Claims (42)
1. Антитело или фрагмент антитела, способные специфически связываться с полипептидом CD73 человека, причем указанное антитело или фрагмент антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 42 (цепь 2Н4+), и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 43 (цепь 2L1), 44 (цепь 2L2), 45 (цепь 2L3) и 46 (цепь 2L4).1. An antibody or antibody fragment capable of specifically binding to a human CD73 polypeptide, said antibody or antibody fragment comprising a heavy chain variable region (VH) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 42 (2H4+ chain) and a light chain variable region (VL ) containing an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 43 (chain 2L1), 44 (chain 2L2), 45 (chain 2L3) and 46 (chain 2L4).
2. Антитело или фрагмент антитела по п. 1, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 42 (2Н4+ цепь), и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 43 (цепь 2L1).2. An antibody or antibody fragment according to claim 1, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a heavy chain variable region (VH) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 42 (2H4+ chain) and a light chain variable region (VL), containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 43 (chain 2L1).
3. Антитело или фрагмент антитела по п. 1, отличающиеся тем, что указанное антитело или фрагмент антитела содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 47, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 48.3. An antibody or antibody fragment according to claim 1, characterized in that said antibody or antibody fragment contains a heavy chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 47 and a light chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 48.
4. Антитело или фрагмент антитела, способные специфически связывать полипептид CD73 человека, причем антитело или фрагмент антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 37 (цепь Н4+), и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 33 (цепь L1), 34 (цепь L2), 35 (цепь L3) и 36 (цепь L4).4. An antibody or antibody fragment capable of specifically binding a human CD73 polypeptide, wherein the antibody or antibody fragment comprises a heavy chain variable region (VH) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 37 (H4+ chain) and a light chain variable region (VL), containing an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 33 (L1 chain), 34 (L2 chain), 35 (L3 chain) and 36 (L4 chain).
5. Антитело или фрагмент антитела по п. 4, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 37 (цепь Н4+), и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 33 (цепь L1).5. An antibody or antibody fragment according to claim 4, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a heavy chain variable region (VH) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 37 (H4+ chain), and a light chain variable region (VL), containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 33 (chain L1).
6. Антитело или фрагмент антитела по п. 4, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 38, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот SEQ ID NO: 39.6. An antibody or antibody fragment according to claim 4, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a heavy chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 38 and a light chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 39.
7. Антитело или фрагмент антитела по любому из предществующих пунктов, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела способны нейтрализовать 5'-эктонуклеотидазную активность полипептида CD73.7. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the antibody or antibody fragment is capable of neutralizing the 5'-ectonucleotidase activity of a CD73 polypeptide.
8. Антитело или фрагмент антитела, которые способны специфически связывать полипептид CD73 человека на поверхности клетки и нейтрализовать 5'-эктонуклеотидазную активность полипептида CD73 на поверхности клетки, причем антитело или фрагмент антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 95% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO: 42, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 95% идентичную последовательности аминокислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 43.8. An antibody or antibody fragment that is capable of specifically binding a human CD73 polypeptide on the cell surface and neutralizing the 5'-ectonucleotidase activity of the CD73 polypeptide on the cell surface, wherein the antibody or antibody fragment contains a heavy chain variable region (VH) containing an amino acid sequence of at least at least 95% identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 42, and a light chain variable region (VL) containing an amino acid sequence at least 95% identical to the amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 43.
9. Антитело или фрагмент антитела, способные специфически связывать полипептид CD73 человека на поверхности клетки и нейтрализовать 5'-эктонуклеотидазную активность полипептида CD73 на поверхности клетки, причем антитело или фрагмент антитела содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 95% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO: 47, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 95% идентичную последовательности аминокислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 48.9. An antibody or antibody fragment capable of specifically binding a human CD73 polypeptide on the cell surface and neutralizing the 5'-ectonucleotidase activity of the CD73 polypeptide on the cell surface, wherein the antibody or antibody fragment contains a heavy chain containing an amino acid sequence at least 95% identical to the sequence amino acids of SEQ ID NO: 47, and a light chain containing an amino acid sequence at least 95% identical to the amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 48.
