Claims (19)
1. Композиция, способная к аэрозолизации, содержащая экзосомы из мезенхимальных стволовых клеток (МСК), имеющие поверхностное покрытие из гидрофильного полимера полиэтиленгликоля (ПЭГ), причем везикулы несут груз, содержащий микроРНК (miR), анти-miR, мРНК, длинную некодирующую РНК, кольцевую РНК, малую интерферирующую РНК, короткую шпилечную РНК, piwi-взаимодействующую РНК, последовательность РНК кластерных коротких палиндромных повторов, разделенных регулярными промежутками (CRISPR), модификации вышеуказанного или искусственно сконструированные последовательности нуклеиновых кислот, белок, цитокин или липид, где ПЭГ имеет молекулярную массу меньше чем 5 кДа, поверхностное покрытие покрывает по меньшей мере 65% поверхности экзосом и по существу нейтрализует поверхностный заряд экзосом. 1. An aerosolizable composition comprising mesenchymal stem cell (MSC) exosomes having a surface coating of a hydrophilic polyethylene glycol (PEG) polymer, wherein the vesicles carry a cargo containing microRNA (miR), anti-miR, mRNA, long non-coding RNA, circular RNA, small interfering RNA, short hairpin RNA, piwi interacting RNA, clustered short palindromic repeats spaced at regular intervals (CRISPR) RNA sequence, modifications of the foregoing or engineered nucleic acid sequences, protein, cytokine or lipid, where PEG has the molecular weight less than 5 kDa, the surface coating covers at least 65% of the surface of the exosomes and substantially neutralizes the surface charge of the exosomes.
2. Композиция по п. 1, в которой гидрофильный полимер содержит дистеароилфосфатидилэтаноламин-полиэтиленгликоль (ДСФЭ-ПЭГ).2. The composition according to claim 1, in which the hydrophilic polymer contains distearoylphosphatidylethanolamine-polyethylene glycol (DSPE-PEG).
3. Композиция по п. 1 или 2, в которой полимер, покрывающий поверхность, имеет молекулярную массу меньше 3 кДа.3. A composition according to claim 1 or 2, wherein the surface coating polymer has a molecular weight of less than 3 kDa.
4. Композиция по любому из пп. 1-3, в которой в экзосомах имеется груз, содержащий микроРНК (miR).4. The composition according to any one of paragraphs. 1-3, in which exosomes have a cargo containing microRNA (miR).
5. Композиция по п. 4, в которой miR выбрана из miR-125b-5p, miR-125b-1-3p, miR-513a-5p и miR-17. Последовательность типа «стебель-петля» (пре-микроРНК) hsa-mir-125b-1 может сверхэкспрессироваться с получением внеклеточных везикул (EV), содержащих обе зрелые последовательности miR-125b-1-3p и miR-125b-5p.5. Composition according to claim 4, wherein miR is selected from miR-125b-5p, miR-125b-1-3p, miR-513a-5p and miR-17. The stem-loop sequence (pre-miRNA) hsa-mir-125b-1 can be overexpressed to produce extracellular vesicles (EVs) containing both miR-125b-1-3p and miR-125b-5p mature sequences.
6. Композиция по любому из пп. 1-5, в которой в экзосомах имеется груз, содержащий мРНК или ее транслированный белок.6. Composition according to any one of paragraphs. 1-5, in which exosomes have a cargo containing mRNA or its translated protein.
7. Композиция по п. 6, в которой мРНК представляет собой модифицированную мРНК регулятора трансмембранной проводимости при кистозном фиброзе (CFTR).7. The composition of claim 6 wherein the mRNA is a modified cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) mRNA.
8. Композиция по любому из пп. 1-7, содержащая водную суспензию или коллоид экзосом.8. The composition according to any one of paragraphs. 1-7 containing an aqueous suspension or colloid of exosomes.
9. Композиция по любому из пп. 1-8 для применения в терапии.9. The composition according to any one of paragraphs. 1-8 for use in therapy.
