RU2034295C1 - Method for determination of residual amount of pesticides in milk and meat - Google Patents
Method for determination of residual amount of pesticides in milk and meat Download PDFInfo
- Publication number
- RU2034295C1 RU2034295C1 SU4931586A RU2034295C1 RU 2034295 C1 RU2034295 C1 RU 2034295C1 SU 4931586 A SU4931586 A SU 4931586A RU 2034295 C1 RU2034295 C1 RU 2034295C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sorbamide
- determination
- plate
- acetone
- sample
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 13
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 title claims description 11
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims description 9
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims description 9
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims description 9
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 title claims description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 39
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 20
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims abstract description 16
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000004807 localization Effects 0.000 claims abstract description 4
- JPXCVMIARYLSGU-MQQKCMAXSA-N (2e,4e)-hexa-2,4-dienamide Chemical compound C\C=C\C=C\C(N)=O JPXCVMIARYLSGU-MQQKCMAXSA-N 0.000 claims description 35
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 7
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Inorganic materials [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 N, N-disubstituted amides Chemical class 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 229910052602 gypsum Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010440 gypsum Substances 0.000 description 2
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 2
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAHFOPIILNICLA-UHFFFAOYSA-N Diphenamid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C(=O)N(C)C)C1=CC=CC=C1 QAHFOPIILNICLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 239000012916 chromogenic reagent Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000005337 ground glass Substances 0.000 description 1
- 239000002035 hexane extract Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- QGWDKKHSDXWPET-UHFFFAOYSA-E pentabismuth;oxygen(2-);nonahydroxide;tetranitrate Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[OH-].[OH-].[OH-].[OH-].[OH-].[OH-].[O-2].[Bi+3].[Bi+3].[Bi+3].[Bi+3].[Bi+3].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O QGWDKKHSDXWPET-UHFFFAOYSA-E 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 1
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/02—Food
- G01N33/12—Meat; Fish
Landscapes
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к аналитической химии пестицидов, в частности к способам определения пестицидов в сельскохозяйственной продукции и объектах окружающей среды с помощью тонкослойной хроматографии, и может использоваться при контроле за содержанием в молоке и мясе N,N-дициклогексиламида сорбиновой кислоты (в дальнейшем изложении именуемого сорбамидом), входящего в состав препаратов "Дарулан" и "Дицаваз". The invention relates to analytical chemistry of pesticides, in particular to methods for determining pesticides in agricultural products and environmental objects using thin-layer chromatography, and can be used to control the content of sorbic acid N, N-dicyclohexylamide in milk and meat (hereinafter referred to as sorbamide) , which is part of the drugs "Darulan" and "Ditsavaz".
Известные способы определения микроколичеств N,N-дизамещенных амидов карбоновых кислот используют метод тонкослойной хроматографии на пластинках с тонким слоем силикагеля или оксида алюминия, закрепленным сернокислым кальцием либо гипсом и нанесенным вручную на стеклянные пластинки [1-3]
Так, известен способ определения в воздухе рабочей зоны пестицида дифенамид, содержащего N, N-дизамещенную амидную группу, с помощью метода тонкослойной хроматографии в тонком слое оксида алюминия, закрепленного сернокислым кальцием и нанесенного вручную на стеклянную пластинку, в подвижной фазе, состоящей из смеси гексана, ацетона и аммиака в объемном отношении 10: 5: 0,8 с последующей обработкой хроматограмм реактивом Драгендорфа. Предел обнаружения 1 мкг [2]
Недостатком способа является использование нестандартных хроматографических пластинок с тонким слоем сорбента, нанесенным вручную, что снижает точность, чувствительность, селективность определения из-за неравномерной толщины слоя сорбента.Known methods for determining the microquantities of N, N-disubstituted amides of carboxylic acids use the method of thin-layer chromatography on plates with a thin layer of silica gel or aluminum oxide, fixed with calcium sulfate or gypsum and applied manually on glass plates [1-3]
Thus, there is a known method for determining in the air of the working zone of a diphenamide pesticide containing an N, N-disubstituted amide group, using thin-layer chromatography in a thin layer of aluminum oxide, fixed with calcium sulfate and applied manually on a glass plate, in a mobile phase consisting of a mixture of hexane , acetone and ammonia in a volume ratio of 10: 5: 0.8, followed by processing of the chromatograms with Dragendorf reagent. Detection Limit 1 mcg [2]
The disadvantage of this method is the use of non-standard chromatographic plates with a thin layer of sorbent applied manually, which reduces the accuracy, sensitivity, selectivity of determination due to the uneven thickness of the sorbent layer.
