RU2086980C1 - Method of alcoholism diagnosis - Google Patents

Method of alcoholism diagnosis Download PDF

Info

Publication number
RU2086980C1
RU2086980C1 RU93032415A RU93032415A RU2086980C1 RU 2086980 C1 RU2086980 C1 RU 2086980C1 RU 93032415 A RU93032415 A RU 93032415A RU 93032415 A RU93032415 A RU 93032415A RU 2086980 C1 RU2086980 C1 RU 2086980C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
alcoholism
diagnosis
patient
serum
thrombocytolytic
Prior art date
Application number
RU93032415A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU93032415A (en
Inventor
В.С. Глебов
Т.А. Наумова
А.Г. Гофман
Original Assignee
Московский научно-исследовательский институт психиатрии
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Московский научно-исследовательский институт психиатрии filed Critical Московский научно-исследовательский институт психиатрии
Priority to RU93032415A priority Critical patent/RU2086980C1/en
Publication of RU93032415A publication Critical patent/RU93032415A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2086980C1 publication Critical patent/RU2086980C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

FIELD: medicine, narcology. SUBSTANCE: method involves examination of thrombocytolytic action of patient blood serum in the presence of complement and tetrahydroisoquinoline at dose 0.5 x 10-4 mmole as hapten. EFFECT: increased precision of diagnosis at early stage of alcoholism, simplified method. 4 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к наркологии. The invention relates to medicine, namely to addiction.

Целью изобретения является повышение точности диагностики, в том числе, на начальной стадии алкоголизма, снятие временных ограничений ее проведения вне зависимости от сроков употребления алкоголя. The aim of the invention is to improve the accuracy of diagnosis, including at the initial stage of alcoholism, removing the time limitations of its implementation, regardless of the timing of alcohol consumption.

Указанная цель достигается тем, что при определении тромбоцитолитического действия сыворотки крови больного в качестве гаптена используют тетрагидроизохинолин в дозе 0,5•10-4 ммоля.This goal is achieved by the fact that when determining the thrombocytolytic effect of the patient's blood serum, tetrahydroisoquinoline in a dose of 0.5 • 10 -4 mmol is used as a hapten.

Способ осуществляют следующим образом. The method is as follows.

К 0,15 мл сыворотки больного, цельной и в серийной разведениях, добавляют 0,15 мл тромбоцитарной массы, полученной из донорской крови 0 группы, 0,05 мл комплемента морской свинки в разведении 1 30 и 0,05 мл 0,04-ного водного раствора 1,2,3,4-тетрагидро-1-метил-6,7-изохинолиндиола (ТИХ). После тщательного перемешивания отбирают 16 мкл смеси для подсчета исходного количества тромбоцитов. Оставшуюся смесь инкубируют в закрытых сосудах при 37 oC в течение 1 ч, после чего вновь отбирают 16 мкл смеси для постинкубационного подсчета количества тромбоцитов. Результат считают положительным, если количество тромбоцитов после инкубации в опытных пробах уменьшается не менее, чем на 20 25 от исходного, при неизменном количестве тромбоцитов в контрольных пробах. Каждое исследование включает 3 контрольные пробы, в которых сыворотку больного заменяют сывороткой здорового человека (1-я контрольная проба), либо исключают из инкубационной среды комплемент (2-я контрольная проба) или ТИХ (3-я контрольная проба).To 0.15 ml of the patient’s serum, whole and serial dilutions, add 0.15 ml of platelet mass obtained from donor blood of group 0, 0.05 ml of guinea pig complement at a dilution of 1 30 and 0.05 ml of 0.04 an aqueous solution of 1,2,3,4-tetrahydro-1-methyl-6,7-isoquinolinediol (TIH). After thorough mixing, 16 μl of the mixture was taken to calculate the initial platelet count. The remaining mixture was incubated in closed vessels at 37 ° C for 1 h, after which 16 μl of the mixture was again taken for post-incubation counting of platelet counts. The result is considered positive if the platelet count after incubation in the experimental samples is reduced by at least 20 25 from the original, with a constant platelet count in the control samples. Each study includes 3 control samples in which the patient’s serum is replaced with healthy human serum (1st control sample), or complement (2nd control sample) or SIL (3rd control sample) are excluded from the incubation medium.

