Claims (18)
1. Выделенная полинуклеотидная последовательность на от 75% до 90% идентичная нуклеотидной последовательности, как представлено в SEQ ID NO: 1, где указанная последовательность кодирует функциональную N-ацетил-галактозамин-6-сульфатазу человека.1. The isolated polynucleotide sequence is 75% to 90% identical to the nucleotide sequence as shown in SEQ ID NO: 1, wherein said sequence encodes a functional human N-acetyl-galactosamine-6-sulfatase.
2. Выделенная полинуклеотидная последовательность по п. 1, где указанная последовательность на от 80 до 85% идентична нуклеотидной последовательности, как представлено в SEQ ID NO: 1.2. The isolated polynucleotide sequence of claim 1, wherein said sequence is 80 to 85% identical to the nucleotide sequence as set forth in SEQ ID NO: 1.
3. Выделенная полинуклеотидная последовательность по п. 1 или 2, где указанная последовательность выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 7.3. An isolated polynucleotide sequence according to claim 1 or 2, wherein said sequence is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, and SEQ ID NO: 7.
4. Экспрессионный вектор, содержащий полинуклеотидную последовательность по любому из пп. 1-3.4. Expression vector containing the polynucleotide sequence according to any one of paragraphs. 1-3.
5. Экспрессионный вектор по п. 4, где указанный вектор содержит промотороную последовательность, функционально связанную с указанной полинуклеотидной последовательностью, причем указанный промотор выбран из промотора CAG, промотора hAAT или промотора CMV.5. The expression vector of claim 4, wherein said vector contains a promoter sequence operably linked to said polynucleotide sequence, said promoter being selected from a CAG promoter, an hAAT promoter, or a CMV promoter.
6. Экспрессионный вектор по п. 5, где указанный промотор представляет собой промотор CAG.6. An expression vector according to claim 5, wherein said promoter is a CAG promoter.
7. Экспрессионный вектор по любому из пп. 4-6, где указанный вектор представляет собой рекомбинантный AAV вектор.7. Expression vector according to any one of paragraphs. 4-6, where said vector is a recombinant AAV vector.
8. Экспрессионный вектор по п. 7, где указанный рекомбинантный AAV вектор выбран из AAV2, AAV5, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 и AAVrh10.8. Expression vector according to claim 7, wherein said recombinant AAV vector is selected from AAV2, AAV5, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 and AAVrh10.
9. Вектор по любому из пп. 4-6, где указанный вектор выбран из группы, состоящей из плазмиды pAAV-CAG-ohGALNS-вариант 1 с номером доступа DSM 32792, как представлено в SEQ ID NO: 4, плазмиды pAAV-CAG-ohGALNS-вариант 2 с номером доступа DSM 32793, как представлено в SEQ ID NO: 6, и плазмиды pAAV-CAG-ohGALNS-вариант 3 с номером доступа DSM 32794, как представлено в SEQ ID NO: 8.9. Vector according to any one of paragraphs. 4-6, wherein said vector is selected from the group consisting of plasmid pAAV-CAG-ohGALNS variant 1 with DSM accession number 32792 as shown in SEQ ID NO: 4, plasmid pAAV-CAG-ohGALNS variant 2 with DSM accession number 32793 as shown in SEQ ID NO: 6 and plasmids pAAV-CAG-ohGALNS variant 3 with DSM accession number 32794 as shown in SEQ ID NO: 8.
10. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество полинуклеотида по любому из пп. 1-3 или вектора по любому из пп. 4-9.10. A pharmaceutical composition containing a therapeutically effective amount of a polynucleotide according to any one of paragraphs. 1-3 or a vector according to any one of paragraphs. 4-9.
11. Фармацевтическая композиция по п. 10, отличающаяся тем, что композицию вводят внутривенно.11. Pharmaceutical composition according to claim 10, characterized in that the composition is administered intravenously.
12. Фармацевтическая композиция по п. 10 или 11, отличающаяся тем, что композицию вводят один раз в течение жизни.12. Pharmaceutical composition according to claim 10 or 11, characterized in that the composition is administered once during a lifetime.
13. Полинуклеотид по любому из пп. 1-3, вектор по любому из пп. 4-9 или фармацевтическая композиция по любому из пп. 10-12 для применения в медицине.13. Polynucleotide according to any one of paragraphs. 1-3, the vector according to any one of paragraphs. 4-9 or a pharmaceutical composition according to any one of paragraphs. 10-12 for use in medicine.
14. Вектор по любому из пп. 4-9 или фармацевтическая композиция по пп. 10-12 для применения для лечения мукополисахаридоза типа IVA или синдрома Моркио А.14. Vector according to any one of paragraphs. 4-9 or pharmaceutical composition according to paragraphs. 10-12 for use in the treatment of mucopolysaccharidosis type IVA or Morquio A syndrome.
15. Способ получения вектора по п. 7 или 8, предусматривающий стадии:15. A method for obtaining a vector according to claim 7 or 8, comprising the steps:
(i) обеспечения клетки, содержащей полинуклеотид согласно настоящему изобретению, AAV белки Cap, AAV белки Rep и необязательно вирусные белки, от которых зависит репликация AAV,(i) providing a cell comprising a polynucleotide of the present invention, AAV Cap proteins, AAV Rep proteins, and optionally viral proteins on which AAV replication depends,
(ii) поддержания клетки в условиях, подходящих для сборки AAV, и(ii) maintaining the cell under conditions suitable for AAV assembly, and
(iii) очистки аденоассоциированного вирусного вектора, продуцированного клеткой.(iii) purifying the adeno-associated viral vector produced by the cell.