Claims (157)
1. Выделенное антитело против CLDN18.2 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, способные связываться с эпитопом, содержащие по меньшей мере один, два или три аминокислотных остатка в положениях D28, W30, V43, N45, Y46, L49, W50, R51, R55, E56, F60, E62, Y66, L72, L76, V79 и R80 в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 30.1. An isolated antibody against human CLDN18.2 or an antigen-binding fragment thereof, capable of binding to an epitope containing at least one, two or three amino acid residues at positions D28, W30, V43, N45, Y46, L49, W50, R51, R55, E56, F60, E62, Y66, L72, L76, V79 and R80 in amino acid sequence SEQ ID NO: 30.
2. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где эпитоп содержит аминокислотный остаток в положении E56.2. An isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 1, where the epitope contains an amino acid residue at position E56.
3. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1 или 2, где эпитоп не содержит по меньшей мере один из следующих остатков: A42, или N45.3. The isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 1 or 2, where the epitope does not contain at least one of the following residues: A42, or N45.
4. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где эпитоп содержит аминокислотный остаток в положении W30, L49, W50, R55 и E56.4. An isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding claims, wherein the epitope contains an amino acid residue at positions W30, L49, W50, R55 and E56.
5. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где эпитоп дополнительно содержит один или несколько аминокислотных остатков: T41, N45, Y46, R51, F60, E62 и R80.5. An isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding paragraphs, where the epitope additionally contains one or more amino acid residues: T41, N45, Y46, R51, F60, E62 and R80.
6. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где эпитоп дополнительно содержит один или несколько аминокислотных остатков: D28, V43, N45, Y46, Y66, L72, L76 и V79.6. An isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding paragraphs, where the epitope additionally contains one or more amino acid residues: D28, V43, N45, Y46, Y66, L72, L76 and V79.
7. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, способные специфически связываться с CLDN18.2 человека и обладающие по меньшей мере одной из следующих характеристик:7. An isolated antibody or antigen-binding fragment thereof capable of specifically binding to human CLDN18.2 and having at least one of the following characteristics:
связывание с клеткой, экспрессирующей CLDN18.2 человека со значением Kd не более чем 2,5 нМ (или не более чем 2,0, 1,5, 1, 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4 нМ), как определено анализом KinExA;binding to a cell expressing human CLDN18.2 with a Kd value of no more than 2.5 nM (or no more than 2.0, 1.5, 1, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 0.4 nM) as determined by KinExA assay;
связывание с клеткой, экспрессирующей CLDN18.2 человека при значении EC50 не более чем 70 мкг/мл (или не более чем 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 12, или 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 мкг/мл), как определено анализом проточной цитометрии;binding to a cell expressing human CLDN18.2 with an EC50 value of no more than 70 μg/ml (or no more than 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 12, or 10 , 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, or 1 μg/ml) as determined by flow cytometry analysis;
индуцирование комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC) на клетке, экспрессирующей CLDN18.2 человека при значении EC50 не более чем 1 мкг/мл (или не более чем 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5 мкг/мл), как определено анализом цитотоксичности,induction of complement-dependent cytotoxicity (CDC) on a cell expressing human CLDN18.2 with an EC50 value of no more than 1 μg/ml (or no more than 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5 µg/ml), as determined by cytotoxicity assay,
индуцирование антителозависимой цитотоксичности (ADCC) на клетке, экспрессирующей CLDN18.2 человека при значении EC50 не более чем 2 мкг/мл (или не более чем 1,9, 1,8, 1,7, 1,6, 1,5, 1,4, 1,3, 1,2, 1,1, 1,0, 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2, или 0,1 мкг/мл), как определено анализом с использованием репортерного гена ADCC.inducing antibody-dependent cytotoxicity (ADCC) on a cell expressing human CLDN18.2 with an EC50 value of no more than 2 μg/ml (or no more than 1.9, 1.8, 1.7, 1.6, 1.5, 1 ,4, 1.3, 1.2, 1.1, 1.0, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 0.4, 0.3, 0.2 , or 0.1 μg/ml), as determined by the ADCC reporter gene assay.
8. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.7, где клетка содержит клетку NUGC4, клетку SNU-620, клетку SNU-601, клетку KATOIII или сравнимую с ними клетку, имеющую уровень экспрессии человеческого белка CLDN18.2, сравнимый или не превышающий уровень с таковым у клетки NUGC4, клетки SNU-620, клетки SNU-601 или клетки KATOIII.8. The isolated antibody or antigen-binding fragment thereof of claim 7, wherein the cell comprises a NUGC4 cell, a SNU-620 cell, an SNU-601 cell, a KATOIII cell, or a comparable cell having a level of expression of human CLDN18.2 protein comparable to or not greater than level with that of a NUGC4 cell, SNU-620 cell, SNU-601 cell, or KATOIII cell.
9. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.7, где клетка содержит клетку CLDN18.2 человека с высокой степенью экспрессии, клетку CLDN18.2 человека со средней степенью экспрессии или клетку CLDN18.2 человека с низкой степенью экспрессии, где клетка CLDN18.2 человека с высокой степенью экспрессии экспрессирует CLDN18.2 человека с интенсивностью по меньшей мере 2+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где по меньшей мере 40% клеток окрашиваются положительно при иммуногистохимическом исследовании (IHC); клетка CLDN18.2 человека со средней степенью экспрессии экспрессирует CLDN18.2 человека с интенсивностью по меньшей мере 1+ и ниже 2+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где по меньшей мере 30%, но ниже 40% клеток окрашиваются положительно при IHC; и клетка CLDN18.2 человека с низкой степенью экспрессии экспрессирует CLDN18.2 человека с интенсивностью около 0, но ниже 1+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где около 0, но ниже 30% клеток окрашиваются положительно при IHC.9. The isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 7, wherein the cell comprises a high-expressing human CLDN18.2 cell, a moderate-expressing human CLDN18.2 cell, or a low-expressing human CLDN18.2 cell, wherein the CLDN18 cell. Highly expressing human 2 expresses human CLDN18.2 at an intensity of at least 2+, as determined by IHC, and at a level where at least 40% of cells stain positive by immunohistochemistry (IHC); a moderately expressing human CLDN18.2 cell expresses human CLDN18.2 with an intensity of at least 1+ and less than 2+, as determined by IHC, and at a level where at least 30% but less than 40% of cells stain positive with IHC; and a low-expressing human CLDN18.2 cell expresses human CLDN18.2 at an intensity of about 0 but below 1+ as determined by IHC, and at a level where about 0 but below 30% of cells stain positive by IHC.
10. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.7, где значение EC50 для связывания с клетками NUGC4 составляет не более чем 70 мкг/мл (или не более чем 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 12 или 10 мкг/мл).10. The isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 7, wherein the EC50 value for binding to NUGC4 cells is no more than 70 μg/ml (or no more than 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 12 or 10 µg/ml).
11. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.7, где ADCC на клетках NUGC4 при значении EC50 не более чем 2 мкг/мл (или не более чем 1,9, 1,8, 1,7, 1,6, 1,5, 1,4, 1,3, 1,2, 1,1, 1,0, 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2 или 0,1 мкг/мл), как определено анализом с использованием репортерного гена ADCC.11. An isolated antibody or an antigen-binding fragment thereof according to claim 7, where ADCC on NUGC4 cells with an EC50 value of not more than 2 μg/ml (or not more than 1.9, 1.8, 1.7, 1.6, 1 .5, 1.4, 1.3, 1.2, 1.1, 1.0, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 0.4, 0.3 , 0.2 or 0.1 μg/ml), as determined by the ADCC reporter gene assay.
12. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, способные специфически связываться с CLDN18.2 человека и обладают по меньшей мере одной из следующих характеристик:12. An isolated antibody or antigen-binding fragment thereof capable of specifically binding to human CLDN18.2 and having at least one of the following characteristics:
связывание с CLDN18.2 человека при значении Kd не более чем 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 15% от такового для IMAB362, как определено анализом KinExA;binding to human CLDN18.2 at a Kd value of no more than 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 15% of that of IMAB362 as determined by the KinExA assay;
связывание с клеткой, экспрессирующей CLDN18.2 человека или мыши при значении EC50 не более чем 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 15% или 10% от такового для IMAB362, как определено анализом проточной цитометрии;binding to a cell expressing human or murine CLDN18.2 at an EC50 value of no more than 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 15%, or 10% of that of IMAB362, as determined flow cytometry analysis;
индуцирование комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC) на клетке, экспрессирующей CLDN18.2 человека при значении EC50 не более чем 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10% или 5% от такового для IMAB362, как определено анализом цитотоксичности; иinducing complement dependent cytotoxicity (CDC) on a cell expressing human CLDN18.2 at an EC50 value of no more than 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10% or 5% of that for IMAB362, as determined by cytotoxicity assay; And
индуцирование антителозависимой цитотоксичности (ADCC) на клетке, экспрессирующей CLDN18.2 человека при значении EC50 не более чем 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5% или 1% от такового для IMAB362, как определено анализом с использованием репортерного гена ADCC,inducing antibody-dependent cytotoxicity (ADCC) on a cell expressing human CLDN18.2 at an EC50 value of no more than 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5% or 1% of that of IMAB362, as determined by the ADCC reporter gene assay,
где IMAB362 представляет собой антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 73.where IMAB362 is an antibody comprising a heavy chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 72, and a light chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 73.
13. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.12, где клетка содержит клетку NUGC4, клетку SNU-620, клетку SNU-601, клетку KATOIII, или клеточную линию, имеющую уровень экспрессии человеческого белка CLDN18.2, сравнимый или не превышающий уровень с таковым у клетки NUGC4, клетки SNU-620, клетки SNU-601 или клетки KATOIII.13. The isolated antibody or antigen-binding fragment thereof of claim 12, wherein the cell comprises a NUGC4 cell, a SNU-620 cell, an SNU-601 cell, a KATOIII cell, or a cell line having a level of expression of human CLDN18.2 protein comparable to or no greater than that of with that of a NUGC4 cell, a SNU-620 cell, a SNU-601 cell, or a KATOIII cell.
14. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.12, где клетка содержит клетку CLDN18.2 человека с высокой степенью экспрессии, клетку CLDN18.2 человека со средней степенью экспрессии, или клетку CLDN18.2 человека с низкой степенью экспрессии, где клетка CLDN18.2 человека с высокой степенью экспрессии экспрессирует CLDN18.2 человека с интенсивностью по меньшей мере 2+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где по меньшей мере 40% клеток окрашиваются положительно при IHC; клетка CLDN18.2 человека со средней степенью экспрессии экспрессирует CLDN18.2 человека с интенсивностью по меньшей мере 1+ и ниже 2+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где по меньшей мере 30%, но ниже 40% клеток окрашиваются положительно при IHC; и клетка CLDN18.2 человека с низкой степенью экспрессии экспрессирует CLDN18.2 человека с интенсивностью около 0, но ниже 1+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где около 0, но ниже 30% клеток окрашиваются положительно при IHC.14. The isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 12, wherein the cell comprises a high-expressing human CLDN18.2 cell, a moderate-expressing human CLDN18.2 cell, or a low-expressing human CLDN18.2 cell, wherein the CLDN18 cell .2 highly expressive human expresses human CLDN18.2 with an intensity of at least 2+, as determined by IHC, and at a level where at least 40% of cells stain positive by IHC; a moderately expressing human CLDN18.2 cell expresses human CLDN18.2 with an intensity of at least 1+ and less than 2+, as determined by IHC, and at a level where at least 30% but less than 40% of cells stain positive with IHC; and a low-expressing human CLDN18.2 cell expresses human CLDN18.2 at an intensity of about 0 but below 1+ as determined by IHC, and at a level where about 0 but below 30% of cells stain positive by IHC.
15. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.7-14, где антитело связывается с эпитопом, содержащим по меньшей мере один, два или три аминокислотных остатка в положениях D28, W30, V43, N45, Y46, L49, W50, R51, R55, E56, F60, E62, Y66, L72, L76, V79 и R80 в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 30, необязательно, эпитоп содержит аминокислотный остаток в положении E56; необязательно, эпитоп не содержит по меньшей мере один из следующих остатков: A42, или N45; необязательно, эпитоп содержит аминокислотный остаток в положении W30, L49, W50, R55 и E56; необязательно, эпитоп дополнительно содержит один или несколько аминокислотных остатков: T41, N45, Y46, R51, F60, E62 и R80; и необязательно, эпитоп дополнительно содержит один или несколько аминокислотных остатков: D28, V43, N45, Y46, Y66, L72, L76 и V79.15. An isolated antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 7 to 14, where the antibody binds to an epitope containing at least one, two or three amino acid residues at positions D28, W30, V43, N45, Y46, L49, W50, R51, R55, E56, F60, E62, Y66, L72, L76, V79 and R80 in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 30, optionally, the epitope contains the amino acid residue at position E56; optionally, the epitope does not contain at least one of the following residues: A42, or N45; optionally, the epitope contains the amino acid residue at positions W30, L49, W50, R55 and E56; optionally, the epitope further comprises one or more amino acid residues: T41, N45, Y46, R51, F60, E62 and R80; and optionally, the epitope further comprises one or more amino acid residues: D28, V43, N45, Y46, Y66, L72, L76 and V79.
16. Анти-CLDN18.2 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие последовательности тяжелых цепей HCDR1, HCDR2 и HCDR3 и/или легких цепей LCDR1, LCDR2 и LCDR3, где:16. Anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof, containing sequences of heavy chains HCDR1, HCDR2 and HCDR3 and/or light chains LCDR1, LCDR2 and LCDR3, where:
последовательность HCDR1 содержит GYNMN (SEQ ID NO: 1), или TYFIGVG (SEQ ID NO: 13), или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей;the HCDR1 sequence contains GYNMN (SEQ ID NO: 1), or TYFIGVG (SEQ ID NO: 13), or a homologous sequence with at least 80% sequence identity;
последовательность HCDR2 содержит X1IDPYYX2X3TX4YNQKFX5G (SEQ ID NO: 32), или HIWWNDNKYYNTALKS (SEQ ID NO: 15), или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей;the HCDR2 sequence contains X 1 IDPYYX 2 X 3 TX 4 YNQKFX 5 G (SEQ ID NO: 32), or HIWWNDNKYYNTALKS (SEQ ID NO: 15), or a homologous sequence with at least 80% sequence identity;
последовательность HCDR3 содержит X6X7X8GNAFDY (SEQ ID NO: 33), или MGSGAWFTY (SEQ ID NO: 17), или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей;the HCDR3 sequence contains X 6 X 7 X 8 GNAFDY (SEQ ID NO: 33), or MGSGAWFTY (SEQ ID NO: 17), or a homologous sequence with at least 80% sequence identity;
последовательность LCDR1 содержит KSSQX9L×10NX11GNX12KNYLT (SEQ ID NO: 34) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей;the LCDR1 sequence contains KSSQX 9 L×10NX 11 GNX 12 KNYLT (SEQ ID NO: 34) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity;
последовательность LCDR2 содержит WASTRX13S (SEQ ID NO: 35) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей;the LCDR2 sequence contains WASTRX 13 S (SEQ ID NO: 35) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity;
последовательность LCDR3 содержит QNDYX14X15PX16T (SEQ ID NO: 36) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей;the LCDR3 sequence contains QNDYX 14 X 15 PX 16 T (SEQ ID NO: 36) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity;
где X1 представляет собой N или Y или H, X2 представляет собой G или V, X3 представляет собой A или G или T, X4 представляет собой R или T или S, X5 представляет собой K или R, X6 представляет собой S или M, X7 представляет собой Y или F, X8 представляет собой Y или H, X9 представляет собой S или N, X10 представляет собой L или F, X11 представляет собой S или N, X12 представляет собой Q или L, X13 представляет собой E или K, X14 представляет собой S или Y, X15 представляет собой F или Y и X16 представляет собой F или L.where X 1 is N or Y or H, X 2 is G or V, X 3 is A or G or T, X 4 is R or T or S, X 5 is K or R, X 6 is is S or M, X 7 is Y or F, X 8 is Y or H, X 9 is S or N, X 10 is L or F, X 11 is S or N, X 12 is Q or L, X 13 is E or K, X 14 is S or Y, X 15 is F or Y, and X 16 is F or L.
17. Анти-CLDN18.2 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, где вариабельная область тяжелой цепи содержит:17. Anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof, where the heavy chain variable region contains:
HCDR1 содержит последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 13,HCDR1 contains a sequence selected from SEQ ID NO: 1 and SEQ ID NO: 13,
HCDR2 содержит последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 19 и SEQ ID NO: 22, иHCDR2 contains a sequence selected from SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 19 and SEQ ID NO: 22, and
HCDR3 содержит последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 17 и SEQ ID NO: 21,HCDR3 contains a sequence selected from SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 17 and SEQ ID NO: 21,
и/илиand/or
вариабельную область легкой цепи, содержащую:light chain variable region containing:
LCDR1 содержит последовательность SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 14 и SEQ ID NO: 20,LCDR1 contains the sequence SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 14 and SEQ ID NO: 20,
LCDR2 содержит последовательность SEQ ID NO: 4 и SEQ ID NO: 16, иLCDR2 contains the sequence SEQ ID NO: 4 and SEQ ID NO: 16, and
LCDR3 содержит последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 12 и SEQ ID NO: 18.LCDR3 contains a sequence selected from SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 12 and SEQ ID NO: 18.
18. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где вариабельная область тяжелой цепи выбрана из группы, включающей:18. An antibody or antigen-binding fragment thereof as claimed in any one of the preceding claims, wherein the heavy chain variable region is selected from the group consisting of:
вариабельную область тяжелой цепи, содержащую HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 3, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 5;a heavy chain variable region comprising HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 3, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 5;
вариабельную область тяжелой цепи, содержащую HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 7, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 5;a heavy chain variable region comprising HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 7, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 5;
вариабельную область тяжелой цепи, содержащую HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 9, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 11;a heavy chain variable region comprising HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 9, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 11;
вариабельную область тяжелой цепи, содержащую HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 13, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 15, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 17;a heavy chain variable region comprising HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 13, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 15, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 17;
вариабельную область тяжелой цепи, содержащую HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 19, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 21; иa heavy chain variable region comprising HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 19, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 21; And
вариабельную область тяжелой цепи, содержащую HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 22, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 5.a heavy chain variable region comprising HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 22, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 5.
19. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где вариабельная область легкой цепи выбрана из группы, включающей:19. An antibody or antigen-binding fragment thereof as claimed in any one of the preceding claims, wherein the light chain variable region is selected from the group consisting of:
вариабельную область легкой цепи, содержащую LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 2, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 6;a light chain variable region comprising LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 2, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 6;
вариабельную область легкой цепи, содержащую LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 2, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 8;a light chain variable region comprising LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 2, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 8;
вариабельную область легкой цепи, содержащую LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 10, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 6;a light chain variable region comprising LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 10, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 6;
вариабельную область легкой цепи, содержащую LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 2, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 12;a light chain variable region comprising LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 2, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 12;
вариабельную область легкой цепи, содержащую LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 14, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 16, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 18; иa light chain variable region comprising LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 14, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 16, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 18; And
вариабельную область легкой цепи, содержащую LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 20, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 6.a light chain variable region comprising LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 20, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 6.
20. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где:20. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding paragraphs, where:
вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 3, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 5; и вариабельная область легкой цепи содержит LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 2, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 6;the heavy chain variable region comprises HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 3, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 5; and the light chain variable region comprises LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 2, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 6;
вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 7, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 5; и вариабельная область легкой цепи содержит LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 2, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 8;the heavy chain variable region comprises HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 7, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 5; and the light chain variable region comprises LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 2, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 8;
вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 9, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 11; и вариабельная область легкой цепи содержит LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 10, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 6;the heavy chain variable region contains HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 9, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 11; and the light chain variable region comprises LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 10, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 6;
вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 13, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 15, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 17; и вариабельная область легкой цепи содержит LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 2, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 12;the heavy chain variable region comprises HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 13, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 15, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 17; and the light chain variable region comprises LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 2, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 12;
вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 19, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 21; и вариабельная область легкой цепи содержит LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 14, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 16, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 18; илиthe heavy chain variable region contains HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 19, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 21; and the light chain variable region comprises LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 14, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 16, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 18; or
вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1, HCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 22, и HCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 5; и вариабельная область легкой цепи содержит LCDR1, содержащую последовательность SEQ ID NO: 20, LCDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4, и LCDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 6.the heavy chain variable region contains HCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 1, HCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 22, and HCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 5; and the light chain variable region comprises LCDR1 containing the sequence of SEQ ID NO: 20, LCDR2 containing the sequence of SEQ ID NO: 4, and LCDR3 containing the sequence of SEQ ID NO: 6.
21. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, дополнительно содержащие одну или несколько тяжелых цепей HFR1, HFR2, HFR3 и HFR4, и/или одну или несколько легких цепей LFR1, LFR2, LFR3 и LFR4, где:21. An antibody or an antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding paragraphs, additionally containing one or more heavy chains HFR1, HFR2, HFR3 and HFR4, and/or one or more light chains LFR1, LFR2, LFR3 and LFR4, where:
HFR1 содержит QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYX17FT (SEQ ID NO: 54) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной-ной идентичностью последовательностей,HFR1 contains QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYX 17 FT (SEQ ID NO: 54) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity,
HFR2 содержит WVX18QAPGQGLEWX19G (SEQ ID NO: 55) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей,HFR2 contains WVX 18 QAPGQGLEWX 19 G (SEQ ID NO: 55) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity,
HFR3 содержит RVTX20TIDKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID NO: 56) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной-ной идентичностью последовательностей,HFR3 contains RVTX 20 TIDKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID NO: 56) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity,
HFR4 содержит WGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 57) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной-ной идентичностью последовательностей,HFR4 contains WGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 57) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity,
LFR1 содержит DIVMTQSPDSLAVSLGERATX21NC (SEQ ID NO: 58) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной-ной идентичностью последовательностей,LFR1 contains DIVMTQSPDSLAVSLGERATX 21 NC (SEQ ID NO: 58) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity,
LFR2 содержит WYQQKPGQPPKLLIY (SEQ ID NO: 59) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной-ной идентичностью последовательностей,LFR2 contains WYQQKPGQPPKLLIY (SEQ ID NO: 59) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity,
LFR3 содержит GVPDRFX22GSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC (SEQ ID NO: 60) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной-ной идентичностью последовательностей, иLFR3 contains GVPDRFX 22 GSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC (SEQ ID NO: 60) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity, and
LFR4 содержит FGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 61) или гомологическую последовательность с по меньшей мере 80%-ной-ной идентичностью последовательностей,LFR4 contains FGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 61) or a homologous sequence with at least 80% sequence identity,
где X17 представляет собой T или S, X18 представляет собой R или K, X19 представляет собой M или I, X20 представляет собой M или L, X21 представляет собой I или M, и X22 представляет собой S или T.where X 17 is T or S, X 18 is R or K, X 19 is M or I, X 20 is M or L, X 21 is I or M, and X 22 is S or T.
22. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.21, где:22. An antibody or an antigen-binding fragment thereof according to claim 21, where:
HFR1 содержит последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 62 и 63,HFR1 contains a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 62 and 63,
HFR2 содержит последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 64 и 65,HFR2 contains a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 64 and 65,
HFR3 содержит последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 66 и 67,HFR3 contains a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 66 and 67,
HFR4 содержит последовательность SEQ ID NO: 57,HFR4 contains the sequence SEQ ID NO: 57,
LFR1 содержит последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 68 и 69,LFR1 contains a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 68 and 69,
LFR2 содержит последовательность SEQ ID NO: 59,LFR2 contains the sequence SEQ ID NO: 59,
LFR3 содержит последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 70 и 71, иLFR3 contains a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 70 and 71, and
LFR4 содержит последовательность SEQ ID NO: 61.LFR4 contains the sequence SEQ ID NO: 61.
23. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45 и SEQ ID NO: 47, и ее гомологичную последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей, сохраняя при этом аффинность специфического связывания с CLDN18.2.23. An antibody or antigen binding fragment thereof as claimed in any one of the preceding claims, wherein the heavy chain variable region comprises a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45 and SEQ ID NO: 47, and a homologous sequence thereof having at least 80% sequence identity while maintaining specific affinity binding to CLDN18.2.
24. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где вариабельная область легкой цепи содержит последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, и ее гомологичную последовательность с по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей, сохраняя при этом аффинность специфического связывания с CLDN18.2.24. An antibody or antigen binding fragment thereof as claimed in any one of the preceding claims, wherein the light chain variable region comprises a sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, and a homologous sequence thereof with at least 80% sequence identity while maintaining specific binding affinity for CLDN18.2.
25. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, где:25. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding paragraphs, where:
вариабельная область тяжелой цепи, содержащая последовательность SEQ ID NO: 23 и вариабельная область легкой цепи, содержащая последовательность SEQ ID NO: 24;a heavy chain variable region containing the sequence of SEQ ID NO: 23 and a light chain variable region containing the sequence of SEQ ID NO: 24;
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 25 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 26;the heavy chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 25 and the light chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 26;
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 27 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 28;the heavy chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 27 and the light chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 28;
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 29 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 26, или 28;the heavy chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 29 and the light chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 26, or 28;
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 37 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 38;the heavy chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 37 and the light chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 38;
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 39 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 40;the heavy chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 39 and the light chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 40;
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 41 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 42;the heavy chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 41 and the light chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 42;
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 43 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 44;the heavy chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 43 and the light chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 44;
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 45 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 46; илиthe heavy chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 45 and the light chain variable region contains the sequence of SEQ ID NO: 46; or
вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 47 и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO: 48.the heavy chain variable region contains the sequence SEQ ID NO: 47 and the light chain variable region contains the sequence SEQ ID NO: 48.
26. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, дополнительно содержат одну или несколько замен или модификаций аминокислотных остатков, сохраняют при этом аффинность специфического связывания с CLDN18.2 человека.26. The antibody or antigen-binding fragment thereof of any one of the preceding claims further comprises one or more substitutions or modifications of amino acid residues while retaining specific binding affinity for human CLDN18.2.
27. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.26, где по меньшей мере по меньшей мере одна из замен или модификаций находится в одной или нескольких последовательностях CDR и/или в одной или нескольких не-CDR областях последовательностей VH или VL.27. The antibody or antigen binding fragment thereof according to claim 26, wherein at least at least one of the substitutions or modifications is in one or more CDR sequences and/or in one or more non-CDR regions of the VH or VL sequences.
28. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.16-27, где антитело связывается с эпитопом, содержащим по меньшей мере один, два или три аминокислотных остатка в положениях D28, W30, V43, N45, Y46, L49, W50, R51, R55, E56, F60, E62, Y66, L72, L76, V79 и R80 CLDN18.2 человека, имеющим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30.28. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 16-27, where the antibody binds to an epitope containing at least one, two or three amino acid residues at positions D28, W30, V43, N45, Y46, L49, W50, R51 , R55, E56, F60, E62, Y66, L72, L76, V79 and R80 human CLDN18.2 having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 30.
29. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, дополнительно содержащие константную область иммуноглобулина, необязательно константную область Ig человека или необязательно константную область IgG человека.29. The antibody or antigen-binding fragment thereof of any one of the preceding claims, further comprising an immunoglobulin constant region, optionally a human Ig constant region, or optionally a human IgG constant region.
30. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.29, где константная область содержит константную область IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 человека.30. The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 29, wherein the constant region comprises a human IgG1, IgG2, IgG3 or IgG4 constant region.
31. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.30, где константная область IgG1 человека содержит SEQ ID NO: 49, или гомологичную последовательность, содержащую по меньшей мере 80%-ной идентичностью последовательностей.31. The antibody or antigen binding fragment thereof according to claim 30, wherein the human IgG1 constant region comprises SEQ ID NO: 49, or a homologous sequence containing at least 80% sequence identity.
32. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.29-31, где константная область содержит одну или несколько замен или модификаций аминокислотных остатков, придающих повышенную CDC или ADCC по сравнению с константной областью дикого типа.32. The antibody or antigen binding fragment thereof according to any one of claims 29 to 31, wherein the constant region contains one or more amino acid residue substitutions or modifications conferring increased CDC or ADCC compared to the wild type constant region.
33. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.32, где константная область содержит одну или несколько замен аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 49, выбранных из группы, включающую: L235V, F243L, R292P, Y300L, P396L или любую их комбинацию.33. The antibody or antigen binding fragment thereof as set forth in claim 32, wherein the constant region comprises one or more amino acid residue substitutions relative to SEQ ID NO: 49 selected from the group consisting of: L235V, F243L, R292P, Y300L, P396L, or any combination thereof.
34. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.33, где константная область содержит последовательность SEQ ID NO: 51.34. The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 33, wherein the constant region comprises the sequence SEQ ID NO: 51.
35. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, которые являются гуманизированным.35. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding claims, which is humanized.
36. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, которые являются афукозилированными.36. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding claims that is afucosylated.
37. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, которое представляет собой диатело, Fab, Fab', F(ab')2, Fd, фрагмент Fv, стабилизированный дисульфидом фрагмент Fv (dsFv), (dsFv)2, биспецифическое dsFv (dsFv-dsFv'), дисульфид-стабилизированное диатело (ds диатело), молекулу одноцепочечного антитела (scFv), димер scFv (бивалентное диатело), полиспецифическое антитело, верблюжье однодоменное антитело, нанотело, доменное антитело и бивалентное доменное антитело37. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding claims, which is a diabody, Fab, Fab', F(ab') 2 , Fd, Fv fragment, disulfide-stabilized Fv fragment (dsFv), (dsFv) 2 , bispecific dsFv (dsFv-dsFv'), disulfide-stabilized diabody (ds diabody), single chain antibody molecule (scFv), scFv dimer (bivalent diabody), multispecific antibody, camel single domain antibody, nanobody, domain antibody and bivalent domain antibody
38. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, которые являются биспецифическим.38. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding claims that is bispecific.
39. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.38, способные специфически связываться с первым и вторым эпитопом CLDN18.2, или способные специфически связываться с CLDN18.2 и вторым антигеном.39. The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 38, capable of specifically binding to the first and second epitope of CLDN18.2, or capable of specifically binding to CLDN18.2 and the second antigen.
40. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.39, где второй антиген представляет собой иммунную мишень, необязательно выбранную из группы, включающей: PD-L1, PD-L2, PD-1, CLTA-4, TIM-3, LAG3, CD160, 2B4, TGF β, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, OX40, CD2, CD27, ICAM-1, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3, LFA-1, 1COS, 4-1BB, GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, IL-2, IL-15, CD3, CD16 и CD83.40. The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 39, where the second antigen is an immune target, optionally selected from the group consisting of: PD-L1, PD-L2, PD-1, CLTA-4, TIM-3, LAG3, CD160 , 2B4, TGF β, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, OX40, CD2, CD27, ICAM-1, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3, LFA-1, 1COS, 4-1BB, GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, IL-2, IL-15, CD3, CD16 and CD83.
41. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.39, где второй антиген содержит опухолевый антиген.41. The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 39, wherein the second antigen comprises a tumor antigen.
42. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.41, где опухолевый антиген присутствует в клетке, экспрессирующей CLDN18.2.42. The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 41, wherein the tumor antigen is present in a cell expressing CLDN18.2.
43. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.42, где опухолевый антиген содержит CA-125, ганглиозиды G(D2), G(M2) и G(D3), CD20, CD52, CD33, Ep-CAM, CEA, бомбезин-подобные пептиды, PSA, HER2/neu, рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), erbB2, erbB3/HER3, erbB4, CD44v6, Ki-67, рако-ассоциированный муцин, VEGF, VEGFR (например, VEGFR3), рецепторы эстрогена, антиген Льюиса-Y TGFβ1, Рецептор IGF-1, EGFα, рецептор c-Kit, рецептор трансферрина, IL-2R или CO17-1A.43. An antibody or an antigen-binding fragment thereof according to claim 42, where the tumor antigen contains CA-125, gangliosides G(D2), G(M2) and G(D3), CD20, CD52, CD33, Ep-CAM, CEA, bombesin- like peptides, PSA, HER2/neu, epidermal growth factor receptor (EGFR), erbB2, erbB3/HER3, erbB4, CD44v6, Ki-67, cancer-associated mucin, VEGF, VEGFR (eg, VEGFR3), estrogen receptors, Lewis antigen -Y TGFβ1, IGF-1 receptor, EGFα, c-Kit receptor, transferrin receptor, IL-2R or CO17-1A.
44. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, способные специфически связываться с CLDN18.2 мыши.44. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding claims, capable of specifically binding to mouse CLDN18.2.
45. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, которые не связываются с CLDN18.1 человека.45. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding claims that does not bind human CLDN18.1.
46. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, связанные с одним или несколькими фрагментами конъюгата.46. An antibody or antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding claims, associated with one or more conjugate fragments.
47. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.46, где фрагмент конъюгата содержит агент, модифицирующий клиренс, химиотерапевтический агент, токсин, радиоактивный изотоп, лантанид, люминесцентную метку, флуоресцентную метку, фермент-субстратную метку, алкилаторы ДНК, ингибитор топоизомеразы, средства, связывающие тубулин, или другие противоопухолевые лекарственные средства.47. The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 46, where the conjugate fragment contains a clearance-modifying agent, a chemotherapeutic agent, a toxin, a radioactive isotope, a lanthanide, a luminescent label, a fluorescent label, an enzyme-substrate label, DNA alkylators, a topoisomerase inhibitor, agents, tubulin binding agents, or other anticancer drugs.
48. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое конкурирует за связывание с CLDN18.2 с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом по любому из пп.1-6, и 16-47.48. An antibody or antigen binding fragment thereof that competes for binding to CLDN18.2 with the antibody or antigen binding fragment thereof according to any one of claims 1-6, and 16-47.
49. Композиция, содержащая анти-CLDN18.2 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-48, где антитела или их антигенсвязывающие фрагменты являются афукозилированными.49. A composition comprising an anti-CLDN18.2 antibody or an antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48, wherein the antibodies or antigen-binding fragments thereof are afucosylated.
50. Композиция по п.49, где анти-CLDN18.2 антитело в композиции имеет количество фукозы 60% или менее (например, менее 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15% или 10%) от общего количества олигосахаридов по Asn297 в соответствии с системой нумерации ЕС.50. The composition of claim 49, wherein the anti-CLDN18.2 antibody in the composition has an amount of fucose of 60% or less (e.g., less than 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20 %, 15% or 10%) of the total oligosaccharides at Asn297 according to the EU numbering system.
51. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из предшествующих пунктов, и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей.51. A pharmaceutical composition containing an antibody or an antigen-binding fragment thereof according to any of the preceding paragraphs, and one or more pharmaceutically acceptable carriers.
52. Выделенный полинуклеотид, кодирующий антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по предшествующим пунктам.52. An isolated polynucleotide encoding an antibody or an antigen-binding fragment thereof according to the preceding paragraphs.
53. Вектор, содержащий выделенный полинуклеотид по п.52.53. A vector containing the isolated polynucleotide according to claim 52.
54. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.53.54. A host cell containing the vector of claim 53.
55. Способ экспрессии антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-48, включающие культивирование клетки-хозяина по п.54 в условиях, при которых экспрессируется вектор по п.53.55. A method for expressing an antibody or an antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48, comprising culturing the host cell of claim 54 under conditions under which the vector of claim 53 is expressed.
56. Способ лечения заболевания или состояния у субъекта, для которого было бы полезно модулировать активность CLDN18.2, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-48 и/или фармацевтической композиции по п.51.56. A method of treating a disease or condition in a subject that would benefit from modulating the activity of CLDN18.2, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of an antibody or antigen binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48 and/or a pharmaceutical composition according to claim 51.
57. Способ по п.56, где заболевание или состояние представляет собой заболевание или состояние, связанное с CLDN18.2.57. The method of claim 56, wherein the disease or condition is a disease or condition associated with CLDN18.2.
58. Способ по п.57, где заболевание или состояние представляет собой рак, необязательно рак, экспрессирующий CLDN18.2.58. The method of claim 57, wherein the disease or condition is a cancer, optionally a cancer expressing CLDN18.2.
59. Способ по любому из пп.56-58, где у субъекта идентифицирована раковая клетка, экспрессирующая CLDN18.2.59. The method according to any one of claims 56-58, wherein a cancer cell expressing CLDN18.2 is identified in the subject.
60. Способ по п.59, где субъект идентифицирован как имеющий раковую клетку с высоким уровнем экспрессии CLDN18.2, раковую клетку со средним уровнем экспрессии CLDN18.2 или раковую клетку с низким уровнем экспрессии CLDN18.2.60. The method of claim 59, wherein the subject is identified as having a cancer cell with a high level of CLDN18.2 expression, a cancer cell with an intermediate level of CLDN18.2 expression, or a cancer cell with a low level of CLDN18.2 expression.
61. Способ по п.60, где раковая клетка с высоким уровнем экспрессии CLDN18.2 экспрессирует CLDN18.2 с интенсивностью по меньшей мере 2+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где по меньшей мере 40% клеток окрашиваются положительно при IHC; раковая клетка со средним уровнем экспрессии CLDN18.2 экспрессирует CLDN18.2 с интенсивностью по меньшей мере 1+ и ниже 2+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где по меньшей мере 30%, но ниже 40% клеток окрашиваются положительно при IHC, и раковая клетка с низким уровнем экспрессии CLDN18.2 экспрессирует CLDN18.2 с интенсивностью около 0, но ниже 1+, как определено с помощью IHC, и на уровне, где около 0, но ниже 30% клеток окрашиваются положительно при IHC.61. The method of claim 60, wherein the CLDN18.2-high expressing cancer cell expresses CLDN18.2 at an intensity of at least 2+, as determined by IHC, and at a level where at least 40% of the cells stain positive for IHC; a cancer cell with an intermediate level of CLDN18.2 expression expresses CLDN18.2 at an intensity of at least 1+ and less than 2+, as determined by IHC, and at a level where at least 30%, but less than 40% of cells stain positive for IHC, and a cancer cell with low CLDN18.2 expression expresses CLDN18.2 at an intensity of about 0 but below 1+ as determined by IHC, and at a level where about 0 but below 30% of cells stain positive by IHC.
62. Способ по любому из пп.56-61, где рак представляет собой рак желудка, рак легкого, рак бронхов, рак кости, рак печени и желчных протоков, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак печени, рак яичников, рак яичка, рак почки, рак, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак позвоночника, рак головного мозга, рак шейки матки, рак матки, рак эндометрия, рак толстой кишки, колоректальный рак, рак прямой кишки, рак анального канала, рак пищевода, рак желудочно-кишечного тракта, рак кожи, рак предстательной железы, рак гипофиза, рак желудка, рак влагалища, рак щитовидной железы, глиобластому, астроцитому, меланому, миелодиспластический синдром, саркому, тератому и аденокарциному.62. The method according to any one of claims 56-61, where the cancer is stomach cancer, lung cancer, bronchial cancer, bone cancer, liver and bile duct cancer, pancreatic cancer, breast cancer, liver cancer, ovarian cancer, testicular cancer , kidney cancer, cancer, bladder cancer, head and neck cancer, spine cancer, brain cancer, cervical cancer, uterine cancer, endometrial cancer, colon cancer, colorectal cancer, rectal cancer, anal cancer, esophageal cancer, gastrointestinal cancer, skin cancer, prostate cancer, pituitary cancer, stomach cancer, vaginal cancer, thyroid cancer, glioblastoma, astrocytoma, melanoma, myelodysplastic syndrome, sarcoma, teratoma and adenocarcinoma.
63. Способ по любому из пп.56-62, где субъектом является человек.63. The method according to any one of paragraphs 56-62, where the subject is a person.
64. Способ по любому из пп.56-63, где введение осуществляют перорально, назально, внутривенно, подкожно, сублингвально или внутримышечно.64. The method according to any one of claims 56-63, where the administration is carried out orally, nasally, intravenously, subcutaneously, sublingually or intramuscularly.
65. Способ по любому из пп.56-64, дополнительно включающий введение терапевтически эффективного количества второго терапевтического агента.65. The method of any one of claims 56 to 64, further comprising administering a therapeutically effective amount of a second therapeutic agent.
66. Способ по любому из пп.65, где второй терапевтический агент выбран из химиотерапевтического агента, противоопухолевого лекарственного средства, лучевой терапии, иммунотерапевтического агента, антиангиогенного агента, таргетного терапевтического агента, клеточного терапевтического агента, генотерапевтического агента, гормонального терапевтического агента или цитокинов.66. The method of any one of claims 65, wherein the second therapeutic agent is selected from a chemotherapeutic agent, an anticancer drug, radiation therapy, an immunotherapeutic agent, an antiangiogenic agent, a targeted therapeutic agent, a cell therapeutic agent, a gene therapy agent, a hormonal therapeutic agent, or cytokines.