10. Антитело или фрагмент антитела по п. 8 или 9, отличающиеся тем, что VH содержит CDR1, CDR2 и CDR3 с соответствующими последовательностями аминокислот, представленными в SEQ ID NO: 2, 3 и 4; и VL содержит CDR1, CDR2 и CDR3 с соответствующими последовательностями аминокислот, представленными в SEQ ID NO: 5, 6 и 7.10. An antibody or antibody fragment according to claim 8 or 9, characterized in that the VH contains CDR1, CDR2 and CDR3 with the corresponding amino acid sequences shown in SEQ ID NOs: 2, 3 and 4; and VL contains CDR1, CDR2 and CDR3 with the respective amino acid sequences shown in SEQ ID NOs: 5, 6 and 7.
11. Антитело или фрагмент антитела по любому из пп. 8-10, отличающиеся тем, что VH содержит последовательности аминокислот каркасных областей FR1, FR2 и FR3 из гена IGHV1-3 человека, и VL содержит последовательности аминокислот каркасных областей FR1, FR2 и FR3 из гена IGKV1-33 человека.11. An antibody or antibody fragment according to any one of paragraphs. 8-10, characterized in that VH contains the amino acid sequences of the FR1, FR2 and FR3 framework regions from the human IGHV1-3 gene, and VL contains the amino acid sequences of the FR1, FR2 and FR3 framework regions from the human IGKV1-33 gene.
12. Антитело или фрагмент антитела по любому из пп. 8-11, отличающиеся тем, что VH содержит CDR1, CDR2 и CDR3 с соответствующими последовательностями аминокислот, представленными в SEQ ID NO: 2, 8 и 9; и VL содержит CDR1, CDR2 и CDR3 с соответствующими последовательностями аминокислот, представленными в SEQ ID NO: 10, 11 и 7.12. An antibody or antibody fragment according to any one of paragraphs. 8-11, characterized in that VH contains CDR1, CDR2 and CDR3 with the corresponding amino acid sequences shown in SEQ ID NOs: 2, 8 and 9; and VL contains CDR1, CDR2 and CDR3 with the respective amino acid sequences shown in SEQ ID NOs: 10, 11 and 7.
13. Антитело или фрагмент антитела по п. 12, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержат вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO: 37, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичную последовательности аминокислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 33.13. An antibody or antibody fragment according to claim 12, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a heavy chain variable region (VH) containing an amino acid sequence of at least 90%, 95%, 97%, 98% or 99% identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 37, and a light chain variable region (VL) containing an amino acid sequence of at least 90%, 95%, 97%, 98% or 99% identical to the amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 33.
14. Антитело или фрагмент антитела по п. 12, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO: 38, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичную последовательности аминокислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 39.14. An antibody or antibody fragment according to claim 12, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a heavy chain containing an amino acid sequence at least 90%, 95%, 97%, 98%, or 99% identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 38, and a light chain containing an amino acid sequence at least 90%, 95%, 97%, 98%, or 99% identical to an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 39.
15. Антитело или фрагмент антитела по любому из пп. 8-11, отличающиеся тем, что VH содержит CDR1, CDR2 и CDR3 с соответствующими последовательностями аминокислот, представленными в SEQ ID NO: 2, 12 и 13; и VL содержит CDR1, CDR2 и CDR3 с соответствующими последовательностями аминокислот, представленными в SEQ ID NO: 14, 15 и 7.15. An antibody or antibody fragment according to any one of paragraphs. 8-11, characterized in that VH contains CDR1, CDR2 and CDR3 with the corresponding amino acid sequences shown in SEQ ID NO: 2, 12 and 13; and VL contains CDR1, CDR2 and CDR3 with the respective amino acid sequences shown in SEQ ID NOs: 14, 15 and 7.
16. Антитело или фрагмент антитела по п. 15, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержат вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO: 42, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичную последовательности аминокислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 43.16. An antibody or antibody fragment according to claim 15, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a heavy chain variable region (VH) containing an amino acid sequence of at least 90%, 95%, 97%, 98% or 99% identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 42, and a light chain variable region (VL) containing an amino acid sequence of at least 90%, 95%, 97%, 98% or 99% identical to the amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 43.
