Claims (32)
1. Биспецифическое антитело, которое специфично связывается с IV субдоменом внеклеточного домена (ECD4) HER2 (рецептор эпидермального фактора роста 2) человека и II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2 человека, включающее:1. A bispecific antibody that specifically binds to the fourth subdomain of the extracellular domain (ECD4) of HER2 (human epidermal growth factor receptor 2) and the second subdomain of the extracellular domain (ECD2) of human HER2, including:
1) первую антигенсвязывающую часть, которая специфично связывается с IV субдоменом внеклеточного домена (ECD4) HER2, и представляет собой одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv) трастузумаба с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 1;1) the first antigen-binding part, which specifically binds to the IV subdomain of the extracellular domain (ECD4) of HER2, and is a single-chain variable fragment (scFv) of trastuzumab with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1;
2) вторую антигенсвязывающую часть, которая специфично связывается с II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2, и представляет собой участок связывания антигена (Fab), включающий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 2, и вариабельный домен легкой цепи (VL) с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 6;2) the second antigen-binding part, which specifically binds to the II subdomain of the extracellular domain (ECD2) of HER2, and is an antigen binding site (Fab) comprising the variable domain of the heavy chain (VH) with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 2, and variable light chain domain (VL) with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 6;
3) кристаллизующийся фрагмент иммуноглобулина (Fc-фрагмент).3) a crystallizing immunoglobulin fragment (Fc fragment).
2. Биспецифическое антитело по п. 1, где антитело представляет собой антитело IgG.2. The bispecific antibody of claim 1, wherein the antibody is an IgG antibody.
3. Биспецифическое антитело по п. 2, где антитело IgG относится к изотипу IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 человека.3. The bispecific antibody of claim 2, wherein the IgG antibody is of the human IgG1, IgG2, IgG3 or IgG4 isotype.
4. Биспецифическое антитело по п. 3, где антитело IgG относится к изотипу IgG1 человека.4. The bispecific antibody of claim 3, wherein the IgG antibody refers to the human IgG1 isotype.
5. Биспецифическое антитело по п. 1, где кристаллизующийся фрагмент иммуноглобулина (Fc-фрагмент) включает две аминокислотные последовательности второго и третьего константных доменов (CH2-CH3), представленные SEQ ID NO: 10-11, соответственно.5. The bispecific antibody of claim 1, wherein the crystallizing immunoglobulin fragment (Fc fragment) comprises two amino acid sequences of the second and third constant domains (CH2-CH3) represented by SEQ ID NO: 10-11, respectively.
6. Биспецифическое антитело по п. 1, где вторая антигенсвязывающая часть, которая специфично связывается с II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2, представляет собой участок связывания антигена (Fab), включающий:6. The bispecific antibody of claim 1, wherein the second antigen binding portion that specifically binds to the second subdomain of the extracellular domain (ECD2) of HER2 is an antigen binding site (Fab), comprising:
а) вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и первый константный домен тяжелой цепи (CH1), с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 12;a) the heavy chain variable domain (VH) and the first heavy chain constant domain (CH1), with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 12;
б) вариабельный домен легкой цепи (VL) и константный домен легкой цепи (CK), с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 13;b) the variable domain of the light chain (VL) and the constant domain of the light chain (CK), with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13;
7 Биспецифическое антитело, которое специфично связывается с IV субдоменом внеклеточного домена (ECD4) HER2 (рецептор эпидермального фактора роста 2) человека и II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2 человека, состоящее из:7 A bispecific antibody that specifically binds to the fourth subdomain of the extracellular domain (ECD4) of HER2 (human epidermal growth factor receptor 2) and the second subdomain of the extracellular domain (ECD2) of human HER2, consisting of:
1) аминокислотной последовательности, которая специфично связывается с IV субдоменом внеклеточного домена (ECD4) HER2, включающей константные домены CH2 и CH3, и одноцепочечный вариабельного фрагмент (scFv) трастузумаба, с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 14;1) an amino acid sequence that specifically binds to the IV subdomain of the extracellular domain (ECD4) of HER2, including the constant domains of CH2 and CH3, and a single chain variable fragment (scFv) of trastuzumab, with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 14;
2) тяжелой цепи антитела, которое специфично связывается с II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2, включающей вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и первый, второй и третий константные домены тяжелой цепи (CH1-CH2-CH3), с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 15;2) an antibody heavy chain that specifically binds to the II subdomain of the extracellular domain (ECD2) of HER2, including the variable domain of the heavy chain (VH) and the first, second and third constant domains of the heavy chain (CH1-CH2-CH3), with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15;
3) легкой цепи антитела, которое специфично связывается с II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2, включающей вариабельный домен легкой цепи (VL) и константный домен легкой цепи (CK), с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 13,3) an antibody light chain that specifically binds to the II subdomain of the extracellular domain (ECD2) of HER2, including the light chain variable domain (VL) and the light chain constant domain (CK), with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13,
при этом части 1)-3) соединены между собой дисульфидными мостиками.while parts 1) -3) are interconnected by disulfide bridges.
