RU2086984C1 - Method of preparing diagnosticum for detection of campylobacter thermostable antigens - Google Patents
Method of preparing diagnosticum for detection of campylobacter thermostable antigens Download PDFInfo
- Publication number
- RU2086984C1 RU2086984C1 RU95108338A RU95108338A RU2086984C1 RU 2086984 C1 RU2086984 C1 RU 2086984C1 RU 95108338 A RU95108338 A RU 95108338A RU 95108338 A RU95108338 A RU 95108338A RU 2086984 C1 RU2086984 C1 RU 2086984C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- campylobacter
- antigens
- diagnosticum
- sera
- thermostable
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии, в частности, к клинической и ветеринарной микробиологии и иммунологии, и предназначено для экспрессной диагностики кампилобактериозов у людей и животных, выявления кампилобактеров в пищевых продуктах, кормах и объектах внешней среды. The invention relates to biotechnology, in particular, to clinical and veterinary microbiology and immunology, and is intended for the rapid diagnosis of campylobacteriosis in humans and animals, the identification of campylobacter in food, feed and environmental objects.
Известен способ получения диагностикума для выявления термостабильных антигенов Campylobacter jejuni и Campylobacter coli с помощью коагглютинации, предусматривающий получение сывороток к живым культурам кампилобактеров всех существующих серотипов (порядка 57), сенсибилизацию лиофилизированных клеток S. aureus Cowan 1, инкубирование в течение 1 ч при комнатной температуре, отмывание в ФСБ при центрифугировании и суспензирование в ФСБ, консервирование 0,05 азида натрия. Таким образом получают монодиагностикумы, которые используют в РКА на стекле с живыми и убитыми культурами исследуемых штаммов. Этот способ выбран в качестве ближайшего аналога. Однако известные диагностикумы пригодны только для серотипирования культур, метод серотипирования многоэтапный и не пригоден для выявления антигенов непосредственно в исследуемом материале. Коммерческих наборов для выявления антигенов кампилобактеров реакцией коагглютинации в известной нам литературе не имеется. A known method for producing a diagnosticum for detecting thermostable antigens Campylobacter jejuni and Campylobacter coli using coagglutination, which involves obtaining sera for living cultures of campylobacter of all existing serotypes (about 57), sensitization of lyophilized S. aureus Cowan 1 cells, incubation for 1 h at room temperature, washing in FSB by centrifugation and suspension in FSB, preservation of 0.05 sodium azide. In this way, monodiagnostics are obtained, which are used in RCA on glass with live and dead cultures of the studied strains. This method is selected as the closest analogue. However, well-known diagnosticums are suitable only for serotyping of cultures, the method of serotyping is multi-stage and not suitable for detecting antigens directly in the test material. There are no commercial kits for detecting campylobacter antigens by coagglutination in the literature known to us.
Техническим результатом, достигаемым при использовании способа, является то, что полученный диагностикум пригоден для выявления термостабильных антигенов кампилобактеров не только в культурах, но также непосредственно в исследуемом материале, что упрощает диагностику (РКА ставят одноэтапно) и значительно сокращает время проведения анализа. Он достигается тем, что из набора часто встречающихся при патологии человека и животных серотипов кампилобактеров отбирают несколько культур, имеющих в своем составе максимальный спектр термостабильных антигенов, для иммунизации кроликов используют убитые ацетоном и прогреванием при температуре 100 oC в течение 1 ч культуры, иммунизацию проводят многократно внутривенно возрастающими дозами от 1,0 до 16,0 млрд микр. кл. кампилобактеров с двумя повторными циклами после каждого взятия крови, для сенсибилизации стафилококка используют смесь полученных сывороток. Диагностикум для выявления кампилобактеров реакцией коагглютинации представляет собой комплект, включающий емкость, заполненную диагностикумом, вторую емкость с несенсибилизированным стафилококком для отрицательного контроля и третью емкость для положительного контроля.The technical result achieved using the method is that the diagnosticum obtained is suitable for detecting thermostable Campylobacter antigens not only in cultures, but also directly in the test material, which simplifies the diagnosis (PCA is performed in one step) and significantly reduces the analysis time. It is achieved by the fact that several cultures with the maximum spectrum of thermostable antigens are selected from the set of campylobacter serotypes that are often found in human and animal pathologies; for immunization, rabbits are killed with acetone and heated at a temperature of 100 o C for 1 h; immunization is carried out repeatedly intravenously increasing doses from 1.0 to 16.0 billion microns. class campylobacter with two repeated cycles after each blood sampling, a mixture of the obtained sera is used to sensitize staphylococcus aureus. The diagnosticum for detecting campylobacter by the coagglutination reaction is a kit that includes a container filled with a diagnosticum, a second container with non-sensitized staphylococcus for negative control and a third container for positive control.