Обычно применяемые в анализе стандартные хроматографические пластинки (Силуфол, Алуфол, пластинки Армянского филиала ИРЕА "Армсорб" и др.) содержат в качестве связующего вещества крахмал. Обработка таких пластинок реактивом Драгендорфа и различными его модификациями [4 и 5] приводит к тому, что фон пластинки темнеет вследствие воздействия на крахмал свободного иода, выделяющегося в результате окислительно-восстановительных реакций с участием иодистого калия или натрия, входящего в состав реактива. Это обстоятельство мешает идентификации пятна исследуемого вещества на хроматограмме, поскольку оранжевые пятна маскируются темным фоном пластинки. Поэтому определение вещества как качественное, так и количественное на таких пластинках с помощью реактива Драгендорфа затруднено. Typically used in the analysis are standard chromatographic plates (Silufol, Alufol, plates of the Armenian branch of IREA Armsorb, etc.) contain starch as a binder. The treatment of such plates with Dragendorf reagent and its various modifications [4 and 5] leads to the fact that the background of the plate darkens due to the action of free iodine on starch released as a result of redox reactions involving potassium or sodium iodide, which is part of the reagent. This circumstance interferes with the identification of the spot of the analyte on the chromatogram, since orange spots are masked by the dark background of the plate. Therefore, the determination of a substance, both qualitative and quantitative, on such plates using Dragendorff reagent is difficult.
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности является способ определения остаточных количеств пестицида в молоке [6] предусматривающий экстракцию пестицида из исследуемой пробы и из полученного жирового остатка, очистку и концентрацию экстрактов с последующим их элюированием подвижным растворителем, нанесение пробы на пластинку со слоем сорбента, хроматографирование, проявление зон локализации искомого компонента (остаточного количества пестицида) путем обработки хроматограмм реактивом с последующим количественным определением искомого компонента по результатам визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы с аналогичными характеристиками пятен стандартных растворов. Closest to the proposed technical essence is a method for determining the residual amounts of a pesticide in milk [6], which involves extraction of the pesticide from the test sample and the obtained fat residue, purification and concentration of extracts, followed by their elution with a mobile solvent, applying the sample to a plate with a sorbent layer, chromatography , the manifestation of localization zones of the desired component (residual pesticide) by processing the chromatograms with a reagent, followed by quantitative op edeleniem desired component from visual comparison of the color intensity of the sample spot size and with the same characteristics spots of standard solutions.
Недостатком данного способа является невозможность определения микроколичества сорбамида, входящего в состав препарата "Дарулан" и "Дицаваз" при исследовании качества мясных и молочных продуктов на остаточное количество пестицидов. The disadvantage of this method is the inability to determine the micro amount of sorbamide, which is part of the drug "Darulan" and "Ditsavaz" in the study of the quality of meat and dairy products on the residual amount of pesticides.
Предлагаемый способ позволяет устранить недостаток за счет того, что закрепление тонкого слоя сорбента на хроматографических пластинках в подвижной фазе осуществляют крахмалом, в качестве подвижной фазы используют смесь четыреххлористого углерода с ацетоном в объемном соотношении (20-15):1, а для обнаружения зон локализации сорбамида на хроматографических пластинках из ряда реактивов выбирают реактив Драгендорфа, модифицированный 0,2%-ным водным раствором аскорбиновой кислоты. The proposed method allows to eliminate the disadvantage due to the fact that the fastening of a thin layer of sorbent on chromatographic plates in the mobile phase is carried out with starch, as the mobile phase, a mixture of carbon tetrachloride with acetone in a volume ratio of (20-15): 1 is used, and for the detection of localization zones of sorbamide on chromatographic plates from a number of reagents, Dragendorff reagent modified with a 0.2% aqueous solution of ascorbic acid is selected.
Для хроматографического разделения анализируемой пробы используют в качестве сорбента хроматографические пластинки "Силуфол", пластинки "Армсорб" Армянского филиала ИРЕА и другие стандартные пластинки с тонким слоем силикагеля, закрепленного крахмалом, и в качестве хромогенного реагента модифицированный реактив Драгендорфа, содержащий, в отличие от вышеуказанных рецептур, аскорбиновую кислоту, сульфит или бисульфит натрия, которые благодаря восстановительным свойствам связывают свободный иод, вследствие чего фон пластинки становится светло-желтым. Применение аскорбиновой кислоты является предпочтительным, так как окраска фона пластинки остается стабильной более длительное время, чем при применении сульфита и бисульфита натрия. For chromatographic separation of the analyzed sample, Silufol chromatographic plates, Armsorb plates of the Armenian branch of IREA and other standard plates with a thin layer of silica gel fixed with starch are used as sorbent, and a modified Dragendorf reagent containing, in contrast to the above formulations, is used as a chromogenic reagent , ascorbic acid, sodium sulfite or sodium bisulfite, which, due to the reducing properties, bind free iodine, so that the background of the plate becomes camping light yellow. The use of ascorbic acid is preferred, since the background color of the plate remains stable for a longer time than with sodium sulfite and sodium bisulfite.
