RU2101029C1 - Способ получения препарата для идентификации стрептококка группы д - Google Patents
Способ получения препарата для идентификации стрептококка группы д Download PDFInfo
- Publication number
- RU2101029C1 RU2101029C1 RU92008092A RU92008092A RU2101029C1 RU 2101029 C1 RU2101029 C1 RU 2101029C1 RU 92008092 A RU92008092 A RU 92008092A RU 92008092 A RU92008092 A RU 92008092A RU 2101029 C1 RU2101029 C1 RU 2101029C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- group
- streptococcus
- preparation
- mixture
- polystyrene latex
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Способ получения препарата для идентификации стрептококков группы D. Использование: в медицине, в частности, в микробиологии. Сущность: получение препарата осуществляют путем иммобилизации гамма-глобулина, иммунного и стрептококку группы D, на поверхности полистирольного латекса, представляющего собой смесь латексов с различной дисперсностью. Стабилизируют в присутствии бычьего альбумина, полиэтиленгликоля и консерванта при условии определенного соотношения всех компонентов, представленных в г/л, а процесс проводят в 0,01 М глициново-солевом буферном растворе с рН 8,20-8,22. Способ прост в исполнении.
Description
Способ относится к микробиологии, а именно к получению препарата, необходимого для проведения иммунологического анализа с целью идентификации стрептококков группы D.
Указанный препарат необходим:
1. для выявления стрептококковой этиологии заболеваний у людей;
2. для контроля за протеканием лечения больных стрептококковыми заболеваниями;
3. для оценки санитарного состояния объектов окружающей среды.
1. для выявления стрептококковой этиологии заболеваний у людей;
2. для контроля за протеканием лечения больных стрептококковыми заболеваниями;
3. для оценки санитарного состояния объектов окружающей среды.
Из аналогов известен способ, по которому возможно получение препарата для идентификации стрептококка группы D. Необходимый препарат получают путем иммобилизации антитела гамма-глобулина, иммунного к стрептококку группы D на поверхности частиц латекса, получаемого на основе полистирола и последующего отделения обработанных латексных частиц. Способ основан на реализации латексной агглютинации. Указанный способ является близким к заявляемому по своей технической сущности и принят авторами за прототип. Недостатком прототипа является сложность технологии получения препарата, заключающаяся в необходимости двукратной обработки латексных частиц составами, включающими антитела с целью их иммобилизации.
Техническая сущность заявляемого способа состоит в том, что целевой препарат получают путем иммобилизации гамма-глобулина, иммунного к стрептококку группы D. Процесс включает следующие операции:
1. Смешение антитела гамма-глобулина, иммунного к стрептококку группы D, разбавленного 0,01 М глициново-солевым буферным раствором с рН 8,2 с латексом, разбавленным тем же буферным раствором до содержания латекса в буферном растворе 1% в расчете на полимер. Применяемый латекс представляет собой смесь латекса полистирола с дисперсностью 0,20-0,22 мкм и латекса полистирола с дисперсностью 0,5-0,7 мкм, активированного метакрилатом цинка. Объемное соотношение указанных латексов в смеси равно 1:1.
1. Смешение антитела гамма-глобулина, иммунного к стрептококку группы D, разбавленного 0,01 М глициново-солевым буферным раствором с рН 8,2 с латексом, разбавленным тем же буферным раствором до содержания латекса в буферном растворе 1% в расчете на полимер. Применяемый латекс представляет собой смесь латекса полистирола с дисперсностью 0,20-0,22 мкм и латекса полистирола с дисперсностью 0,5-0,7 мкм, активированного метакрилатом цинка. Объемное соотношение указанных латексов в смеси равно 1:1.
2. Полученную по п. 1 смесь инкубируют при 56oC в течение 30 мин.
3. Смесь, полученную по п. 2, охлаждают до 4-6oC.
4. Охлажденную смесь смешивают с бычьим сыворотным альбумином, разбавленным 0,01 М глициново-солевым буферным раствором.
5. В полученную смесь вводят полиэтиленгликоль ПЭГ-6000 и концентрат.