8. Нуклеиновая кислота, которая кодирует антитело по любому из пп. 1-7.8. A nucleic acid that encodes an antibody according to any one of paragraphs. 1-7.
9. Нуклеиновая кислота по п. 8, где нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.9. The nucleic acid of claim 8, wherein the nucleic acid is DNA.
10. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из пп. 8-9.10. The expression vector containing the nucleic acid according to any one of paragraphs. 8-9.
11. Способ получения клетки-хозяина для получения антитела по любому из пп. 1-7, включающий трансформирование клетки вектором по п. 10.11. A method of obtaining a host cell to obtain an antibody according to any one of paragraphs. 1-7, including the transformation of the cell with the vector according to claim 10.
12. Клетка-хозяин для получения антитела по любому из пп. 1-7, содержащая нуклеиновую кислоту по любому из пп. 8-9.12. A host cell for producing an antibody according to any one of claims. 1-7, containing the nucleic acid according to any one of paragraphs. 8-9.
13. Способ получения антитела по любому из пп. 1-7, заключающийся в культивировании клетки-хозяина по п. 12 в культуральной среде в условиях, достаточных для получения указанного антитела, при необходимости, с последующим выделением и очисткой полученного антитела.13. The method of producing antibodies according to any one of paragraphs. 1-7, which consists in culturing the host cell according to claim 12 in a culture medium under conditions sufficient to obtain the indicated antibodies, if necessary, followed by isolation and purification of the obtained antibody.
14. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого HER2, содержащая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-7 в терапевтически эффективном количестве, в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами.14. A pharmaceutical composition for treating a disease or disorder mediated by HER2, comprising the antibody or antigen binding fragment thereof according to any one of claims. 1-7 in a therapeutically effective amount, in combination with one or more pharmaceutically acceptable excipients.
15. Фармацевтическая композиция по п. 14, предназначенная для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого HER2, выбранного из группы: рак молочной железы (РМЖ), злокачественное новообразование желудка, немелкоклеточный рак лёгкого, злокачественное новообразование головы и/или шеи, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), колоректальный рак (КРР), эзофагеальный рак, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак ЖКТ, рак почек, рак шейки матки, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи.15. The pharmaceutical composition according to claim 14, intended for the treatment of a disease or disorder mediated by HER2 selected from the group: breast cancer (BC), malignant neoplasm of the stomach, non-small cell lung cancer, malignant neoplasm of the head and / or neck, squamous cell carcinoma of the head and neck (PRGS), colorectal cancer (CRC), esophageal cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, gastrointestinal cancer, kidney cancer, cervical cancer, endometrial cancer, uterine cancer, malignant melanoma, pharyngeal cancer, oral cancer or skin cancer.
16. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого HER2, содержащая антитело по любому из пп. 1-7 в терапевтически эффективном количестве и по меньшей мере одно терапевтически активное противоопухолевое соединение в терапевтически эффективном количестве. 16. A pharmaceutical composition for treating a disease or disorder mediated by HER2, comprising an antibody according to any one of claims. 1-7 in a therapeutically effective amount and at least one therapeutically active antitumor compound in a therapeutically effective amount.
