RU2058388C1 - Штамм бактерий vibrio cholerae eltor jnaba, используемый для иммунопрофилактики холеры - Google Patents
Штамм бактерий vibrio cholerae eltor jnaba, используемый для иммунопрофилактики холеры Download PDFInfo
- Publication number
- RU2058388C1 RU2058388C1 RU9393050403A RU93050403A RU2058388C1 RU 2058388 C1 RU2058388 C1 RU 2058388C1 RU 9393050403 A RU9393050403 A RU 9393050403A RU 93050403 A RU93050403 A RU 93050403A RU 2058388 C1 RU2058388 C1 RU 2058388C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- cholera
- vibrio cholerae
- jnaba
- immunoprophylaxis
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Использование: биотехнология, вакцина, иммунопрофилактика холеры. Сущность изобретения: получен штамм бактерий Vibrio Cholerae eltor Inaba КМ-184, полученный генно-инженерным способом, путем введения в специально подобранный авирулентный и атоксигенный штамм V.Cholerae 118 б гена, кодирующего синтез иммуногенной субъединицы В холерного токсина и плазмиды, кодирующей синтез антигена колонизирующего фактора CFaI из кишечной палочки. В результате проведенных работ штамм приобрел способность приживаться в кишечнике на срок, необходимый для формирования кишечного иммунного ответа, и может быть использован для иммунопрофилактики холеры. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицинской микробиологии и иммунологии, а именно к генной инженерии, и представляет собой штамм Vibrio cholerae eltor Inaba КМ-184, который содержит в хромосоме ген В-субъединицы холерного токсина (В-ХТ) и плазмиду антигенов колонизирующего фактора CFAI и используется для пероральной иммунопрофилактики холеры.
Как известно, в настоящее время имеет место широкое распространение холеры. По данным ВОЗ ежегодно от холеры погибает более 150000 человек. На данном этапе наиболее перспективными препаратами для иммунопрофилактики холеры по мнению экспертов ВОЗ являются убитые и живые оральные препараты (Bul. WHO, 1991, v. 69, N 6, р. 667-678).
В соединенных Штатах Америки разработан штамм V. cholerae CVD-103 HgR, происходящий из высокотоксигенного и слабоколонизирующего штамма V, cholerae 569B classical Inaba (Kaper J. B. e.a. //Rev. Infect. Dis. 1989, v. 11, s. 3, p. 568-573; Levine M. M.e.a. //Lancet. 1988, N 6809, р. 467-470), в котором из гена, кодирующего синтез холерного токсина, был удален участок, ответственный за синтез токсической субъединицы. А. Штамм V. cholerae CVD-103HgR обеспечивал наработку специфических антител и защиту добровольцев от заражения.
Штамм Vibrio cholerae eltor Inaba KM-184, полученный генно-инженерным путем, используется для иммунопрофилактики холеры.
Штамм Vibrio cholerae eltor Inaba КМ-184 хранится в Музее живых культур патогенных микроорганизмов Российского научно-исследовательского противочумного института "Микроб" под номером КМ-184. Указанный штамм обладает всеми свойствами, характерными для рода Vibrio (таблица).
Культурально-морфологические свойства.
Штамм V. cholearae eltor Inaba КМ-184 состоит из подвижных, прямых или слегка изогнутых палочек, грамотрицательных, аспорогенных, полиморфных, с одним полярно расположенным жгутиком. На щелочном агаре рН 7,6 через сутки при 32-37оС вырастают небольшие прозрачные колонии с голубоватым отливом, в бульоне равномерное помутнение.
Физиологические свойства.
Штамм образует индофенолоксидазу, ферментируют глюкозу как в аэробных, так и в анаэробных условиях, декарбоксилирует лизин и орнитин, не расщепляет аргинин. Относится по Хейбергу к 1 ферментативной группе, агглютинируется холерными сыворотками 01, Инаба до диагностического титра. Штамм лизируется соответствующими диагностическими фагами "С", "эльтор", обладает нестабильной гемолитической активностью в пробе Грейга.