6. Компоненты, необходимые для приготовления целевого препарата, берут в следующем соотношении, г/л:
Гаммаглобулин, иммунный с стрептококку группы D 0,12-0,13
Смесь латексов 2,50-2,55
Бычий сыворотный альбумин 0,50-0,55
Полиэтиленгликоль 55,00-65,00
Консервант 0,10-1,00
0,01 М Глициново-солевой буферный раствор с рН 8,20-8,22 Остальное
Предлагаемый способ несложен и обеспечивает получение высокочувствительного препарата.
Гаммаглобулин, иммунный с стрептококку группы D 0,12-0,13
Смесь латексов 2,50-2,55
Бычий сыворотный альбумин 0,50-0,55
Полиэтиленгликоль 55,00-65,00
Консервант 0,10-1,00
0,01 М Глициново-солевой буферный раствор с рН 8,20-8,22 Остальное
Предлагаемый способ несложен и обеспечивает получение высокочувствительного препарата.
Авторы утверждают, что способ соответствует критерию изобретательского уровня, т. к. на основании ознакомления с научно-технической и патентной информацией, а также в силу своих опыта и знаний вся совокупность технических признаков предлагаемого способа явным образом не вытекает из уровня техники, имеющей отношение к предлагаемому объекту.
1. Гамма-глобулин, иммунный к стрептококкам группы D, разводят 0,01 М глициново-солевым буферным раствором с рН 8,2 до концентрации 0,8 мг/л.
2. Полистирольный латекс с размером частиц 0,2 мкм разводят 0,01 М глициново-солевым раствором с рН 8,2 до концентрации 1% полимера.
3. Полистирольный латекс с размером частиц 0,6 мкм, активированный метакрилатом цинка, разводят 0,01 М глициново-солевым буферным раствором с рН 8,2 до концентрации 1% полимера.
4. Подготовленные по пп. 2 и 3 полистирольные латексы смешивают в объемном соотношении 1:1.
5. 10 мл рабочего раствора гамма-глобулина, полученного по п. 1, смешивают с 10 мл 1%-ной латексной смеси, полученной по п.4.
6. Смесь, полученную по п. 5, подвергают инкубированию в водяной бане при 56oC и при 140 колебаниях в 1 мин в течение 30 мин.
7. Смесь, полученную по п. 6, охлаждают. К охлажденной до 4-6oC смеси латекса с гамма-глобулином добавляют 20 мл 0,1%-ного раствора бычьего сывороточного альбумина в 0,01 М глициново-солевом буферном растворе с рН 8,2, содержащего 6% полиэтиленгликоля-6000. В полученную смесь добавляют 0,004 г мертиолята-консерванта.
Препарат группы D, изготовленный вышеописанным способом, обладает высокой специфичностью, проявляющейся в отсутствии перекрестных реакций в отношении антигенов гетерологичных групп этих микроорганизмов.
Чувствительность препаратов группы D проверяли по реакции латексной агглотипации (РЛА) на стекле с разведениями 18-24-часовых культур стрептококков этой группы, выращенных в жидкой питательной среде и обработанных 1%-ным раствором химопсина для снятия спонтанной агглютинации.
Результат исследования чувствительности препарата представлен ниже:
РЛА на стекле с культурами стрептококков группы D, обработанных химопсином, 104-105 КОЕ.
РЛА на стекле с культурами стрептококков группы D, обработанных химопсином, 104-105 КОЕ.
Примечания:
1. КОЕ колониеобразующие единицы стрептококка.
1. КОЕ колониеобразующие единицы стрептококка.
2. Чувствительность препарата представлена в соответствующем показателе, соответствующем одной пробе испытуемого материала (0,05 мл).
