Claims (46)
1. Полинуклеотид, содержащий следующие нуклеотидные последовательности:1. Polynucleotide containing the following nucleotide sequences:
(а) нуклеотидную последовательность, кодирующую слитый белок, состоящий из эффекторного белка CRISPR, дефицитного по нуклеазной активности, и транскрипционного репрессора, и(a) a nucleotide sequence encoding a fusion protein consisting of a nuclease deficient CRISPR effector protein and a transcriptional repressor, and
(b) нуклеотидную последовательность, кодирующую направляющую РНК, нацеленную на непрерывный участок длиной от 18 до 24 нуклеотидов в области, показанной в SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 117 или SEQ ID NO: 119, в регуляторной области экспрессии гена DMPK человека.(b) a nucleotide sequence encoding a guide RNA targeting a contiguous stretch of 18 to 24 nucleotides in length in the region shown in SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 117 or SEQ ID NO : 119, in the regulatory region of human DMPK gene expression.
2. Полинуклеотид по п.1, содержащий следующие нуклеотидные последовательности:2. Polynucleotide according to claim 1, containing the following nucleotide sequences:
(а) нуклеотидную последовательность, кодирующую слитый белок, состоящий из эффекторного белка CRISPR, дефицитного по нуклеазной активности, и транскрипционного репрессора, и(a) a nucleotide sequence encoding a fusion protein consisting of a nuclease deficient CRISPR effector protein and a transcriptional repressor, and
(b) нуклеотидную последовательность, кодирующую направляющую РНК, нацеленную на непрерывный участок длиной от 18 до 24 нуклеотидов в области, показанной в SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 117 или SEQ ID NO: 119, в регуляторной области экспрессии гена DMPK человека.(b) a nucleotide sequence encoding a guide RNA targeting a contiguous stretch of 18 to 24 nucleotides in length in the region shown in SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO : 100, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 117 or SEQ ID NO: 119, in the regulatory region of human DMPK gene expression.
3. Полинуклеотид по п.1 или 2, содержащий следующие нуклеотидные последовательности:3. Polynucleotide according to claim 1 or 2, containing the following nucleotide sequences:
(а) нуклеотидную последовательность, кодирующую слитый белок, состоящий из эффекторного белка CRISPR, дефицитного по нуклеазной активности, и транскрипционного репрессора, и(a) a nucleotide sequence encoding a fusion protein consisting of a nuclease deficient CRISPR effector protein and a transcriptional repressor, and
(b) нуклеотидную последовательность, кодирующую направляющую РНК, нацеленную на непрерывный участок длиной от 18 до 24 нуклеотидов в области, показанной в SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 109 или SEQ ID NO: 111, в регуляторной области экспрессии гена DMPK человека.(b) a nucleotide sequence encoding a guide RNA targeting a contiguous stretch of 18 to 24 nucleotides in length in the region shown in SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 109 or SEQ ID NO: 111, in the regulatory region of human DMPK gene expression.
4. Полинуклеотид п.1, где нуклеотидная последовательность, кодирующая направляющую РНК, содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 117 или SEQ ID NO: 119, или нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82 , SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 117 или SEQ ID NO: 119, где от 1 до 3 нуклеотидов делецированы, заменены, вставлены и/или добавлены.4. The polynucleotide of claim 1, wherein the nucleotide sequence encoding the guide RNA comprises the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63 , SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO : 100, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 117 or SEQ ID NO: 119 , or the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82 , SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO : 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 105 , SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 117 or SEQ ID NO: 119, where 1 to 3 nucleotides are deleted, replaced, inserted and/ or added.
5. Полинуклеотид по любому из пп.1-4, содержащий, по меньшей мере, две нуклеотидные последовательности, кодирующие направляющие РНК, где, по меньшей мере, две нуклеотидные последовательности являются различными.5. A polynucleotide according to any one of claims 1 to 4, comprising at least two nucleotide sequences encoding guide RNAs, wherein at least two nucleotide sequences are different.