Штамм растет на средах, обычных для холерного вибриона: 1% пептонная вода, бульон и мясопептонный, Мартена, Хоттингера, казеиновый агар, с настоем сердечной мышцы и др. Обладает устойчивостью к канамицину (маркер наличия vct-В гена), триметоприму (маркер плазмиды, кодирующей CFAI).
Вирулентные свойства.
Штамм авирулентен для крольчат-сосунков в дозе 109 м.т. кaк с применением иммунодепресантов (циклофосфана), так и без них, после 10-кратного пассирования на крольчатах-сосунках, авирулентен в лигированных петлях взрослых кроликов.
Антигенные и иммуногенные свойства.
Штамм обладает типичным 01 Инаба соматическим холерным антигеном, способен вызывать образование специфических антител в организме кролика при однократном пероральном введении.
Все вышеперечисленные свойства штамма определяются в соответствии с "Инструктивно-методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры", М. 1984.
Генетические свойства.
Штамм Vibrio cholerae eltor Inaba КМ-184 получен генно-инженерным путем из природного штамма Vibrio cholerae 118 б (КМ-27), не обладающего геном, кодирующим синтез холерного токсина (авирулентный и атоксигенный штамм при исследованиях на крольчатах-сосунках, взрослых кроликах, методом генетического зондирования). В штамм Vibrio cholerae 118б с помощью векторной плазмиды, включающей в себя последовательности F, КмR, vct B, H ген, vct В был введен на место последовательности F H. Полученные генно-инженерные мутанты содержат в составе своей хромосомы ген КмR (канамициноустойчивости) и ген vct В. Наличие или отсутствие генов токсинообразования подтверждалось ДНК-ДНК-гибридизацией с зондом на ген холерного токсина. Рекомбинантный штамм способен продуцировать В-субъединицу холерного токсина (В-ХТ) в количествах, соответствующих продукции целого токсина (ХТ), вирулентными штаммами вибрионов эльтор, что определялось методом Gm-ELISA.
Для улучшения колонизирующей способности в этот штамм была дополнительно введена плазмида, кодирующая синтез фактора колонизации CFA I (Colonisation Factor Antigen) из клеток E. coli с маркером TpR (триметопримустойчивости).
В результате изменения иммунобиологических свойств рекомбинантного штамма Vibrio cholerae elton Inaba КМ-184 он остается полностью и стабильно авирулентным и атоксигенным на модели кроликов-сосунков по Датта и Хаббу (10 пассажей в дозе 109 м.т. с циклофосфаном и без него), в лигированных петлях взрослого кролика по Де и Чаттерджи (дозы 107 и 109 м.т.) при пероральном внутригастральном заражении взрослых кроликов по Крэйгу с соавт. (дозами 5 х 1010 м.т.) в кожной пробе по Крейгу, при патогистолических исследованиях.
П р и м е р. Штамм Vibrio cholerae eltor Inaba КМ-184 приживается в кишечнике (1-3 дня) и вызывает иммунологическую перестройку организма (в том числе и наработку специфических антител), приводящую к защите его от заражения вирулентными штаммами Vibrio cholerae при внутрикишечном заражении в изолированные петли на 14-21 день.
Использование предлагаемого штамма для иммунопрофилактики и защиты от холеры имеет большое практическое значение, т.к. приведет к улучшению общественного здравоохранения.
