Claims (18)
1. Способ получения фруктозы из сахарида, включающий:1. A method for obtaining fructose from a saccharide, including:
стадию конвертирования фруктозо-6-фосфата (F6P) во фруктозу, катализируемую фруктозо-6-фосфатфосфатазой (F6PP), в присутствии двухвалентного катиона, выбранного из группы, состоящей из Mg2+, Zn2+, Ca2+, Co2+, Mn2+ и их комбинаций.a step of converting fructose-6-phosphate (F6P) to fructose catalyzed by fructose-6-phosphate phosphatase (F6PP) in the presence of a divalent cation selected from the group consisting of Mg 2+ , Zn 2+ , Ca 2+ , Co 2+ , Mn 2+ and their combinations.
2. Способ по п.1, где стадию конвертирования F6P во фруктозу, катализируемую F6PP, проводят в присутствии Mg2+ и двухвалентного катиона, выбранного из группы, состоящей из Zn2+, Ca2+, Co2+, Mn2+ и их комбинаций.2. The method of claim 1 wherein the step of converting F6P to fructose catalyzed by F6PP is carried out in the presence of Mg 2+ and a divalent cation selected from the group consisting of Zn 2+ , Ca 2+ , Co 2+ , Mn 2+ and their combinations.
3. Способ по п.1, где концентрация двухвалентного катиона находится в диапазоне от 0,01 мМ до 500 мМ.3. The method of claim 1 wherein the divalent cation concentration is in the range of 0.01 mM to 500 mM.
4. Способ по любому из пп.1-3, где двухвалентный катион представляет собой Co2+ или Mn2+.4. The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the divalent cation is Co 2+ or Mn 2+ .
5. Способ по любому из пп.1-4, где двухвалентный катион представляет собой Co2+.5. The method according to any one of claims 1 to 4, wherein the divalent cation is Co 2+ .
6. Способ по любому из пп.1-4, где двухвалентный катион представляет собой Mn2+.6. The method according to any one of claims 1 to 4, wherein the divalent cation is Mn 2+ .
7. Способ по любому из пп.1-6, дополнительно включающий стадию конвертирования глюкозо-6-фосфата (G6P) в F6P, где стадия катализируется фосфоглюкоизомеразой (PGI).7. The method according to any one of claims 1 to 6, further comprising the step of converting glucose-6-phosphate (G6P) to F6P, where the step is catalyzed by phosphoglucoisomerase (PGI).
8. Способ по п.7, дополнительно включающий стадию конвертирования глюкозо-1-фосфата (G1P) в G6P, где стадия катализируется фосфоглюкомутазой (PGM).8. The method of claim 7, further comprising the step of converting glucose-1-phosphate (G1P) to G6P, wherein the step is catalyzed by phosphoglucomutase (PGM).
9. Способ по п.1, где сахарид выбран из сахарозы, крахмала или производного крахмала, выбранного из группы, состоящей из амилозы, амилопектина, растворимого крахмала, амилодекстрина, мальтотриозы, мальтодекстрина, мальтозы и глюкозы.9. The method of claim 1 wherein the saccharide is selected from sucrose, starch or a starch derivative selected from the group consisting of amylose, amylopectin, soluble starch, amylodextrin, maltotriose, maltodextrin, maltose and glucose.
10. Способ по п.9, дополнительно включающий стадию конвертирования сахарида в G1P, где стадия катализируется по меньшей мере одним ферментом.10. The method of claim 9, further comprising the step of converting the saccharide to G1P, wherein the step is catalyzed by at least one enzyme.
11. Способ по п.10, где по меньшей мере один фермент на стадии конвертирования сахарида в G1P выбран из группы, состоящей из альфа-глюканфосфорилазы (aGP), мальтозофосфорилазы и сахарозофосфорилазы, и их смесей.11. The method of claim 10, wherein at least one enzyme in the step of converting the saccharide to G1P is selected from the group consisting of alpha-glucan phosphorylase (aGP), maltose phosphorylase, and sucrose phosphorylase, and mixtures thereof.
12. Способ по п.11, где сахарид представляет собой крахмал, дополнительно включающий стадию конвертирования крахмала в производное крахмала, где производное крахмала получают посредством ферментативного гидролиза крахмала или посредством кислотного гидролиза крахмала.12. The method of claim 11, wherein the saccharide is starch, further comprising the step of converting the starch into a starch derivative, wherein the starch derivative is obtained by enzymatic hydrolysis of starch or by acidic hydrolysis of starch.
13. Способ по п.11 или 12, где в способ добавляют 4-глюкантрансферазу (4GT).13. The method according to claim 11 or 12, wherein 4-glucan transferase (4GT) is added to the method.
14. Способ по любому из пп.12, 13, где производное крахмала получают посредством ферментативного гидролиза крахмала, катализируемого изоамилазой, пуллуланазой, альфа-амилазой или их комбинацией.14. The method according to any one of claims 12, 13, wherein the starch derivative is obtained by enzymatic hydrolysis of starch catalyzed by isoamylase, pullulanase, alpha-amylase, or a combination thereof.
15. Способ по любому из пп.1-14, где стадии способа проводят при температуре в диапазоне от приблизительно 37°C до приблизительно 95°C, при pH в диапазоне от приблизительно 5,0 до приблизительно 8,0, и/или в течение от приблизительно 8 часов до приблизительно 48 часов.15. The method according to any one of claims 1-14, where the steps of the method are carried out at a temperature in the range from about 37°C to about 95°C, at a pH in the range from about 5.0 to about 8.0, and/or for about 8 hours to about 48 hours.
16. Способ по любому из пп.1-15, где стадии способа проводят в одном биореакторе.16. A method according to any one of claims 1 to 15, wherein the steps of the method are carried out in a single bioreactor.
17. Способ по любому из пп.1-16, где стадии способа проводят так, чтобы они были свободными от ATP, свободными от NAD(P)(H), при концентрации фосфата от приблизительно 0,1 мМ до приблизительно 150 мМ, фосфат повторно используется, и/или по меньшей мере одна стадия способа вовлекает энергетически выгодную химическую реакцию.17. The method according to any one of claims 1 to 16, wherein the steps of the method are carried out such that they are free of ATP, free of NAD(P)(H), at a phosphate concentration of from about 0.1 mM to about 150 mM, phosphate is reused and/or at least one process step involves an energetically favorable chemical reaction.