RU2102395C1 - Method of synthesis of biotin 2-nitro-4-sulfophenyl ester sodium salt - Google Patents
Method of synthesis of biotin 2-nitro-4-sulfophenyl ester sodium salt Download PDFInfo
- Publication number
- RU2102395C1 RU2102395C1 RU96101599A RU96101599A RU2102395C1 RU 2102395 C1 RU2102395 C1 RU 2102395C1 RU 96101599 A RU96101599 A RU 96101599A RU 96101599 A RU96101599 A RU 96101599A RU 2102395 C1 RU2102395 C1 RU 2102395C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- biotin
- nitro
- sodium salt
- sulfophenol
- dicyclohexylcarbodiimide
- Prior art date
Links
Landscapes
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области биоорганической химии и молекулярной биологии и может быть использовано для получения олиго(поли)нуклеотидов и биологически активных белков, несущих биотиновую группу [1-30]
Из известных способов получения эфиров биотина, с помощью которых синтезируют биотинилированные производные олиго(поли)нуклеотидов и белков [1,4-6] наиболее близким является способ, проводящий к образованию натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенильного эфира биотина. Синтез ведут путем взаимодействия биотина и натриевой сили2-нитро-4-сульфофенола в растворе диметилформамида (ДМФА) в присутствии дициклогексилкарбодиимида (ДЦГК) при молярном соотношении исходных реагентов в ДЦГК, равном 1:1:1, по методике [6] аналогично получению натриевых солей 2-нитро-4-сульфофениловых эфиров аминокислот, а выделение продукта из реакционной смеси осуществляют с помощью хроматографии на сефадексе LH-20. Выход целевого продукта 80% Однако такой путь выделения продукта не удобен тем, что процесс хроматографии является трудоемким и не всегда возможным из-за труднодоступности сорбента.The invention relates to the field of bioorganic chemistry and molecular biology and can be used to obtain oligo (poly) nucleotides and biologically active proteins bearing a biotin group [1-30]
Of the known methods for producing biotin esters, with the help of which biotinylated derivatives of oligo (poly) nucleotides and proteins [1,4-6] are synthesized, the closest is the method that leads to the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ester of biotin. The synthesis is carried out by the interaction of biotin and sodium sily2-nitro-4-sulfophenol in a solution of dimethylformamide (DMF) in the presence of dicyclohexylcarbodiimide (DCCA) with a molar ratio of the starting reagents in DCCA equal to 1: 1: 1, according to the procedure [6] similar to the preparation of sodium salts 2-nitro-4-sulfophenyl ethers of amino acids, and the isolation of the product from the reaction mixture is carried out using chromatography on Sephadex LH-20. The yield of the target product is 80%. However, this way of isolating the product is not convenient because the chromatography process is time-consuming and not always possible due to the inaccessibility of the sorbent.
Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа получения натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенильного эфира биотина, не требующего дополнительной стадии хроматографического выделения продукта. The objective of the invention is to develop a method for producing the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin, which does not require an additional stage of chromatographic isolation of the product.
Предлагаемый способ заключается в том, что натриевую соль 2-нитро-4-сульфофенилового эфира биотина получают путем взаимодействия натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола с биотином в среде ДМФА в присутствии ДЦГК, при этом биотин и ДЦГК вводят в реакционную смесь постепенно (порциями) до достижения молярного соотношения указанных реагентов к натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, равного 1:81,4-1,69):(1,3)-1,5) соответственно. The proposed method consists in the fact that the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin is obtained by the interaction of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol with biotin in DMF in the presence of DCCA, while biotin and DCCA are introduced into the reaction mixture gradually ( in portions) until the molar ratio of these reagents to the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol equal to 1: 81.4-1.69) is achieved: (1.3) -1.5), respectively.