Известно, что наиболее распространенными серотипами кампилобактеров по схеме Lior являются: L1, L2, L4, L5, L6, L7, L9, L11, K16, K17 и L36, которые составляют 70 всех выделенных культур. Наиболее распространенными штаммами, серотипированными по термостабильным антигенам 0 в США являются P1, P2, P4, P5, P3, P10, P16, P18, P21, P25, которые составляют 73,7 выделенных штаммов, у нас в стране L1, L5, L6, L7. При этом культуры серотипов по схеме Lior часто сочетаются с наиболее распространенными 0-антигенами по схеме Penner: так, L1 часто сочетается с P2 (59) и L4 с P3 (11); серотип L36 с P3, P4 и P8 (19 15 11 соответственно); L1 с P4 и P1 (36 и 27 соответственно); L6 с P25, P17 и P7 (34 33 и 22 соответственно); L16 с P10 и P5 в 77 и 22 соответственно. It is known that the most common serotypes of campylobacter according to the Lior scheme are: L1, L2, L4, L5, L6, L7, L9, L11, K16, K17 and L36, which make up 70 of all selected cultures. The most common strains serotyped for thermostable antigens 0 in the USA are P1, P2, P4, P5, P3, P10, P16, P18, P21, P25, which comprise 73.7 isolated strains, in our country L1, L5, L6, L7. Moreover, cultures of serotypes according to the Lior scheme are often combined with the most common 0-antigens according to the Penner scheme: for example, L1 is often combined with P2 (59) and L4 with P3 (11); serotype L36 with P3, P4 and P8 (19 15 11 respectively); L1 with P4 and P1 (36 and 27, respectively); L6 with P25, P17 and P7 (34 33 and 22, respectively); L16 with P10 and P5 at 77 and 22 respectively.
Исходя из этих данных, для дальнейшей разработки диагностикума для РКА, исследования специфических и перекрестно-реагирующих антигенов, а также для получения антисывороток был использован набор культур кампилобактеров из 14 наиболее распространенных в патологии человека и животных серотипов кампилобактеров. Based on these data, a set of campylobacter cultures from the 14 most common campylobacter serotypes in the pathology of humans and animals was used to further develop a diagnosticum for RCA, study specific and cross-reacting antigens, and also to obtain antisera.
Пример 1. Получение сывороток к каждому серотипу кампилобактеров (подготовительный этап). Example 1. Obtaining sera for each serotype of campylobacter (preparatory stage).
Для получения сывороток были испытаны описанные в литературе, а также специально разработанные схемы иммунизации кроликов. Из 6 испытанных методов, в которых применялись формалинизированные, гретые при 100 oC культуры в течение 1 ч и 2 ч, ЛПС, полученные горячим фенольным методом по Вестфалю и Джан (1965), с адъювантом Фрейнда и без него, в разных дозах, мы остановились на оригинальном, разработанном нами методе получения антисывороток к термостабильным антигенам, который заключается в следующем. Кролики породы шиншилла весом 2,5-3,0 кг иммунизировались убитой и высушенной ацетоном микробной массой кампилобактеров после прогревания ее при 100 oC в течение 1 ч, внутривенно, один раз в неделю в возрастающих дозах от 1,0 млрд микр. кл. до 16,0 млрд микр. кл (I цикл); 4,0, 8,0 и 16,0 млрд микр. кл (II цикл); 10,0 и 10,0 млрд микр. кл (III цикл). После каждого цикла вакцинации на 7-10 день брали кровь из ушной вены. Сыворотки исследовали в реакции препипитации и иммуноэлектрофореза в агаре с ЛПС каждого штамма и перекрестно.To obtain sera were tested described in the literature, as well as specially designed immunization schemes for rabbits. Of the 6 tested methods that used formalized cultures heated at 100 ° C for 1 h and 2 h, LPS obtained by the hot phenolic method according to Westphalle and Jan (1965), with and without Freund's adjuvant, in different doses, settled on the original method developed by us for the production of antisera to thermostable antigens, which is as follows. Chinchilla rabbits weighing 2.5-3.0 kg were immunized with killed and acetone-dried microbial mass of campylobacter after heating it at 100 o C for 1 h, intravenously, once a week in increasing doses from 1.0 billion microns. class up to 16.0 billion mic. cells (I cycle); 4.0, 8.0 and 16.0 billion microns. cells (II cycle); 10.0 and 10.0 billion microns. cells (III cycle). After each vaccination cycle, blood was taken from the ear vein on day 7-10. Serum was tested in the reaction of prepipitation and immunoelectrophoresis in agar with LPS of each strain and cross.