17. Фармацевтическая композиция по п. 16, предназначенная для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого HER2, выбранного из группы: рак молочной железы (РМЖ), злокачественное новообразование желудка, немелкоклеточный рак лёгкого, злокачественное новообразование головы и/или шеи, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), колоректальный рак (КРР), эзофагеальный рак, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак ЖКТ, рак почек, рак шейки матки, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи.17. The pharmaceutical composition according to claim 16, intended for the treatment of a disease or disorder mediated by HER2 selected from the group: breast cancer (BC), malignant neoplasm of the stomach, non-small cell lung cancer, malignant neoplasm of the head and / or neck, squamous cell carcinoma of the head and neck (PRGS), colorectal cancer (CRC), esophageal cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, gastrointestinal cancer, kidney cancer, cervical cancer, endometrial cancer, uterine cancer, malignant melanoma, pharyngeal cancer, oral cancer or skin cancer.
18. Фармацевтическая композиция по пп. 16-17, где терапевтически активное противоопухолевое соединение выбирают из цитотоксического средства, химиотерапевтического средства, антитела или противогормонального средства.18. The pharmaceutical composition according to paragraphs. 16-17, where the therapeutically active antitumor compound is selected from a cytotoxic agent, chemotherapeutic agent, antibody, or anti-hormonal agent.
19. Способ ингибирования биологической активности HER2 у субъекта, нуждающемуся в таком ингибировании, включающий введение субъекту эффективного количества антитела по любому из пп. 1-7.19. A method of inhibiting the biological activity of HER2 in a subject in need of such inhibition, comprising administering to the subject an effective amount of an antibody according to any one of claims. 1-7.
20. Способ лечения заболевания или нарушения, опосредованного HER2, включающий введение субъекту антитела по любому из пп. 1-7 или фармацевтической композиции по п. 14, нуждающемуся в таком лечении, в терапевтически эффективном количестве.20. A method of treating a disease or disorder mediated by HER2, comprising administering to a subject an antibody according to any one of claims. 1-7 or the pharmaceutical composition according to claim 14, in need of such treatment, in a therapeutically effective amount.
21. Способ лечения заболевания или нарушения по п.20, где заболевание или нарушение выбрано из группы: рак молочной железы (РМЖ), злокачественное новообразование желудка, немелкоклеточный рак лёгкого, злокачественное новообразование головы и/или шеи, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), колоректальный рак (КРР), эзофагеальный рак, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак ЖКТ, рак почек, рак шейки матки, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи.21. The method of treating a disease or disorder according to claim 20, where the disease or disorder is selected from the group: breast cancer (BC), malignant neoplasm of the stomach, non-small cell lung cancer, malignant neoplasm of the head and / or neck, squamous cell carcinoma of the head and neck (PRGS) ), colorectal cancer (CRC), esophageal cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, gastrointestinal cancer, kidney cancer, cervical cancer, endometrial cancer, uterine cancer, malignant melanoma, pharyngeal cancer, oral cancer or skin cancer.
22. Применение антитела по любому из пп. 1-7 или фармацевтической композиции по п. 14 для лечения у субъекта, нуждающегося в таком лечении, заболевания или нарушения, опосредуемого HER2.22. The use of antibodies according to any one of paragraphs. 1-7 or the pharmaceutical composition according to p. 14 for treating a subject in need of such treatment, a disease or disorder mediated by HER2.
23. Применение по п. 20, где заболевание или нарушение выбрано из группы: рак молочной железы (РМЖ), злокачественное новообразование желудка, немелкоклеточный рак лёгкого, злокачественное новообразование головы и/или шеи, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), колоректальный рак (КРР), эзофагеальный рак, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак ЖКТ, рак почек, рак шейки матки, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи. 23. The use according to claim 20, where the disease or disorder is selected from the group: breast cancer (BC), malignant neoplasm of the stomach, non-small cell lung cancer, malignant neoplasm of the head and / or neck, squamous cell carcinoma of the head and neck (PRGS), colorectal cancer (CRC), esophageal cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, gastrointestinal cancer, kidney cancer, cervical cancer, endometrial cancer, uterine cancer, malignant melanoma, pharyngeal cancer, oral cancer or skin cancer.