17. Антитело или фрагмент антитела по п. 15, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичную последовательности аминокислот SEQ ID NO: 47, и легкую цепь, содержащую последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичную последовательности аминокислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 48.17. An antibody or antibody fragment according to claim 15, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a heavy chain containing an amino acid sequence at least 90%, 95%, 97%, 98%, or 99% identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and a light chain containing an amino acid sequence at least 90%, 95%, 97%, 98%, or 99% identical to an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 48.
18. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что: аминокислота в положении 2 по Кабату тяжелой цепи представляет собой изолейцин.18. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that: the amino acid at Kabat position 2 of the heavy chain is isoleucine.
19. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 30 по Кабату тяжелой цепи представляет собой аланин.19. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the amino acid at the Kabat position 30 of the heavy chain is alanine.
20. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 48 по Кабату тяжелой цепи представляет собой изолейцин.20. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the amino acid at the Kabat position 48 of the heavy chain is isoleucine.
21. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 69 по Кабату тяжелой цепи представляет собой лейцин.21. An antibody or antibody fragment according to any of the preceding claims, characterized in that the amino acid at Kabat position 69 of the heavy chain is leucine.
22. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 73 по Кабату тяжелой цепи представляет собой лизин.22. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the amino acid at Kabat position 73 of the heavy chain is lysine.
23. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что тяжелая цепь содержит остаток изолейцина в положении 2 по Кабату, аланин в положении 30, изолейцин в положении 48, лейцин в положении 69 и лизин в положении 73.23. An antibody or antibody fragment according to any of the preceding claims, characterized in that the heavy chain contains an isoleucine residue at position 2 according to Kabat, alanine at position 30, isoleucine at position 48, leucine at position 69 and lysine at position 73.
24. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 67 по Кабату легкой цепи представляет собой тирозин.24. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the amino acid at position 67 of the Kabat light chain is tyrosine.
25. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 60 по Кабату легкой цепи представляет собой серии или аспарагиновую кислоту.25. An antibody or antibody fragment according to any of the preceding claims, characterized in that the amino acid at position 60 on the Kabat of the light chain is serine or aspartic acid.
26. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 2 по Кабату легкой цепи представляет собой валин или изолейцин.26. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the amino acid at position 2 of the Kabat light chain is valine or isoleucine.
27. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 87 по Кабату легкой цепи представляет собой тирозин или фенилаланин.27. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the amino acid at position 87 of the Kabat light chain is tyrosine or phenylalanine.
28. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что легкая цепь содержит остаток тирозина в положении 67 по Кабату, серии в положении 60, изолейцин в положении 2 и тирозин в положении 87.28. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the light chain contains a tyrosine residue at Kabat position 67, a series at position 60, an isoleucine at position 2 and a tyrosine at position 87.
29. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что аминокислота в положении 28 по Кабату тяжелой цепи представляет собой треонин (Т), аминокислота в положении 66 по Кабату тяжелой цепи представляет собой аргинин (R), аминокислота в положении 67 по Кабату тяжелой цепи представляет собой валин (V), и аминокислота в положении 71 по Кабату тяжелой цепи представляет собой аргинин (R).29. An antibody or antibody fragment according to any of the preceding claims, characterized in that the amino acid at position 28 according to Kabat of the heavy chain is threonine (T), the amino acid at position 66 according to Kabat of the heavy chain is arginine (R), the amino acid at position 67 the Kabat of the heavy chain is valine (V); and the amino acid at position 71 of the Kabat of the heavy chain is arginine (R).
30. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела специфически связываются с полипептидом CD73 человека на поверхности клетки и способны нейтрализовать его 5'-эктонуклеотидазную активность, при этом антитело или фрагмент антитела ингибирует активность полипептида CD73 человека без детектируемого снижения связывания между полипептидом CD73 и его субстратом.30. An antibody or antibody fragment according to any of the preceding claims, characterized in that the antibody or antibody fragment specifically binds to the human CD73 polypeptide on the cell surface and is able to neutralize its 5'-ectonucleotidase activity, while the antibody or antibody fragment inhibits the activity of the human CD73 polypeptide no detectable reduction in binding between the CD73 polypeptide and its substrate.
31. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что у антитела или фрагмента антитела выявляют пониженное связывание с мутантным полипептидом CD73, содержащим мутацию K136A и/или мутации A99S, Е129А, K133A, E134N и A135S (в последовательности SEQ ID NO: 1), по сравнению со связыванием между антителом или фрагментом антитела и полипептидом CD73 дикого типа, содержащим последовательность аминокислот SEQ ID NO: 1.31. An antibody or antibody fragment according to any of the preceding claims, characterized in that the antibody or antibody fragment exhibits reduced binding to a mutant CD73 polypeptide containing the K136A mutation and/or the A99S, E129A, K133A, E134N and A135S mutations (in the sequence of SEQ ID NO: 1), compared to binding between an antibody or antibody fragment and a wild-type CD73 polypeptide containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
32. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержат домен Fc человеческого происхождения, который модифицирован, чтобы уменьшить связывание между указанным доменом Fc и рецептором Fcγ человека.32. An antibody or antibody fragment according to any of the preceding claims, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a human Fc domain that is modified to reduce binding between said Fc domain and the human Fcγ receptor.
33. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент антитела содержит домен Fc IgG1 человека, содержащий замены аминокислот в остатках 234, 235 и 331, или содержащий замены аминокислот в остатках 234, 235 и 322 (нумерация EU по Кабату).33. An antibody or antibody fragment according to any of the preceding claims, characterized in that the antibody or antibody fragment contains a human IgG1 Fc domain containing amino acid substitutions at residues 234, 235 and 331, or containing amino acid substitutions at residues 234, 235 and 322 (numbering EU according to Kabat).
34. Антитело по любому из предыдущих пунктов, отличающееся тем, что антитело представляет собой полноразмерное антитело.34. An antibody according to any one of the preceding claims, characterized in that the antibody is a full length antibody.
35. Антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, отличающиеся тем, что антитело представляет собой фрагмент антитела.35. An antibody or antibody fragment according to any one of the preceding claims, characterized in that the antibody is an antibody fragment.
36. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов и фармацевтически приемлемый носитель.36. A pharmaceutical composition comprising an antibody or antibody fragment according to any one of the preceding paragraphs and a pharmaceutically acceptable carrier.
37. Набор, содержащий антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов, необязательно дополнительно содержащий меченое вторичное антитело, которое специфически распознает антитело или фрагмент антитела по любому из предыдущих пунктов.37. A kit containing an antibody or antibody fragment according to any one of the preceding paragraphs, optionally further containing a labeled secondary antibody that specifically recognizes the antibody or antibody fragment according to any of the previous paragraphs.
38. Нуклеиновая кислота или набор нуклеиновых кислот, кодирующих тяжелую и/или легкую цепь антитела или фрагмента антитела по любому из пп. 1-35.38. Nucleic acid or set of nucleic acids encoding the heavy and/or light chain of an antibody or antibody fragment according to any one of paragraphs. 1-35.
39. Рекомбинантная клетка-хозяин, продуцирующая антитело или фрагмент антитела по любому из пп. 1-35.39. A recombinant host cell that produces an antibody or antibody fragment according to any one of paragraphs. 1-35.
40. Способ лечения или предотвращения заболевания у нуждающегося в этом пациента, указанный способ включает введение указанному пациенту эффективного количества антитела, фрагмента антитела или композиции по любому из пп. 1-36.40. A method of treating or preventing a disease in a patient in need thereof, said method comprising administering to said patient an effective amount of an antibody, antibody fragment or composition according to any one of paragraphs. 1-36.
41. Способ по п. 40, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой рак или инфекционное заболевание.41. The method of claim 40, wherein said disease is cancer or an infectious disease.
42. Способ по любому из пп. 40 или 41, отличающийся тем, что заболевание или рак представляют собой лейкоз, рак мочевого пузыря, глиому, глиобластому, рак яичников, меланому, рак предстательной железы, рак щитовидной железы, рак желудка, рак пищевода, рак поджелудочной железы или рак молочной железы.42. The method according to any one of paragraphs. 40 or 41, wherein the disease or cancer is leukemia, bladder cancer, glioma, glioblastoma, ovarian cancer, melanoma, prostate cancer, thyroid cancer, gastric cancer, esophageal cancer, pancreatic cancer, or breast cancer.