При проведении процесса в предлагаемых условиях натриевая соль 2-нитро-4-сульфофенола полностью расходуется на образование эфира биотина. Поскольку биотин не растворим в диметилформамиде, то избыток его остается в осадке, дициклогексилмочевина продукт превращения дициклогексилкарбодиимида выпадает в осадок. Таким образом, единственным соединением, находящемся в растворе, является искомый продукт, регистрируемый в УФ-свете при анализе аликвоты реакционной смеси методом тонкослойной хроматографии. Для получения его в кристаллически чистом виде достаточно профильтровать раствор реакционной смеси от осадка фильтрат упарить, а осадок растворить в метаноле и продукт осадить эфиром. Выход продукта увеличивается до 92% по сравнению с прототипом. При проведении процесса в условиях, когда исходные реагенты в указанных выше соотношениях сразу вводятся в реакционную смесь, т.е. не порциями, идет образование трудноотделимого побочного продукта. When carrying out the process under the proposed conditions, the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol is completely consumed for the formation of biotin ester. Since biotin is insoluble in dimethylformamide, its excess remains in the precipitate, dicyclohexylurea, the product of the conversion of dicyclohexylcarbodiimide precipitates. Thus, the only compound in solution is the desired product, detected in UV light when analyzing an aliquot of the reaction mixture by thin layer chromatography. To obtain it in crystalline pure form, it is enough to filter the solution of the reaction mixture from the precipitate, evaporate the filtrate, and dissolve the precipitate in methanol and precipitate the product with ether. The product yield increases to 92% compared with the prototype. When carrying out the process under conditions when the starting reagents in the above ratios are immediately introduced into the reaction mixture, i.e. not in portions, the formation of an intractable by-product.
Уменьшение конечного количества биотина (молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола: биотин 1:(1,2-1,4)) не приводит к полному расходованию натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, а увеличение количества дициклогексилкарбодиимида (конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола: дициклогексилкарбодиимид 1:(1,6-1,9)) приводит к появлению в реакционной смеси побочного продукта, который регистрируют в УФ-свете с помощью метода тонкослойной хроматографии. A decrease in the final amount of biotin (molar ratio of sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol: biotin 1: (1.2-1.4)) does not lead to a complete consumption of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, and an increase in the amount of dicyclohexylcarbodiimide ( the final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol: dicyclohexylcarbodiimide 1: (1.6-1.9)) leads to the appearance of a by-product in the reaction mixture, which is recorded in UV light using thin layer chromatography.
Пример 1 (по прототипу). Синтез проводят по методике, описанной в [6-7] Для этого 41,5 мк моль натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола сушат 30 минут в вакууме при 60oC растворяют в 62 мкл диметилформамида, а затем добавляют 44,6 мк моль биотина. К охлажденной во льду реакционной смеси добавляют 43,2 мк моль дициклогексилкарбодиимида и выдерживают в 1 час при 0oC и 21 час при комнатной температуре при перемешивании. Аликвоту реакционной смеси наносят на тонкослойную пластинку с силикагелем и проводят хроматографию в системе этанол: хлороформ (6:4). Продукты, образующиеся в результате реакции, регистрируют в виде пятен на пластине в УФ свете. Анализ показывает, что при проведении реакции в таких условиях (молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида равно 1:1, 08:1,04 соответственно) в реакционной смеси появляется продукт с Rf 0,35, а натриевая соль 2-нитро-4-сульфофенола расходуется не полностью.Example 1 (prototype). The synthesis is carried out according to the procedure described in [6-7]. For this, 41.5 μmol of 2-nitro-4-sulfophenol sodium salt is dried for 30 minutes in a vacuum at 60 ° C., dissolved in 62 μl of dimethylformamide, and then 44.6 μm are added. mole of biotin. 43.2 μmol of dicyclohexylcarbodiimide was added to the reaction mixture cooled in ice and kept at 0 ° C for 1 hour and at room temperature with stirring. An aliquot of the reaction mixture was applied to a thin-layer plate with silica gel and chromatography was performed in the ethanol: chloroform system (6: 4). The products resulting from the reaction are recorded as spots on the plate in UV light. The analysis shows that when carrying out the reaction under such conditions (the molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is 1: 1, 08: 1.04, respectively), a product with R f 0.35 appears in the reaction mixture, and the 2-nitro-4-sulfophenol sodium salt is not completely consumed.
