RU2050130C1

RU2050130C1 - Newly born animal viability assessment method

Info

Publication number: RU2050130C1
Authority: RU
Inventors: Анатолий Федорович Дмитриев; Айтбай Кабыкешович Булашев; Канат Телюбаевич Шенжанов
Original assignee: Ставропольский сельскохозяйственный институт; Целиноградский сельскохозяйственный институт
Priority date: 1992-03-31
Filing date: 1992-03-31
Publication date: 1995-12-20

Abstract

FIELD: agriculture; livestock farming. SUBSTANCE: method involves solid-phase immunoenzymatic analysis. Before the infant animal gets access to colostrum, the animal's blood is assayed for specific antibodies circulating in the mother's organism. Antibodies detected in the blood are indicative of low viability. EFFECT: simpler and more accurate method. 3 tbl

Description

Изобретение относится к животноводству, а именно к способам определения физиологического состояния новорожденных, и может использоваться для прогнозирования продуктивных и племенных качеств животных. The invention relates to animal husbandry, and in particular to methods for determining the physiological state of newborns, and can be used to predict productive and breeding qualities of animals.

Известен способ прогнозирования резистентности крупного рогатого скота, по которому предлагается использовать показатель удельного отношения площади сечения пуповины к живой массе телят при рождении, а также коэффициент использования корма у телочек в раннем возрасте. Животные, рождаемые с минимальным значением отношения площади сечения пуповины к живой массе, проявляют высокую энергию роста и развития, обладают наиболее выраженной жизнеспособностью (Высокос Н. П. Ветеринария, 1985, N 1, с. 56-57); (Вестник сельскохозяйственной науки, 1986, N 10, с. 105). A known method for predicting the resistance of cattle, which proposes to use the indicator of the specific ratio of the cross-sectional area of the umbilical cord to the live weight of calves at birth, as well as the coefficient of feed use in heifers at an early age. Animals born with a minimum value of the ratio of the cross-sectional area of the umbilical cord to live weight exhibit high energy of growth and development, have the most pronounced viability (Vysokos N.P. Veterinary, 1985, N 1, p. 56-57); (Bulletin of Agricultural Science, 1986, N 10, p. 105).

Недостатком этого способа является то, что он основан на использовании показателя, который не отражает сущности иммунологических взаимоотношений между материнским организмом и плодом. Это обусловливает погрешности диагностики особенно на фермах, неблагополучных по генитальным инфекциям. The disadvantage of this method is that it is based on the use of an indicator that does not reflect the essence of the immunological relationship between the mother's body and the fetus. This causes diagnostic errors, especially on farms that are unsuccessful for genital infections.

Целью изобретения является выявление животных с признаками пониженной жизнеспособности и повышение точности. The aim of the invention is the identification of animals with signs of reduced vitality and increased accuracy.

Способ осуществляется следующим образом. У копытных животных (коров, овцематок и др. ) после родов определяют наличие специфических антител в сыворотке крови. У новорожденного кровь берут после рождения до приема молозива и определяют содержание антител, идентичных циркулирующим в организме матери, и при их обнаружении устанавливают нарушение плацентарного барьера и, как следствие, пониженную жизнеспособность потомства. The method is as follows. In ungulate animals (cows, ewes, etc.) after childbirth, the presence of specific antibodies in the blood serum is determined. In a newborn, blood is taken after birth before colostrum is taken and the content of antibodies identical to those circulating in the mother’s body is determined, and when they are detected, a violation of the placental barrier and, as a result, reduced viability of the offspring are established.

Предлагаемый способ апробирован на 51 новорожденных телятах и поясняется следующими примерами. The proposed method is tested on 51 newborn calves and is illustrated by the following examples.

П р и м е р 1. У коров сразу после отела были взяты пробы крови из яремной вены. Наличие специфических антител в сыворотке крови определяли в твердофазном иммуноферментном анализе (ТИФА) с использованием единого бруцеллезного антигена для РА, РСК и РДСК. Титр антител в сыворотке крови и содержание общего белка у отдельных животных представлены в табл.1. PRI me R 1. Cows were taken immediately after calving blood samples from the jugular vein. The presence of specific antibodies in blood serum was determined in an enzyme-linked immunosorbent assay (TIFA) using a single brucellosis antigen for RA, CSC and RDSK. The serum antibody titer and total protein content in individual animals are presented in Table 1.

