RU2091075C1 - Complex bacterial preparation for treatment and prophylaxis of gastroenteric disease in animals - Google Patents
Complex bacterial preparation for treatment and prophylaxis of gastroenteric disease in animals Download PDFInfo
- Publication number
- RU2091075C1 RU2091075C1 RU95111097A RU95111097A RU2091075C1 RU 2091075 C1 RU2091075 C1 RU 2091075C1 RU 95111097 A RU95111097 A RU 95111097A RU 95111097 A RU95111097 A RU 95111097A RU 2091075 C1 RU2091075 C1 RU 2091075C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- lactobacillus acidophilus
- animals
- preparation
- vkpm
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологической промышленности и, в частности к получению бактериального препарата, используемого для скармливания пушным зверям, домашним животным (собакам), сельскохозяйственным животным и птице с целью профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний. The invention relates to the microbiological industry and, in particular, to the production of a bacterial preparation used for feeding fur animals, domestic animals (dogs), farm animals and poultry for the prevention and treatment of gastrointestinal diseases.
Известны различные бактериальные препараты (пробиотики), предназначенные для профилактики и лечения диарреи и диобактериозов, а также стимуляции роста и развития молодняка сельскохозяйственных животных. Пробиотики могут содержать только один бактериальный штамм, или же в их состав могут быть включены несколько, вплоть до восьми различных штаммов и видов бактерий. Тенденция к созданию мульти-штаммовых препаратов объясняется тем, что они активны в более широком диапазоне условий и видов животных. В настоящее время в пробиотики включают главным образом штамм кишечного происхождения таких видов как Lactobacillus acidophilus, L. casei, L. helveticus, L. lactis, L. salivarius, L. plantarum, Enterococcus faecalis, E. faecium и Bifidobacterium spp. Кроме того, могут применяться и культуры, выделенные из кисломолочных продуктов, например, L. delbrueckii ss. bulgaricus и Streptococcus thermophilus. Почти все пробиотики, пользующиеся сейчас спросом, содержат лактобациллы и/или стрептококки; немногие содержат бифидобактерии. Various bacterial preparations (probiotics) are known for the prevention and treatment of diarrhea and diobacteriosis, as well as stimulating the growth and development of young farm animals. Probiotics can contain only one bacterial strain, or several, up to eight different strains and types of bacteria, can be included in their composition. The trend towards the creation of multi-strain preparations is explained by the fact that they are active in a wider range of conditions and animal species. Currently, probiotics mainly include a strain of intestinal origin of species such as Lactobacillus acidophilus, L. casei, L. helveticus, L. lactis, L. salivarius, L. plantarum, Enterococcus faecalis, E. faecium and Bifidobacterium spp. In addition, cultures isolated from fermented milk products, for example, L. delbrueckii ss, can also be used. bulgaricus and Streptococcus thermophilus. Almost all the probiotics currently in demand contain lactobacilli and / or streptococci; few contain bifidobacteria.
Примером пробиотического препарата, в состав которого входит один штамм, является ацидофилин, содержащий в 1 г не менее 200 млн ацидофильных бактерий Lactobacillus acidophilus [1] Среди комплексных пробиотических препаратов можно отметить пропиацид, который содержит ацидофильные лактобациллы и пропионовокислые бактерии [2] Описан препарат, который содержит антибиотикустойчивые штаммы молочнокислых бактерий L. acidophilus, L. delbrueckii ss. bulgaricus и S. lactis [3] Он предназначен для восстановления и поддержания равновесия кишечной флоры животных, нарушенного в результате применения антибактериальных средств. Известно несколько пробиотических препаратов, в состав которых входят культуры L. delbrueckii ss. bulgaricus и S. thermophilus [4 5]
Известен также комплексный микробный препарат СБА для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний животных, выбранный нами в качестве ближайшего аналога [7] Согласно описанию, он содержит L. acidophilus, S. faecium и Bifidobacterium bifidum. Препарат используют для лечения сельскохозяйственных животных и птицы. Недостаток препарата СБА заключается в том, что он имеет недостаточно широкий диапазон антимикробного действия и обладает невысокой антагонистической активностью (табл. 1). Кроме того, при его наработке получаются недостаточно высокие выходы составляющих его культур, а также невозможно использование мелассы, которая является дешевым источником углерода в промышленных средах при получении препарата.An example of a probiotic preparation containing one strain is acidophilus, which contains at least 200 million acidophilic bacteria Lactobacillus acidophilus in 1 g [1] Among the complex probiotic preparations, propacid, which contains acidophilic lactobacilli and propionic acid bacteria [2], describes the drug, which contains antibiotic-resistant strains of lactic acid bacteria L. acidophilus, L. delbrueckii ss. bulgaricus and S. lactis [3] It is designed to restore and maintain the balance of the intestinal flora of animals, disturbed by the use of antibacterial agents. Several probiotic preparations are known that include cultures of L. delbrueckii ss. bulgaricus and S. thermophilus [4 5]
Also known is the complex microbial preparation SBA for the treatment and prevention of gastrointestinal diseases in animals, which we have chosen as the closest analogue [7] According to the description, it contains L. acidophilus, S. faecium and Bifidobacterium bifidum. The drug is used to treat farm animals and poultry. The disadvantage of the SBA drug is that it does not have a wide enough range of antimicrobial activity and has a low antagonistic activity (Table 1). In addition, when it is developed, the yields of its constituent cultures are not high enough, and it is also impossible to use molasses, which is a cheap source of carbon in industrial environments when receiving the drug.