Пример 2. Проводят те же процедуры с теми же количествами веществ, что и в примере 1, а затем реакционную смесь снова охлаждают в льду, добавляют 20,8 мк моль биотина, 18,4 мк моль дициклогексилкарбодиимида и снова выдерживают 1 час при 0oC, 21 час при комнатной температуре и 12-15 часов при +5oC. (Конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида равно 1:1, 58:1,49 соответственно). Анализ реакционной смеси проводят методом тонкослойной хроматографии так, как описано в примере 1. В этом случае анализ обнаруживает полное превращение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола в продукт с Rf 0,35. Осадок дициклогексилмочевины и непрореагировашего биотина отделяют фильтрованием, фильтрат упаривают до маслянистого остатка, остаток растворяют в 50 мкл метанола. Продукт осаждают их метанола серным эфиром и сушат над P2O5 в вакууме. Выход 80%
Пример 3. Выполняют все те же стадии, что и в примерах 1 и 2, за исключением того, что реакционная смесь в объеме 420 мкл содержит изначально 264 мк моль натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, 278 мк моль биотина и 269 мк моль дициклогексилкарбодиимида, а затем в нее было добавлено 96 мк моль биотина и 102 мк моль дициклогексилкарбодиимида. (Конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида равно 1:1, 4:1,39 соответственно).Example 2. The same procedures are carried out with the same amounts of substances as in Example 1, and then the reaction mixture is again cooled in ice, 20.8 μm mol of biotin, 18.4 μm mol of dicyclohexylcarbodiimide are added and again kept for 1 hour at 0 o C, 21 hours at room temperature and 12-15 hours at +5 o C. (The final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is 1: 1, 58: 1.49, respectively). Analysis of the reaction mixture is carried out by thin-layer chromatography as described in example 1. In this case, the analysis reveals the complete conversion of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol into a product with R f 0.35. The precipitate of dicyclohexylurea and unreacted biotin was separated by filtration, the filtrate was evaporated to an oily residue, the residue was dissolved in 50 μl of methanol. The product was precipitated with methanol in sulfuric ether and dried over P 2 O 5 in vacuo. Yield 80%
Example 3. All the same steps are performed as in examples 1 and 2, except that the reaction mixture in a volume of 420 μl initially contains 264 μm mol of sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, 278 μm mol of biotin and 269 μm mole of dicyclohexylcarbodiimide, and then 96 μm of biotin and 102 μm of dicyclohexylcarbodiimide were added to it. (The final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is 1: 1, 4: 1.39, respectively).
