RU2090187C1

RU2090187C1 - Agent showing tocolytic effect at low toxicity and its compositions

Info

Publication number: RU2090187C1
Application number: RU93043783A
Authority: RU
Inventors: София Яковлевна Скачилова; Элеонора Федоровна Зуева; Юрий Валентинович Буров; Светлана Мефодиевна Дроговоз; Виталий Георгиевич Филимонов; Екатерина Михайловна Вихляева; Ирина Михайловна Рыженко; Надежда Павловна Петругова; Николай Иванович Юрченко; Ирина Владимировна Березовская; Галина Алексеевна Шевелева; Валентина Сергеевна Акиньшина; Анатолий Евгеньевич Добротворский
Original assignee: Всероссийский научный центр безопасности биологически активных веществ
Priority date: 1993-08-27
Filing date: 1993-08-27
Publication date: 1997-09-20

Abstract

FIELD: organic chemistry. SUBSTANCE: new chemical compound: 1-(4-hydroxy-3-hydroxymethylphenyl)-2- -tert. -butylamino)-ethanol hemisuccinate of the formula given in description. Compound is synthesized by the known method - by interaction of equimolar amounts of 1-(4-hydroxy-3-hydroxymethylphenyl)-2-(tert. -butyl- -amino)-ethanol and succinic acid. In animal experiments this compound shows high tocolytic activity and low toxicity. Based on this compound the following compositions were obtained: for parenteral administration - an aqueous solution containing from 0.05-1.0% to 10-30% succinic acid with respect to active component. For oral using - tablets containing 2-6 mg active component and 10-80 mg succinic acid. EFFECT: improved method of synthesis, enhanced quality and effectiveness. 3 cl, 8 tbl

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к препаратам, используемым для лечения патологий беременности, в частности невынашивания беременности. The invention relates to medicine, namely to drugs used to treat pregnancy pathologies, in particular miscarriage.

Проблема профилактики и лечения невынашивания беременности занимает одно из ведущих мест в акушерстве. Фармакологическая коррекция этой патологии проводится с использованием препаратов токолитического действия, пролонгирующих беременность, среди которых ведущее место занимают β₂-адреномиметики. В качестве токолитиков широко используются такие препараты, как партусистен, бриканил, сальбупарт, ритодрин, гинипрал и др. (Кудрина Е.А. Омельяненко А. И. Белоглазова С.Е. //Акушерство и гинекология, 1988, N 2, с. 5-9).The problem of prevention and treatment of miscarriage is one of the leading places in obstetrics. Pharmacological correction of this pathology is carried out using tocolytic drugs prolonging pregnancy, among which β ₂ -adrenomimetics take the leading place. As tocolytics, drugs such as partusisten, brikanil, salbupart, ritodrin, ginipral, etc. are widely used (Kudrina E.A. Omelyanenko A.I. Beloglazova S.E. // Obstetrics and Gynecology, 1988, N 2, p. 5-9).

Однако эти лекарственные средства наряду с высокой токолитической активностью оказывают ряд побочных эффектов на организм беременных, вызывая снижение АД, тахикардию, тремор, тошноту, рвоту. Так, применяемые для токолиза β₂-адреномиметик сальбутамол, используемый в виде сернокислой соли, при метаболическом ацидозе усугубляет эту патологию.However, these drugs, along with high tocolytic activity, have a number of side effects on the body of pregnant women, causing a decrease in blood pressure, tachycardia, tremor, nausea, and vomiting. So, the β ₂ -adrenomimetic salbutamol used for tocolysis, used in the form of a sulfate salt, with metabolic acidosis exacerbates this pathology.

Широко известный токолитик партусистен обладает высокой токсичностью (ЛД₅₀ его составляет 38,2 мг/кг) и коротким сроком действия.The widely known tocolytic partusisten has high toxicity (LD ₅₀ it is 38.2 mg / kg) and a short duration.

Целью изобретения является создание малотоксичных токолитических средств. The aim of the invention is the creation of low toxic tocolytic agents.

Поставленная цель достигается 1-(4-гидрокси-3-гидроксиметил)-2-(трет-бутиламино)этанола гемисукцинатом (I) формулы:

проявляющим токолитическую активность, и составами, содержащими I и янтарную кислоту.The goal is achieved 1- (4-hydroxy-3-hydroxymethyl) -2- (tert-butylamino) ethanol with hemisuccinate (I) of the formula:

exhibiting tocolytic activity, and compositions containing I and succinic acid.

Соединение I получают известным способом взаимодействием эквимолярных количеств 1-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-(трет- бутиламино)этанола и янтарный кислоты. Compound I is prepared in a manner known per se by reacting equimolar amounts of 1- (4-hydroxy-3-hydroxymethylphenyl) -2- (tert-butylamino) ethanol and succinic acid.

Несмотря на разнообразие путей введения β-адреномиметиков (внутривенный, внутримышечный, оральный, ингаляционный), при выраженных явлениях угрозы прерывания беременности предпочтительным является внутривенное капельное введение (Кудрина Е. А. Омельяненко А.И. Белоглазова С.Е. //Акушерство и гинекология, 1988, N 2, с. 5-9). При данном способе введения лекарственное вещество быстро попадает в кровоток матери, а скорость и доза введения легко регулируются, что обеспечивает лучший терапевтический эффект. Для поддерживающей и профилактической терапии угрозы преждевременных родов эффективны оральные лекарственные формы препарата. Despite the variety of routes of administration of β-adrenergic agonists (intravenous, intramuscular, oral, inhalation), with pronounced threats of abortion, intravenous drip is preferable (Kudrina E.A. Omelyanenko A.I. Beloglazova S.E. // Obstetrics and gynecology 1988, No. 2, pp. 5-9). With this method of administration, the drug substance quickly enters the bloodstream of the mother, and the speed and dose of administration are easily regulated, which provides the best therapeutic effect. Oral dosage forms of the drug are effective for maintenance and prophylactic therapy of the threat of preterm birth.