10. Композиция для применения по п. 9 для применения в терапии заболевания легкого.10. Composition for use according to claim 9 for use in the treatment of lung disease.
11. Композиция для применения по п. 9 или 10 для применения в терапии рака.11. Composition for use according to claim 9 or 10 for use in cancer therapy.
12. Коллоид или суспензия экзосом для применения в терапии, где в экзосомах имеется терапевтический груз, содержащий микроРНК (miR), анти-miR, мРНК, длинную некодирующую РНК, кольцевую РНК, малую интерферирующую РНК, короткую шпилечную РНК, piwi-взаимодействующую РНК, последовательность РНК CRISPR, модификации вышеуказанного или искусственно сконструированные последовательности нуклеиновых кислот, белок, цитокин или липид, и поверхностное покрытие из гидрофильного полимера полиэтиленгликоля (ПЭГ), где ПЭГ имеет молекулярную массу меньше чем 5 кДа, и поверхностное покрытие покрывает по меньшей мере 65% поверхности экзосом и по существу нейтрализует поверхностный заряд экзосом.12. A colloid or suspension of exosomes for use in therapy, where the exosomes contain a therapeutic cargo containing microRNA (miR), anti-miR, mRNA, long non-coding RNA, circular RNA, small interfering RNA, short hairpin RNA, piwi-interacting RNA, a CRISPR RNA sequence, modifications of the foregoing or artificially engineered nucleic acid sequences, a protein, cytokine or lipid, and a surface coating of a hydrophilic polyethylene glycol (PEG) polymer, wherein the PEG has a molecular weight of less than 5 kDa and the surface coating covers at least 65% of the surface exosomes and essentially neutralizes the surface charge of exosomes.
13. Коллоид или суспензия экзосом для применения по п. 12, где терапия предназначена для лечения кистозного фиброза, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), рака легкого или другого патологического состояния легкого.13. A colloid or suspension of exosomes for use according to claim 12, wherein the therapy is for the treatment of cystic fibrosis, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), lung cancer, or other pathological condition of the lung.
14. Коллоид или суспензия экзосом для применения по п. 12 или 13, где экзосомы содержат терапевтический груз, который содержит по меньшей мере одну экзогенную мРНК (например, in vitro транскрибируемую мРНК), белок, miR или анти-miR.14. A colloid or suspension of exosomes for use according to claim 12 or 13, wherein the exosomes contain a therapeutic cargo that contains at least one exogenous mRNA (eg, in vitro transcribed mRNA), protein, miR, or anti-miR.
15. Коллоид или суспензия экзосом для применения по любому из пп. 12-14, где экзосомы происходят из мезенхимальных стволовых клеток, генетически модифицированных для сверхэкспрессии специфичных miR, анти-miR, мРНК или другой нуклеиновой кислоты и зрелого белка в качестве терапевтических грузов.15. A colloid or suspension of exosomes for use according to any one of paragraphs. 12-14, where exosomes are derived from mesenchymal stem cells genetically modified to overexpress specific miR, anti-miR, mRNA or other nucleic acid and mature protein as therapeutic cargo.
16. Коллоид или суспензия экзосом для применения по любому из пп. 12-15, где лечение включает аэрозолизацию коллоида или суспензии.16. A colloid or suspension of exosomes for use according to any one of paragraphs. 12-15, where the treatment includes aerosolization of the colloid or suspension.
17. Способ лечения пациента, имеющего заболевание легкого, включающий: предоставление композиции по любому из пп. 1-8; образование аэрозоля везикул данной композиции и введение данного аэрозоля пациенту.17. A method of treating a patient with a lung disease, including: providing a composition according to any one of paragraphs. 1-8; forming an aerosol of the vesicles of the composition; and administering the aerosol to the patient.
18. Способ по п. 17, включающий образование аэрозоля с использованием небулайзера.18. The method according to p. 17, including the formation of an aerosol using a nebulizer.
19. Способ по п. 18, включающий образование аэрозоля с использованием вибрационного меш-небулайзера.19. The method of claim. 18, including the formation of an aerosol using a vibrating mesh nebulizer.