Как видно из таблицы, у всех животных, за исключением коровы под N 93, в сыворотке крови содержатся специфические антитела, причем их количество колеблется в пределах 1:2000-1:128000. Наиболее высокий титр антител был обнаружен у коровы под N 1281 и составлял 1:128000. As can be seen from the table, all animals, with the exception of a cow under N 93, contain specific antibodies in the blood serum, and their number ranges from 1: 2000-1: 128000. The highest titer of antibodies was found in a cow under N 1281 and amounted to 1: 128000.

П р и м е р 2. Образцы сывороток крови телят, полученные до первого кормления молозивом, были исследованы в ТИФА. Ниже приведены результаты серологических исследований новорожденных, матери которых указаны в примере 1 (табл.2). PRI me R 2. Samples of calf blood serum obtained before the first feeding with colostrum, were investigated in TIFA. Below are the results of serological studies of newborns whose mothers are indicated in example 1 (table 2).

Как видно из приведенных данных, у телят (пяти) специфические антитела в сыворотке крови до первого кормления молозивом не обнаружены. У остальных новорожденных (7 гол.) титр противобруцеллезных антител находился в пределах 1:8-1:6400. As can be seen from the data presented, in calves (five) specific antibodies in the blood serum were not detected until the first feeding with colostrum. In the remaining newborns (7 goals), the titer of anti-brucellosis antibodies was in the range 1: 8-1: 6400.

Сравнивая результаты исследований крови матерей и их потомства, считают, что специфические антитела, выявляемые в сыворотке крови новорожденных до приема молозива, имеют материнское происхождение. Эти антитела перешли трансплацентарно от матери к плоду в результате нарушения барьерной функции плаценты. Доказательством этого является то, что титр антител у большинства телят значительно ниже, чем у их матерей. Почти у всех телят имеет место значительная кратность снижения титра антител по сравнению с материнским организмом. Только у одного теленка (инв. номер 46/93) обнаружены противобруцеллезные антитела, в то время они отсутствовали в крови матери. У пяти телят противобруцеллезные антитела в преколостральной сыворотке не выявлены, хотя у матерей их титр был значительным. Comparing the results of studies of the blood of mothers and their offspring, it is believed that specific antibodies detected in the blood serum of newborns before colostrum are of maternal origin. These antibodies passed transplacental from mother to fetus as a result of impaired placental barrier function. Proof of this is that the antibody titer in most calves is significantly lower than that of their mothers. Almost all calves have a significant reduction in antibody titer compared to the mother's body. Only one calf (inventory no. 46/93) found anti-brucellosis antibodies, while they were absent in the mother’s blood. Five calves did not have anti-brucellosis antibodies in pre-colostral serum, although their titers were significant in mothers.

Новорожденные были условно разделены на две группы: I группа телята, имеющие в крови специфические антитела и 2 группа телята, не содержащие в крови специфические антитела. Анализ белковой картины крови новорожденных приведен в табл.3. Newborns were conditionally divided into two groups: group I calves having specific antibodies in the blood and group 2 calves not containing specific antibodies in the blood. Analysis of the protein picture of the blood of newborns is given in table 3.

