Mascio P.Di. Kaiser S. Sies H. Arch. Biochem. Biophys. 1989, v. 264, N 2, P. 532.

3. Porter J.W. Zscheile F.P. Arch. Biochem. 1946, v. 10, N 1, P. 537. 3. Porter J.W. Zscheile F.P. Arch. Biochem. 1946, v. 10, N 1, P. 537.

4. Patent USA N 3467579, 1969. 4. Patent USA N 3467579, 1969.

5. Patent France N 1403839, 1965
6. АС 1080479, 1983 (прототип).
5. Patent France N 1403839, 1965
6. AC 1080479, 1983 (prototype).

7. Феофилова Е.П. Михайлова М.В. Садовова Н.В. Микробиология, 1993, Т. 62, В. 4, С. 625-632. 7. Feofilova EP Mikhailova M.V. Sadovova N.V. Microbiology, 1993, T. 62, V. 4, S. 625-632.

8. АС N 851968, 1981. 8. AC N 851968, 1981.

Claims (1)

Способ получения ликопина, включающий выращивание мицелиального гриба - продуцента Blakeslea trispora на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, растительное масло, воду, гетероциклические соединения - стимуляторы ликопинообразования и получение целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют штаммы Blakeslea trispora А-732-3(+) и А-732-3(-), 8А(+) и 8А(-), выращивание (+) и (-) штаммов осуществляют раздельно в течение 48 ч, полученный посевной материал используют в соотношении 1 9 для последующей ферментации, при этом в состав питательной среды дополнительно вводят источник фосфора-KH2PO4 в количестве 0,05% в качестве источника углерода и азота использует 4% соевой муки и 1,75% кукурузной муки, из растительного масла используют подсолнечное масло в количестве 4% а количество воды составляет 90,5% стимуляторы ликопинообразования соединения класса аминометилпиридинов вносят при 0 ч ферментации в количестве 0,01 0,005% а стимулятора ликопинообразования - табачную крошку в количестве 1% причем получение целевого продукта осуществляет экстракцией подсолнечным маслом, кристаллизацией с использованием этанола и толуола и последующей колоночной хроматографией в системе: н-гексан-ацетон 50 1.A method of producing lycopene, including the cultivation of a mycelial fungus producer Blakeslea trispora on a nutrient medium containing sources of carbon, nitrogen, vegetable oil, water, heterocyclic compounds - lycopene formation stimulators and obtaining the target product, characterized in that Blakeslea trispora A- strains are used as producer 732-3 (+) and A-732-3 (-), 8A (+) and 8A (-), the cultivation of (+) and (-) strains is carried out separately for 48 hours, the seed obtained is used in a ratio of 1 9 for subsequent fermentation, while in the composition of p of the production medium, an additional source of phosphorus-KH 2 PO 4 is introduced in an amount of 0.05%; as a source of carbon and nitrogen, it uses 4% soy flour and 1.75% corn flour; from vegetable oil, 4% sunflower oil is used and the amount of water is 90.5% of the lycopene formation stimulants of the aminomethylpyridine class compound are introduced at 0 hours of fermentation in an amount of 0.01 0.005% and the lycopene formation stimulant is introduced in 1% tobacco crumb and the target product is obtained by extraction with sunflower oil, a crystal zatsiey using ethanol and toluene followed by column chromatography in the system n-hexane-acetone 50 1.
RU95104293A 1995-03-22 1995-03-22 Method of lycopine producing RU2102416C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU95104293A RU2102416C1 (en) 1995-03-22 1995-03-22 Method of lycopine producing

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU95104293A RU2102416C1 (en) 1995-03-22 1995-03-22 Method of lycopine producing

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU95104293A RU95104293A (en) 1996-12-10
RU2102416C1 true RU2102416C1 (en) 1998-01-20

Family

ID=20165967

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU95104293A RU2102416C1 (en) 1995-03-22 1995-03-22 Method of lycopine producing

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2102416C1 (en)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002038791A1 (en) * 2000-11-13 2002-05-16 Uralbiofarm, Otkrytoe Aktsionernoe Obschestvo Method for producing lycopene-containing biomass and method for the production of crystalline lycopene from said biomass
WO2003056028A1 (en) 2001-12-31 2003-07-10 Vitatene, S.A. Improved method of producing lycopene through the fermentation of selected strains of blakeslea trispora, formulations and uses of the lycopene thus obtained
WO2003038064A3 (en) * 2001-10-29 2003-09-25 Dsm Ip Assets Bv Blakeslea trispora producing high yield of lycopene in a suitable medium in the absence of an exogenous carotenogenesis inhibitor
WO2022090547A1 (en) * 2020-10-30 2022-05-05 Dsm Ip Assets B.V. Production of carotenoids by fermentation
WO2024022771A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Givaudan Sa Composition comprising a polyketide pigment