Полученный продукт был проанализирован методом тонкослойной хроматографии в трех системах растворителей: А этанол-хлороформ (6:4), Б этанол-вода (9: 1, В н-бутанол:уксусная кислота:вода (4:1:1). Анализ показывает, что во всех системах растворителей продукт представлен одним пятном с Rf 0,35, 0,69 и 0,55 в системах А, Б и В соответственно. Строение полученного продукта было доказано с помощью метода 1H-ЯМР-спектроскопии. Отнесение сигналов было проведено с использованием метода двойного резонанса1H}1H -1H. 1H-ЯМР-спектр (400мГц, D2O, δ м.д.) 1,59(м, 2H, H-7, H-7'); 1,68 (м, 1H,H-6); 1,82 (м, 3H, H-6', H-8H-8'); 2,83 (м, 3H,H-3,H-9,H-9'); 3,04 (дд, 1H,H-2); 3,41 (м, 1H, H-4); 4,48 (дд, 1H,H-5); 4,65 (м, 1H,H-1); 7,57 (д, 1H,H-12); 8,21 (дд, 1H, H-11); 8,57 (д, 1H,H-10). Выход 92%
Пример 4. Синтез продукт проводят аналогично тому, как описано в примерах 1 и 2, за исключением того, что конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида рано 1:1, 42: 1,32 соответственно. Анализ аликвоты реакционной смеси, проведенной так, как описано в примере 1, обнаруживает полное расхождение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенилового эфира биотина.The resulting product was analyzed by thin-layer chromatography in three solvent systems: A ethanol-chloroform (6: 4), B ethanol-water (9: 1, C n-butanol: acetic acid: water (4: 1: 1). Analysis shows that in all solvent systems the product is represented by one spot with R f 0.35, 0.69 and 0.55 in systems A, B and C. The structure of the obtained product was proved using the method of 1 H-NMR spectroscopy. was carried out using the double resonance method 1 H} 1 H - 1 H. 1 H-NMR spectrum (400 MHz, D 2 O, δ ppm) 1.59 (m, 2H, H-7, H-7 '); 1.68 (m, 1H, H-6); 1.82 (m, 3H, H-6 ', H-8H-8'); 2.83 (m, 3H, H-3, H-9, H-9 '); 3, 04 (dd, 1H, H-2); 3.41 (m, 1H, H-4); 4.48 (dd, 1H, H-5); 4.65 (m, 1H, H-1); 7.57 (d, 1H, H-12); 8.21 (dd, 1H, H-11); 8.57 (d, 1H, H-10). 92% yield
Example 4. The synthesis of the product is carried out similarly as described in examples 1 and 2, except that the final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is early 1: 1, 42: 1.32, respectively. Analysis of an aliquot of the reaction mixture, carried out as described in example 1, reveals a complete discrepancy between the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol and the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin.
Пример 5. Условия синтеза аналогичны условиям, приведенным в примерах 1 и 2, за исключением того, что конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида равно 1:1, 41: 1,47 соответственно. Анализ аликвоты реакционной смеси, проведенный так, как описано в примере 1, показывает полное расходование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенилового эфира биотина. Example 5. The synthesis conditions are similar to the conditions described in examples 1 and 2, except that the final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is 1: 1, 41: 1.47, respectively. Analysis of an aliquot of the reaction mixture, carried out as described in example 1, shows the complete consumption of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol for the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin.
Пример 6. Условия синтеза аналогичны условиям, описанным в примерах 1 и 2, за исключением того, что конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида равно 1:1,48: 1,31 соответственно. Анализ аликвоты реакционной смеси, приведенный так, как описано в примере 1, обнаруживает полное расходование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенилового эфира биотина. Example 6. The synthesis conditions are similar to the conditions described in examples 1 and 2, except that the final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is 1: 1.48: 1.31, respectively. Analysis of an aliquot of the reaction mixture, as described in example 1, reveals the complete consumption of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol on the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin.
Пример 7. Условия синтеза аналогичны условиям, описанным в примерах 1 и 2, за исключением того, что конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида равно 1:1,52: 1,44 соответственно. Анализ аликвоты реакционной смеси, проведенный так, как описано в примере 1, обнаруживает полное расходование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенилового эфира биотина. Example 7. The synthesis conditions are similar to the conditions described in examples 1 and 2, except that the final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is 1: 1.52: 1.44, respectively. Analysis of an aliquot of the reaction mixture, carried out as described in example 1, reveals the complete consumption of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol on the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin.
Пример 8. Условия синтеза аналогичны условиям, описанным в примерах 1 и 2, за исключением того, что конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида равно 1:1,49: 1,51 соответственно. Анализ аликвоты реакционной смеси, проведенный так, как описано в примере 1, обнаруживает полное расходование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенилового эфира биотина. Example 8. The synthesis conditions are similar to the conditions described in examples 1 and 2, except that the final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is 1: 1.49: 1.51, respectively. Analysis of an aliquot of the reaction mixture, carried out as described in example 1, reveals the complete consumption of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol on the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin.
