Claims (23)
1. Растительная клетка, содержащая1. Plant cell containing
(a) полинуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид нитратредуктазу, содержащий непрерывную полипептидную последовательность под SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 7, где метионин заменен аминокислотой, уменьшающей уровни нитратов в растительной клетке по сравнению с контрольной растительной клеткой;(a) a polynucleotide sequence encoding a nitrate reductase polypeptide comprising the contiguous polypeptide sequence of SEQ ID NO: 5 or SEQ ID NO: 7, wherein methionine is replaced by an amino acid that reduces nitrate levels in a plant cell compared to a control plant cell;
(b) полипептидную последовательность, кодируемую полинуклеотидной последовательностью, представленной в (a); или(b) a polypeptide sequence encoded by the polynucleotide sequence shown in (a); or
(c) конструкцию, вектор или вектор экспрессии, содержащие полинуклеотидную последовательность, представленную в (b).(c) a construct, vector or expression vector containing the polynucleotide sequence shown in (b).
2. Клетка по п. 1, где метионин заменен другой аминокислотой, где заменяющая аминокислота предпочтительно представляет собой изолейцин, где полипептид предпочтительно содержит непрерывную полипептидную последовательность под SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 8.2. The cell according to claim 1, where the methionine is replaced by another amino acid, where the replacement amino acid is preferably isoleucine, where the polypeptide preferably contains a continuous polypeptide sequence under SEQ ID NO: 6 or SEQ ID NO: 8.
3. Клетка по п. 1 или 2, где полипептид нитратредуктаза содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 527 в последовательности, характеризующейся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 1.3. The cell according to claim 1 or 2, wherein the nitrate reductase polypeptide contains an amino acid substitution at a position corresponding to position 527 in a sequence characterized by at least 80% sequence identity with SEQ ID NO: 1.
4. Клетка по любому из предыдущих пунктов, где полипептид нитратредуктаза содержит полипептидную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 3, состоит из нее или, по сути, состоит из нее.4. The cell according to any one of the preceding claims, wherein the nitrate reductase polypeptide comprises, consists of, or essentially consists of the polypeptide sequence shown under SEQ ID NO: 3.
5. Клетка по любому из предыдущих пунктов, где полинуклеотидная последовательность содержит полинуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 4, состоит из нее или по сути состоит из нее.5. A cell according to any one of the preceding claims, wherein the polynucleotide sequence comprises, consists of, or essentially consists of, a polynucleotide sequence having at least 80% sequence identity with SEQ ID NO: 4.
6. Клетка по любому из предыдущих пунктов, где полинуклеотидная последовательность содержит полинуклеотидную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 4, состоит из нее или, по сути, состоит из нее.6. A cell according to any one of the preceding claims, wherein the polynucleotide sequence comprises, consists of, or essentially consists of, the polynucleotide sequence shown under SEQ ID NO: 4.
7. Клетка по любому из предыдущих пунктов, где растительная клетка представляет собой клетку растения Nicotiana tabacum.7. A cell according to any one of the preceding claims, wherein the plant cell is a Nicotiana tabacum plant cell.
8. Клетка по п. 7, где растительная клетка представляет собой клетку растения Nicotiana tabacum культивара AA37.8. The cell of claim 7, wherein the plant cell is a Nicotiana tabacum cultivar AA37 plant cell.
9. Растение или его часть, содержащие растительную клетку по любому из предыдущих пунктов; где предпочтительно высушенные листья растения или его части содержат более низкие уровни нитратов по сравнению с контрольным растением или его частью, где предпочтительно уровень нитратов уменьшен по сравнению с контрольным растением или его частью.9. A plant or part thereof containing a plant cell according to any one of the preceding paragraphs; where preferably the dried leaves of the plant or part contain lower levels of nitrate compared to the control plant or part, where preferably the level of nitrate is reduced compared to the control plant or part.
10. Растительный материал, высушенный растительный материал или гомогенизированный растительный материал, полученный из растения или его части по п. 9, где высушенный растительный материал предпочтительно представляет собой растительный материал воздушной сушки, или солнечной сушки, или трубоогневой сушки; где растительный материал, высушенный растительный материал или гомогенизированный растительный материал предпочтительно содержит биомассу, семя, стебель, цветки или листья растения или его части по п. 9.10. Plant material, dried plant material or homogenized plant material obtained from a plant or part thereof according to claim 9, where the dried plant material is preferably an air-dried or sun-dried or fire-dried plant material; where plant material, dried plant material or homogenized plant material preferably contains biomass, seed, stem, flowers or leaves of a plant or parts thereof according to claim 9.
11. Табачный продукт, содержащий растительную клетку по любому из пп. 1-8, часть растения по п. 9 или растительный материал по п. 10.11. Tobacco product containing a plant cell according to any one of paragraphs. 1-8, plant part according to claim 9 or plant material according to claim 10.
12. Способ получения растения по п. 9, включающий стадии:12. A method for obtaining a plant according to claim 9, including the steps:
(a) получения растительной клетки по любому из пп. 1-8; (a) obtaining a plant cell according to any one of paragraphs. 1-8;
(b) размножения растительной клетки с получением растения.(b) propagating the plant cell to obtain a plant.
13. Способ получения высушенного растительного материала с измененным количеством нитратов по сравнению с контрольным растительным материалом, включающий стадии:13. A method for obtaining dried plant material with a changed amount of nitrates compared to the control plant material, including the steps:
(a) получения растения или его части по п. 9 или растительного материала по п. 10;(a) obtaining a plant or part thereof according to paragraph 9 or plant material according to paragraph 10;
(b) необязательно сбора растительного материала с растения или его части; (b) optionally collecting plant material from a plant or part thereof;
(c) сушки растительного материала.(c) drying the plant material.
14. Способ по п. 13, где растительный материал содержит высушенные листья.14. The method of claim 13 wherein the plant material comprises dried leaves.
15. Способ по п. 14, где способ сушки выбран из группы, состоящей из воздушной сушки, огневой сушки, дымовой сушки и трубоогневой сушки.15. The method of claim 14, wherein the drying method is selected from the group consisting of air drying, fire drying, flue drying, and fire tube drying.