Задачей настоящего изобретения является создание бактериального препарата для пушных зверей, домашних животных (собак), сельскохозяйственных животных и птицы с более широким диапазоном антимикробного действия и более высокой антагонистической активностью. An object of the present invention is to provide a bacterial preparation for fur animals, domestic animals (dogs), farm animals and poultry with a wider range of antimicrobial activity and higher antagonistic activity.
Задача решается получением комплексного бактериального препарата энтерацид П, содержащего новый штамм Lactobacillus acidophilus 495 и штамм Enterococcus faecium ВКПМ В-2990 (штамм получен из Музея культур промышленных микроорганизмов ГНИИгенетика). The problem is solved by obtaining a complex bacterial preparation Entericide P containing a new strain of Lactobacillus acidophilus 495 and Enterococcus faecium strain VKPM B-2990 (the strain was obtained from the Museum of Culture of Industrial Microorganisms GNI Genetics).
Штамм Lactobacillus acidophilus 495 был выделен из содержимого кишечника песца. Strain Lactobacillus acidophilus 495 was isolated from the intestinal contents of the arctic fox.
Идентификация штамма проводилась по основным морфологическим, культуральным и физиолого-биохимическим свойствам, согласно определителю Берджи [8]
Штамм Lactobacillus acidophilus 495 депонирован во Всероссийской коллекции культур промышленных микроорганизмов ГНИИгенетика под номером ВКПМ В-6535 и характеризуется следующими признаками.The identification of the strain was carried out according to the main morphological, cultural and physiological-biochemical properties, according to the Bergey determinant [8]
The strain Lactobacillus acidophilus 495 is deposited in the All-Russian collection of cultures of industrial microorganisms GNI genetics under the number VKPM B-6535 and is characterized by the following features.
Морфологические признаки. Morphological signs.
Клетки в виде тонких прямых палочек с тупыми концами, расположенные поодиночке или в цепочках. Неподвижные, грамположительные, спор и капсул не образуют, жгутиков не имеют. Cells in the form of thin straight sticks with blunt ends, located singly or in chains. Fixed, gram-positive, do not form spores and capsules, do not have flagella.
Культуральные признаки. Cultural signs.
Растет на богатых питательных средах, содержащих органические компоненты. При росте на гидролизованном молоке или среде МРС через 12 часов наблюдается равномерное помутнение. На плотной среде МРС колонии выпуклые, непрозрачные, беловатые, обычно шероховатые, но становятся гладкими и плотными в присутствии твина-80. На агаре с молочной сывороткой образуют поверхностные колонии диаметром 2 3 мм и глубинные колонии в виде комочков ваты. It grows on rich nutrient media containing organic components. When growing on hydrolyzed milk or MPC medium after 12 hours, uniform turbidity is observed. On dense MPC medium, colonies are convex, opaque, whitish, usually rough, but become smooth and dense in the presence of Tween-80. On whey agar form surface colonies with a diameter of 2 to 3 mm and deep colonies in the form of cotton balls.
Физиолого-биохимические признаки. Physiological and biochemical characteristics.
Каталазонегативен. Факультативный анаэроб. При расщеплении сахаров не менее половины конечных углеродных продуктов составляет молочная кислота. Не образует пигмента. Растет при pH 5,0 5,8. Оптимальная температура роста культуры 37 39oC, максимальная 45oC, минимальная 20oC. Обладает сложными пищевыми потребностями в аминокислотах, пептидах, производных нуклеиновых кислот, витаминах, солях жирных кислот или их эфирах и сбраживаемых углеводах. Не разжижает желатину. Не образует газа из глюкозы или глюконата.Catalase-negative. Optional anaerobic. With the breakdown of sugars, at least half of the final carbon products are lactic acid. It does not form pigment. Grows at pH 5.0 5.8. The optimum growth temperature of the culture is 37 39 o C, maximum 45 o C, minimum 20 o C. It has complex nutritional needs for amino acids, peptides, nucleic acid derivatives, vitamins, salts of fatty acids or their esters and fermented carbohydrates. Does not thin the gelatin. Does not form gas from glucose or gluconate.