Пример 1. Больной К. 1962 г. р. История болезни N 27182. Диагноз при поступлении: циклотимия, с возможным осложнением алкоголизмом. В психиатрический стационар поступил впервые. В отделении вял, заторможен, настроение подавленное, в то же время неусидчив, тревожен. Соматических и неврологических нарушений не выявлено. Интеллект и память нормальны. С 1986 г. эпизодически, с большими перерывами до 20 30 дней употребляет крепкие спиртные напитки. Алкогольный абстинентный синдром выражен слабо, непродолжителен. Больному 19.02.90 (на 35-й день воздержания от алкоголя) проведено диагностическое исследование. Взят 1 мл крови больного, получена сыворотка, приготовлены серийные разведения от 1 2 до 1 128. К сыворотке, цельной и в серийных разведениях, добавлены тромбоцитарная масса из донорской крови 0 группы, комплемент морской свинки и ТИХ в соотношении 3 3 1 1 соответственно. Во всех пробах из полученной смеси отобрано по 16 мкл для подсчета исходного количества тромбоцитов. Подсчет осуществлен на электронном счетчике микрочастиц "Пикоскель PS-4" (Медикор, Будапешт). После 1-ч инкубации при 37 oC произведен повторный отбор проб по 16 мкл для постинкубационного подсчета тромбоцитов. Общее время исследования 1 ч 40 мин. Результаты анализа отражены в табл. 1.Example 1. Patient K., b. 1962 Medical history N 27182. Diagnosis at admission: cyclothymia, with a possible complication of alcoholism. He entered the psychiatric hospital for the first time. The department is lethargic, inhibited, depressed mood, at the same time restless, anxious. Somatic and neurological disorders were not detected. Intelligence and memory are normal. Since 1986, occasionally, with large interruptions up to 20 30 days, he drinks strong alcohol. Alcohol withdrawal syndrome is mild, short-lived. A patient was examined on 19.02.90 (on the 35th day of abstinence from alcohol). 1 ml of patient’s blood was taken, serum was obtained, serial dilutions from 1 2 to 1 128 were prepared. Serum, whole and serial dilutions, platelet mass from donor blood of group 0, complement of guinea pig and SIL in the ratio of 3 3 1 1, respectively, were added. In all samples, 16 μl were taken from the resulting mixture to calculate the initial platelet count. The calculation was carried out on an electronic counter of microparticles "Picoskel PS-4" (Medicor, Budapest). After a 1-h incubation at 37 ° C, 16 μl samples were taken again for post-incubation platelet counts. The total study time is 1 h 40 min. The results of the analysis are shown in table. one.

На основании уменьшения количества тромбоцитов в опытных пробах, начиная с цельной сыворотки и до разведения 1:4, на 20 29 после инкубации по сравнению с имевшим место до инкубации, при неизменном количестве тромбоцитов в контрольных пробах (колебания в пределах ошибки опыта) сделан вывод о наличии у больного алкоголизма, что подтверждено и соответствующей клинической картиной заболевания. Уточненный диагноз, поставленный при выписке больного: алкоголизм I стадии с развитием на его фоне астено-невротических расстройств. Таким образом, предлагаемый способ позволил диагностировать начальную стадию алкоголизма после 35 дней воздержания от алкоголя. Based on a decrease in the number of platelets in experimental samples, starting from whole serum and before dilution of 1: 4, by 20 29 after incubation compared to that which took place before incubation, with a constant number of platelets in control samples (fluctuations within the experimental error), it was concluded the presence of alcoholism in the patient, which is confirmed by the corresponding clinical picture of the disease. Clarified diagnosis made at patient’s discharge: stage I alcoholism with the development of astheno-neurotic disorders on its background. Thus, the proposed method allowed to diagnose the initial stage of alcoholism after 35 days of abstinence from alcohol.

Пример 2. Больной Г. 1967 г. р. История болезни N 27367. Поступил с жалобами на эпилептические припадки полиморфного типа. Приступы иногда приурочены к похмельному состоянию после употребления спиртного. Выпивать начал с 16 лет. Употребляет спиртные напитки эпизодически, с перерывами по 2 - 3 недели. Имеется наследственная отягощенность алкоголизмом со стороны отца. Предварительный диагноз: эпилепсия алкогольного генеза. 26.03.90 больному было проведено диагностическое исследование (на 15-й день воздержания от алкоголя). Результаты приведены в табл. 2. На основании отсутствия тромбоцитолитического действия сыворотки больного (все колебания числа тромбоцитов лежат в пределах ошибки опыта) сделан вывод от отсутствии у больного алкоголизма. При дальнейшем исследовании у больного был обнаружен воспалительный процесс в субарахноидальной области. Окончательный диагноз: эпилепсия инфекционного генеза. Example 2. Patient G. born in 1967 Case history No. 27367. Received with complaints of epileptic seizures of the polymorphic type. Attacks are sometimes confined to a hangover after drinking. I started drinking from the age of 16. He drinks alcohol occasionally, with intervals of 2 to 3 weeks. There is a hereditary burden of alcoholism on the part of the father. Preliminary diagnosis: epilepsy of alcoholic origin. 03/26/90 the patient underwent a diagnostic study (on the 15th day of abstinence from alcohol). The results are shown in table. 2. Based on the absence of thrombocytolytic action of the patient's serum (all fluctuations in the number of platelets are within the experimental error), a conclusion is drawn from the patient’s absence of alcoholism. Upon further investigation, the patient was found to have an inflammatory process in the subarachnoid region. The final diagnosis: epilepsy of infectious origin.