Нами приготовлены и экспериментально исследованы следующие составы:
1. Водные растворы, получившие название "венттокол", содержащие от 0,05 до 1,0% и от 10 до 30% по отношению к нему янтарной кислоты. Концентрация основного компонента в интервале 0,05 1,0% является биологически оптимальной, более высокие концентрации нецелесообразны, поскольку для внутривенного введения препарата требуется значительное разбавление его.We have prepared and experimentally studied the following compounds:
1. Aqueous solutions, called "ventokol", containing from 0.05 to 1.0% and from 10 to 30% in relation to it succinic acid. The concentration of the main component in the range of 0.05 to 1.0% is biologically optimal, higher concentrations are impractical, since intravenous administration of the drug requires a significant dilution of it.

Количество янтарной кислоты в выбранном экспериментально интервале обеспечивает, с одной стороны, пролонгированный эффект действия препарата, и с другой, стабильность растворов при хранении;
2. Токолитический состав для перорального применения таблетки, получившие название "савентол", содержащие 2-6 мг I и 10-80 мг янтарной кислоты. Содержание 2-6 мг основного компонента обеспечивает эффективность действия. Количество янтарной кислоты выбрано экспериментально с учетом достижения ее положительного эффекта в качестве средства, влияющего на энергетический обмен.The amount of succinic acid in the experimentally selected interval provides, on the one hand, the prolonged effect of the drug, and on the other, the stability of solutions during storage;
2. Tocolytic composition for oral administration of tablets, called "saventol", containing 2-6 mg I and 10-80 mg succinic acid. The content of 2-6 mg of the main component ensures the effectiveness of the action. The amount of succinic acid is chosen experimentally, taking into account the achievement of its positive effect as a means of affecting energy metabolism.

Пример. Способ получения соединения I. Растворяют 4,92 г (4,91 г 100% 0,04158 моль) янтарной кислоты и 20 г (19,90 г 100% 0,08316 моль) 1-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-(трет-бутиламино)этанола в воде, раствор фильтруют от механических примесей, охлаждают до 8-10^oC. Выпавший осадок I отфильтровывают, сушат. Выход I 60-65% от теоретического, т.пл. - 176,5-177,5^oC.Example. The method of obtaining compound I. 4.92 g (4.91 g 100% 0.04158 mol) of succinic acid and 20 g (19.90 g of 100% 0.08316 mol) 1- (4-hydroxy-3-hydroxymethylphenyl) are dissolved -2- (tert-butylamino) ethanol in water, the solution is filtered from mechanical impurities, cooled to 8-10 ^o C. The precipitated precipitate I is filtered off, dried. Yield 60-65% of theoretical, mp. - 176.5-177.5 ^o C.

Найдено, C 60,75; H 8,00; N 4,60. C₃₀H₄₈N₂O₁₀.Found, C, 60.75; H 8.00; N, 4.60. C ₃₀ H ₄₈ N ₂ O ₁₀ .

Вычислено, C 60,39; H 8,11; N 4,89. Calculated, C 60.39; H 8.11; N, 4.89.

ИК-спектр, см^-1: ν = NH $\binom{+}{2}$ 1560; ν = >N⁺< 2480, 2670.IR spectrum, cm ^-1 : ν = NH $\binom{+}{2}$ 1560; ν => N ⁺ <2480, 2670.

В области валентных колебаний NH-групп отсутствуют характерные для вторичной аминогруппы полосы поглощения. In the region of stretching vibrations of NH groups, there are no absorption bands characteristic of the secondary amino group.

УФ-спектр: максимум поглощения при (276±2) нм (в области от 230 нм до 350 нм). UV spectrum: absorption maximum at (276 ± 2) nm (in the range from 230 nm to 350 nm).

ЯМР¹H спектр: сложный мультиплет группы N-CH₂ в области δ 2,5-2,9 м.д. синглет метиленовых протонов янтарной кислоты при d 2,27 м.д. синглет протонов трет-бутильной группы при d 1,13 и др. ¹ H NMR spectrum: complex multiplet of the N-CH ₂ group in the region of δ 2.5-2.9 ppm. singlet of methylene protons of succinic acid at d 2.27 ppm a singlet of protons of the tert-butyl group at d 1.13, etc.

Пример 1. Состав раствора:
I 0,5 г (0,05%)
Кислота янтарная 0,1 г (0,01%)
Вода для инъекций до 1 л
В мерную колбу вместимостью 1 л вносят 800 мл воды для инъекций, 0,1 г кислоты янтарной. Содержимое колбы перемешивают до полного растворения кислоты, затем вносят 0,5 г I, перемешивают до полного растворения, доводят объем полученного раствора водой до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через мембранные пластины типа "Миллипор", разливают по 5 мл в ампулы и запаивают. Стерилизацию проводят при 120^oC в течение 8 минут.Example 1. The composition of the solution:
I 0.5 g (0.05%)
Succinic acid 0.1 g (0.01%)
Water for injection up to 1 liter
In a volumetric flask with a capacity of 1 liter, 800 ml of water for injection, 0.1 g of succinic acid are added. The contents of the flask are stirred until the acid is completely dissolved, then 0.5 g of I is added, mixed until completely dissolved, the volume of the resulting solution is adjusted to the mark with water and mixed. The resulting solution is filtered through membrane plates of the Millipor type, poured into 5 ml ampoules and sealed. Sterilization is carried out at 120 ^o C for 8 minutes.