Хорошо сбраживает молоко, образуя плотный ровный сгусток с приятным кисломолочным запахом и вкусом. Титруемая кислотность суточной культуры составляет 110oT, предельная титруемая кислотность при 37oC - 300oT.It ferments milk well, forming a dense, even clot with a pleasant sour-milk smell and taste. The titratable acidity of the daily culture is 110 o T, the maximum titratable acidity at 37 o C is 300 o T.
Отношение к углеводам. Attitude to carbohydrates.
Сбраживает эскулин, фруктозу, галактозу, глюкозу, лактозу, мальтозу, маннозу, раффинозу, салицин, сахарозу, трегалозу; не сбраживает ксилозу, рибозу, сорбит, рамнозу, мелибиозу, мелезитозу, маннит, целлобиозу, арабинозу, амигдалин. Ferments esculin, fructose, galactose, glucose, lactose, maltose, mannose, raffinose, salicin, sucrose, trehalose; does not ferment xylose, ribose, sorbitol, rhamnose, melibiosis, melesitosis, mannitol, cellobiose, arabinose, amygdalin.
Штамм растет в бульоне в присутствии 2% NaCl, но не 4% NaCl. Штамм устойчив в желчи в концентрации 40% в среде. Свертывает молоко с 0,5% фенола. The strain grows in broth in the presence of 2% NaCl, but not 4% NaCl. The strain is stable in bile at a concentration of 40% in the medium. Coagulates milk with 0.5% phenol.
Антагонистическая активность культуральной жидкости штамма (КЖ), полученной при его культивировании в MRS-бульоне [8] в течение 24 ч, выявлена как по отношению к грамположительным, так и к грамотрицательным бактериям: Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Salmonella abortus-bovis, Salmonella dublin, Salmonella gallinarum, Enterococcus faecalis, Streptococcus sanguis и Pseudomonas aeruginosa. Сравнительная характеристика антимикробной активности штамма Lactobacillus acidophilus 495 и штамма Lactobacillus acidophilus, выделенного из препарата СБА (Lactobacillus acidophilus СБА), по отношению к некоторым тест-культурам приведена в таблице 1. The antagonistic activity of the culture fluid of the strain (CL) obtained by culturing it in MRS broth [8] for 24 hours was detected both against gram-positive and gram-negative bacteria: Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Salmonella abortus-bovis, Salmonella dublin, Salmonella gallinarum, Enterococcus faecalis, Streptococcus sanguis and Pseudomonas aeruginosa. Comparative characteristics of the antimicrobial activity of the strain of Lactobacillus acidophilus 495 and the strain of Lactobacillus acidophilus isolated from the SBA preparation (Lactobacillus acidophilus SBA), in relation to some test cultures are shown in table 1.
Продуктивность штамма. Strain productivity.
При культивировании штамма на обезжиренном молоке в течение 14 ч титр клеток составляет 2 4 млрд/мл, а в ферментационной среде 3 6 млрд/мл. When the strain is cultivated in skim milk for 14 hours, the cell titer is 2 4 billion / ml, and in a fermentation medium 3 6 billion / ml.
При проверке штамма Lactobacillus acidophilus 495 на белых мышах установлена его непатогенность. When testing the strain of Lactobacillus acidophilus 495 on white mice, its pathogenicity was established.