Пример 9. Условия синтеза аналогичны условиям, описанным в примерах 1 и 2, за исключением того, что конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодимида равно 1:1,58:1,31 соответственно. Анализ аликвоты реакционной смеси, проведенный так, как описано в примере 1, обнаруживает полное расходование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенилового эфира биотина. Example 9. The synthesis conditions are similar to the conditions described in examples 1 and 2, except that the final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodimide is 1: 1.58: 1.31, respectively. Analysis of an aliquot of the reaction mixture, carried out as described in example 1, reveals the complete consumption of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol for the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol for the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin .
Пример 10. Условия синтеза аналогичны условиям, описанным в примерах 1 и 2, за исключением того, что конечное молярное соотношение натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола, биотина и дициклогексилкарбодиимида равно 1:1,57: 1,37 соответственно. Анализ аликвоты реакционной смеси, проведенный так, как описано в примере 1, обнаруживает полное расходование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенола на образование натриевой соли 2-нитро-4-сульфофенилового эфира биотина. Example 10. The synthesis conditions are similar to the conditions described in examples 1 and 2, except that the final molar ratio of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol, biotin and dicyclohexylcarbodiimide is 1: 1.57: 1.37, respectively. Analysis of an aliquot of the reaction mixture, carried out as described in example 1, reveals the complete consumption of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol for the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenol for the formation of the sodium salt of 2-nitro-4-sulfophenyl ether of biotin .
Исследования по данной заявке были выполнены при поддержке Международного Научного фонда и Правительства России (гранты RBN000 и RBN300). Studies on this application were supported by the International Science Foundation and the Government of Russia (grants RBN000 and RBN300).
Источники информации:
1. Bayer E.A. Wilchek M. Methods of biochemical analysis, 1980, v.26, p. 1-45.Sources of information:
1. Bayer EA Wilchek M. Methods of biochemical analysis, 1980, v. 26, p. 1-45.
2. Pantano P. Kuhr W.G. Anal.Chem. 1993, v.65, N5, p.623-630. 2. Pantano P. Kuhr W.G. Anal.Chem. 1993, v. 65, N5, p. 623-630.
3. Бадашкеева А.Г. Зарытова В.Ф. Молекул. биологии, 1989, т.23, вып.5, с.1221-1226. 3. Badashkeeva A.G. Zarytova V.F. Molecules Biology, 1989, v.23, issue 5, pp. 1221-1226.
4. Bayer E.A. Wilchek M. Methods in enzymolrgy, 1974, v.XXXIV, p.265-267. 4. Bayer E.A. Wilchek M. Methods in enzymolrgy, 1974, v. XXIV, p. 265-267.
5. Costello S. M. Felix R.T. Gieje R.W. Clin.Chem. 1979, v.25, N8, p. 1572-1580. 5. Costello S. M. Felix R.T. Gieje R.W. Clin. Chem. 1979, v. 25, N8, p. 1572-1580.