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1. Goodruch J., Barker C., Phelps R. J.Chem. Educ. 1993, 70, N 6, P.A.158. 2. Mascio P.Di., Kaiser S., Sies H., Arch. Biochem. Biophys., 1989, v.264, N 2, p.532. 3. Porter J.W., Zscheile F.P. Arch. Biochem, 1946, 10, N 1, p.537. 4. Микробиология, т.39, выпуск 3, 1970, с.457-463. Феофилова Е.П. и др. Влияние некоторых стимуляторов и производных пиридина на биосинтез каротиноидов. *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002038791A1 (en) * 2000-11-13 2002-05-16 Uralbiofarm, Otkrytoe Aktsionernoe Obschestvo Method for producing lycopene-containing biomass and method for the production of crystalline lycopene from said biomass
WO2003038064A3 (en) * 2001-10-29 2003-09-25 Dsm Ip Assets Bv Blakeslea trispora producing high yield of lycopene in a suitable medium in the absence of an exogenous carotenogenesis inhibitor
EA007616B1 (en) * 2001-10-29 2006-12-29 ДСМ Ай Пи ЭССЕТС Б.В. Blakeslea trispora strain and process for using thereof
AU2002358479B2 (en) * 2001-10-29 2007-11-22 Dsm Ip Assets B.V. Blakeslea trispora producing high yield of lycopene in a suitable medium in the absence of an exogenous carotenogenesis inhibitor
WO2003056028A1 (en) 2001-12-31 2003-07-10 Vitatene, S.A. Improved method of producing lycopene through the fermentation of selected strains of blakeslea trispora, formulations and uses of the lycopene thus obtained
EP2143800A1 (en) 2001-12-31 2010-01-13 Vitatene, S.A. Formulations of lycopene and uses thereof
WO2022090547A1 (en) * 2020-10-30 2022-05-05 Dsm Ip Assets B.V. Production of carotenoids by fermentation
WO2024022771A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Givaudan Sa Composition comprising a polyketide pigment

Also Published As

Publication number Publication date
RU95104293A (en) 1996-12-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1808483B1 (en) Process for obtaining lutein from algae
JP2022516888A (en) Strains producing ergothioneine and methods for screening thereof
EP0608172B1 (en) Phaffia rhodozyma mutants, process for the production of beta-caroten and use of a beta-caroten rich biomass
EP1676925B1 (en) Process for producing zeaxanthin and beta-cryptoxanthin
PETERSEN et al. Production of cladospirone bisepoxide, a new fungal metabolite
US8859228B2 (en) Method for the production of beta-carotene
RU2211862C2 (en) (-)-strain of heterothallic phycomycetus blakeslea trispora producing lycopin in pair with different (+)-strains of blakeslea trispora and method for micribiological synthesis of lycopin
RU2102416C1 (en) Method of lycopine producing
US5407826A (en) Isolated cultures of microorganisms of Clonostachys Cylindrospora, Gliocladium and Nectria Gliocladioides
JP2003502052A (en) How to make lycopene
US20050203321A1 (en) Process for obtaining carotenoids from natural sources
DE68903907T2 (en) CYCLIC PEPTIDE, ITS PRODUCTION AND USE FOR TREATING CARDIOVASCULAR DISORDERS.
JPH0870848A (en) Euglena algal body highly containing vitamin e and beta-carotene and production
KR101999273B1 (en) Preparation methods of high quality Cordycepin, Cordyceps militaris containing high quantity of Cordycepin and high quality Cordycepin obtained by the same
RU2115678C1 (en) Method of lycopin preparing
RU2270868C1 (en) METHOD FOR PREPARING LICOPIN, PHOSPHOLIPIDS, FATTY ACIDS AND ERGOSTEROL BY COMBINED CULTURING (+)= AND (-)-STRAINS OF FUNGUS Blakeslea trispora
US3835170A (en) Hypotensive agent, oudenone, its salts and processes for production and preparation thereof
EP0171283A2 (en) Hapalindoles
KR820000295B1 (en) Process for the production of coenzymc q
RU2053301C1 (en) Pair strains of heterothallic fungus blakeslea trispora f - 674(+) and f-551 (-) producing beta-carotene
RU2085077C1 (en) Method of abscisic acid producing
RU2238970C1 (en) Strain of mycelia sterilia lch-1 - producer of complex of biologically active substances eliciting growth-regulating properties
EP0260964A2 (en) New hapalindoles
RU2415916C1 (en) Method for preparing biologically active agent of lycopin
ITMI950865A1 (en) PURPOROGALLINA DERIVATIVES

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20090323