С целью обеспечения возможности определения микроколичеств сорбамида в сельскохозяйственной продукции, в частности в молоке и мясе, анализируемую пробу предварительно экстрагируют соответствующим экстрагентом, экстракт подвергают очистке и концентрированию, а затем проводят количественное определение следующим образом. In order to ensure the possibility of determining the trace amounts of sorbamide in agricultural products, in particular milk and meat, the analyzed sample is pre-extracted with the appropriate extractant, the extract is subjected to purification and concentration, and then quantitative determination is carried out as follows.
На стандартной хроматографической пластинке с тонким слоем сорбента, закрепленного крахмалом, на расстоянии 15 мм от края намечают линию старта и на ее середину с помощью микрошприца наносят экстракт анализируемой пробы, а справа и слева от пятна пробы на расстоянии 15 мм одно от другого наносят стандартные пятна-свидетели с различным содержанием исследуемого вещества. Диаметр нанесенных пятен не должен превышать 10 мм, количество пятен на пластинке 7-9. On a standard chromatographic plate with a thin layer of sorbent fixed with starch, a start line is drawn at a distance of 15 mm from the edge and an extract of the analyzed sample is applied to its middle with a microsyringe, and standard spots are applied to the right and left of the sample spot at a distance of 15 mm from one another -Witnesses with different contents of the test substance. The diameter of the applied spots should not exceed 10 mm, the number of spots on the plate 7-9.
Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.
Пластинку помещают в закрытую пришлифованной стеклянной пластинкой хроматографическую камеру размером 16х8х20 см, заполненную за 30 мин до хроматографирования (для насыщения камеры парами растворителей) подвижной фазой, состоящей из смеси четыреххлористого углерода с ацетоном (все компоненты квалификации "хч" или "чда"). Оптимальное объемное соотношение четыреххлористого углерода и ацетона (20-15):1. Увеличение или уменьшение этого соотношения приводит к размыванию пятен, нечеткому их контуру, а следовательно, к снижению точности и чувствительности анализа. The plate is placed in a chromatographic chamber 16x8x20 cm in size closed with a ground glass plate and filled 30 minutes before chromatography (to saturate the chamber with solvent vapor) by a mobile phase consisting of a mixture of carbon tetrachloride with acetone (all components of qualification "hch" or "analytical grade"). The optimal volumetric ratio of carbon tetrachloride and acetone (20-15): 1. An increase or decrease in this ratio leads to blurring of spots, their fuzzy contour, and, consequently, to a decrease in the accuracy and sensitivity of the analysis.
Количество подвижной фазы в хроматографической камере должно быть таким, чтобы хроматографическая пластинка погружалась в подвижную фазу не более чем на 0,5 см. Пластинку элюируют восходящим способом, высота поднятия фронта подвижной фазы 10 см. Продолжительность элюирования 15-20 мин. Затем пластинку вынимают из камеры, подсушивают на воздухе 5-8 мин и обрабатывают из пульверизатора реактивом Драгендорфа, модифицированным водным раствором аскорбиновой кислоты. The amount of the mobile phase in the chromatographic chamber should be such that the chromatographic plate is immersed in the mobile phase by no more than 0.5 cm. The plate is eluted in an ascending manner, the height of the front of the mobile phase is 10 cm. The elution duration is 15-20 minutes. Then the plate is removed from the chamber, dried in air for 5-8 minutes and treated from the spray with Dragendorf reagent, a modified aqueous solution of ascorbic acid.