67. Набор, содержащий антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-48, и второй терапевтический агент.67. A kit containing an antibody or an antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48, and a second therapeutic agent.
68. Способ модулирования активности CLDN18.2 в клетках, экспрессирующих CLDN18.2, включающие воздействие на клетки, экспрессирующие CLDN18.2, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-48.68. A method of modulating the activity of CLDN18.2 in cells expressing CLDN18.2, comprising exposing the cells expressing CLDN18.2 to an antibody or an antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48.
69. Способ обнаружения присутствия или количества CLDN18.2 в образце, включающие приведение образца в контакт с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом по любому из пп.1-48, и определение присутствия или количества CLDN18.2 в образце.69. A method for detecting the presence or amount of CLDN18.2 in a sample, comprising contacting the sample with an antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48, and determining the presence or amount of CLDN18.2 in the sample.
70. Способ диагностики заболевания или состояния, связанного с CLDN18.2, у субъекта, включающие: a) приведение в контакт образца, полученного от субъекта, с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом по любому из пп.1-48; b) определение наличия или количества CLDN18.2 в образце; и c) сопоставление наличия или количества CLDN18.2 с наличием или статусом связанного с CLDN18.2 заболевания или состояния у субъекта.70. A method for diagnosing a disease or condition associated with CLDN18.2 in a subject, comprising: a) contacting a sample obtained from the subject with an antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48; b) determining the presence or amount of CLDN18.2 in the sample; and c) correlating the presence or amount of CLDN18.2 with the presence or status of a CLDN18.2-related disease or condition in the subject.
71. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-48 при изготовлении медицинского препарата для лечения у субъекта заболевания или состояния, связанного с CLDN18.2.71. Use of an antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48 in the manufacture of a medicinal product for treating a disease or condition associated with CLDN18.2 in a subject.
72. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-48 при изготовлении диагностического реагента для диагностики заболевания или состояния, связанного с CLDN18.2.72. Use of an antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48 in the manufacture of a diagnostic reagent for diagnosing a disease or condition associated with CLDN18.2.
73. Набор, содержащий антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-48, пригодный для обнаружения CLDN18.2.73. A kit containing an antibody or an antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 48, suitable for the detection of CLDN18.2.
74. Химерный антигенный рецептор (CAR), содержащий антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен, костимуляторную сигнальную область и сигнальный домен TCR, где антигенсвязывающий домен специфически связывается с CLDN18.2 и содержит антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-48.74. A chimeric antigen receptor (CAR) comprising an antigen binding domain, a transmembrane domain, a costimulatory signaling region and a TCR signaling domain, wherein the antigen binding domain specifically binds to CLDN18.2 and comprises an antigen binding fragment according to any one of claims 1 to 48.
75. CAR по п.74, где антигенсвязывающий фрагмент представляет собой Fab или scFv.75. The CAR of claim 74, wherein the antigen binding fragment is a Fab or scFv.
76. CAR по п.74 или 75, который является биспецифическим.76. The CAR according to claim 74 or 75, which is bispecific.
77. CAR по п.75, где CAR способен дополнительно специфически связываться со вторым антигеном, отличным от CLDN18.2, или со вторым эпитопом на CLDN18.2.77. The CAR of claim 75, wherein the CAR is further capable of specifically binding to a second antigen other than CLDN18.2 or a second epitope on CLDN18.2.
78. CAR по п.77, где второй антиген содержит опухолевый антиген.78. The CAR of claim 77, wherein the second antigen comprises a tumor antigen.
79. Последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор (CAR) по любому из пп.74-78.79. A nucleic acid sequence encoding a chimeric antigen receptor (CAR) according to any one of claims 74-78.
80. Клетка, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты по п.79.80. A cell containing the nucleic acid sequence according to claim 79.
81. Клетка, генетически модифицированная для экспрессии CAR по любому из пп.74-78.81. A cell genetically modified to express a CAR according to any one of claims 74-78.
82. Вектор, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты по п.79.82. A vector containing the nucleic acid sequence according to claim 79.
83. Способ стимуляции опосредованного Т-клетками иммунного ответа на клетки или ткани, экспрессирующие CLDN18.2 у млекопитающего, способ включает введение млекопитающему эффективного количества клеток, генетически модифицированных для экспрессии CAR по любому из пп.74-78.83. A method of stimulating a T cell-mediated immune response to cells or tissues expressing CLDN18.2 in a mammal, the method comprising administering to the mammal an effective amount of cells genetically modified to express a CAR according to any one of claims 74 to 78.
84. Способ лечения млекопитающего, страдающего заболеванием или состоянием, связанным с CLDN18.2, включающие введение млекопитающему эффективного количества клеток по п.81, и тем самым лечение млекопитающего.84. A method of treating a mammal suffering from a disease or condition associated with CLDN18.2, comprising administering to the mammal an effective amount of the cells of claim 81, and thereby treating the mammal.
85. Способ по п.84, где клетка представляет собой аутологичную Т-клетку.85. The method of claim 84, wherein the cell is an autologous T cell.
86. Способ по п.84, где заболевание или состояние, связанное с CLDN18.2, представляет собой рак.86. The method of claim 84, wherein the disease or condition associated with CLDN18.2 is cancer.
87. Способ по п.84, где млекопитающим является человек.87. The method according to claim 84, where the mammal is a human.
88. Способ по п.84, где млекопитающее идентифицировано как имеющее раковую клетку, экспрессирующую CLDN18.2, необязательно, млекопитающее идентифицировано как имеющее раковую клетку с высоким уровнем экспрессии CLDN18.2, раковую клетку со средним уровнем экспрессии CLDN18.2 или раковую клетку с низким уровнем экспрессии CLDN18.2.88. The method of claim 84, wherein the mammal is identified as having a cancer cell expressing CLDN18.2, optionally, the mammal is identified as having a cancer cell with a high level of CLDN18.2 expression, a cancer cell with an intermediate level of CLDN18.2 expression, or a cancer cell with low level of CLDN18.2 expression.