Пример 2. Состав раствора:
I 1,0 г(0,10%)
Кислота янтарная 0,2 г (0,02%)
Вода для инъекций до 1 л
Раствор готовят, как в примере 1.Example 2. The composition of the solution:
I 1.0 g (0.10%)
Succinic acid 0.2 g (0.02%)
Water for injection up to 1 liter
The solution is prepared as in example 1.

Пример 3. Состав раствора:
I 1,0 г (0,10%)
Кислота янтарная 0,1 г (0,01%)
Вода для инъекций до 1 л.Example 3. The composition of the solution:
I 1.0 g (0.10%)
Succinic acid 0.1 g (0.01%)
Water for injection up to 1 liter.

Раствор готовят, как в примере 1. The solution is prepared as in example 1.

Пример 4. Состав раствора:
I 1,0 г (0,10%)
Кислота янтарная 0,3 г (0,0003%)
Вода для инъекций до 1 л
Раствор готовят, как в примере 1.Example 4. The composition of the solution:
I 1.0 g (0.10%)
Succinic acid 0.3 g (0.0003%)
Water for injection up to 1 liter
The solution is prepared as in example 1.

Пример 5. Состав раствора:
I 1-,0 г (1,0%)
Кислота янтарная 2,0 г (0,2%)
Вода для инъекций до 1 л
Раствор готовят, как в примере 1.Example 5. The composition of the solution:
I 1-, 0 g (1.0%)
Succinic acid 2.0 g (0.2%)
Water for injection up to 1 liter
The solution is prepared as in example 1.

Пример 6. Состав на одну таблетку:
I 2 мг
Кислота янтарная 10 мг
Наполнитель до 100 мг
Просеянные и взвешенные I и янтарную кислоту смешивают с наполнителем (аэросил, крахмал, кальция стеарат), равномерно увлажняют крахмальным клейстером, пропускают через сито с размером отверстий 2 мм или 1,25 мм, влажный гранулят высушивают при 85^oC, просеивают и прессуют при помощи таблеточной машины. Получаемые таблетки имеют плоскоцилиндрическую форму.Example 6. Composition per tablet:
I 2 mg
Succinic acid 10 mg
Excipient up to 100 mg
Sifted and suspended I and succinic acid are mixed with a filler (aerosil, starch, calcium stearate), uniformly moistened with starch paste, passed through a sieve with a hole size of 2 mm or 1.25 mm, the wet granulate is dried at 85 ^o C, sieved and pressed at help tablet machine. The resulting tablets have a cylindrical shape.

Пример 7. Состав на одну таблетку:
I 4 мг
Кислота янтарная 40 мг
Наполнитель до 100 мг
Таблетки готовят, как в примере 6.Example 7. Composition per tablet:
I 4 mg
Succinic Acid 40 mg
Excipient up to 100 mg
Tablets are prepared as in example 6.

Пример 8. Состав на одну таблетку:
I 4 мг
Кислота янтарная 60 мг
Наполнитель до 100 мг
Таблетки готовят, как в примере 6.Example 8. Composition per tablet:
I 4 mg
Succinic acid 60 mg
Excipient up to 100 mg
Tablets are prepared as in example 6.

Пример 9. Состав на одну таблетку:
I 6 мг
Кислота янтарная 80 мг
Наполнитель до 100 мг
Таблетки готовят, как в примере 6.Example 9. Composition per tablet:
I 6 mg
Succinic acid 80 mg
Excipient up to 100 mg
Tablets are prepared as in example 6.

Изучение токсичности и токолитической активности I, составов, содержащих I (венттокол, савентол), а также раствора I, меченного ³H-тимидином, проводили в сравнении с сальбутамолом гемисульфатом и препаратом "партусистен". В качестве агониста сократительной деятельности матки (при изучении токолитической активности) использовали окситоцин в ампулах по 5 ед. в 1 мл.The toxicity and tocolytic activity of I, formulations containing I (ventocol, saventol), as well as solution I labeled with ³ H-thymidine were studied in comparison with salbutamol hemisulfate and partusisten. As an agonist of contractile activity of the uterus (in the study of tocolytic activity), oxytocin in ampoules of 5 units was used. in 1 ml.

Исследование сравнительной токсичности I, венттокола, савентола, гемисульфата сальбутамола и партусистена проводили на нелинейных белых мышах-самцах массой 18-20 г в условиях острого опыта. Препараты вводили внутривенно (венттокол, партусистен) или внутрибрюшинно (I, савентол, гемисульфат сальбутамола), что связано со способом применения препаратов (внутривенно или перорально). A study of the comparative toxicity of I, ventocol, saventol, salbutamol hemisulfate and partusisten was carried out on non-linear white male mice weighing 18-20 g in an acute experiment. The drugs were administered intravenously (ventocol, partusisten) or intraperitoneally (I, saventol, salbutamol hemisulfate), which is associated with the method of drug administration (intravenously or orally).

Наблюдения за экспериментальными животными после введения препаратов вели в течение 3 суток. ЛД₅₀ рассчитывали по методу Личфилда и Уилкоксона.Observations of experimental animals after drug administration were carried out for 3 days. LD _{50 was} calculated by the method of Litchfield and Wilcoxon.

Экспериментальные исследования токолитической активности проводили на беременных животных: самках белых крыс линии Вистар (20-21-й день) массой 300-350 г. Experimental studies of tocolytic activity were carried out on pregnant animals: female Wistar white rats (day 20-21) weighing 300-350 g.

