RU2021113880A - Биспецифическое антитело и его применение - Google Patents
Биспецифическое антитело и его применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2021113880A RU2021113880A RU2021113880A RU2021113880A RU2021113880A RU 2021113880 A RU2021113880 A RU 2021113880A RU 2021113880 A RU2021113880 A RU 2021113880A RU 2021113880 A RU2021113880 A RU 2021113880A RU 2021113880 A RU2021113880 A RU 2021113880A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bispecific antibody
- amino acid
- antibody according
- sequence
- acid sequence
- Prior art date
Links
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 title claims 30
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 title claims 30
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 23
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims 17
- 102000005632 Single-Chain Antibodies Human genes 0.000 claims 15
- 108010070144 Single-Chain Antibodies Proteins 0.000 claims 15
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 claims 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 11
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims 6
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 claims 4
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 claims 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 4
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-N-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-N,1-N-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 claims 3
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 claims 3
- 125000000267 glycino group Chemical group [H]N([*])C([H])([H])C(=O)O[H] 0.000 claims 3
- 210000004962 mammalian cells Anatomy 0.000 claims 3
- 125000000773 L-serino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])*)C([H])([H])O[H] 0.000 claims 2
- 206010062081 Plasma cell disease Diseases 0.000 claims 2
- 208000007452 Plasmacytoma Diseases 0.000 claims 2
- 206010047802 Waldenstrom's macroglobulinaemias Diseases 0.000 claims 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims 2
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 claims 2
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 claims 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims 2
- 201000000564 macroglobulinemia Diseases 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 2
- 206010002022 Amyloidosis Diseases 0.000 claims 1
- 206010002023 Amyloidosis Diseases 0.000 claims 1
- 206010003816 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims 1
- 210000000988 Bone and Bones Anatomy 0.000 claims 1
- 102100014838 FCGRT Human genes 0.000 claims 1
- 101710003435 FCGRT Proteins 0.000 claims 1
- 229940084986 Human Chorionic Gonadotropin Drugs 0.000 claims 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 claims 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 claims 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 claims 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 claims 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims 1
- 208000003359 Plasma Cell Leukemia Diseases 0.000 claims 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims 1
- 208000004346 Smoldering Multiple Myeloma Diseases 0.000 claims 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims 1
- 201000006569 extramedullary plasmacytoma Diseases 0.000 claims 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 claims 1
- 230000003899 glycosylation Effects 0.000 claims 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims 1
- 201000008064 heavy chain disease Diseases 0.000 claims 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 claims 1
- 201000005328 monoclonal gammopathy of uncertain significance Diseases 0.000 claims 1
- 201000009251 multiple myeloma Diseases 0.000 claims 1
- 201000009234 osteosclerotic myeloma Diseases 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 claims 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims 1
Claims (50)
1. Биспецифическое антитело, в котором молекула состоит из двух идентичных полипептидных цепей, ковалентно связанных с образованием четырехвалентного гомодимера, каждая из полипептидных цепей содержит первый одноцепочечный Fv, специфически связывающийся с опухолевым антигеном ВСМА, второй одноцепочечный Fv, специфически связывающийся с антигеном эффекторной клетки CD3, Fc-фрагмент, где первый одноцепочечный Fv и второй одноцепочечный Fv соединены связывающим пептидом, а указанные второй одноцепочечный Fv и Fc- фрагмент соединены напрямую или связывающим пептидом.
2. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что Fc-фрагмент не имеет эффекторных функций CDC, ADCC и ADCP.
3. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что первый одноцепочечный Fv содержит домен VH и домен VL, соединенные связывающим пептидом, аминокислотная последовательность связывающего пептида представляет собой (GGGGX)n, где, в X содержатся Ser или Ala, n - натуральное число от 1 до 5; X предпочтительно представляет собой Ser, n предпочтительно равно 3.
4. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что первый одноцепочечный Fv содержит:
(1) домен VH, содержащий HCDR1, HCDR2 и HCDR3, показанную в SEQ ID NO: 1, 2 и 3 соответственно, последовательность, имеющую не менее 80% сходства с вышеуказанными последовательностями или имеющую одну или несколько замен консервативных аминокислотных последовательностей; а также
(2) домен VL, содержащий LCDR1, LCDR2 и LCDR3, показанную в SEQ ID NO: 4, 5 и 6 соответственно, последовательность, имеющую не менее 80% сходства с вышеуказанными последовательностями или имеющую одну или несколько замен консервативных аминокислотных последовательностей.
5. Биспецифическое антитело по п. 1 или 4, отличающееся тем, что первый одноцепочечный Fv содержит:
(1) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 7, или последовательность, имеющую не менее 80% сходства с вышеуказанной последовательностью или имеющую одну или несколько замен консервативных аминокислотных последовательностей; а также
(2) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 8, или последовательность, имеющую не менее 80% сходства с вышеуказанной последовательностью или имеющую одну или несколько замен консервативных аминокислотных последовательностей.
6. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что домен VH и домен VL, содержащиеся во втором одноцепочечном Fv, соединены связывающим пептидом, аминокислотная последовательность связывающего пептида представляет собой (GGGGX)n, где, Х включает Ser или Ala, n - натуральное число от 1 до 5; X предпочтительно представляет собой Ser, n предпочтительно равно 3.
7. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что второй одноцепочечный Fv содержит:
(1) домен VH, содержащий HCDR1, HCDR2 и HCDR3, показанную в SEQ ID NO: 11, 12 и
13 соответственно, последовательность, имеющую не менее 80% сходства с вышеуказанными последовательностями или имеющую одну или несколько замен консервативных аминокислотных последовательностей; а также
(2) домен VL, содержащий LCDR1, LCDR2 и LCDR3, показанную в SEQ ID NO: 14, 15 и 16 соответственно, последовательность, имеющую не менее 80% сходства с вышеуказанными последовательностями или имеющую одну или несколько замен консервативных аминокислотных последовательностей.
8. Биспецифическое антитело по п. 1 или 7, отличающееся тем, что второй одноцепочечный Fv содержит:
1) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 17, или последовательность, имеющую не менее 80% сходства с вышеуказанной последовательностью или имеющую одну или несколько замен консервативных аминокислотных последовательностей; а также
2) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 18, или последовательность, имеющую не менее 80% сходства с вышеуказанной последовательностью или имеющую одну или несколько замен консервативных аминокислотных последовательностей.
9. Биспецифическое антитело по п. 1 или 7, отличающееся тем, что второй одноцепочечный FV способен специфически связываться с CD3 человека, макака-крабоеда или макака-резуса.
10. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что связывающий пептид, связывающий первый одноцепочечный Fv и второй одноцепочечный Fv, состоит из гибкого пептида и жесткого пептида; и гибкий пептид содержит 2 или более аминокислот и предпочтительно состоит из любой комбинации двух или более из следующих аминокислот: Gly (G), Ser (S), Ala (А) и Thr (T); более предпочтительно гибкий пептид содержит остатки G и S; Еще более предпочтительно общая структурная формула аминокислот гибкого пептида представляет собой GxSy(GGGGS)z, где, х, у и z являются целыми числами, большими или равными 0, и x + y + z ≥ 1; указанный жесткий пептид происходит из полноразмерной последовательности, состоящей из аминокислот в положениях от 118 до 145 на карбоксильном конце β-субъединицы природного хорионического гонадотропина человека или ее укороченного фрагмента; и предпочтительно жесткий пептид содержит аминокислотную последовательность SSSSKAPPPS.
11. Биспецифическое антитело по п. 10, отличающееся тем, что связывающий пептид содержит аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 10.
12. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что связывающий пептид, связывающий Fc-фрагмент и второй одноцепочечный Fv, содержит 1-20 аминокислот и предпочтительно состоит из любой повторяющейся комбинации следующих аминокислот: Gly (G), Сер (S), Ala (А) и Thr (Т); более предпочтительно состоит из любой повторяющейся комбинации Gly (G) и Ser (S); еще более предпочтительно связывающий пептид состоит из (GGGGS)n, где n = 1, 2, 3 или 4.
13. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что Fc-фрагмент содержит шарнирную область, домены СН2 и СН3, происходящие из константной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека; предпочтительно, Fc-фрагмент состоит из константных областей тяжелой цепи человеческих клеток IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD и IgE; предпочтительно, Fc-фрагмент состоит из константных областей тяжелой цепи человеческих клеток IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4; и более предпочтительно Fc-фрагмент состоит из константной области тяжелой цепи человеческих клеток IgG1 или IgG4.
14. Биспецифическое антитело по п. 13, отличающееся тем, что Fc-фрагмент содержит замену, делецию или добавление одной или более аминокислот по сравнению с его исходной природной последовательностью.
15. Биспецифическое антитело по п. 13, отличающееся тем, что Fc-фрагмент содержит аминокислотные замены, делеции или добавления с уменьшенными или устраненными эффекторными функциями.
16. Биспецифическое антитело по п. 15, отличающееся тем, что Fc-фрагмент содержит аминокислотные замены L234A / L235A / P331S, определенные в соответствии со схемой нумерации EU.
17. Биспецифическое антитело по п. 15 или 16, отличающееся тем, что Fc-фрагмент также содержит замены, делеции или добавления аминокислот, обладающих одним или несколькими из следующих свойств:
(1) повышенная аффинность связывания с неонатальным рецептором FcRn;
(2) уменьшенное или устраненное гликозилирование;
(3) уменьшение или устранение неоднородности заряда.
18. Биспецифическое антитело по п. 17, отличающееся тем, что Fc-фрагмент дополнительно содержит одну или несколько аминокислотных замен, делеций или добавлений, указанных ниже:
(1) аминокислотные замены M428L, T250Q / M428L, M428L/ N434S или M252Y / S254T / Т256Е, определенные в соответствии со схемой нумерации ЕС; и/или
(2) аминокислотные замены N297A, определенные в соответствии со схемой нумерации ЕС; и/или
(3) делеции аминокислоты К447, определенные в соответствии со схемой нумерации ЕС.