Пример 2. Подготовительный этап-отбор штаммов для получения диагностикума кампилобактериозного для реакции коагглютинации. Example 2. The preparatory stage is the selection of strains to obtain diagnostic campylobacteriosis for the coagglutination reaction.
Методом иммуноэлектрофореза в агаре и препипитации в геле было установлено, что многие сыворотки к изученным культурам кампилобактеров (10 из 15) имеют в своем составе, кроме антител к гомологичным термостабильным антигенам 0 этих бактерий, также антитела к гетерологичным 0-антигенам других серотипов, причем некоторые сыворотки имеют антитела к двум или даже шести термостабильным 0-антигенам. Using agar immunoelectrophoresis and gel prepipitation, it was found that many serums for the studied campylobacter cultures (10 out of 15) contain, in addition to antibodies to the homologous thermostable antigens 0 of these bacteria, also antibodies to heterologous 0-antigens of other serotypes, some sera have antibodies to two or even six thermostable 0-antigens.
На основании этих данных в смесь сывороток для приготовления кампилобактериозного поливалентного коагглютинирующего диагностикума можно было взять 3-4 сыворотки, при этом она содержала бы антитела ко всем исследованным культурам кампилобактеров. Based on these data, 3-4 sera could be taken into the serum mixture for the preparation of the campylobacter polyvalent coagglutinating diagnosticum, and it would contain antibodies to all the studied cultures of campylobacter.
Так, из табл. 1 видно, что сыворотка к штамму 4 выявляет термостабильные антигены штамма 5 и наоборот, сыворотка к штамму 6 является моноспецифической; сыворотка к штамму 35 выявляет антиген также штамма 21 наряду с гомологичным антигеном; сыворотка к штамму 21 имеет антитела к термостабильным антигенам сероваров 1, 2, 8, 20, 21, 35. Таким образом, для смеси можно было взять эти 4 сыворотки. Данный пример не ограничивает предмет изобретения. So, from the table. 1 shows that the serum to
Пример 3. Получение кампилобактериозного диагностикума (конечный этап). Example 3. Obtaining campylobacteriological diagnosticum (final stage).
Для получения сывороток, которые содержали бы антитела ко всем термостабильным антигенам наиболее часто встречающихся серотипов кампилобактеров, берут штаммы кампилобактеров, имеющие максимальный набор термостабильных антигенов этих серотипов, выращивают на твердой питательной среде, смывают физиологическим раствором (0,9 хлорида натрия), взвесь микробов заливают тремя объемами ацетона, через сутки дважды отмывают свежими порциями ацетона и высушивают микробы на воздухе. Убитые и высушенные ацетоном микробы каждого штамма разводят 0,9-ным раствором хлорида натрия до концентрации 20-25 млрд микр. кл. прогревают в водяной бане при 100 oC в течение 1 ч и хранят при 2-6 oC в течение всего периода иммунизации. Кроликов иммунизируют, как указано в примере 1. Определяют рабочее разведение каждой гипериммунной кроличьей сыворотки, необходимое для приготовления смеси, путем приготовления пробных диагностикумов для РКА и испытания их с гомологичным ЛПС. Готовят смесь этих сывороток, используя такие их соотношения, чтобы в смеси содержалось примерно равное количество антител к разным термостабильным антигенам, учитывая их разведения при изготовлении пробных диагностикумов. Например, если рабочее разведение первой, второй и третьей сывороток соответственно составляло 1:200, 1:400 и 1:400, то для приготовления смеси этих сывороток берут их соотношения как 2:1:1 (табл.1).To obtain sera that would contain antibodies to all thermostable antigens of the most common campylobacter serotypes, campylobacter strains having the maximum set of thermostable antigens of these serotypes are taken, grown on solid nutrient medium, washed with physiological saline (0.9 sodium chloride), the microbial suspension is poured three volumes of acetone, after a day twice washed with fresh portions of acetone and dried microbes in the air. Killed and acetone-dried microbes of each strain are diluted with 0.9% sodium chloride solution to a concentration of 20-25 billion microns. class heated in a water bath at 100 o C for 1 h and stored at 2-6 o C for the entire period of immunization. Rabbits are immunized as described in Example 1. The working dilution of each hyperimmune rabbit serum necessary for preparing the mixture is determined by preparing test diagnostics for RCA and testing them with homologous LPS. A mixture of these sera is prepared using their ratios such that the mixture contains an approximately equal number of antibodies to different thermostable antigens, given their dilutions in the manufacture of test diagnostics. For example, if the working dilution of the first, second, and third serums was 1: 200, 1: 400, and 1: 400, respectively, then to prepare a mixture of these sera, take their ratio as 2: 1: 1 (Table 1).