Claims (1)
- Штамм бактерий Vibrio cholerae eltor Jnaba КМ-184, используемый для иммунопрофилактики холеры.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU9393050403A RU2058388C1 (ru) | 1993-10-28 | 1993-10-28 | Штамм бактерий vibrio cholerae eltor jnaba, используемый для иммунопрофилактики холеры |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU9393050403A RU2058388C1 (ru) | 1993-10-28 | 1993-10-28 | Штамм бактерий vibrio cholerae eltor jnaba, используемый для иммунопрофилактики холеры |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2058388C1 true RU2058388C1 (ru) | 1996-04-20 |
| RU93050403A RU93050403A (ru) | 1996-07-10 |
Family
ID=20148834
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU9393050403A RU2058388C1 (ru) | 1993-10-28 | 1993-10-28 | Штамм бактерий vibrio cholerae eltor jnaba, используемый для иммунопрофилактики холеры |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2058388C1 (ru) |
-
1993
- 1993-10-28 RU RU9393050403A patent/RU2058388C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Bul.UHO. 1991, v.69, N 6, p.667-678. Kaper J.B., Lockman H., Baldini M.M., Levine M.M.Recombinant nontoxigenic Vibrio cholerae strains as attenuated cholera vaccine candidates. Nature. 1984, v.308, N 5959, p.655-658. Levine M.M. etal. Volnnter studies of deletion mutants of Vibrio cholerae O1 prepared by ruombinant technignes//Infections and Immunity, 1984, v.56, N 1, p.161-167. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sack et al. | Progressive changes of Vibrio serotypes in germ-free mice infected with Vibrio cholerae | |
| Levine et al. | Volunteer studies of deletion mutants of Vibrio cholerae O1 prepared by recombinant techniques | |
| CA2094515C (en) | Bacterial attenuation method and vaccine | |
| Sato et al. | Role of pili in the pathogenesis of Pseudomonas aeruginosa burn infection | |
| Yokoyama et al. | Oral passive immunization against experimental salmonellosis in mice using chicken egg yolk antibodies specific for Salmonella enteritidis and S. typhimurium | |
| Nishibuchi et al. | Vibrio factors cause rapid fluid accumulation in suckling mice | |
| Genco et al. | Influence of immunization on Porphyromonas gingivalis colonization and invasion in the mouse chamber model | |
| US5580557A (en) | Live, avirulent salmonella choleraesuis vaccine used for inducing an immune response in animals | |
| US4748019A (en) | Vaccine for swine dysentery | |
| KR100333113B1 (ko) | 헬리코박터피롤리관련위십이지장질환의치료방법 | |
| CN102238960B (zh) | 制造疫苗的方法 | |
| US6558678B1 (en) | Preparation and use of formalin-killed colonization-factor-antigen (cfa)-expressing e. coli organisms for vaccination against enteric infection/diarrhea caused by enterotoxigenic e. coli bacteria in humans | |
| Kothary et al. | Fluid accumulation in infant mice caused by Vibrio hollisae and its extracellular enterotoxin | |
| Pierce et al. | Determinants of immunogenicity and mechanisms of protection by virulent and mutant Vibrio cholerae O1 in rabbits | |
| KANEMORI et al. | The role of extracellular protease produced by Vibrio anguillarum | |
| Richardson | Animal models in cholera research | |
| Mukhopadhaya et al. | Role of Shigella flexneri 2a 34 kDa outer membrane protein in induction of protective immune response | |
| Sanyal et al. | A new enterotoxin produced by Vibrio cholerae 01 | |
| Sengupta et al. | Antibody against the capsule of Vibrio cholerae O139 protects against experimental challenge | |
| RU2058388C1 (ru) | Штамм бактерий vibrio cholerae eltor jnaba, используемый для иммунопрофилактики холеры | |
| Arko et al. | Immunological and serological diversity of Neisseria gonorrhoeae: immunotyping of gonococci by cross-protein in guinea pig subcutaneous chambers | |
| Jung et al. | Immunization with major outer membrane protein of Vibrio vulnificus elicits protective antibodies in a murine model | |
| Guinee et al. | Vibrio cholerae infection and acquired immunity in an adult rabbit model | |
| RU2140981C1 (ru) | Авирулентный штамм vibrio cholerae не-01 серогруппы (варианты), способ получения штамма (варианты), вакцина | |
| CA2071955C (en) | Reduced-protein subunit vaccine for swine dysentery |