Пример 3. В эксперименте на белых беспородных крысах, получавших 15-й раствор этанола вместо питьевой воды, проведено исследование тромбоцитолитического ТИХ-зависимого действия сыворотки крови у самца возрастом 3 мес с длительностью алкоголизации 19 дней. Из сыворотки крови опытной крысы были приготовлены серийные разведения от 1 2 до 1 83921. В качестве мишени тромбоцитолитического действия сыворотки использовали тромбоциты, выделенные из крови интактной, неалкоголизированной крысы того же возраста. Результаты исследования приведены в табл. 3.Example 3. In an experiment on white outbred rats treated with the 15th solution of ethanol instead of drinking water, a study was made of the thrombocytolytic SIL-dependent action of blood serum in a male aged 3 months with a duration of alcoholization of 19 days. Serial dilutions from 1 2 to 1 8392 1 were prepared from the blood serum of the experimental rat. Platelets isolated from the blood of an intact, non-alcoholized rat of the same age were used as a target for serum thrombocytolytic action. The results of the study are given in table. 3.

Как видно из табл. 3, сыворотка крысы, находившейся на принудительной алкоголизации 19 дней, обнаружила отчетливое ТИХ-зависимое тромбоцитолитическое действие в высоком титре, вплоть до разведения 1 1024, на основании чего было сделано заключение о формировании у крысы экспериментального алкоголизма. Это заключение было подтверждено последующим ферментативным исследованием печени и мозга крысы на аутопсийном материале по активации этанол-метаболизирующих энзимов: алкогольдегидрогеназы, микросомальной этанол-окисляющей системы и альдегиддегидрогеназы, характерной для начальной стадии алкоголизма. Таким образом, предлагаемый способ позволил провести прижизненную диагностику начальной стадии экспериментального алкоголизма. As can be seen from the table. 3, the serum of a rat, which had been forced alcoholization for 19 days, showed a clear TI-dependent thrombocytolytic effect in high titer, up to dilution of 1,024, on the basis of which it was concluded that experimental rats were formed in the rat. This conclusion was confirmed by a subsequent enzymatic study of the liver and brain of a rat on autopsy material on the activation of ethanol-metabolizing enzymes: alcohol dehydrogenase, microsomal ethanol-oxidizing system and aldehyde dehydrogenase, characteristic of the initial stage of alcoholism. Thus, the proposed method allowed for in vivo diagnosis of the initial stage of experimental alcoholism.

Предлагаемый способ диагностики алкоголизма применен 12 здоровым донорам, 34 больным алкоголизмом, 21 больному эпилепсией, 19 больным шизофренией, циклотимией и маниакально-депрессивным психозом, не осложненными алкоголизмом. The proposed method for the diagnosis of alcoholism is applied to 12 healthy donors, 34 patients with alcoholism, 21 patients with epilepsy, 19 patients with schizophrenia, cyclotemia and manic-depressive psychosis, not complicated by alcoholism.

Дополнительное подтверждение более высокой чувствительности предлагаемого способа диагностики алкоголизма в применении к различным стадиям алкоголизма было получено в эксперименте на 146 крысах с различными сроками экспериментального алкоголизма. Результаты представлены в табл. 4. Additional confirmation of the higher sensitivity of the proposed method for the diagnosis of alcoholism as applied to various stages of alcoholism was obtained in an experiment on 146 rats with different periods of experimental alcoholism. The results are presented in table. 4.

Из табл. 4 видно, что ТИХ-специфичное тромбоцитолитическое действие сывороток крыс наблюдается уже на ранних стадиях алкоголизации (от двух нед до двух мес), соответствующих начальным стадиям клинического алкоголизма, тогда как способ-прототип проявляет в эти сроки достоверно более низкую чувствительность (p<0,5) 05). В частности, в сроки алкоголизации от 2-х нед до 1 мес частота положительных реакций в способе-прототипе практически не отличается от контрольной группы интактных крыс (p>0,1). Более высокая частота положительных реакций, выявляемых предлагаемым способом в сравнении со способом-прототипом, сохраняется и в более поздние стадии экспериментального алкоголизма (3 12 месяцы), хотя в эти сроки разница в чувствительности несколько снижается. From the table. Figure 4 shows that the SIL-specific thrombocytolytic effect of rat sera is already observed in the early stages of alcoholization (from two weeks to two months), corresponding to the initial stages of clinical alcoholism, while the prototype method exhibits significantly lower sensitivity (p <0, 5) 05). In particular, in the period of alcoholization from 2 weeks to 1 month, the frequency of positive reactions in the prototype method is practically no different from the control group of intact rats (p> 0.1). A higher frequency of positive reactions detected by the proposed method in comparison with the prototype method is maintained in the later stages of experimental alcoholism (3-12 months), although the difference in sensitivity decreases slightly during these periods.