19. Биспецифическое антитело по п. 17, отличающееся тем, что Fc-фрагмент содержит аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 19, по сравнению с его исходной природной последовательностью, имеющую смещения или замены следующих 6 аминокислот, нижеуказанных определенных в соответствии с ЕС: L234A / L235A / N297A / P331S / T250Q / M428L; обусловленных отсутствием или удалением K447, определенных в соответствии со схемой нумерации ЕС.
20. Биспецифическое антитело по п. 1, отличающееся тем, что оно связывается с ВСМА и CD3 человечества, содержит следующие аминокислотные последовательности:
(1) последовательности, показанные в SEQ ID NO: 20; или же
(2) последовательности, имеющие одну или несколько замен, делеций или добавлений по сравнению с последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 20; или же
(3) последовательности, имеющие не менее 80%, не менее 85%, не менее 90%, не менее 91%, не менее 92%, не менее 93%, не менее 94%, не менее 95%, не менее 96%, не менее, 97%, не менее 98%, не менее, 99% или 100% идентичности с последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 20.
21. Молекула ДНК, отличающаяся тем, что она кодирует биспецифическое антитело по любому из пп. 1-20 в формуле изобретения.
22. Молекула ДНК по п. 21, отличающаяся тем, что она имеет нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 21.
23. Вектор экспрессии, отличающийся тем, что он имеет молекулу ДНК, кодирующую аминокислоту по п. 21 или молекулу ДНК по п. 22.
24. Клетка-хозяин, отличающаяся тем, что она трансформирована вектором экспрессии по п. 23, предпочтительно клетка-хозяин представляет собой прокариотическую клетку или дрожжевую клетку или клетку млекопитающего, более предпочтительно клетка-хозяин представляет собой клетку млекопитающего, а еще более предпочтительно клетка млекопитающего представляют собой клетки СНО или клетки NS0.
25. Фармацевтическая композиция, содержащая биспецифическое антитело по любому из пп. 1-20 и фармацевтически приемлемый наполнитель, и/или носитель, и/или разбавитель.
26. Способ получения биспецифического антитела по любому из пп. 1-20, отличающийся тем, что он содержит:
(а) получение слитого гена биспецифического антитела и конструирование вектора экспрессии биспецифического антитела;
(б) трансфекцию вышеуказанного вектора экспрессии в клетку хозяина способом генной инженерии;
(в) культивирование вышеуказанной клетки хозяина в условиях, позволяющих продуцировать биспецифическое антитело;
(г) отделение и очистка антитела.
27. Применение биспецифического антитела по любому из пп. 1-20 в лекарственном средстве, предназначенного для лечения или облегчения симптомов нарушений плазматических клеток и других нарушений В-клеток и аутоиммунных заболеваний, связанных с экспрессией ВСМА, где нарушения плазматических клеток включают, но не ограничиваются ими: множественная миелома, плазмоцитома, лейкоз плазматических клеток, макроглобулинемия, амилоидоз, макроглобулинемия Вальденстрема, плазмоцитома солитарной кости, экстрамедуллярная плазмоцитома, остеосклеротическая миелома, болезнь тяжелых цепей, моноклональная гаммопатия неопределенного значения и тлеющая множественная миелома.
28. Комбинированный продукт для лечения заболевания, как оно определено в п. 27, в котором биспецифическое антитело представляет собой АР163.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811294887.4 | 2018-11-01 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021113880A true RU2021113880A (ru) | 2022-12-01 |
| RU2785292C2 RU2785292C2 (ru) | 2022-12-06 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7344858B2 (ja) | Ｆｃ含有ポリペプチドの安定化 | |
| EP3387013B1 (en) | Heterodimeric antibodies that bind cd3 and psma | |
| AU2017272111B2 (en) | Compositions and methods related to engineered Fc constructs | |
| KR20190060821A (ko) | IL-15/IL-15Rα FC-융합 단백질 및 PD-1 항체 단편을 포함하는 이중특이성 이종이량체 융합 단백질 | |
| US11739144B2 (en) | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CLDN6 | |
| WO2021228091A1 (zh) | St2抗原结合蛋白 | |
| US20240034815A1 (en) | Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3 | |
| RU2021113880A (ru) | Биспецифическое антитело и его применение | |
| JP2023553384A (ja) | 複数の結合ドメインを有する免疫グロブリン構築物 | |
| EP4237003A1 (en) | Compositions and methods for modulating delta gamma chain mediated immunity | |
| JP2019147786A (ja) | ヒトｇｐ１３０受容体に対するヒト化抗体 | |
| US20240228608A9 (en) | Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cldn6 | |
| US20230203198A1 (en) | Bispecific binding constructs | |
| WO2023073599A1 (en) | Engineered fc variants | |
| WO2024104988A1 (en) | Recombinant binding proteins with activatable effector domain | |
| TW202311295A (zh) | 一種抗原結合分子 | |
| CN117377689A (zh) | 结合cd3和gpc3的异二聚抗体 |