Штамм хранят в лиофильно-высушенном состоянии или путем периодических пересевов (1 раз в 30 дн) на стерильном обезжиренном молоке. В этом случае посевы инкубируют при 37 39oC в течение 18 24 ч.The strain is stored in a freeze-dried state or by periodic reseeding (1 time in 30 days) in sterile skim milk. In this case, the crops are incubated at 37 39 o C for 18 24 hours
Предлагаемый штамм Lactobacillus acidophilus 495 обладает более высокой антагонистической активностью по отношению к некоторым грамположительным и грамотрицательным микроорганизмам (табл. 1) и дает более высокие титры, т.е. имеет более высокую продуктивность по сравнению с использовавшимся ранее штаммом Lactobacillus acidophilus из препарата СБА (табл. 2). Штамм Lactobacillus acidophilus 495 обладает также таким преимуществом, как способность сбраживать сахарозу, которая отсутствует у штамма Lactobacillus acidophilus из СБА. Благодаря этому можно эффективно использовать в составе ферментационной питательной среды для его культивирования в качестве источника углерода свекловичную мелассу, которая значительно дешевле глюкозы. The proposed strain of Lactobacillus acidophilus 495 has a higher antagonistic activity against certain gram-positive and gram-negative microorganisms (Table 1) and gives higher titers, i.e. has a higher productivity compared to the previously used strain of Lactobacillus acidophilus from the drug SBA (table. 2). The strain Lactobacillus acidophilus 495 also has such an advantage as the ability to ferment sucrose, which is absent in the Lactobacillus acidophilus strain from SBA. Due to this, beet molasses, which is much cheaper than glucose, can be effectively used in the composition of a fermentation nutrient medium for its cultivation as a carbon source.
Комплексный бактериальный препарат, полученный с использованием предлагаемого штамма, характеризуется хорошей приживаемостью лактобацилл в желудочно-кишечном тракте пушных зверей и собак, очевидно, в связи с видоспецифичностью штамма Lactobacillus acidophilus 495 (табл. 3). The complex bacterial preparation obtained using the proposed strain is characterized by a good survival of lactobacilli in the gastrointestinal tract of fur animals and dogs, apparently, due to the species-specificity of the strain Lactobacillus acidophilus 495 (Table 3).
Получение комплексного бактериального препарата энтерацид П включает следующие этапы: приготовление питательной среды для раздельного выращивания составляющих его культур, получение инокулята, приготовление посевного материала, накопление бактериальной массы, отделение бактериальной массы от культуральной жидкости, приготовление защитной среды, смешивание бактериальной массы с защитной средой, замораживание, сушка суспензии сублимацией (или распылительное высушивание культуральной жидкости), измельчение сухих порошков биомассы, смешивание культур-компонентов, стандартизация препарата, упаковка, маркировка. Obtaining a complex bacterial preparation enteric P includes the following steps: preparation of a nutrient medium for separate cultivation of its constituent cultures, preparation of an inoculum, preparation of seed, accumulation of bacterial mass, separation of the bacterial mass from the culture fluid, preparation of a protective medium, mixing of the bacterial mass with a protective medium, freezing drying the suspension by sublimation (or spray drying the culture fluid), grinding dry biomass powders, mixing of component cultures, drug standardization, packaging, labeling.
Пример 1. С целью получения комбинированного бактериального препарата энтерацид П проводят раздельное выращивание культур Lactobacillus acidophilus 495 и Enterococcus faecium ВКПМ В-2990 на посевной питательной среде следующего состава,
Кукурузная мука 3
Кукурузный экстракт 0,9
Глюкоза 1,5 (или меласса свекловиченая 1,5 по РВ)
Мел химически осажденный 0,5
Калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный 0,02
Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,02
Натрий азотнокислый 0,03
Кобальт хлористый 6-водный 0,0005
Марганец сернокислый 5-водный 0,0005
Натрий молибденовокислый 0,0005
Цинк сернокислый 7-водный 0,0005
Водопроводная вода до 100.Example 1. In order to obtain a combined bacterial preparation Entericide P, separate cultivation of cultures of Lactobacillus acidophilus 495 and Enterococcus faecium VKPM B-2990 is carried out on a seed culture medium of the following composition,
Cornmeal 3
Corn Extract 0.9
Glucose 1.5 (or molasses beet 1.5 according to RV)
Chemically precipitated chalk 0.5
Potassium phosphate disubstituted 3-water 0.02
Potassium phosphate monosubstituted 0.02
Sodium nitrate 0.03
Cobalt chloride 6-water 0.0005
5-
Molybdenum Sodium 0.0005
Zinc Sulphate 7-Aqueous 0.0005
Tap water up to 100.
Глюкозу и мелассу стерилизуют отдельно в автоклаве: глюкозу в виде раствора с конц. 400 г/л при давлении 0,05 МПа с выдержкой в течение 30 мин; мелассу в виде раствора с конц. 500 г/л при 0,08 МПа с выдержкой 40 мин. Остальные компоненты среды стерилизуют совместно. Значение pH питательной среды до стерилизации устанавливают 7,2-7,3; после стерилизации 7,0-7,2. Засев среды производят в асептических условиях. Glucose and molasses are sterilized separately in an autoclave: glucose in the form of a solution with conc. 400 g / l at a pressure of 0.05 MPa with holding for 30 minutes; molasses in the form of a solution with conc. 500 g / l at 0.08 MPa with an exposure of 40 min. The remaining components of the medium are sterilized together. The pH of the nutrient medium before sterilization is set to 7.2-7.3; after sterilization, 7.0-7.2. Inoculation of the medium is carried out under aseptic conditions.