Как видно из таблицы, в преколостральной сыворотке крови телят первой группы содержание общего белка и β -глобулинов было несколько выше, чем у их сверстников из второй группы (соответственно 63,7+2,2 г/л против 51,3+3,7 г/л и 12,0+2,4 г/л против 5,8+1,4 г/л; Р < 0,05). Наличие гамма-глобулинов в сыворотке крови новорожденных животных до кормления молозивом является также доказательством их трансплацентарного перехода. У новорожденных, в сыворотке которых отсутствуют противобруцеллезные антитела, не обнаружены и гамма-глобулины. Неоспоримым фактом присутствия в крови телят специфических антител, перешедших трансплацентарно от матери плоду в результате нарушения плацентарного барьера, является и то, что в сыворотке новорожденных установлены (в реакции радиальной иммунодиффузии) в основном иммуноглобулины класса IgG, за исключением теленка N 11/409, у которого кроме IgG установлено наличие IgM. As can be seen from the table, in the pre-colostral blood serum of calves of the first group, the content of total protein and β-globulins was slightly higher than that of their peers from the second group (respectively 63.7 + 2.2 g / l against 51.3 + 3.7 g / l and 12.0 + 2.4 g / l versus 5.8 + 1.4 g / l; P <0.05). The presence of gamma globulins in the blood serum of newborn animals before colostrum is also evidence of their transplacental transition. In newborns in the serum of which there are no anti-brucellosis antibodies, gamma globulins were not detected. An indisputable fact of the presence in the blood of calves of specific antibodies that have passed transplacentally from the mother to the fetus as a result of violation of the placental barrier is the fact that in the serum of newborns, mainly IgG class immunoglobulins are established (in the reaction of radial immunodiffusion), with the exception of calf N 11/409, which, in addition to IgG, the presence of IgM is established.

Для подтверждения наличия в крови телят специфических антител проведено также электрофоретическое разделение преколостральных сывороток в полиакриламидном геле в присутствии дедецилсульфита натрия. To confirm the presence of specific antibodies in the blood of calves, electrophoretic separation of pre-colostral sera in a polyacrylamide gel in the presence of sodium dedecyl sulfite was also carried out.

В образце сыворотки крови теленка N 2/2060 имеется белковая фракция с мол. м. 30 КДа, что соответствует электрофоретической подвижности легких цепей иммуноглобулинов, тогда как у теленка 10/143, в сыворотке которого антител не обнаружено, отсутствует белковая фракция с упомянутой молекулярной массой. In the sample of blood serum of calf N 2/2060 there is a protein fraction with mol. m 30 KDa, which corresponds to the electrophoretic mobility of the light chains of immunoglobulins, while the calf 10/143, in the serum of which no antibodies were detected, there is no protein fraction with the mentioned molecular weight.

Нарушение плацентарных условий развития не только способствовало переходу антител из организма матери к плоду, но и отразилось на состоянии жизнеспособности телят в первые дни постнательного онтогенеза. Заболеваемость и падеж зарегистрированы преимущественно у телят, имевших в преколостральной сыворотке высокие титры противобруцеллезных антител. За период (30 сут.) наблюдения высокая заболеваемость молодняка наблюдалась в течение первых 7-10 сут его жизни. При этом из числа заболевших в этот период пало три теленка из 1-й группы (N 2/2060:7/385:46/93) и один теленок из 2-й группы (N 50/124). Violation of the placental developmental conditions not only facilitated the transition of antibodies from the mother's body to the fetus, but also affected the state of viability of calves in the early days of post-ontogenesis. Morbidity and mortality have been reported mainly in calves that had high titers of anti-brucellosis antibodies in pre-colostral serum. Over the period (30 days) of observation, a high incidence of young animals was observed during the first 7-10 days of his life. Moreover, out of the number of cases during this period, three calves from the 1st group (N 2/2060: 7/385: 46/93) and one calf from the 2nd group (N 50/124) fell.

По течению беременность может быть нереальной (физиологической) для матери и развивающегося плода и патологической, сопровождающейся нарушением функционального состояния организма матери или плода. В связи с тем, что в функциональной системе мать-плод более уязвимым и изменчивым элементом является плод, следует ожидать более выраженные нарушения физиологических функций у плода и новорожденного. In the course of pregnancy, it can be unrealistic (physiological) for the mother and the developing fetus and pathological, accompanied by a violation of the functional state of the mother or fetus. Due to the fact that in the functional mother-fetus system the fetus is more vulnerable and variable, a more pronounced disturbance in the physiological functions of the fetus and newborn should be expected.