Модифицированный реактив Драгендорфа получают растворением 850 мг основного азотнокислого висмута в 40 мл воды и 10 мл уксусной кислоты. В этот раствор добавляют 8 г иодистого калия, растворенного в 20 мл воды. Для обработки хроматограммы 1 мл полученного раствора разбавляют 2 мл уксусной кислоты и 10 мл 0,2%-ного водного раствора аскорбиновой кислоты. Указанная концентрация водного раствора аскорбиновой кислоты является оптимальной. Уменьшение концентрации водного раствора аскорбиновой кислоты приводит к быстрому потемнению фона пластинки, а увеличение концентрации не повышает эффективность действия аскорбиновой кислоты. The modified Dragendorf reagent is prepared by dissolving 850 mg of basic bismuth nitrate in 40 ml of water and 10 ml of acetic acid. 8 g of potassium iodide dissolved in 20 ml of water are added to this solution. To process the chromatogram, 1 ml of the resulting solution was diluted with 2 ml of acetic acid and 10 ml of a 0.2% aqueous solution of ascorbic acid. The indicated concentration of an aqueous solution of ascorbic acid is optimal. A decrease in the concentration of an aqueous solution of ascorbic acid leads to a rapid darkening of the background of the plate, and an increase in the concentration does not increase the effectiveness of ascorbic acid.
После обработки хроматограммы реактивом Драгендорфа, модифицированным аскорбиновой кислотой, проявляются пятна сорбамида оранжевого цвета с соответствующим значением Rf.After processing the chromatogram with Dragendorf reagent modified with ascorbic acid, orange sorbamide spots with a corresponding R f value appear.
Количественное определение проводят или путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен исследуемого вещества и стандартного, или по калибровочной зависимости площади пятна (мм2) от количества (мкг) вещества, или с помощью денситометра по отношению интегральных значений содержания вещества в пятнах пробы и стандартного.Quantitative determination is carried out either by comparing the color intensity and stain area of the test substance and the standard, or by the calibration dependence of the stain area (mm 2 ) on the amount (μg) of the substance, or using a densitometer with respect to the integral values of the substance content in the sample spots and standard.
П р и м е р 1. В мерной колбе готовят раствор сорбамида в ацетоне концентрации 0,05 мг/мл. PRI me R 1. In a volumetric flask prepare a solution of sorbamide in acetone concentration of 0.05 mg / ml
На середину линии старта хроматографической пластинки "Силуфол" наносят в виде пятна 10 мкл этого раствора, что соответствует содержанию сорбамида в пятне 0,5 мкг. По обеим сторонам от пятна пробы наносят в виде отдельных пятен на расстоянии 15 мм друг от друга по 10 мкл стандартных растворов сорбамида с концентрациями 0,05; 0,10; 0,20; 0,40; 0,80; 1,0 мг/мл. Пластинку элюируют в подвижной фазе четыреххлористый углерод + ацетон (15:1) на высоту 10 см, а затем обрабатывают из пульверизатора реактивом Драгендорфа, модифицированным аскорбиновой кислотой. На хроматограмме проявляются четкие оранжевые пятна сорбамида на светло-желтом фоне с Rf 0,42. По калибровочному графику, построенному по зависимости площади стандартных пятен от содержания в них сорбамида, определено в пятне пробы 0,52 мкг. Относительная ошибка определения составляет 5%
П р и м е р 2. Определение проводят аналогично примеру 1, но для модификации реактива Драгендорфа используют 0,1%-ный водный раствор аскорбиновой кислоты. Светло-желтая окраска фона через 6-7 мин темнеет.In the middle of the start line of the Silufol chromatographic plate, 10 μl of this solution is applied as a spot, which corresponds to a sorbamide content of 0.5 μg in the spot. On both sides of the spot, samples are applied as separate spots at a distance of 15 mm from each other, 10 μl of standard solutions of sorbamide with concentrations of 0.05; 0.10; 0.20; 0.40; 0.80; 1.0 mg / ml. The plate is eluted in the mobile phase with carbon tetrachloride + acetone (15: 1) to a height of 10 cm, and then treated with a Dragendorf reagent modified with ascorbic acid from the atomizer. The chromatogram shows clear orange spots of sorbamide on a light yellow background with R f 0.42. According to the calibration graph, constructed according to the dependence of the area of standard spots on the content of sorbamide in them, 0.52 μg was determined in the sample spot. The relative error of determination is 5%
PRI me R 2. The determination is carried out analogously to example 1, but to modify the Dragendorf reagent using a 0.1% aqueous solution of ascorbic acid. The light yellow color of the background darkens after 6-7 minutes.
П р и м е р 3. Определение проводят аналогично примеру 1, но для модификации реактива Драгендорфа используют 0,4%-ный водный раствор аскорбиновой кислоты. Результат определения совпадает с результатом примера 1. PRI me R 3. The determination is carried out analogously to example 1, but to modify the Dragendorff reagent using a 0.4% aqueous solution of ascorbic acid. The result of the determination coincides with the result of example 1.