Инокулят получают на обрате путем культивирования монокультур при 37 - 39oC в течение 18 20 ч до образования плотного ровного сгустка. Инокулят используют для получения посевного материала. С этой целью инокулят в количестве 3 5% вносят в питательную среду. После засева и перемешивания величина pH должна составлять 5,5 6,0. Выращивание посевного материала для каждого штамма ведут в анаэробных условиях при температуре (39±1)oC и избыточном давлении 0,02 0,04 МПа. Выращивание ведут в течение 10 14 ч.The inoculum is obtained on the image by culturing monocultures at 37 - 39 o C for 18 to 20 hours until a dense, even clot forms. The inoculum is used to obtain seed. To this end, the inoculum in the amount of 3 5% contribute to the nutrient medium. After seeding and mixing, the pH should be 5.5 to 6.0. The cultivation of seed for each strain is carried out under anaerobic conditions at a temperature of (39 ± 1) o C and an overpressure of 0.02 0.04 MPa. Growing lead for 10 to 14 hours
Посевной материал используют для засева ферментационной питательной среды. Его вносят в количестве 3% от объема среды. После засева и перемешивания величина pH должна составлять 5,5 6,0. Культивирование каждого штамма ведут в анаэробных условиях при температуре (39±1)oC и избыточном давлении 0,02 0,04 МПа. Продолжительность выращивания каждой культуры 10 14 ч. К концу срока выращивания количество жизнеспособных клеток составляет: при выращивании энтерококка не менее 500 млн/мл, при выращивании лактобацилл не менее 400 млн/мл; pH культуральной жидкости снижается до значения 4,0 4,5; содержание сухих веществ составляет 4,8 - 5,2%
После этого полученную культуральную жидкость с pH 4,0 4,5 подщелачивают до pH 5,8 6,0 40% раствором едкого натра, затем добавляют в нее при перемешивании компоненты, служащие защитной средой при последующей сушке; мелассу в количестве 15 г/л и кукурузную муку в количестве 50 г/л, после чего культуральную жидкость перемешивают в течение 15 20 мин.Seed is used for inoculation of a fermentation nutrient medium. It is introduced in an amount of 3% of the volume of the medium. After seeding and mixing, the pH should be 5.5 to 6.0. The cultivation of each strain is carried out under anaerobic conditions at a temperature of (39 ± 1) o C and an overpressure of 0.02 0.04 MPa. The duration of growing each culture is 10–14 hours. At the end of the growing period, the number of viable cells is: when growing Enterococcus, at least 500 million / ml; when growing Lactobacilli, at least 400 million / ml; the pH of the culture fluid is reduced to 4.0 4.5; solids content is 4.8 - 5.2%
After that, the resulting culture fluid with a pH of 4.0 4.5 is made alkaline to pH 5.8 6.0 with a 40% sodium hydroxide solution, then the components serving as a protective medium for subsequent drying are added to it with stirring; molasses in an amount of 15 g / l and corn flour in an amount of 50 g / l, after which the culture fluid is mixed for 15 to 20 minutes.
Сушку обработанной культуральной жидкости энтерококка или ацидофильных бактерий производят в распылительной сушилке. Режим сушки: температура воздуха на входе 130 135oC, на выходе 60 65oC.Drying of the treated culture fluid of Enterococcus or acidophilus bacteria is carried out in a spray dryer. Drying mode: air inlet temperature 130 135 o C, outlet 60 65 o C.
Стандартный препарат энтерацид П получают путем смешивания сухих порошкообразных продуктов культур Enterococcus faecium и Lactobacillus acidophilus, полученных после распылительной сушки, с наполнителем - высушенной кукурузной мукой. Кукурузную муку сушат в сушильном шкафу при температуре 70 80oC в течение 20 30 мин до влажности 4 6%
Полученный комплексный микробный препарат энтерацид П имеет следующую характеристику: мелкий сухой порошок от кремового до светло-коричневого цвета со специфическим запахом и вкусом, нерастворимый в воде, содержащий живые клетки штаммов:
Lactobacillus aciluphilus 495 140 160 млн/г;
Enterococcus faecium ВКПМ В-2990 190 210 млн/г.The standard preparation Entericocide P is obtained by mixing dry powdered products of Enterococcus faecium and Lactobacillus acidophilus cultures obtained after spray drying with a filler, dried corn flour. Corn flour is dried in an oven at a temperature of 70 80 o C for 20 30 minutes to a moisture content of 4 to 6%
The obtained complex microbial preparation Entericid P has the following characteristic: fine dry powder from cream to light brown in color with a specific smell and taste, insoluble in water, containing living cells of the strains:
Lactobacillus aciluphilus 495 140 160 ppm;
Enterococcus faecium VKPM B-2990 190 210 ppm.