При выполнении работы использовали фармакологические, физиологические, статистические методы исследования, метод радиоактивных изотопов. When performing the work, pharmacological, physiological, statistical research methods, the method of radioactive isotopes were used.

Токолитическую активность I, савентола, сальбутамола гемисульфата, венттокола и партусистена изучали на изолированном роге матки беременных крыс в опытах in vitro [Эксперименты на изолированных препаратах гладких мышц. Пер. с англ. М. Мир, 1983, с. 203; Николаев М.П. Экспериментальные основы фармакологии и токсикологии. Практическое руководство. М.-Л. Медгиз, 1941, с. 194] и на крысах в условиях целого организма [Николаев М.П. Экспериментальные основы фармакологии и токсикологии. Практическое руководство. М.-Л. Медгиз, 1941, с. 194]
В опытах in vitro исследовали токолитическую активность I венттокола и партусистена при действии их на спонтанные сокращения матки крыс при однократном внутривенном введении, соответственно, в дозах 100, 50 мкг/кг, 25 мкг/кг и 10; 5; 2,5 мкг/кг. Помимо этого их расслабляющее действие на миометрий изучали на фоне стимуляции матки окситоцином. Окситоцин вводили внутривенно в двойной пороговой дозе, которая в нашем эксперименте для крыс составила 0,5 ед./кг.The tocolytic activity of I, saventol, salbutamol hemisulfate, ventocol and partusisten was studied on an isolated uterine horn of pregnant rats in in vitro experiments [Experiments on isolated preparations of smooth muscles. Per. from English M. Mir, 1983, p. 203; Nikolaev M.P. The experimental basis of pharmacology and toxicology. A practical guide. M.-L. Medgiz, 1941, p. 194] and on rats in the conditions of the whole organism [Nikolaev M.P. The experimental basis of pharmacology and toxicology. A practical guide. M.-L. Medgiz, 1941, p. 194]
In in vitro experiments, the tocolytic activity of ventolokol I and partusisten was studied when they act on spontaneous contractions of the uterus of rats with a single intravenous administration, respectively, at doses of 100, 50 μg / kg, 25 μg / kg and 10; 5; 2.5 mcg / kg. In addition, their relaxing effect on the myometrium was studied against the background of uterine stimulation with oxytocin. Oxytocin was administered intravenously at a double threshold dose, which in our experiment for rats was 0.5 units / kg.

При обработке результатов исследования учитывали показатели частоты, амплитуды, тонуса матки, а также время наступления токолитического эффекта и его продолжительность. When processing the results of the study, indicators of the frequency, amplitude, and tone of the uterus, as well as the time of onset of the tocolytic effect and its duration, were taken into account.

Для сопоставления результатов исследования вычисляли EC₅₀, ЕД₅₀ и их доверительные границы графическим методом по Я.И.Хаджаю (Фармакол. и токсикол. 1965, N 1, с. 118-122).To compare the results of the study, the EC ₅₀ , ED ₅₀ and their confidence limits were calculated by the graphical method according to Ya.I. Khadzhay (Farmakol. And Toxicol. 1965, No. 1, pp. 118-122).

Для установления достоверности полученных результатов проводили статистическую обработку экспериментальных данных [Беленький М.М. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л. Мед. лит-ра, 1963, с. 81-106; Березовский В.А. Метод ускоренной статистической обработки в медицинских исследованиях. М. Наука, 1975, с. 41-46]
Исследование фармакокинетики I изучали методом радиоактивных изотопов. Препарат метили ³H-тимидином, удельная радиоактивность составляла 5,7 микрокюри/мг препарата. Водный раствор I вводили внутривенно беременным самкам в двух дозах 0,3 и 2 мг на 100 г массы тела. Использовали образцы печени, селезенки, почек, сердца, легких, кровь и мочу самок, кроме того, анализировали плаценту, амниотическую жидкость, околоплодные оболочки и гомогенаты.To establish the reliability of the results obtained, statistical processing of experimental data was carried out [Belenky M.M. Elements of a quantitative assessment of the pharmacological effect. L. Honey. literature, 1963, p. 81-106; Berezovsky V.A. The method of accelerated statistical processing in medical research. M. Nauka, 1975, p. 41-46]
The study of pharmacokinetics I was studied by the method of radioactive isotopes. The preparation was labeled with ³ H-thymidine; the specific radioactivity was 5.7 microcurie / mg of the preparation. Aqueous solution I was administered intravenously to pregnant females in two doses of 0.3 and 2 mg per 100 g of body weight. Samples of the liver, spleen, kidneys, heart, lungs, blood and urine of females were used; in addition, placenta, amniotic fluid, amniotic membranes, and homogenates were analyzed.