П р и м е р 4. Определение проводят аналогично примеру 1, но на хроматографическую пластинку наносят 10 мкл ацетонового раствора сорбамида концентрации 0,5 мк/мл, что соответствует содержанию сорбамида в пятне 5 мкг. Обнаружено 5,25 мкг. Значение Rf 0,43. Относительная ошибка определения 5%
П р и м е р 5. Определение проводят аналогично примеру 1, но на хроматографическую пластинку наносят 10 мкл ацетонового раствора сорбамида концентрации 1 мг/мл, что соответствует содержанию сорбамида в пятне 10 мкл. Обнаружено 9,5 мкг. Относительная ошибка определения 5% Значение Rf 0,44.PRI me R 4. The determination is carried out analogously to example 1, but on the chromatographic plate is applied 10 μl of acetone solution of sorbamide concentration of 0.5 μ / ml, which corresponds to the content of sorbamide in the spot 5 μg. Detected 5.25 mcg. The value of R f 0.43. 5% relative error
PRI me R 5. The determination is carried out analogously to example 1, but on the chromatographic plate is applied 10 μl of acetone solution of sorbamide concentration of 1 mg / ml, which corresponds to the content of sorbamide in the spot 10 μl. Detected 9.5 mcg. The relative error of determination is 5%. The value of R f is 0.44.
П р и м е р 6. Определение проводят аналогично примеру 1, но объемное соотношение компонентов подвижной фазы четыреххлористый углерод + ацетон составляет 20: 1. Значение Rf сорбамида 0,42. Предел обнаружения 0,5 мкг. Относительная ошибка определения 5%
П р и м е р 7. Определение проводят аналогично примеру 1, но объемное соотношение компонентов подвижной фазы четыреххлористый углерод + ацетон составляет 7:1. Значение Rf сорбамида 0,72. Предел обнаружения 1 мкг. Пятно сорбамида нечеткое, размытое. Относительная ошибка определения 9,8%
П р и м е р 8. Определение проводят аналогично примеру 1, но объемное соотношение компонентов подвижной фазы четыреххлористый углерод + ацетон составляет 30:1. Значение Rf сорбамида 0,35. Предел обнаружения 1 мкг. Пятно нечеткое. Относительная ошибка определения 10,2%
П р и м е р 9. Определение проводят аналогично примеру 1, но для обработки хроматограмм используют реактив Драгендорфа без модификации его водным раствором аскорбиновой кислоты. Пятно сорбамида на хроматограмме маскируется темно-синим фоном. Определение невозможно.PRI me R 6. The determination is carried out analogously to example 1, but the volume ratio of the components of the mobile phase carbon tetrachloride + acetone is 20: 1. The value of R f sorbamide 0,42. The detection limit is 0.5 mcg. 5% relative error
PRI me R 7. The determination is carried out analogously to example 1, but the volume ratio of the components of the mobile phase carbon tetrachloride + acetone is 7: 1. The value of R f sorbamide 0.72. The detection limit is 1 mcg. The spot of sorbamide is fuzzy, blurry. Relative error in determining 9.8%
PRI me R 8. The determination is carried out analogously to example 1, but the volume ratio of the components of the mobile phase carbon tetrachloride + acetone is 30: 1. The value of R f sorbamide 0.35. The detection limit is 1 mcg. The spot is fuzzy. The relative error in the determination of 10.2%
PRI me R 9. The determination is carried out analogously to example 1, but for the processing of chromatograms using Dragendorf reagent without modifying it with an aqueous solution of ascorbic acid. The sorbamide spot in the chromatogram is masked by a dark blue background. Definition is impossible.