Пример 2. Культуральные жидкости ацидофильных бактерий и энтерококка кишечного происхождения, полученные по описанному в примере 1 способу, подвергают сепарированию, а выделенную биомассу сублимационной сушке. Example 2. Culture liquids of acidophilic bacteria and enterococcus of intestinal origin, obtained by the method described in example 1, are subjected to separation, and the isolated biomass is freeze-dried.
Перед сепарированием культуральную жидкость подщелачивают до pH 5,8 6,0 40% раствором едкого натра, затем охлаждают при перемешивании до температуры 18 20oC. Во время сепарирования производят постоянное захолаживание культуральной жидкости.Before separation, the culture fluid is alkalinized to pH 5.8 6.0 with 40% sodium hydroxide solution, then cooled with stirring to a temperature of 18 20 o C. During the separation produce constant cooling of the culture fluid.
По окончании сепарирования полученный осадок биомассы, представляющий собой пасту желто-коричневого цвета, смешивают с защитным раствором в соотношении 1 л раствора на 1 кг биомассы. Для получения однородной массы смесь перемешивают в течение 20 25 мин. В качестве защитного раствора используют раствор трехзамещенного 5,5-водного лимоннокислотого натрия (50 г/л) и мелассы (15 г/л). Раствор готовят на водопроводной воде, стерилизуют его в автоклаве при давлении 0,05 МПа с выдержкой в течение 1 ч и охлаждают до комнатной температуры. At the end of the separation, the resulting biomass sediment, which is a yellow-brown paste, is mixed with a protective solution in the ratio of 1 liter of solution per 1 kg of biomass. To obtain a homogeneous mass, the mixture is stirred for 20 25 minutes. As a protective solution, a solution of trisubstituted 5.5-aqueous sodium citric acid (50 g / l) and molasses (15 g / l) is used. The solution is prepared in tap water, sterilized in an autoclave at a pressure of 0.05 MPa with exposure for 1 h and cooled to room temperature.
Полученную сметанообразную суспензию направляют на сублимационную сушку. Продолжительность сушки составляет 25 30 ч; процесс оканчивают, когда остаточное давление в камере уменьшения до 0,1 мбар, а температура материала достигает (22 ± 3)oC, остаточная влажность материала не превышает при этом 5% Полученные сухие продукты измельчают до порошкообразного состояния на лабораторной мельнице, в которую каждый продукт (по отдельности) загружают порциями и размалывают в течение 15 20 мин.The resulting creamy suspension is sent to freeze-drying. The drying time is 25-30 hours; the process ends when the residual pressure in the chamber is reduced to 0.1 mbar, and the material temperature reaches (22 ± 3) o C, the residual moisture content of the material does not exceed 5%. The resulting dry products are ground to a powder state in a laboratory mill, in which each the product (separately) is loaded in portions and ground for 15 to 20 minutes.
Стандартизованные препараты получают путем смешивания сухих порошкообразных продуктов культур Enterococcus faecium и Lactobacillus acidophilus, полученных после сублимационной сушки, с наполнителем - высушенной кукурузной мукой. Содержание живых клеток в стандартизированных препаратах составляет:
Lactobacillus acidophilus 495 140 160 млн/г
Enterococcus faecium ВКПМ В-2990 190 210 млн/г.Standardized preparations are obtained by mixing dry powdered products of Enterococcus faecium and Lactobacillus acidophilus cultures obtained after freeze-drying with a filler — dried corn flour. The content of living cells in standardized preparations is:
Lactobacillus acidophilus 495 140 160 ppm
Enterococcus faecium VKPM B-2990 190 210 ppm.
Использованная литература. References.
1. Авторское свидетельство СССР N 306827, опубл. 1971. 1. USSR author's certificate N 306827, publ. 1971.
2. Платонов А. В. Производство препаратов для животноводства на основе микроорганизмов-симбионтов желудочно-кишечного тракта. М. ВНИИСЭНТИ, 1985, 43 с. 2. Platonov A. V. Production of livestock products based on symbiotic microorganisms of the gastrointestinal tract. M. VNIISENTI, 1985, 43 pp.
