Claims (36)
1. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток, содержащая:1. A population of genetically engineered hematopoietic cells containing:
(i) первую группу генетически сконструированных гемопоэтических клеток, которые имеют генетическое редактирование в первом гене, кодирующем первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, где первая группа генетически сконструированных гемопоэтических клеток (a) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена или (b) экспрессирует мутант первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена; и(i) a first group of genetically engineered hematopoietic cells that have a genetic edit in a first gene encoding a first lineage-specific cell surface antigen, wherein the first group of genetically engineered hematopoietic cells (a) has reduced or absent expression of the first lineage-specific cell surface antigen, or (b) expresses a mutant of the first lineage-specific cell surface antigen; and
(ii) вторую группу генетически сконструированных гемопоэтических клеток, которые имеют генетическое редактирование во втором гене, кодирующем второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, где вторая группа генетически сконструированных гемопоэтических клеток (a) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена или (b) экспрессирует мутант второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена,(ii) a second group of genetically engineered hematopoietic cells that have a genetic edit in a second gene encoding a second lineage-specific cell surface antigen, wherein the second group of genetically engineered hematopoietic cells (a) has reduced or absent expression of the second lineage-specific cell surface antigen, or (b) expresses a mutant of the second lineage-specific cell surface antigen,
где первая группа генетически сконструированных гемопоэтических клеток частично пересекается со второй группой генетически сконструированных гемопоэтических клеток, иwhere the first group of genetically engineered hematopoietic cells partially overlap with the second group of genetically engineered hematopoietic cells, and
где первый и второй линиеспецифические поверхностноклеточные антигены выбирают из группы, состоящей из:where the first and second lineage specific cell surface antigens are selected from the group consisting of:
(i) CD19 и CD33;(i) CD19 and CD33;
(ii) CD33 и CD123; и(ii) CD33 and CD123; and
(iii) CD33 и CLL-1.(iii) CD33 and CLL-1.
2. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток, где одна или более клеток популяции:2. A population of genetically engineered hematopoietic cells, where one or more cells in the population:
(i) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена относительно дикого типа эквивалентной клетки ли экспрессирует мутант первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена, где первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген экспрессирован в первичном раке у субъекта; и(i) has reduced or no expression of the first lineage-specific cell surface antigen relative to the wild-type equivalent cell, or expresses a first lineage-specific cell surface antigen mutant, wherein the first lineage-specific cell surface antigen is expressed in the subject's primary cancer; and
(ii) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена относительно дикого типа эквивалентной клетки или экспрессирует мутант второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена, где второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген экспрессирован в рецидивирующем раке у субъекта.(ii) has reduced or absent expression of the second lineage-specific cell surface antigen relative to the wild-type equivalent cell, or expresses a mutant of the second lineage-specific cell surface antigen, wherein the second lineage-specific cell surface antigen is expressed in recurrent cancer in the subject.
3. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по п. 2, где первым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD19, и вторым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD33.3. The genetically engineered hematopoietic cell population of claim 2, wherein the first lineage-specific cell surface antigen is CD19 and the second lineage-specific cell surface antigen is CD33.
4. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток, где одна или более клеток популяции:4. A population of genetically engineered hematopoietic cells, where one or more cells in the population:
(i) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена относительно дикого типа эквивалентной клетки, или экспрессирует мутант первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена, где первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген экспрессируется в первой субпопуляции раковых клеток у субъекта; и(i) has reduced or no expression of the first lineage-specific cell surface antigen relative to the wild-type equivalent cell, or expresses a mutant of the first lineage-specific cell surface antigen, wherein the first lineage-specific cell surface antigen is expressed in a first subpopulation of cancer cells in the subject; and
(ii) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена относительно дикого типа эквивалентной клетки, или экспрессирует мутант второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена, где второй линиеспецифический поверхностноклеточный антигене экспрессирован во второй субпопуляции раковых клеток у субъекта.(ii) has reduced or absent expression of the second lineage-specific cell surface antigen relative to the wild-type equivalent cell, or expresses a mutant of the second lineage-specific cell surface antigen, wherein the second lineage-specific cell surface antigen is expressed in a second subpopulation of cancer cells in the subject.
5. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по п. 4, где первым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD33 и вторым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD123 или CLL-1.5. The genetically engineered hematopoietic cell population of claim 4, wherein the first lineage-specific cell surface antigen is CD33 and the second lineage-specific cell surface antigen is CD123 or CLL-1.
6. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где, по меньшей мере, 40% копий гена, кодирующего первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, имеют генетическое редактирование и, по меньшей мере, 40% копий гена, кодирующего второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген имеет генетическое редактирование.6. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims, wherein at least 40% of the copies of the gene encoding the first lineage-specific cell surface antigen have a genetic edit and at least 40% of the copies of the gene encoding the second lineage-specific cell surface antigen have genetic editing.
7. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где поверхностные уровни первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в популяции составляют менее чем 40% от поверхностных уровней первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в эквивалентных клетках дикого типа.7. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims, wherein the surface levels of the first lineage-specific cell surface antigen in the population are less than 40% of the surface levels of the first lineage-specific cell surface antigen in equivalent wild-type cells.
8. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где поверхностные уровни второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в популяции составляют менее чем 40% от поверхностных уровней второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в эквивалентных клетках дикого типа.8. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims, wherein the surface levels of the second lineage-specific cell surface antigen in the population are less than 40% of the surface levels of the second lineage-specific cell surface antigen in equivalent wild-type cells.
9. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где одно или оба из: генетическое редактирование гена, кодирующего первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген содержит мутацию «сдвига рамки», и генетическое редактирование второго гена содержит мутацию «сдвига рамки».9. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims, wherein one or both of the gene editing of the gene encoding the first lineage specific cell surface antigen contains a frameshift mutation and the genetic editing of the second gene contains a frameshift mutation.
10. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, которая способна расти в культуре на, по меньшей мере, 2-кратно в течение 8 дней.10. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims, which is capable of growing in culture by at least 2-fold in 8 days.
11. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где поверхностные уровни второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в популяции составляют менее чем 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 2% или 1% от поверхностных уровней второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в эквивалентных клетках дикого типа.11. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims, wherein the surface levels of the second lineage-specific cell surface antigen in the population are less than 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 2%, or 1% of the surface levels of the second lineage-specific cell surface antigen in equivalent wild-type cells.
12. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, которая способна приживаться.12. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims which is capable of engrafting.
13. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где гемопоэтическими клетками являются гемопоэтические стволовые клетки (HSC).13. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims, wherein the hematopoietic cells are hematopoietic stem cells (HSCs).
14. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где CD33 псевдоген не модифицирован в одной или более (например, по меньшей мере, 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или всех) клетках популяции.14. A population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of the preceding claims, wherein the CD33 pseudogene is not modified in one or more (e.g., at least 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% or all) of the population cells.
15. Способ поставки гемопоэтических клеток субъекту (например, субъекту, имеющему гемопоэтическое злокачественное образование), включающий:15. A method of delivering hematopoietic cells to a subject (for example, a subject having a hematopoietic malignancy), including:
(a) получение популяции генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из пп. 1-14; и(a) obtaining a population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of paragraphs. 1-14; and
(b) введение популяции генетически сконструированных гемопоэтических клеток субъекту,(b) introducing a population of genetically engineered hematopoietic cells to a subject,
тем самым поставляя гемопоэтические клетки субъекту.thereby supplying hematopoietic cells to the subject.
16. Способ лечения гемопоэтического злокачественного образования, включающий:16. A method for the treatment of hematopoietic malignancy, including:
введение субъекту, нуждающемуся в этом, популяции генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из пп. 1-14;administering to a subject in need thereof a population of genetically engineered hematopoietic cells according to any one of paragraphs. 1-14;
введение субъекту эффективного количества первого иммунотерапевтического агента, который таргетирует первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, иadministering to the subject an effective amount of a first immunotherapeutic agent that targets the first lineage specific cell surface antigen, and
введение субъекту эффективного количества второго иммунотерапевтического агента, который таргетирует второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген.administering to the subject an effective amount of a second immunotherapeutic agent that targets a second lineage specific cell surface antigen.
17. Способ по п. 16, где первый иммунотерапевтический агент вводят, если субъект имеет первичный рак, и второй иммунотерапевтический агент вводят, если субъект имеет рецидив рака или рак, резистентный к первому иммунотерапевтическому агенту.17. The method of claim 16, wherein the first immunotherapeutic agent is administered if the subject has a primary cancer and the second immunotherapeutic agent is administered if the subject has cancer recurrence or cancer resistant to the first immunotherapeutic agent.
18. Способ по п. 16, где субъект имеет рак, который содержит первую субпопуляцию раковых клеток, которые экспрессируют первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, и вторую субпопуляцию раковых клеток, которые экспрессируют второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген.18. The method of claim 16 wherein the subject has a cancer that comprises a first subpopulation of cancer cells that express a first lineage specific cell surface antigen and a second subset of cancer cells that express a second lineage specific cell surface antigen.
19. Способ по п. 18, где первым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD33, и вторым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD123 или CLL-1.19. The method of claim 18, wherein the first lineage-specific cell surface antigen is CD33 and the second lineage-specific cell surface antigen is CD123 or CLL-1.