Claims (1)
- Способ получения препарата для идентификации стрептококка группы D, отличающийся тем, что гамма-глобулин иммунный к стрептококку группы D, иммобилизуют на поверхности частиц полистирольного латекса и полученный препарат стабилизируют раствором бычьего сывороточного альбумина в присутствии полиэтиленгликоля и мертиолята, причем в качестве полистирольного латекса используют смесь, составленную из равных объемов полистирольного латекса с дисперсностью 0,20 0,22 мкм и полистирольного латекса с дисперсностью 0,50 - 0,70 мкм активированного метакрилатом цинка и процесс проводят в 0,01 М глициново-солевом буферном растворе с pH 8,20 8,22 при следующем соотношении компонентов, г на 1 л буферного раствора:
Гамма-глобулин, иммунный к стрептококку группы D 0,12 0,13
Смесь полистирольных латексов 2,50 2,55
Бычий сывороточный альбумин 0,50 0,55
Полиэтиленгликоль 55,0 65,0
Мертиолят 0,10 0,120
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU92008092A RU2101029C1 (ru) | 1992-11-26 | 1992-11-26 | Способ получения препарата для идентификации стрептококка группы д |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU92008092A RU2101029C1 (ru) | 1992-11-26 | 1992-11-26 | Способ получения препарата для идентификации стрептококка группы д |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU92008092A RU92008092A (ru) | 1995-04-20 |
RU2101029C1 true RU2101029C1 (ru) | 1998-01-10 |
Family
ID=20132540
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU92008092A RU2101029C1 (ru) | 1992-11-26 | 1992-11-26 | Способ получения препарата для идентификации стрептококка группы д |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2101029C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7291343B2 (en) * | 1997-10-14 | 2007-11-06 | Nabi Biopharmaceuticals | Enterococcus antigens and vaccines |
-
1992
- 1992-11-26 RU RU92008092A patent/RU2101029C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Фикс А.И. и др. Использование реакций коагглютинации на основе отечественного реагента для серогруппирования стрептококков группы B и менингококков. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - М.: Медицина, 1986, N 2, с. 8 - 11. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7291343B2 (en) * | 1997-10-14 | 2007-11-06 | Nabi Biopharmaceuticals | Enterococcus antigens and vaccines |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Nelson Jr | The immune-adherence phenomenon: an immunologically specific reaction between microorganisms and erythrocytes leading to enhanced phagocytosis | |
Boyden | The adsorption of proteins on erythrocytes treated with tannic acid and subsequent hemagglutination by antiprotein sera | |
CA1045031A (en) | Serological test for gonorrheal antibodies | |
Nossal et al. | IN VITRO STIMULATION OF ANTIBODY FORMATION BY PERITONEAL CELLS: I. Plaque Technique of High Sensitivity Enabling Access to the Cells | |
Webb et al. | Evaluation of procedures for the diagnosis of Brucella ovis infection in rams | |
Edwards et al. | Diagnosis of group A streptococcal infections directly from throat secretions | |
Jones | Agglutination by precipitin | |
JP2000510687A (ja) | リンパ球機能の測定方法 | |
RU2377308C1 (ru) | Диагностикум псевдотуберкулезный эритроцитарный моноклональный | |
Bailey et al. | Antigenic properties of pleuropneumonia-like organisms from tissue cell cultures and the human genital area | |
US3562384A (en) | Immunological indicator and test system | |
Boettcher | Correlation between human ABO blood group antigens in seminal plasma and on seminal spermatozoa | |
US5318913A (en) | Reagent for the determination by hemagglutination of antibodies to bacterial toxins, method of preparation and application thereof | |
Chordi et al. | Analysis of Toxoplasma gondii antigens by agar diffusion methods | |
RU2101029C1 (ru) | Способ получения препарата для идентификации стрептококка группы д | |
EP0150567B1 (en) | Process for detecting beta-hemolytic streptococcus antigens | |
DE68919982T2 (de) | Ein Sulfydril enthaltendes Reduktionsmittel enthaltende stabilisierte Extraktionszusammensetzung und deren Verwendung zur Bestimmung von Chlamydia und Gonokokken. | |
EP0079145B1 (en) | Reagent for use in diagnosis of syphilis and preparation thereof | |
CA2078651A1 (en) | Wash composition, test kit and method for determination of microorganisms associated with periodontal diseases | |
RU2101027C1 (ru) | Способ получения препарата для идентификации стрептококков группы в | |
US3826821A (en) | Reagents for the diagnosis of infectious mononucleosis and preparation of same | |
RU2101028C1 (ru) | Способ получения препаратов для идентификации стрептококков группы а или группы с | |
US4677080A (en) | Rapid particle agglutination test for enterotoxigenic bacteria | |
JPH07109419B2 (ja) | 微孔質膜を使用するクラミジア抗原または淋菌抗原の測定方法および診断試験キット | |
MEINERTZ et al. | Detection of antisperm antibodies on the surface of motile spermatozoa. Comparison of the immunobead binding technique (IBT) and the mixed antiglobulin reaction (MAR) |