Таким образом, предлагаемый способ имеет преимущества, заключающиеся в повышении точности диагностики алкоголизма, возможности диагностики начальной стадии данного заболевания, отсутствии временных ограничений при ее проведении вне зависимости от сроков предшествующей алкоголизации. Thus, the proposed method has the advantages of improving the accuracy of diagnosis of alcoholism, the ability to diagnose the initial stage of this disease, the absence of time limits when it is carried out, regardless of the timing of previous alcoholization.

Claims (1)

Способ диагностики алкоголизма, включающий исследование крови пациента, отличающийся тем, что получают сыворотку крови, добавляют к ней тромбоциты донорской крови, комплемент и 0,5 • 10-4 ммоля тетрагидроизохинолина в качестве гаптена, подсчитывают количество тромбоцитов и при уменьшении его не менее, чем на 20 25% от исходного уровня диагностируют алкоголизм.A method for diagnosing alcoholism, including a patient’s blood test, characterized in that blood serum is obtained, donor blood platelets, complement and 0.5 • 10 - 4 mmol of tetrahydroisoquinoline as a hapten are added to it, platelet count is counted, and if it is reduced, not less than 20 25% of the initial level is diagnosed with alcoholism.
RU93032415A 1993-06-25 1993-06-25 Method of alcoholism diagnosis RU2086980C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU93032415A RU2086980C1 (en) 1993-06-25 1993-06-25 Method of alcoholism diagnosis

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU93032415A RU2086980C1 (en) 1993-06-25 1993-06-25 Method of alcoholism diagnosis

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU93032415A RU93032415A (en) 1996-04-20
RU2086980C1 true RU2086980C1 (en) 1997-08-10

Family

ID=20143662

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU93032415A RU2086980C1 (en) 1993-06-25 1993-06-25 Method of alcoholism diagnosis

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2086980C1 (en)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Авторское свидетельство СССР N 1805386, кл. G 01 N 33/48, 1993. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Serjeant et al. Human parvovirus infection in homozygous sickle cell disease
Pierangeli et al. Induction of thrombosis in a mouse model by IgG, IgM and IgA immunoglobulins from patients with the antiphospholipid syndrome
CA1106759A (en) Process for preparing a biological composition for use as a reference control in diagnostic analysis
Olee et al. A monoclonal IgG anticardiolipin antibody from a patient with the antiphospholipid syndrome is thrombogenic in mice.
CN101367875A (en) N-11 truncated amyloid-beta monoclonal antibodies, compositions, methods and uses
Chamouard et al. Prevalence and significance of anticardiolipin antibodies in Crohn's disease
Angelini et al. Partial seizures associated with antiphospholipid antibodies in childhood
Vallota et al. Continuing C3 breakdown after bilateral nephrectomy in patients with membrano-proliferative glomerulonephritis
Basun et al. Plasma levels of Aβ42 and Aβ40 in Alzheimer patients during treatment with the acetylcholinesterase inhibitor tacrine
Graham Biochemical genetics of blood coagulation
Friedman et al. Serum aldolase in the neonatal period: including a colorimetric determination of aldolase by standardization with dihydroxyacetone
EP1304336A2 (en) Antibodies for specific detection of pathogenic prions of human origin and detection methods using them
RU2086980C1 (en) Method of alcoholism diagnosis
Meyer et al. Factor VIII and IX variants. Relationship between haemophilia BM and haemophilia B+
Korte et al. Increased thrombin generation during fibrinogen and platelet recovery as an explanation for hypercoagulability in children with L-asparaginase therapy for ALL or NHL: a preliminary report
US3284434A (en) Protein isolation and preparations
AU2013200440B2 (en) Immunoglobulin G (IgG) concentrate depleted of anti-A and anti-B antibodies and of polyreactive IgGs
EP0826965B1 (en) Method for producing a factor V depleted plasma
Mellbye et al. Effect of penicillamine on complement in vitro and in vivo.
US20070092919A1 (en) Monitoring of liquids for disease-associated materials
Ekert et al. Detection of carriers of haemophilia
Kernoff et al. The specificity of antibodies to factor VIII produced in the rabbit after immunization with human cryoprecipitate
DE60127081T2 (en) Specific antibody directed against active but not inactive hepatocyte growth factor activator (HGFA)
Shapiro et al. Enzyme activity in Tourette's syndrome
EP0015508A1 (en) Method and reagent for the determination of creatine kinase MB