В аликвоте (100-200 мг) анализируемых органов и тканей определяли радиоактивность I по методу [Озрина Р.Д. Ульянов А.М. Сарвачев К.Ф. //Биологич. науки, 1979, N 4, с. 100-102] для этого подготовленные образцы просчитывали в сцинтилляционном счетчике "Векман". Основные фармакологические параметры рассчитывали согласно [Kochar G. M. Paknit A. //Drug Metab. and Disposit Biol. Fate. Chem. 1987, 5, N 4, р. 456-459] и методическим рекомендациям по изучению фармакокинетики лекарственных средств [Методические рекомендации по доклиническому изучению фармакокинетики лекарственных средств. М. ФК СССР, 1990]
Результаты исследований
Сравнительное изучение острой токсичности венттокола и токолитика партусистен свидетельствует, что венттокол в 8 раз менее токсичен, чем партусистен: ЛД₅₀ для венттокола составляет 270 мг/кг, ЛД₅₀ партусистена -38,2 мг/кг; I, савентол и гемисульфат сальбутамола обладают сравнимой токсичностью: при внутрибрюшинном введении ЛД₅₀ 1-273 мг/кг, савентола 200 мг/кг, гемисульфата сальбутамола 300 мг/кг.In an aliquot (100-200 mg) of the analyzed organs and tissues, the radioactivity of I was determined by the method [Ozrina R.D. Ulyanov A.M. Sarvachev K.F. // Biologich. Science, 1979, N 4, p. 100-102] for this, the prepared samples were counted in a Vekman scintillation counter. The main pharmacological parameters were calculated according to [Kochar GM Paknit A. // Drug Metab. and Disposit Biol. Fate. Chem. 1987, 5, N 4, p. 456-459] and guidelines for the study of pharmacokinetics of drugs [Guidelines for preclinical studies of the pharmacokinetics of drugs. M. FC USSR, 1990]
Research results
A comparative study of the acute toxicity of ventokol and tocolytic partusisten indicates that ventokol is 8 times less toxic than partusisten: LD ₅₀ for ventokol is 270 mg / kg, LD _{50 of} partusisten is 38.2 mg / kg; I, salbutamol hemisulfate saventol and have comparable toxicity: the _LD50 administered intraperitoneally 1-273 mg / kg, saventola 200 mg / kg, salbutamol hemisulphate 300 mg / kg.

Изучение общетоксического действия I и его составов свидетельствует, что они не вызывают изменений в поведении и интегральных показателях животных (выделительная система, функция печени, формула крови, сердечно-сосудистая система и др.). A study of the general toxic effects of I and its compositions indicates that they do not cause changes in the behavior and integral indicators of animals (excretory system, liver function, blood formula, cardiovascular system, etc.).

Лекарственные составы, содержащие I и янтарную кислоту, обладают малой токсичностью. Входящая в составы янтарная кислота является естественным метаболитом организма, оказывает положительное влияние на энергетический обмен и функции ряда органов при различных заболеваниях, сопровождающихся метаболическими ацидозом, гипоксией различного генеза, интоксикацией [Терапевтическое действие янтарной кислоты /Под ред. проф. М.Н. Кондрашовой. Пущино, 1976]
Токсическая активность I выше, чем у гемисульфата сальбутамола (табл. 1). Так, уменьшение амплитуды сокращений матки при дозе 5•10^-7 г/мл составляет 93,5% у I и 12,1% у гемисульфата. Равный по степени выраженности токолитический эффект в начале эксперимента заметно уменьшается в концу наблюдения в случае введения гемисульфата, что свидетельствует о более продолжительном токолитическом действии I. Показано, что I проявляет специфическую активность, близкую к партусистену (табл. 2), при этом оказывается в 7,1 раза менее токсичным.Medicinal formulations containing I and succinic acid have low toxicity. The succinic acid in the composition is a natural metabolite of the body, has a positive effect on the energy metabolism and functions of a number of organs in various diseases accompanied by metabolic acidosis, hypoxia of various origins, intoxication [The therapeutic effect of succinic acid / Ed. prof. M.N. Kondrashova. Pushchino, 1976]
The toxic activity of I is higher than that of salbutamol hemisulfate (Table 1). Thus, a decrease in the amplitude of uterine contractions at a dose of 5 • 10 ^-7 g / ml is 93.5% in I and 12.1% in hemisulfate. The tocolytic effect of equal severity at the beginning of the experiment noticeably decreases at the end of the observation in the case of administration of hemisulfate, which indicates a longer tocolytic effect of I. It was shown that I exhibits specific activity close to partusisten (Table 2), while it turns out to be 7 1 time less toxic.

Токолитическая активность I подтверждена также в опытах на беременных крысах в условиях целого организма. Наибольший по продолжительности и силе действия токолитический эффект наблюдается при внутривенном введении I в дозе 100 мкг/кг, который характеризовался значительным как уменьшением величины амплитуды сокращений матки, так и снижением ее тонического напряжения (табл. 3). (В таблицах приведены данные по первым 10-12 минутам и последним 15 минутам эксперимента.)
Токолитическая активность лекарственной формы I в виде 0,1%-ного водного раствора, стабилизированного 20% янтарной кислоты (венттокол), изучена в опытах in vitro (табл. 4) и in situ (табл. 5). Показано, что при исследовании на изолированном роге матки крыс раствор по активности превосходил субстанцию в 2,5 раз, при этом уступал партусистену лишь в 3,2 раза. В то же время по ТИ венттокол (ТИ-496202) превосходил партусистен в 2,3 раза, что свидетельствует о большой широте его терапевтического действия и безопасности применения. И в условиях целого организма венттокол оказывает выраженное токолитическое действие (табл. 5).The tocolytic activity of I was also confirmed in experiments on pregnant rats in a whole organism. The tocolytic effect is greatest in duration and force of action when I is administered intravenously at a dose of 100 μg / kg, which was characterized by a significant decrease in the amplitude of uterine contractions and a decrease in its tonic stress (Table 3). (The tables show data for the first 10-12 minutes and the last 15 minutes of the experiment.)
The tocolytic activity of the dosage form I in the form of a 0.1% aqueous solution stabilized with 20% succinic acid (ventocol) was studied in vitro (Table 4) and in situ (Table 5). It was shown that, when tested on an isolated uterine horn of rats, the solution was 2.5 times superior in activity to the substance, while it was only 3.2 times lower than partusisten. At the same time, the ventokol (TI-496202) exceeded partusisten by 2.3 times in terms of TI, which indicates the great breadth of its therapeutic effect and safety of use. And under the conditions of the whole organism, the ventocol has a pronounced tocolytic effect (Table 5).