П р и м е р 10. Определение проводят аналогично примеру 1, но используют хроматографическую пластину "Армсорб". Значение Rf для сорбамида 0,87. Предел обнаружения 0,5 мкг. Относительная ошибка определения 5%
П р и м е р 11. 200 мл молока с содержанием сорбамида 0,005 мг/л вливают в 300 мл ацетона, выдерживают в течение 15 мин, затем фильтруют под вакуумом, остаток на фильтре промывают 20 мл ацетона. Фильтрат переносят в колбу с притертой пробкой, вносят 40 г хлористого натрия, закрывают пробкой и интенсивно встряхивают до появления эмульсии (1-3 мин). Эмульсию сливают в делительную воронку и экстрагируют сорбамид тремя порциями гексана по 100 мл. Гексановые экстракты объединяют, осушают, пропуская через слой безводного сульфата натрия (80 г), упаривают до отсутствия запаха растворителя. Маслянистый остаток растворяют в 1-2 мл гексана и переносят в колонку с оксидом алюминия, обмывая колбу 2-3 раза такими же порциями гексана. Гексан отсасывают под вакуумом, колонку элюируют со скоростью 80-100 капель в минуту сначала 30 мл гексана (элюат отбрасывают), а затем смесью (10 мл) гексан + ацетон в объемном соотношении 50:1. Этот элюат упаривают досуха. Остаток растворяют в 2 мл гексана, а затем испаряют в слабом токе воздуха до объема 0,2-0,3 мл. Этот объем с помощью микрошприца или стеклянного капилляра наносят на хроматографическую пластинку "Силуфол" и проводят определение аналогично примеру 1. Значение Rf сорбамида 0,43. В анализируемой пробе обнаружено 0,004 мг/л сорбамида. Суммарная относительная погрешность определения 20%
П р и м е р 12. 40 г измельченного говяжьего мяса с содержанием сорбамида 0,05 мг/кг экстрагируют дважды смесью 60 мл ацетона с 10 мл воды, встряхивая каждый раз по 30 мин, и фильтруют под вакуумом. Остаток на фильтре промывают 20 мл ацетона. В объединенный фильтрат вносят 30 г хлористого натрия и интенсивно встряхивают до появления эмульсии. Эмульсию сливают в делительную воронку и экстрагируют гексаном тремя порциями по 60 мл. Объединенные экстракты осушают, пропуская через слой безводного сульфата натрия (40 г). Экстракт упаривают до отсутствия запаха растворителей и далее поступают как в примере 11. Значение Rf сорбамида 0,43. Количество вещества, определенное в пробе, соответствует содержанию сорбамида 0,04 мг/кг. Суммарная относительная ошибка определения 20%
П р и м е р 13. Определение проводят аналогично примеру 11, но анализируемая проба молока содержит 0,002 мг/кг сорбамида. Обнаружено пятно сорбамида, не поддающееся количественному определению.PRI me R 10. The determination is carried out analogously to example 1, but use the chromatographic plate Armsorb. The value of R f for sorbamide is 0.87. The detection limit is 0.5 mcg. 5% relative error
PRI me R 11. 200 ml of milk with a sorbamide content of 0.005 mg / l are poured into 300 ml of acetone, kept for 15 minutes, then filtered under vacuum, the residue on the filter is washed with 20 ml of acetone. The filtrate was transferred to a flask with a ground stopper, 40 g of sodium chloride were added, closed with a stopper and shaken vigorously until an emulsion appeared (1-3 min). The emulsion is poured into a separatory funnel and sorbamide is extracted with three 100 ml portions of hexane. Hexane extracts are combined, dried, passing through a layer of anhydrous sodium sulfate (80 g), evaporated to an odorless solvent. The oily residue is dissolved in 1-2 ml of hexane and transferred to a column of aluminum oxide, washing the flask 2-3 times with the same portions of hexane. Hexane is suctioned off under vacuum, the column is eluted at a rate of 80-100 drops per minute, first 30 ml of hexane (the eluate is discarded) and then with a mixture (10 ml) of hexane + acetone in a volume ratio of 50: 1. This eluate is evaporated to dryness. The residue is dissolved in 2 ml of hexane, and then evaporated in a weak stream of air to a volume of 0.2-0.3 ml. This volume is applied using a microsyringe or a glass capillary onto a Silufol chromatographic plate and is determined analogously to Example 1. The value of R f of sorbamide is 0.43. In the analyzed sample, 0.004 mg / l sorbamide was detected. The total relative error of determination of 20%
PRI me R 12. 40 g of chopped beef with a sorbamide content of 0.05 mg / kg is extracted twice with a mixture of 60 ml of acetone with 10 ml of water, shaking each time for 30 minutes, and filtered under vacuum. The filter residue is washed with 20 ml of acetone. Into the combined filtrate add 30 g of sodium chloride and shake vigorously until an emulsion appears. The emulsion is poured into a separatory funnel and extracted with hexane in three portions of 60 ml. The combined extracts are dried by passing through a layer of anhydrous sodium sulfate (40 g). The extract was evaporated to an odorless solvent and then proceed as in example 11. The value of R f sorbamide 0,43. The amount of substance determined in the sample corresponds to a sorbamide content of 0.04 mg / kg. The total relative error of determination of 20%
PRI me R 13. The determination is carried out analogously to example 11, but the analyzed sample of milk contains 0.002 mg / kg of sorbamide. A sorbamide spot that cannot be quantified has been detected.