6. Полинуклеотид по любому из пп.1-5, где транскрипционный репрессор выбран из группы KRAB, MeCP2, SIN3A, HDT1, MBD2B, NIPP1 и HP1A.6. A polynucleotide according to any one of claims 1-5, wherein the transcriptional repressor is selected from the group KRAB, MeCP2, SIN3A, HDT1, MBD2B, NIPP1 and HP1A.
7. Полинуклеотид по п.6, где транскрипционный репрессор представляет собой KRAB.7. The polynucleotide of claim 6 wherein the transcriptional repressor is KRAB.
8. Полинуклеотид по любому из пп.1-7, где эффекторный белок CRISPR, дефицитный по нуклеазной активности, представляет собой dCas9.8. A polynucleotide according to any one of claims 1 to 7, wherein the CRISPR effector protein deficient in nuclease activity is dCas9.
9. Полинуклеотид по п.8, где dCas9 получен из Staphylococcus aureus.9. The polynucleotide of claim 8, wherein dCas9 is derived from Staphylococcus aureus.
10. Полинуклеотид по любому из пп.1-9, дополнительно содержащий промоторную последовательность для нуклеотидной последовательности, кодирующей направляющую РНК, и/или промоторную последовательность для нуклеотидной последовательности, кодирующей слитый белок, состоящий из эффекторного белка CRISPR, дефицитного по нуклеазной активности, и транскрипционного репрессора.10. A polynucleotide according to any one of claims 1 to 9, further comprising a promoter sequence for a nucleotide sequence encoding a guide RNA and/or a promoter sequence for a nucleotide sequence encoding a fusion protein consisting of a CRISPR effector protein deficient in nuclease activity and a transcriptional repressor.
11. Полинуклеотид по п.10, где промоторная последовательность для нуклеотидной последовательности, кодирующей направляющую РНК, выбрана из группы промотора U6, промотора SNR6, промотора SNR52, промотора SCR1, промотора RPR1, промотора U3 и промотора H1.11. The polynucleotide of claim 10, wherein the promoter sequence for the nucleotide sequence encoding the guide RNA is selected from the group of U6 promoter, SNR6 promoter, SNR52 promoter, SCR1 promoter, RPR1 promoter, U3 promoter and H1 promoter.
12. Полинуклеотид по п.11, где промоторная последовательность для нуклеотидной последовательности, кодирующей направляющую РНК, представляет собой промотор U6.12. The polynucleotide of claim 11, wherein the promoter sequence for the nucleotide sequence encoding the guide RNA is the U6 promoter.
13. Полинуклеотид по любому из пп.10-12, где промоторная последовательность для нуклеотидной последовательности, кодирующей слитый белок, состоящий из эффекторного белка CRISPR, дефицитного по нуклеазной активности, и транскрипционного репрессора, является повсеместным промотором или мышечно-специфическим промотором.13. A polynucleotide according to any one of claims 10 to 12, wherein the promoter sequence for the nucleotide sequence encoding the fusion protein consisting of a nuclease-deficient CRISPR effector protein and a transcriptional repressor is a ubiquitous promoter or a muscle-specific promoter.
14. Полинуклеотид по п.13, где повсеместный промотор выбран из группы промотора EFS, промотора CMV и промотора CAG.14. The polynucleotide of claim 13 wherein the ubiquitous promoter is selected from the group of the EFS promoter, the CMV promoter and the CAG promoter.
15. Полинуклеотид по п.13, где мышечно-специфический промотор выбран из группы промотора CK8, промотора киназы тяжелой цепи миозина (MHCK), промотора мышечной креатинкиназы (MCK), синтетического промотора C5-12 (Syn) и промотора Des.15. The polynucleotide of claim 13, wherein the muscle-specific promoter is selected from the group of the CK8 promoter, the myosin heavy chain kinase (MHCK) promoter, the muscle creatine kinase (MCK) promoter, the C5-12 (Syn) synthetic promoter, and the Des promoter.