3. Антипов В. А. Субботин В.М. Эффективность и перспективы применения пробиотиков //Ветеринария. 1980, N 12, с. 55-57. 3. Antipov V. A. Subbotin V. M. The effectiveness and prospects of the use of probiotics // Veterinary medicine. 1980,
4. Патент США N 3876808/
5. Патент ФРГ N 2329746.4. US Patent N 3876808 /
5. Patent of Germany N 2329746.
6. Патент Великобритании N 1431809. 6. British patent N 1431809.
7. Патент РФ N2018313, кл, C 12 N 1/20, 1994. 7. RF patent N2018313, cl, C 12 N 1/20, 1994.
8. Kandler O. Weiss N. Genus Lactobacillus Bejerink 1901, 212 AL / Bergey's Manual of Sistemic Bacteriology, v. 2 / Eds. Smath P.H.A. Mair N.S. Sharpe M. E. Holf J.G. Baltimore, london, Los Angeles, Sidney: Williams and Wilkins, Ins. 1986, pp. 1209 1234. 8. Kandler O. Weiss N. Genus Lactobacillus Bejerink 1901, 212 AL / Bergey's Manual of Sistemic Bacteriology, v. 2 / eds. Smath P.H.A. Mair N.S. Sharpe M. E. Holf J.G. Baltimore, London, Los Angeles, Sidney: Williams and Wilkins, Ins. 1986, pp. 1209 1234.
Claims (1)
Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6535 140 160
Enterococcus faecium ВКПМ В-2990 190 210аA complex bacterial preparation for the treatment and prevention of gastrointestinal diseases of animals, containing lactic acid bacteria Lactobacillus acidophilus and Enterococcus faecium, characterized in that it is from the species Lactobacillus acidophilus contains a strain of Lactobacillus acidophilus VKPM B-6535, and from the species Enterocococcus faecium faecium enterium VKPM B-2990 in the following ratio of components, million living cells / g of the drug:
Lactobacillus acidophilus VKPM B-6535 140 160
Enterococcus faecium VKPM B-2990 190 210a
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95111097A RU2091075C1 (en) | 1995-06-28 | 1995-06-28 | Complex bacterial preparation for treatment and prophylaxis of gastroenteric disease in animals |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95111097A RU2091075C1 (en) | 1995-06-28 | 1995-06-28 | Complex bacterial preparation for treatment and prophylaxis of gastroenteric disease in animals |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU95111097A RU95111097A (en) | 1997-06-20 |
| RU2091075C1 true RU2091075C1 (en) | 1997-09-27 |
Family
ID=20169499
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU95111097A RU2091075C1 (en) | 1995-06-28 | 1995-06-28 | Complex bacterial preparation for treatment and prophylaxis of gastroenteric disease in animals |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2091075C1 (en) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005018654A1 (en) * | 2003-08-26 | 2005-03-03 | Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostyu Alef-Farma | Use of enrerococcus faecium strains for curing hepatic insufficiency and for regenerating and intensifying metabolism in a liver |
| US7195906B2 (en) | 1999-01-15 | 2007-03-27 | Enterprise Ireland (Trading As Bioresearch Ireland) | Bifidobacterium in the treatment of inflammatory disease |
| RU2503451C1 (en) * | 2012-11-22 | 2014-01-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Combined antibacterial preparation for treating acute intestinal infections |
| RU2504388C1 (en) * | 2012-11-22 | 2014-01-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Combined antibacterial preparation for treating acute intestinal infections |
| RU2513204C1 (en) * | 2012-11-22 | 2014-04-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Method for preparing combined antibacterial preparation for treating acute intestinal infections |
| RU2652836C1 (en) * | 2017-08-02 | 2018-05-03 | Общество с ограниченной ответственностью "БИОТРОФ" (ООО "БИОТРОФ") | Fodder additive with probiotic activity for farm animals, birds, horses and fish |
| RU2816010C1 (en) * | 2023-07-25 | 2024-03-25 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный технологический университет им. В.Г. Шухова" | Method for producing probiotic with cuticle of pupae of black soldier fly for preventing and treating avian dysbacteriosis |
-
1995
- 1995-06-28 RU RU95111097A patent/RU2091075C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Авторское свидетельство СССР N 306827, кл. A 23 C 9/123, 1971. 2. Платонов А.В. Производство препаратов для животноводства на основе микроорганизмов - симбионов желудочно-кишечного тракта. - М.: ВНИИСЭНТИ, 1985. 3. Антипов В.А., Субботин В.М. Эффективность и перспективы применения пробиотиков. - Ветеринария, 1980, N 12, с. 55 - 57. 4. Патент США N 3876807, кл. C 12 N 1/20, 1975. 5. Заявка ГДР N 2329746, кл. C 12 N 1/20, 1977. 6. Заявка Великобритании N 1431809, кл. C 6F 1976. 7. Патент РФ N 2018313, кл. C 12 N 1/20, 1994. * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7195906B2 (en) | 1999-01-15 | 2007-03-27 | Enterprise Ireland (Trading As Bioresearch Ireland) | Bifidobacterium in the treatment of inflammatory disease |