Тот факт, что венттокол проявляет большую токолитическую активность, по-видимому, можно объяснить наличием в составе водного раствора янтарной кислоты, которая способствует усилению токолитического эффекта (ср. табл. 3 и 5). The fact that the ventokol exhibits a large tocolytic activity, apparently, can be explained by the presence of succinic acid in the aqueous solution, which helps to enhance the tocolytic effect (cf. Tables 3 and 5).

Токолитический эффект венттокола подтвержден в опытах с индуцированием матки крыс окситоцином (табл. 6). The tocolytic effect of the ventocol was confirmed in experiments with the induction of rat uterus with oxytocin (Table 6).

Данные фармакологического исследования I, меченного ³H-тимидином, показали, что он обладает большой скоростью всасывания и наибольшая его концентрация отмечается в печени, почках, меньше в легких и сердце. Положительным является тот факт, что в дозе 0,3 мг /100 г массы тела (100 ЕД₅₀) I не обнаруживается в матке, плаценте, околоплодных оболочках, амниотической жидкости, печени и гомогенате плодов. Даже при увеличении дозы до 2 мг/ 100 г (660 ЕД₅₀) только в течение первого часа после введения в этих тканях фиксировались минимальные количества препарата, а через 3 часа препарат и вовсе не определялся.The data from a pharmacological study of I, labeled with ³ H-thymidine, showed that it has a high absorption rate and its highest concentration is observed in the liver, kidneys, less in the lungs and heart. The positive fact is that at a dose of 0.3 mg / 100 g body weight (100 IU ₅₀ ) I is not found in the uterus, placenta, amniotic membranes, amniotic fluid, liver and fetal homogenate. Even with an increase in dose to 2 mg / 100 g (660 IU ₅₀ ), only during the first hour after administration, the minimal amounts of the drug were recorded in these tissues, and after 3 hours the drug was not determined at all.

Токолитическая активность савентола (состава I с янтарной кислотой для перорального применения в виде таблеток) изучена в эксперименте на беременных крысах. The tocolytic activity of saventol (composition I with succinic acid for oral administration in the form of tablets) was studied in an experiment on pregnant rats.

Эксперименты проведены на 24 крысах 21-го дня беременности в условиях острого опыта под общим комбинированным наркозом калипсолом в дозе 30 мг/кг внутримышечно и реланиумом в дозе 2 мг/кг внутримышечно. The experiments were carried out on 24 rats on the 21st day of pregnancy under the conditions of an acute experiment under general combined anesthesia with calypsol at a dose of 30 mg / kg intramuscularly and relanium at a dose of 2 mg / kg intramuscularly.

Оценку моторной активности матки проводили с помощью регистрации внутриматочного давления (баллонный способ) [Филимонов В. Г. Акиньшина В.А. //Акуш. и гинекология, 1980, N 212, с. 24-26] Для этого после наркотизации животных фиксировали на термостатированном столике. Послойно вскрывали брюшную полость и извлекали рога матки. В один из вскрытых рогов матки вводили баллончик для регистрации внутриматочного давления. Наряду с этим производили катетеризацию венозного синуса для поддержания наркоза в течение эксперимента и введения стимулирующих матку препаратов. Через 15-20 минут после окончания операции на полиграфе РМ-150 (Япония) осуществляли непрерывную регистрацию изменений внутриматочного давления. Порядок проведения острого эксперимента позволял длительно поддерживать у животных достаточно стабильное состояние основных констант материнского организма и плодов. Evaluation of the motor activity of the uterus was carried out using registration of intrauterine pressure (balloon method) [Filimonov V. G. Akinshina V. A. // Akush. and gynecology, 1980, N 212, S. 24-26] For this, after anesthesia, the animals were fixed on a thermostated table. The abdominal cavity was opened in layers and uterine horns were removed. A balloon was inserted into one of the opened uterine horns to record intrauterine pressure. Along with this, a venous sinus was catheterized to maintain anesthesia during the experiment and the introduction of uterine stimulating drugs. 15-20 minutes after the end of the operation on the PM-150 polygraph (Japan), continuous changes in intrauterine pressure were recorded. The procedure for conducting an acute experiment made it possible to maintain for a long time in animals a fairly stable state of the basic constants of the mother's body and fetuses.

Животные были разделены на 4 группы. Крысам первой и второй групп во время 20-минутной экспозиции для стабилизации функциональных показателей и после регистрации фоновых значений внутриматочного давления внутрижелудочно с помощью зонда вводили состав савентол, содержащий 4 мг I и 40 мг янтарной кислоты, в дозах 10 мг/кг (в 100 раз выше терапевтической) и 0,3 мг/кг (суточная терапевтическая доза) и продолжали регистрацию изменений внутриматочного давления в течение 60 минут. По истечении указанного времени моделировали повышенную сократительную деятельность матки путем внедрения через катетер в вену окситоцина в двойной средней надпороговой дозе 0,5 МЕ. Животным третьей группы интенсификацию сократительной деятельности матки производили путем внутривенного введения окситоцина и затем на фоне индуцированной маточной активности внутрижелудочно вводили савентол в дозе 0,3 мг/кг. Animals were divided into 4 groups. Rats of the first and second groups during a 20-minute exposure to stabilize functional parameters and after registering the background values of intrauterine pressure intragastrically using a probe were injected with a composition of saventol containing 4 mg I and 40 mg of succinic acid, in doses of 10 mg / kg (100 times above therapeutic) and 0.3 mg / kg (daily therapeutic dose) and continued to record changes in intrauterine pressure for 60 minutes. After this time, the increased contractile activity of the uterus was simulated by introducing oxytocin through a catheter into a vein in a double average suprathreshold dose of 0.5 IU. In animals of the third group, uterine contractile activity was intensified by intravenous administration of oxytocin, and then, against the background of induced uterine activity, saventol was administered intragastrically at a dose of 0.3 mg / kg.