6. Гершкович А. А. Серебряный С.Б. Биоорган. химия, 1979, т.5, N8 с. 1125-1132. 6. Gershkovich A. A. Silver S.B. Bioorgan. Chemistry, 1979, v. 5, N8 p. 1125-1132.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96101599A RU2102395C1 (en) | 1996-01-24 | 1996-01-24 | Method of synthesis of biotin 2-nitro-4-sulfophenyl ester sodium salt |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96101599A RU2102395C1 (en) | 1996-01-24 | 1996-01-24 | Method of synthesis of biotin 2-nitro-4-sulfophenyl ester sodium salt |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2102395C1 true RU2102395C1 (en) | 1998-01-20 |
| RU96101599A RU96101599A (en) | 1998-02-10 |
Family
ID=20176215
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU96101599A RU2102395C1 (en) | 1996-01-24 | 1996-01-24 | Method of synthesis of biotin 2-nitro-4-sulfophenyl ester sodium salt |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2102395C1 (en) |
-
1996
- 1996-01-24 RU RU96101599A patent/RU2102395C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Bayer E.A., Wilchek M. Methods of biockemical analysis. 1980, v. 26, p. 1 - 45. 2. Pantano P., Kuhr W.G. Anal.Chem. 1993, v. 65, N 5, p. 623 - 630. 3. Бадашкеева А.Г., Зарытова В.Ф. Молекул.биология. 1989, т. 23, вып. 5, с. 1221 - 1226. 4. Bayer E.A., Wilchek M. Methods in enzymology. 1974, p. 265 - 267. 5. Costello S.M., Felix R.T. и др. Clin.Chum. 1979, v. 25, N 8, p. 1572 - 1580. 6. Гершкович А., Серебряный С.В. Биоорганич.химия. 1979, т. 5, N 8, с. 1125 - 1132. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Miyano et al. | Asymmetric synthesis of axially dissymmetric 1, 1'-binaphthyls via an intramolecular Ullmann coupling reaction of (R)-and (S)-2, 2'-bis (1-bromo-2-naphthylcarbonyloxy)-1, 1'-binaphthyl. | |
| SU654171A3 (en) | Method of obtaining 7-d-/-/a-amino-a-/p-oxyphenylacetamido/-desacetoxycephalosporanic acid or its hydrate or its salt | |
| JP3197957B2 (en) | One-step process for producing dirithromycin | |
| RU2266295C2 (en) | Methods for preparing erythromycin fumarate derivative crystalline forms a, c and d, crystalline forms and methods for preparing intermediate compounds | |
| SU1103796A3 (en) | Process for preparing derivative of paromomycin | |
| RU2102395C1 (en) | Method of synthesis of biotin 2-nitro-4-sulfophenyl ester sodium salt | |
| HU198700B (en) | Process for producing 2-amino-alpha-//1-/diphenyl-methoxy-carbonyl/-ethenyl/-oxy-imino/-4-thiazol-acetic acid | |
| JPH0797391A (en) | Nucleoside derivative and its production | |
| SU558644A3 (en) | The method of obtaining imidazoles or their salts | |
| Shimizu et al. | Synthetic studies on leupeptins and their analogs | |
| KR20000064500A (en) | Optical separation method of 3- (para-chlorophenyl) -glutaramide | |
| JP2735609B2 (en) | UCN-1028D derivative | |
| RU2709493C1 (en) | Method of producing roxadustat | |
| KR900000266B1 (en) | Process for the preparation of apovincaminic acid ethyl ester | |
| Carter et al. | Chemistry and structure of Ganefromycin | |
| CA1277670C (en) | 4-benzyloxy-3-pyrrolin-2-one, its production and use for synthesis of tetramic acid | |
| JP2567638B2 (en) | Tetrahydropteridine derivative | |
| JP2567639B2 (en) | Pteridine derivative | |
| CN112876397B (en) | Preparation method of 2, 5-dihydro-2-oxo-1H-pyrrole-1-acetamide | |
| US2773872A (en) | Dihydroorotic acid | |
| SU1016281A1 (en) | Composite anhydrides of 4-bromo-2,2,5,5-tetramethyl-1-oxypyrrolyne-3-carboxylic acid as spin marks for bioorganic compounds of the protein-peptide nature | |
| JP2663295B2 (en) | Hexadienoic acid derivative and method for producing the same | |
| US6835841B2 (en) | Asymmetric catalytic hydrogenation process for preparation of chiral cyclic β-aminoesters | |
| SU1757471A3 (en) | Method for preparation of l-alanyl-l-prolyn derivatives or their pharmaceutically acceptable salts | |
| Avent et al. | Synthesis of protected γ-carboxyglutamates and γ-acylglutamates by rearrangement of N, N-diacylglutamates |