| WO2005018654A1 (en) * | 2003-08-26 | 2005-03-03 | Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostyu Alef-Farma | Use of enrerococcus faecium strains for curing hepatic insufficiency and for regenerating and intensifying metabolism in a liver |
| RU2503451C1 (en) * | 2012-11-22 | 2014-01-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Combined antibacterial preparation for treating acute intestinal infections |
| RU2504388C1 (en) * | 2012-11-22 | 2014-01-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Combined antibacterial preparation for treating acute intestinal infections |
| RU2513204C1 (en) * | 2012-11-22 | 2014-04-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Method for preparing combined antibacterial preparation for treating acute intestinal infections |
| RU2652836C1 (en) * | 2017-08-02 | 2018-05-03 | Общество с ограниченной ответственностью "БИОТРОФ" (ООО "БИОТРОФ") | Fodder additive with probiotic activity for farm animals, birds, horses and fish |
| RU2816010C1 (en) * | 2023-07-25 | 2024-03-25 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный технологический университет им. В.Г. Шухова" | Method for producing probiotic with cuticle of pupae of black soldier fly for preventing and treating avian dysbacteriosis |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU95111097A (en) | 1997-06-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5951977A (en) | Competitive exclusion culture for swine | |
| EP1840205B1 (en) | Bifidobacterium lactis 668 strain used as a component for food products, starters, medicinal and cosmetic agents | |
| CN110577907B (en) | Bifidobacterium animalis and application thereof | |
| JP3648233B2 (en) | Feed composition | |
| Polyanskaya et al. | Quasicapsulation of probiotics. | |
| CN107949633B (en) | Lactobacillus rhamnosus, animal feed and composition thereof, and production method of inactive cells | |
| RU2091075C1 (en) | Complex bacterial preparation for treatment and prophylaxis of gastroenteric disease in animals | |
| CN117305189A (en) | Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus VB183 and culture device and application thereof | |
| CN107189966A (en) | A kind of probiotics and preparation method thereof | |
| CN112226389A (en) | Planting culture method of intestinal probiotic groups of Sanhuang young chickens and application of intestinal probiotic groups | |
| KR100457002B1 (en) | Novel microorganism inhibiting the growth of harmful bacteria and microbial preparation containing same as an effective ingredient | |
| RU2471864C1 (en) | Probiotic preparation for viral and bacterial infections toxisporin, method for preparing it, bacillus licheniformis bacterial strain used as ingredient of probiotic preparation | |
| RU2475535C1 (en) | Method to produce probiotic preparation lacto-amylovorin | |
| RU2103354C1 (en) | Strain of bacterium lactobacillus acidophilus used for curative-dietetic lactic acid product preparing | |
| RU2524117C1 (en) | Bacterial strain lactobacillus acidophilus used to prepare fermented milk product | |
| RU2215027C2 (en) | Strain of bacterium lactobacillus rhamnosus 12l for preparing biologically active supplement regulating intestine microflora in children of early age | |
| RU2802073C1 (en) | Feed additive with probiotic activity for fish | |
| CN114521608B (en) | Fermentation synergistic composition of lactic acid bacteria and bacillus | |
| RU2218394C2 (en) | Strain of bacterium lactobacillus acidophilus 27l for preparing biologically active supplements regulating intestine microflora in children of early age | |
| Vuran et al. | The antimicrobial effects of probiotic and traditional yoghurts produced using commercial starter cultures on some foodborne pathogens | |
| Djide et al. | Sourcing new potential bacteriocin-producing bacteria from dangke, ethnic cheese of Enrekang, Indonesia | |
| RU2103353C1 (en) | Strain of bacterium lactobacillus acidophilus used for correction of disbacteriosis at gastroenteric diseases and in patient with large intestine cancer | |
| RU2253674C2 (en) | Treatment biological preparation against animal endometritis | |
| RU2035184C1 (en) | Method of preparing bacterial preparation for food agent production | |
| RU2153531C2 (en) | Strain of bacterium streptococcus lactis used for industrial production of probiotic for ruminant young animals |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090629 |