Четвертая группа крыс служила контролем. Животным этой группы после регистрации фоновой активности матки внутрижелудочно вводили дистиллированную воду в эквиобъемном количестве, и в течение часа проводили наблюдение за спонтанной динамикой изменений сократительной деятельности матки. The fourth group of rats served as control. After registering the background activity of the uterus, animals of this group were intragastrically injected with distilled water in an equivalent volume, and spontaneous dynamics of changes in uterine contractile activity was monitored for an hour.

Для получения полной характеристики динамики сократительной функции матки применяли интегральный и дифференциальный анализ кривых. При этом интенсивность ритмического и тонического компонентов сократительной активности матки определяли раздельно. Определяли амплитуду, чистоту, длительность и интенсивность сокращений матки (последнее по площади сокращений). База подсчета и интегрирования 3 минуты. Интервал 10 минут. To obtain a complete description of the dynamics of the contractile function of the uterus, integral and differential analysis of the curves was used. The intensity of the rhythmic and tonic components of the contractile activity of the uterus was determined separately. The amplitude, purity, duration, and intensity of uterine contractions were determined (the latter by area of contractions). Base counting and integration 3 minutes. The interval is 10 minutes.

Для удобства сравнения все абсолютные цифры переведены в проценты, принимая фоновые значения показателей сократительной деятельности матки за 100% Статистический анализ результатов исследований проводили с применением общепринятых методов [Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л. 1963]
Результаты исследований влияния изученного состава на сократительную функцию матки крыс при введении в желудочек представлены в табл. 7 и 8.For ease of comparison, all absolute figures are converted to percentages, taking the background values of the uterine contractile activity indicators as 100%. Statistical analysis of the research results was carried out using generally accepted methods [Belenky M.L. Elements of a quantitative assessment of the pharmacological effect. L. 1963]
The results of studies of the effect of the studied composition on the contractile function of the uterus of rats when introduced into the ventricle are presented in table. 7 and 8.

Как следует из табл. 7, введение состава в желудочек крысам в дозе 10 мг/кг приводило к следующим изменениям спонтанной активности матки. Уже к 10-й минуте после введения препарата интенсивность ритмических сокращений матки уменьшалась по сравнению с исходным фоном на 47,4% /в контроле на 8,1% p<0,05/ и далее до конца наблюдения оставалась пониженной на 40-50% от исходного фона. Амплитуда сокращений падала на 10-й минуте на 36% /в контроле на 0,8% p<0,05/ и оставалась уменьшенной до конца исследований. Частоте сокращений в 1 минуту снижалась, а их длительность увеличивалась. Тонус матки в ходе эксперимента как в опытной, так и в контрольной группах снижался, что характерно для баллонного способа регистрации внутриматочного давления [Филимонов В. Г. Раевский В.В. Финикова Л.С. //Акуш. и гинекология, 1972, N 1, с. 27-39] Однако при введении савентола в дозе 10 мг/кг в желудок снижение тонической активности было примерно в 1,5 раза больше, чем в контроле. As follows from the table. 7, the introduction of the composition into the ventricle of rats at a dose of 10 mg / kg led to the following changes in the spontaneous activity of the uterus. By the 10th minute after the administration of the drug, the intensity of rhythmic contractions of the uterus decreased by 47.4% compared to the initial background / in the control by 8.1% p <0.05 / and remained 40-50% lower until the end of the observation from the original background. The amplitude of contractions fell at the 10th minute by 36% / in the control at 0.8% p <0.05 / and remained reduced until the end of the study. The frequency of contractions in 1 minute decreased, and their duration increased. The uterine tone during the experiment both in the experimental and in the control groups decreased, which is typical for the balloon method of registering intrauterine pressure [Filimonov V. G. Raevsky V.V. Finikova L.S. // Akush. and gynecology, 1972, N 1, p. 27-39] However, with the introduction of saventol at a dose of 10 mg / kg into the stomach, the decrease in tonic activity was approximately 1.5 times greater than in the control.

При применении меньшей дозы состава -0,3 мг/кг, был также выявлен токолитический эффект /табл. 7/. Наиболее отчетливо утеродепримирующие свойства препарата проявлялись на 30-й 40-й минуте после введения, что, по-видимому, связано с меньшей дозой вещества и более медленным переходом его в кровяное русло. When applying a lower dose of -0.3 mg / kg, a tocolytic effect was also revealed / tab. 7 /. The most clearly utero-determinating properties of the drug appeared at the 30th 40th minute after the administration, which, apparently, is associated with a lower dose of the substance and its slower transition to the bloodstream.

Савентол в дозе 0,3 мг/кг оказывал менее выраженное релаксирующее действие на спонтанную активность матки, чем при дозе 10 мг/кг. Интенсивность ритмических сокращений снижалось на 39% /в контроле -на 3,3% p<0,05/. Снижение частоты сокращений и их амплитуды было менее выражено. Длительность сокращений увеличивалась незначительно. Динамика тонического компонента сократительной деятельности матки по своим параметрам не отличалась от контрольных животных. Saventol at a dose of 0.3 mg / kg had a less pronounced relaxing effect on the spontaneous activity of the uterus than at a dose of 10 mg / kg. The intensity of rhythmic contractions decreased by 39% / in the control - by 3.3% p <0.05 /. The reduction in the frequency of contractions and their amplitude was less pronounced. The duration of contractions increased slightly. The dynamics of the tonic component of the uterine contractile activity did not differ from the control animals in its parameters.