Таким образом, данный способ позволяет:
проводить определение сорбамида в молоке и мясе;
расширить возможность анализа сорбамида методом тонкослойной хроматографии за счет применения наряду с нестандартными пластинками с тонким слоем сорбента, закрепленного сернокислым кальцием или гипсом, стандартных хроматографических пластинок с тонким слоем сорбента, закрепленного крахмалом;
повысить селективность анализа за счет применения в качестве подвижной фазы смеси четыреххлористого углерода и ацетона в объемном соотношении (20-15): 1, что позволяет получать четкое пятно сорбамида, а также отделять пятно сорбамида от мешающих коэкстрактивных веществ, извлекаемых при экстракции из молока и мяса;
увеличить точность за счет применения стандартных хроматографических пластинок;
увеличить чувствительность за счет обработки хроматограмм реактивом Драгендорфа, модифицированным 0,2%-ным водным раствором аскорбиновой кислоты, для осветления фона на хроматограмме.Thus, this method allows you to:
determine sorbamide in milk and meat;
expand the ability to analyze sorbamide by thin layer chromatography by using, along with non-standard plates with a thin layer of sorbent, fixed with calcium sulfate or gypsum, standard chromatographic plates with a thin layer of sorbent fixed with starch;
to increase the analysis selectivity due to the use of a mixture of carbon tetrachloride and acetone as a mobile phase in a volume ratio (20-15): 1, which allows to obtain a clear sorbamide spot, as well as to separate the sorbamide spot from interfering coextracting substances extracted from milk and meat ;
increase accuracy through the use of standard chromatographic plates;
increase sensitivity by treating the chromatograms with Dragendorf's reagent, modified with a 0.2% aqueous solution of ascorbic acid, to brighten the background on the chromatogram.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4931586 RU2034295C1 (en) | 1991-04-29 | 1991-04-29 | Method for determination of residual amount of pesticides in milk and meat |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4931586 RU2034295C1 (en) | 1991-04-29 | 1991-04-29 | Method for determination of residual amount of pesticides in milk and meat |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2034295C1 true RU2034295C1 (en) | 1995-04-30 |
Family
ID=21572014
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU4931586 RU2034295C1 (en) | 1991-04-29 | 1991-04-29 | Method for determination of residual amount of pesticides in milk and meat |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2034295C1 (en) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005048683A1 (en) * | 2003-10-29 | 2005-06-02 | Syngenta Participations Ag | Method and device for direct quantitative determination of pesticide seed loading on individual seeds |
| CN102338779A (en) * | 2010-07-28 | 2012-02-01 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | Method for detecting sorbic acid content in cheese |
| CN103645079A (en) * | 2013-12-05 | 2014-03-19 | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | Preparation method and application of standard sample for detecting pesticide residue by taking paprika as matrix |
| CN104807912A (en) * | 2015-05-13 | 2015-07-29 | 梧州市产品质量检验所 | Method for detecting sorbic acid in food |
| RU2581456C1 (en) * | 2014-10-10 | 2016-04-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ВГУ") | Method for identification and quantitative determination of ascorbic acid |
-
1991
- 1991-04-29 RU SU4931586 patent/RU2034295C1/en active
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 1. Новикова К.Ф., Меерзон И.Л. и др. Методические указания по определению ФДН / N, N-диметил- NI -(3-хлорфенил) -гуанидин) в огурцах, бахчевых и воде методом тонкослойной хроматографии. - В сб. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде, часть XI. М.: Госкомиссия по ХСЗР при МСХ СССР, 1981, с.139-148. * |
| 2. Методические указания на хроматографическое определение дифенамида в воздухе. - В сб. Методические указания на определение вредных веществ в воздухе, вып. XYI. -М.: Минздрав СССР, 1980, с.71-81. * |
| 3. Красных А.А. и Павлова Л.Г. Временные методические указания по определению эвисекта в растительной продукции, почве и воде хроматографией в тонком слое. - В сб. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде, часть ХШ. -М.: Госкомиссия по ХСЗР при МСХ СССР, 1983, с.182-187. * |
| 4. Шаршунова М., Шварц В. и Михалец Ч. Тонкослойная хроматография в фармации и биохимии, т.2. -М.: Мир, 1980, с.584-585. * |
| 5. Хроматография в тонких слоях. /Под ред. Э.Шталя. - М.: Мир, 1965, с.482. * |