Для приготовления поливалентного диагностикума берут 0,1 мл смеси сывороток, добавляют 0,9 мл 10-ной взвеси стабилизированной формалином (0,5 раствор формальдегида 2 ч) и прогреванием (85 oC 2 ч), отмытого при центрифугировании стафилококка Staphylococcus aureus штамм Cowan 1, тщательно перемешивают и доводят ФСБ до 10 мл. Приготовленный таким образом кампилобактериозный диагностикум контролируют путем постановки РКА на стекле с ЛПС или гретыми (100 oC 1 ч) культурами наиболее часто встречающихся серотипов Campylobacter jejuni, coli, laridis, взятыми в различных разведениях, для определения чувствительности, а также другими энтеробактериями для определения специфичности препарата. Для постановки РКА одну каплю каждого разведения ЛПС (десятикратного, от 10-1 до 10-4 мг/мл) наносят на предметное стекло, разделенное на сектора стеклографом, и добавляют к ней одну каплю сенсибилизированного стафилококка (диагностикума). В контроле N 1 вместо диагностикума помещают каплю несенсибилизированного стафилококка (отрицательный контроль), в контроле N 2 - к диагностикуму добавляют ЛПС Campylobacter, разведенный в ФСБ (положительный контроль). Капли осторожно перемешивают покачиванием стекла в течение 3-5 мин, помещают во влажную камеру на 30 мин. Учет реакции проводят по 4-крестовой шкале, положительной считается агглютинация стафилококка на 2+.To prepare a multivalent diagnosticum, 0.1 ml of a serum mixture is taken, 0.9 ml of a 10th suspension of stabilized with formalin (0.5 formaldehyde solution 2 h) and heating (85 o C 2 h), washed by centrifugation of Staphylococcus aureus Staphylococcus strain Cowan are added 1, mix thoroughly and bring the FSB to 10 ml. The Campylobacteriosis diagnosticum prepared in this way is monitored by placing RCAs on glass with LPS or heated (100 ° C 1 h) cultures of the most common serotypes Campylobacter jejuni, coli, laridis taken in various dilutions to determine sensitivity, as well as other enterobacteria for determining specificity the drug. For staging RCA, one drop of each dilution of LPS (tenfold, from 10 -1 to 10 -4 mg / ml) is applied to a glass slide, divided into sectors by a glass scanner, and one drop of sensitized staphylococcus (diagnosticum) is added to it. Instead of a diagnosticum, in control No. 1, a drop of unsensitized staphylococcus is placed (negative control), in control No. 2, Campylobacter LPS diluted in FSB (positive control) is added to the diagnosticum. Drops are carefully mixed by swaying the glass for 3-5 minutes, placed in a humid chamber for 30 minutes. Accounting for the reaction is carried out on a 4-cross scale, agglutination of staphylococcus by 2+ is considered positive.
Набор диагностикума для выявления термостабильных антигенов кампилобактеров включает: 1. емкость (ампула, флакон), заполненную диагностикумом в объеме 1-2 мл; 2. емкость, заполненную несенсибилизированным 1 стафилококком для отрицательного контроля 1-2 мл; 3. емкость, заполненную жидкостью для положительного контроля 1-2 мл. A diagnostic kit for identifying thermostable Campylobacter antigens includes: 1. a container (ampoule, vial) filled with a diagnosticum in a volume of 1-2 ml; 2. a container filled with non-sensitized 1 staphylococcus for a negative control of 1-2 ml; 3. a container filled with liquid for a positive control of 1-2 ml.