Моделирование изменений сократительной деятельности матки путем введения окситоцина на фоне действия савентола как в дозе 10 мг/кг, так и в дозе 0,3 мг/кг не приводило к существенному повышению маточной активности. Интенсивность, частота, длительность и амплитуда сокращений либо находились на уровне фона, либо не достигали исходного уровня, что свидетельствуют о стабильном релаксирующем действии савентола на миометрий животных. Modeling changes in uterine contractility by administering oxytocin against the background of the action of saventol both at a dose of 10 mg / kg and at a dose of 0.3 mg / kg did not lead to a significant increase in uterine activity. The intensity, frequency, duration and amplitude of contractions were either at the background level or did not reach the initial level, which indicates the stable relaxing effect of saventol on the myometrium of animals.

При предварительной стимуляции матки окситоцином и последующем введении в желудок савентола в дозе 0,3 мг/кг наблюдалось достоверное снижение ритмических сокращений матки через 40 минут по сравнению с контролем /табл. 8/. Изменялся характер сокращений: они становились более равномерными и регулярными. При этом амплитуда маточных сокращений снижалась незначительно, частота сокращений оставалась на повышенном уровне, а длительность сокращений снижалась к 40-й минуте. Изучение тонической активности миометрия выявила значительное ее снижение к 60-й минуте наблюдения в 2,4 раза по сравнению с контрольными животными и на 78% по сравнению с исходным фоном /в контроле на 44% по сравнению с исходным фоном/. По сравнению с группой животных без предварительной стимуляции окситоцином (табл. 7) тоническая активность у животных указанной группы снижалась более чем в 2 раза. With preliminary stimulation of the uterus with oxytocin and subsequent administration of saventol at a dose of 0.3 mg / kg into the stomach, a significant decrease in rhythmic contractions of the uterus after 40 minutes was observed compared with the control / table. 8/. The nature of the reductions was changing: they became more even and regular. At the same time, the amplitude of uterine contractions decreased slightly, the frequency of contractions remained at an increased level, and the duration of contractions decreased by the 40th minute. A study of the tonic activity of the myometrium revealed a significant decrease by the 60th minute of observation by 2.4 times compared with the control animals and 78% compared with the initial background / in the control by 44% compared with the initial background /. Compared with a group of animals without prior stimulation with oxytocin (Table 7), the tonic activity in animals of this group decreased by more than 2 times.

Таким образом, проведенные исследования показали, что савентол в дозах 10 мг/кг и 0,3 мг/кг при внутрижелудочном введении крысам на 21-й день беременности обладает способностью оказывать токолитический эффект. Выявлено снижение активности как ритмического, так и тонического компонентов сократительной деятельности матки, отмечаемое на протяжении исследования /1 час/. Thus, studies have shown that saventol in doses of 10 mg / kg and 0.3 mg / kg when administered intragastrically to rats on the 21st day of pregnancy has the ability to have a tocolytic effect. A decrease in the activity of both the rhythmic and tonic components of the contractile activity of the uterus was observed, observed during the study / 1 hour /.

Стимуляция матки окситоцином на фоне действия состава не вызывала существенного повышения контрактильной активности миометрия. Stimulation of the uterus by oxytocin against the background of the composition did not cause a significant increase in the contractile activity of the myometrium.

На фоне предварительной стимуляции матки беременных крыс окситоцином установлено значительное снижение тонической активности миометрия. Against the background of preliminary stimulation of the uterus of pregnant rats with oxytocin, a significant decrease in the tonic activity of the myometrium was established.

Таким образом, применение бронхолитика 1-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-(трет-бутиламино)этанола гемисукцината (I) в качестве основы токолитического средства, а также составов, содержащих данную основу и янтарную кислоту, для парентерального и перорального применения при лечении и профилактике невынашивания беременности позволяет получить менее токсичное, с пролонгированным действием токолитическое средство. Thus, the use of 1- (4-hydroxy-3-hydroxymethylphenyl) -2- (tert-butylamino) ethanol hemisuccinate (I) bronchodilator as the basis of tocolytic means, as well as formulations containing this base and succinic acid, for parenteral and oral use in the treatment and prevention of miscarriage allows you to get a less toxic, prolonged action tocolytic agent.

Claims

1. The tool has a tocolytic effect with low toxicity, characterized in that it is 1- (4-hydroxy-3-hydroxymethylphenyl) -2- (tert-butylamino) ethanol hemisuccinate of the formula

2. A tocolytic composition comprising an active agent and a solvent, characterized in that as an active agent it contains 1- (4-hydroxy-3-hydroxymethylphenyl) -2- (tert-butylamino) ethanol hemisuccinate and succinic acid in a ratio of components, wt.

1- (4-Hydroxy-3-hydroxymethylphenyl) -2- (tert-butylamino) ethanol hemisuccinate 0.05 1.0
Succinic acid 10 30
Water for injection Else
3. A tocolytic composition comprising an active agent and an excipient, characterized in that, as an active agent, the tablet contains 1- (4-hydroxy-3-hydroxymethylphenyl) -2- (tert-butylamino) ethanol hemisuccinate and succinic acid with respect to the components, mg:
1- (4-Hydroxy-3-hydroxymethylphenyl) -2- (tert-butylamino) ethanol hemisuccinate 2 6
Succinic acid 10 80
Filler Up to 100i