16. Полинуклеотид по п.15, где мышечно-специфический промотор представляет собой промотор CK8.16. The polynucleotide of claim 15, wherein the muscle specific promoter is the CK8 promoter.
17. Полинуклеотид по любому из пп.10-16,17. Polynucleotide according to any one of claims 10-16,
где нуклеотидная последовательность, кодирующая направляющую РНК, содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 83 или SEQ ID NO: 99, или нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 83 или SEQ ID NO: 99, где от 1 до 3 нуклеотидов делецированы, заменены, вставлены и/или добавлены,where the nucleotide sequence encoding the guide RNA contains the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 83 or SEQ ID NO: 99, or the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 83 or SEQ ID NO: 99, where 1 to 3 nucleotides are deleted, replaced, inserted and/or added,
транскрипционный репрессор представляет собой KRAB,the transcriptional repressor is KRAB,
эффекторный белок CRISPR, дефицитный по нуклеазной активности, представляет собой dCas9, полученный из Staphylococcus aureus,the CRISPR effector protein deficient in nuclease activity is dCas9, derived from Staphylococcus aureus,
промоторная последовательность для нуклеотидной последовательности, кодирующей направляющую РНК, представляет собой промотор U6, иthe promoter sequence for the nucleotide sequence encoding the guide RNA is the U6 promoter, and
промоторная последовательность для нуклеотидной последовательности, кодирующей слитый белок, состоящий из эффекторного белка CRISPR, дефицитного по нуклеазной активности, и транскрипционного репрессора, представляет собой промотор CK8.a promoter sequence for a nucleotide sequence encoding a fusion protein consisting of a nuclease-deficient CRISPR effector protein and a transcriptional repressor is the CK8 promoter.
18. Полинуклеотид по п.17, где нуклеотидная последовательность, кодирующая направляющую РНК, содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 83, или нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 83, где от 1 до 3 нуклеотидов делецированы, заменены, вставлены и/или добавлены.18. The polynucleotide of claim 17, wherein the nucleotide sequence encoding the guide RNA comprises the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 83 or the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 83, where 1 to 3 nucleotides are deleted, replaced, inserted and/or added.
19. Вектор, содержащий полинуклеотид по любому из пп.1-18.19. A vector containing a polynucleotide according to any one of claims 1-18.
20. Вектор по п.19, где вектор представляет собой плазмидный вектор или вирусный вектор.20. The vector of claim 19, wherein the vector is a plasmid vector or a viral vector.
21. Вектор по п.20, где вирусный вектор выбран из группы аденоассоциированного вирусного вектора (AAV), аденовирусного вектора и лентивирусного вектора.21. The vector of claim 20, wherein the viral vector is selected from the group of adeno-associated viral vector (AAV), adenoviral vector, and lentiviral vector.
22. Вектор по п.21, где вектор AAV выбран из группы AAV1, AAV2, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, Anc80, AAV587MTP, AAV588MTP, AAV-B1, AAVM41 и AAVrh74.22. The vector of claim 21, wherein the AAV vector is selected from the group AAV1, AAV2, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, Anc80, AAV587MTP, AAV588MTP, AAV-B1, AAVM41 and AAVrh74.
23. Фармацевтическая композиция, содержащая полинуклеотид по любому из пп.1-18 или вектор по любому из пп.19-22.23. A pharmaceutical composition containing a polynucleotide according to any one of claims 1-18 or a vector according to any one of claims 19-22.
24. Фармацевтическая композиция по п.23 для лечения или профилактики миотонической дистрофии 1 типа.24. Pharmaceutical composition according to claim 23 for the treatment or prevention of type 1 myotonic dystrophy.