Приготовленный кампилобактериозный диагностикум должен давать положительную реакцию коагглютинации со всеми наиболее распространенными культурами кампилобактеров разных серотипов или их 0-антигенами при концентрации последних 100 мкг/мл и более. Он не должен реагировать с 0-антигенами других видов бактерий (табл. 2). The prepared campylobacteriotic diagnosticum should give a positive coagglutination reaction with all the most common cultures of campylobacter of different serotypes or their 0 antigens at a concentration of the last 100 μg / ml or more. It should not react with 0-antigens of other types of bacteria (table. 2).
Пример 4. Использование кампилобактериозного диагностикума для выявления термостабильных антигенов этих бактерий непосредственно в исследуемом материале. Example 4. The use of campylobacteriological diagnosticum to detect thermostable antigens of these bacteria directly in the test material.
Для определения термостабильных антигенов кампилобактеров материал (копрофильтрат, слюна, моча, сыворотка крови, пищевые продукты, корма) прогревают в водяной бане при 100 oC в течение 30 мин, осветляют центрифугированием или фильтрацией. Одну каплю исследуемого материала наносят на предметное стекло, размеченное на сектора карандашом по стеклу, добавляют одну каплю диагностикума, осторожно перемешивают покачиванием стекла в течение 3-5 мин, оставляют во влажной камере на 30 мин при комнатной температуре. Учет реакции проводят визуально, отмечая интенсивность реакции над вогнутым зеркалом микроскопа. Положительной считается реакция на 2+. Контролем служат капля исследуемого материала с несенсибилизированным стафилококком (отрицательный контроль). Положительным контролем является реакция агглютинации диагностикума с ЛПС кампилобактеров, прилагаемого к набору. Разработанный диагностикум был испытан на материале от здоровых и больных людей, а также при исследовании птиц, яиц, содержимого кишечника, печени кур, а также материалов от работников птицефабрик (табл. 3).To determine thermostable antigens of campylobacter, the material (coprofiltrate, saliva, urine, blood serum, food, feed) is heated in a water bath at 100 ° C for 30 minutes, clarified by centrifugation or filtration. One drop of the test material is applied to a glass slide marked in sectors with a pencil on the glass, one drop of the diagnosticum is added, carefully mixed by swaying the glass for 3-5 minutes, left in a humid chamber for 30 minutes at room temperature. Accounting for the reaction is carried out visually, noting the intensity of the reaction over a concave mirror of the microscope. A positive reaction is considered to be 2+. The control is a drop of test material with non-sensitized staphylococcus (negative control). A positive control is the agglutination reaction of the diagnosticum with LPS of campylobacter attached to the kit. The developed diagnosticum was tested on material from healthy and sick people, as well as in the study of birds, eggs, intestinal contents, chicken liver, as well as materials from poultry workers (Table 3).
Показана достаточно высокая чувствительность разработанного кампилобактериозного диагностикума в выявлении антигенов этих бактерий; наши данные соответствуют результатам других исследователей, показавших высокую частоту выявления кампилобактеров у людей и животных с помощью бактериологического метода. A rather high sensitivity of the developed campylobacteriological diagnosticum in detecting the antigens of these bacteria was shown; our data are consistent with the results of other researchers who showed a high incidence of campylobacter in humans and animals using the bacteriological method.