| 6. Ботвиньева А.М. Метод определения хлорофоса в молоке тонкослойной хроматографией. Труды П Всесоюзного совещания по исследованию остатков пестицидов и профилактике загрязнения ими продуктов питания, кормов и внешней среды. Методы анализа. - Таллин, 1971, с.133-135. * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005048683A1 (en) * | 2003-10-29 | 2005-06-02 | Syngenta Participations Ag | Method and device for direct quantitative determination of pesticide seed loading on individual seeds |
| CN102338779A (en) * | 2010-07-28 | 2012-02-01 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | Method for detecting sorbic acid content in cheese |
| CN103645079A (en) * | 2013-12-05 | 2014-03-19 | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | Preparation method and application of standard sample for detecting pesticide residue by taking paprika as matrix |
| CN103645079B (en) * | 2013-12-05 | 2016-03-30 | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | Take chilli powder as preparation method and the application of the Detecting Pesticide standard model of matrix |
| RU2581456C1 (en) * | 2014-10-10 | 2016-04-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "ВГУ") | Method for identification and quantitative determination of ascorbic acid |
| CN104807912A (en) * | 2015-05-13 | 2015-07-29 | 梧州市产品质量检验所 | Method for detecting sorbic acid in food |
| CN104807912B (en) * | 2015-05-13 | 2016-05-18 | 梧州市产品质量检验所 | Detect the method for sorbic acid in food |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kamimura et al. | Simultaneous detection of several Fusarium mycotoxins in cereals, grains, and foodstuffs | |
| Reynolds et al. | Clinical analysis for the anti-neoplastic agent 1, 4-dihydroxy-5, 8-bis {{2-[(2-hydroxyethyl) amino] ethyl} amino} 9, 10-anthracenedione dihydrochloride (NSC 301739) in plasma: Application of temperature control to provide selectivity in paired-ion high-performance liquid chromatography | |
| RU2034295C1 (en) | Method for determination of residual amount of pesticides in milk and meat | |
| Ikai et al. | Improvement of chemical analysis of antibiotics: XIII. Systematic simultaneous analysis of residual tetracyclines in animal tissues using thin-layer and high-performance liquid chromatography | |
| Vartiainen et al. | The determination of traces of fluoroacetic acid by extractive alkylation, pentafluorobenzylation and capillary gas chromatography-mass spectrometry | |
| Bazzanella et al. | Determination of inorganic anions, carboxylic acids and amino acids in plant matrices by capillary zone electrophoresis | |
| Iwase et al. | Determination of cyanocobalamin in foods by high-performance liquid chromatography with visible detection after solid-phase extraction and membrane filtration for the precolumn separation of lipophilic species | |
| Fujimoto et al. | Determination of penicillic acid and patulin by gas-liquid chromatography with an electron-capture detector | |
| Swarbrick et al. | Post-column electrochemical oxidation of leuco malachite green for the analysis of rainbow trout flesh using HPLC with absorbance detection | |
| Lambou | Mobilities of Some Polyols, Sugars, Acids, and Other Compounds | |
| Kirchmann et al. | The electrochemical detection of penicillins in milk | |
| Takatsuki | Gas chromatographic—mass spectrometric determination of oxolinic acid in fish selected ion monitoring | |
| Cohen et al. | High pressure liquid chromatographic determination of vitamin D3 in instant nonfat dried milk | |
| Brown-Thomas et al. | Determination of glycyrrhetinic acid in human plasma by high-performance liquid chromatography | |
| Khazanchi et al. | Detection and separation of fenpropathrin, flucythrinate, fluvalinate, and PP 321 by thin-layer chromatography | |
| RU2056044C1 (en) | Method of quantitative determination of patulin in foods | |
| Giri et al. | Circular paper chromatographic method for estimation of thiamine and riboflavin in multivitamin preparations | |
| SU726479A1 (en) | Method of quantitative determining of zearalenon in animal tissues | |
| SU1097937A1 (en) | Method of determination of stereoisomers of 7,9-dodecadiene-1-ilacetate | |
| Ismail et al. | New, Improved Thin Layer Chromatography for Poly chlorinated Biphenyls, Toxaphene, and Chlordane Components | |
| SU1062600A1 (en) | Method of determination of compounds containing 1,1'-dimethyl-4,4'-dipyridinium cation | |
| RU2037824C1 (en) | Method of simultaneous qualitative and quantitative assay of cadmium, lead, zinc, nickel and copper | |
| RU2151391C1 (en) | Method for separate determination of o-chlorophenol and 2,6- dichlorophenol | |
| SU1385069A1 (en) | Quantitative method of determining adipinic and sebatic acids their mono-and-dimethyl ethers | |
| SU1120237A1 (en) | Method of determining amount of phenothiaze in honey |