25. Способ лечения или профилактики миотонической дистрофии 1 типа, включающий введение полинуклеотида по любому из пп.1-18 или вектора по любому из пп.19-22, субъекту, нуждающемуся в этом.25. A method for treating or preventing type 1 myotonic dystrophy, comprising administering a polynucleotide according to any one of claims 1-18 or a vector according to any one of claims 19-22 to a subject in need thereof.
26. Применение полинуклеотида по любому из пп.1-18 или вектора по любому из пп.19-22 для лечения или профилактики миотонической дистрофии 1 типа.26. The use of a polynucleotide according to any one of claims 1-18 or a vector according to any one of claims 19-22 for the treatment or prevention of type 1 myotonic dystrophy.
27. Применение полинуклеотида по любому из пп.1-18 или вектора по любому из пп.19-22 в производстве фармацевтической композиции для лечения или профилактики миотонической дистрофии 1 типа.27. The use of a polynucleotide according to any one of claims 1-18 or a vector according to any one of claims 19-22 in the manufacture of a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of type 1 myotonic dystrophy.
28. Рибонуклеопротеин, содержащий следующее:28. Ribonucleoprotein containing the following:
(c) слитый белок, состоящий из эффекторного белка CRISPR, дефицитного по нуклеазной активности, и транскрипционного репрессора, и(c) a fusion protein consisting of a nuclease-deficient CRISPR effector protein and a transcriptional repressor, and
(d) направляющую РНК, нацеленную на непрерывный участок длиной от 18 до 24 нуклеотидов в области, показанной в SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 117 или SEQ ID NO: 119, в регуляторной области экспрессии гена DMPK человека.(d) a guide RNA targeting a contiguous stretch of 18 to 24 nucleotides in the region shown in SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130 , SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 117 or SEQ ID NO: 119, in regulatory region of human DMPK gene expression.
29. Рибонуклеопротеин по п.28, где направляющая РНК содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185 или SEQ ID NO: 186, или нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO : 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 1 79, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185 или SEQ ID NO: 186, где от 1 до 3 нуклеотидов делецированы, заменены, вставлены и/или добавлены.29. The ribonucleoprotein of claim 28, wherein the guide RNA comprises the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO : 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170 , SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185 or SEQ ID NO: 186, or a nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164 , SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 1-79, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185 or SEQ ID NO: 186, where 1 to 3 nucleotides are deleted, replaced, inserted and/or added.
30. Композиция или набор для подавления экспрессии гена DMPK человека, содержащие следующее:30. Composition or kit for suppressing the expression of the human DMPK gene, containing the following:
(e) слитый белок, состоящий из эффекторного белка CRISPR, дефицитного по нуклеазной активности, и транскрипционного репрессора, или полинуклеотид, кодирующий слитый белок, и(e) a fusion protein consisting of a nuclease-deficient CRISPR effector protein and a transcriptional repressor, or a polynucleotide encoding the fusion protein, and
(f) направляющую РНК, нацеленную на непрерывный участок длиной от 18 до 24 нуклеотидов в области, показанной в SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 117 или SEQ ID NO: 119, в регуляторной области экспрессии гена DMPK человека или полинуклеотид, кодирующий направляющую РНК.(f) a guide RNA targeting a contiguous stretch of 18 to 24 nucleotides in the region shown in SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130 , SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 117 or SEQ ID NO: 119, in regulatory region of human DMPK gene expression; or a polynucleotide encoding a guide RNA.
31. Композиция или набор по п.30, где направляющая РНК содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185 или SEQ ID NO: 186, или нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162 , SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO : 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185 или SEQ ID NO: 186, где от 1 до 3 нуклеотидов делецированы, заменены, вставлены и/или добавлены.31. The composition or kit of claim 30, wherein the guide RNA comprises the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO : 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178 , SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185, or SEQ ID NO: 186, or the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO : 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172 , SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO : 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185 or SEQ ID NO: 186, where 1 to 3 nucleotides are deleted, replaced, inserted and/or added .