Применение диагностикума, полученного по предлагаемому способу, позволяет проводить экспресс-диагностику кампилобактериозов у больных людей и животных, выявлять контаминацию кампилобактерами пищевых продуктов, кормов и объектов внешней среды, непосредственно в исследуемом материале без проведения бактериологического исследования и выделения чистой культуры, требующих специальных дорогостоящих питательных сред и оборудования. Постановка РКА с помощью предлагаемого диагностикума является технически простой процедурой, а способ приготовления диагностикума и его применение, в особенности при массовых исследованиях, экономически значительно более эффективен, чем другие способы диагностики кампилобактериоза. The use of a diagnosticum obtained by the proposed method allows the rapid diagnosis of campylobacteriosis in sick people and animals, to detect contamination by campylobacter of food products, feed and environmental objects directly in the test material without bacteriological studies and isolation of pure culture that require special expensive nutrient media and equipment. Setting the RCA using the proposed diagnosticum is a technically simple procedure, and the method for preparing the diagnosticum and its use, especially in mass studies, is economically much more effective than other methods for diagnosing campylobacteriosis.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95108338A RU2086984C1 (en) | 1996-05-22 | 1996-05-22 | Method of preparing diagnosticum for detection of campylobacter thermostable antigens |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95108338A RU2086984C1 (en) | 1996-05-22 | 1996-05-22 | Method of preparing diagnosticum for detection of campylobacter thermostable antigens |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2086984C1 true RU2086984C1 (en) | 1997-08-10 |
| RU95108338A RU95108338A (en) | 1997-11-27 |
Family
ID=20168024
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU95108338A RU2086984C1 (en) | 1996-05-22 | 1996-05-22 | Method of preparing diagnosticum for detection of campylobacter thermostable antigens |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2086984C1 (en) |
-
1996
- 1996-05-22 RU RU95108338A patent/RU2086984C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Wong H. H. еt. al. Typing of Heat-stable and Heat-labile antigens of Campylobacter jejuni and Campylobacber coli by Coagglitination. J. of Clinical Microbiol., 1985, v. 21, p. 702 - 707. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cox et al. | Automated, quantitative microhemagglutination assay for Treponema pallidum antibodies | |
| Leinonen et al. | Comparison of counter-current immunoelectrophoresis, latex agglutination, and radioimmunoassay in detection of soluble capsular polysaccharide antigens of Haemophilus influenzae type b and Neisseria meningitidis of groups A or C. | |
| Collins et al. | Rapid solid-phase radioimmunoassay for staphylococcal enterotoxin A | |
| RU2607006C1 (en) | Test strain leptospira of interrogans serogroup icterohaemorrhagiae serovar copenhageni for detection of antibodies to l icterohaemorrhagiae | |
| Harrison et al. | Diagnosis of Legionella pneumophila infections by means of formolised yolk sac antigens. | |
| Myhre | Typing of Haemophilus influenzae by counterimmunoelectrophoresis | |
| Hodges et al. | Serotypes of Yersinia pseudotuberculosis recovered from domestic livestock | |
| Singhal et al. | Modified latex agglutination test for rapid detection of Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae in cerebrospinal fluid and direct serotyping of Streptococcus pneumoniae | |
| RU2086984C1 (en) | Method of preparing diagnosticum for detection of campylobacter thermostable antigens | |
| Lim et al. | Detection of group D salmonellae in blood culture broth and of soluble antigen by tube agglutination using an O-9 monoclonal antibody latex conjugate | |
| GENIGEQRGIS et al. | Immunofluorescent Detection of Staphylococcal Enterotoxin B II. Detection in Foods | |
| RU2625031C1 (en) | Immunoenzymometric test system for animals anaerobic enterotoxemia serum diagnostics and postvaccinal immunity stress control | |
| RU2063769C1 (en) | Method of preparing specific salmonellosis polyvalent h-serum for accelerated salmonella detection in foodstuffs, fodder, environment object and clinical material | |
| CN111830263A (en) | Establishment method of mycoplasma ovipneumoniae indirect hemagglutination detection method | |
| RU2232989C1 (en) | Method for preparing test-system for determination of helicobacter pylori cytotoxin-associated protein antigens in biological material in infected patients by co-agglutination reaction | |
| Berkhoff et al. | Fluorescent antibody test in diagnosis of ulcerative enteritis | |
| JP2012513588A (en) | Ex vivo passive protective bacteremia assay | |
| Bragger et al. | A card test for the serodiagnosis of human leptospirosis. | |
| SU1758075A1 (en) | Method of pathogenic enterobacterium identification | |
| Cui et al. | Further evaluation of one-point microcapsule agglutination test for diagnosis of leptospirosis | |
| Iannelli et al. | Identification of Brucella abortus antibodies in cattle serum by single radial diffusion | |
| KR920000881B1 (en) | Diagnosis reagent | |
| SU1604851A1 (en) | Strain of enterovirus suis for diagnosis of enterovirus pneumonia of swine | |
| Ris | The failure of genus specific serological tests to detect leptospirosis in cattle and rabbits | |
| SU833259A1 (en) | Method of preparing milk for determining disenteric antigen |