Известно, что передача пассивного иммунитета от матери потомству может иметь место как до, так и после рождения в зависимости от вида млекопитающих и типа гистологического строения плаценты. У жвачных животных с шестислойной плацентой эпителиехориального типа не происходит передача антител (если плацента не повреждена) от матери в кровь плода. Потомство этих животных рождается без иммуноглобулинов (антител) и получает их только с молозивом после рождения. It is known that the transmission of passive immunity from mother to offspring can take place both before and after birth, depending on the type of mammal and the type of histological structure of the placenta. In ruminants with a six-layer epithelium-placental placenta, antibodies are not transmitted (if the placenta is not damaged) from the mother to the fetal blood. The offspring of these animals is born without immunoglobulins (antibodies) and receives them only with colostrum after birth.

Однако в процессе беременности могут возникнуть нарушения плацентарного барьера, обусловленные воздействием различных неблагоприятных факторов (инфицирование возбудителями генитальных инфекций и другие причины). Эти причины увеличивают проницаемость плаценты, что способствует трансплацентарному переносу не только нормальных специфических антител из материнского организма в организм плода, но и из антител, направленных на различные антигены потомства, что не может не отразиться на состоянии его жизнеспособности. However, during pregnancy, violations of the placental barrier may occur due to exposure to various adverse factors (infection by pathogens of genital infections and other causes). These reasons increase the permeability of the placenta, which contributes to the transplacental transfer of not only normal specific antibodies from the mother's body to the fetus, but also from antibodies aimed at various offspring antigens, which cannot but affect the state of its viability.

Для определения иммунологического состояния новорожденных животных в практике широко используется определение иммуноглобулинов в молозиве и сыворотке крови. Пониженное их количество связано с заболеваемостью и смертностью. Однако при этом определение количества иммуноглобулинов в сыворотке крови позволяет судить об уровне пассивной защиты новорожденных, которая зависит от качества молозива, своевременности его скармливания и абсорбционной способности кишечной стенки. To determine the immunological state of newborn animals, the determination of immunoglobulins in colostrum and blood serum is widely used in practice. Their reduced number is associated with morbidity and mortality. However, the determination of the amount of immunoglobulins in serum allows us to judge the level of passive protection of newborns, which depends on the quality of the colostrum, the timeliness of its feeding and the absorption capacity of the intestinal wall.

Предлагаемый способ отличается тем, что пробы крови у новорожденного животного берутся не после, а до первого кормления молозивом. Обнаружение антител в крови новорожденного до первого кормления молозивом свидетельствует о нарушении плацентарного барьера и трансплацентарном переносе антител от матери плоду. Нарушения плацентарного барьера обусловливают нарушение процессов питания плода и физиологического созревания. The proposed method is characterized in that blood samples from a newborn animal are not taken after, but before the first feeding with colostrum. Detection of antibodies in the blood of a newborn before the first colostrum feeding indicates a violation of the placental barrier and transplacental transfer of antibodies from mother to fetus. Violations of the placental barrier cause a violation of the processes of nutrition of the fetus and physiological maturation.

Важным отличительным признаком предлагаемого способа является и то, что по предлагаемому способу проводят исследования сыворотки крови новорожденного на наличие тех антител, которые циркулируют в организме матери. В настоящее время в практике широко используется вакцинация животных в период беременности с целью создания высокого пассивного иммунитета у потомства. Контроль за содержанием антител в сыворотке крови животных после иммунизации позволяет контролировать не только его иммунологическую реактивность, но и использовать эти материалы для оценки жизнеспособности потомства. An important distinguishing feature of the proposed method is the fact that according to the proposed method, the blood serum of the newborn is tested for the presence of antibodies that circulate in the mother's body. Currently, vaccination of animals during pregnancy is widely used in practice in order to create high passive immunity in the offspring. Monitoring the content of antibodies in the blood serum of animals after immunization allows you to control not only its immunological reactivity, but also use these materials to assess the viability of the offspring.

Claims

METHOD FOR DETERMINING THE VITABILITY OF NEWBORN ANIMALS, including a study of their blood, characterized in that prior to taking colostrum, specific antibodies identical to those circulating in the body are determined and, when detected, reduced viability is established.