Claims (34)
1. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая фермент дельта-9-десатуразу, содержащая аминокислотную последовательность, являющуюся по меньшей мере на 80% идентичную SEQ ID NO: 2.1. The selected nucleic acid molecule encoding the enzyme delta-9 desaturase, containing an amino acid sequence that is at least 80% identical to SEQ ID NO: 2.
2. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, дополнительно содержащая по меньшей мере один регуляторный элемент для гена.2. The nucleic acid molecule according to claim 1, additionally containing at least one regulatory element for the gene.
3. Молекула нуклеиновой кислоты по п.2, где регуляторный элемент для гена выбран из группы, состоящей из промотора дельта-9-десатуразы Saccharomyces cerevisiae, 3'UTR/терминатора дельта-9-десатуразы, промотора гена ole1, промотора фазеолина Phaseolus vulgaris, 5'-нетранслируемой области фазеолина Phaseolus vulgaris, 3'-нетранслируемой области фазеолина Phaseolus vulgaris, участка прикрепления к матриксу фазеолина Phaseolus vulgaris, промотора KCS3 Lesquerella fendleri, промотора маннопинсинтазы Agrobacterium tumefaciens, 3'-нетранслируемой области ORF23 Agrobacterium tumefaciens, промотора вируса мозаики прожилок маниоки, 3'-нетранслируемой области ORF1Agrobacterium tumefaciens, участка прикрепления к матриксу RB7 Nicotiana tabacum, усиливающей последовательности, пограничных последовательностей T-цепи, промотора LfKCS3, промотора FAE 1, Myc-метки и гемагглютининовой метки.3. The nucleic acid molecule according to claim 2, where the regulatory element for the gene is selected from the group consisting of the Saccharomyces cerevisiae delta 9 desaturase promoter, 3'UTR / delta 9 desaturase terminator , ole1 gene promoter, Phaseolus vulgaris phaseolin promoter, 5'-untranslated region of phaseolin Phaseolus vulgaris, 3'-untranslated region of phaseolin Phaseolus vulgaris, the attachment portion to the matrix phaseolin Phaseolus vulgaris, promoter KCS3 Lesquerella fendleri, mannopine synthase promoter Agrobacterium tumefaciens, 3'-untranslated region of ORF23 Agrobacterium tumefaciens, promoter cassava mosaic virus veining , 3'- etransliruemoy region ORF1 Agrobacterium tumefaciens, the attachment portion to the matrix RB7 Nicotiana tabacum, amplifying sequences border sequences of T-chain promoter LfKCS3, FAE 1 promoter, Myc-tag and hemagglutinin tag.
4. Конструкция, содержащая первую молекулу нуклеиновой кислоты по п.3 и вторую молекулу нуклеиновой кислоты по п.3, где первая молекула нуклеиновой кислоты дополнительно содержит первый регуляторный элемент для гена и вторая молекула нуклеиновой кислоты содержит второй регуляторный элемент для гена.4. A construct comprising a first nucleic acid molecule according to claim 3 and a second nucleic acid molecule according to claim 3, wherein the first nucleic acid molecule further comprises a first regulatory element for the gene and the second nucleic acid molecule contains a second regulatory element for the gene.
5. Конструкция по п.4, где первая или вторая молекула нуклеиновой кислоты содержит по меньшей мере два регуляторных элемента для гена.5. The design according to claim 4, where the first or second nucleic acid molecule contains at least two regulatory elements for the gene.
6. Способ уменьшения количества насыщенных жирных кислот в клетке, причем способ включает:6. A method of reducing the amount of saturated fatty acids in a cell, the method comprising:
трансформацию клетки молекулой нуклеиновой кислоты по п.1, так чтобы происходило уменьшение количества насыщенных жирных кислот в клетке.the transformation of the cell by the nucleic acid molecule according to claim 1, so that there is a decrease in the number of saturated fatty acids in the cell.
7. Способ уменьшения количества насыщенных жирных кислот в клетке, причем способ включает:7. A method of reducing the amount of saturated fatty acids in a cell, the method comprising:
трансформацию клетки конструкцией по п.5, так чтобы происходило уменьшение количества насыщенных жирных кислот в клетке.transforming the cell with the construct according to claim 5, so that a decrease in the amount of saturated fatty acids in the cell occurs.
8. Способ по п.7, где клетка представляет собой дрожжевую клетку.8. The method according to claim 7, where the cell is a yeast cell.
9. Способ по п.7 или 8, где клетка представляет собой клетку растений.9. The method according to claim 7 or 8, where the cell is a plant cell.
10. Способ по п.9, включающий трансформацию клетки растения более чем одной молекулой нуклеиновой кислоты по п.1.10. The method according to claim 9, comprising transforming a plant cell with more than one nucleic acid molecule according to claim 1.
11. Способ по п.9, где трансформация клетки растения вводит в клетку растения средство для снижения уровней 16:0-CoA в клетке растения.11. The method according to claim 9, where the transformation of the plant cell introduces an agent into the plant cell to lower 16: 0-CoA levels in the plant cell.
12. Способ по п.11, где средство для снижения уровней 16:0-CoA в клетке растения представляет собой внепластидную десатуразу.12. The method according to claim 11, where the means to reduce levels of 16: 0-CoA in the plant cell is an off-plastid desaturase.
13. Способ по п.12, где внепластидная десатураза представляет собой десатуразу, выбранную из группы, состоящей из десатуразы LnD9DS, десатуразы AnD9DS, десатуразы HzD9DS и десатуразы MgD9DS.13. The method of claim 12, wherein the off-plastid desaturase is a desaturase selected from the group consisting of LnD9DS desaturase, AnD9DS desaturase, HzD9DS desaturase, and MgD9DS desaturase.
14. Способ по п.12, где внепластидная десатураза представляет собой десатуразу AnD9DS.14. The method of claim 12, wherein the off-plastid desaturase is AnD9DS desaturase.
15. Способ по п.9, где клетку растения получают из растения, выбранного из рода, выбранного из группы, состоящей из Arabidopsis, Borago, Canola, Ricinus, Theobroma, Zea, Gossypium, Crambe, Cuphea, Linum, Lesquerella, Limnanthes, Linola, Tropaeolum, Oenothera, Olea, Elaeis, Arachis, рапса, Carthamus, Glycine, Soja, Helianthus, Nicotiana, Vernonia, Triticum, Hordeum, Oryza, Avena, Sorghum, Secale и других представителей Gramineae.15. The method according to claim 9, where the plant cell is obtained from a plant selected from a genus selected from the group consisting of Arabidopsis , Borago, Canola, Ricinus , Theobroma, Zea, Gossypium , Crambe , Cuphea , Linum , Lesquerella , Limnanthes , Linola , Tropaeolum , Oenothera , Olea , Elaeis , Arachis , canola, Carthamus , Glycine , Soja , Helianthus , Nicotiana , Vernonia , Triticum , Hordeum , Oryza , Avena , Sorghum , Secale and other representatives of Gramineae .
16. Масличное растение, содержащее последовательность нуклеиновой кислоты по п.1.16. An oil plant containing a nucleic acid sequence according to claim 1.
17. Масличное растение, содержащее конструкцию по п.5 или 6.17. Oilseed plant containing the construction according to claim 5 or 6.
18. Семя растения, которое экспрессирует внепластидную десатуразу, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 27 или SEQ ID NO: 28.18. The seed of a plant that expresses an off-plastid desaturase selected from the group consisting of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 27 or SEQ ID NO: 28.
19. Семя трансгенной линии Brassica napus, причем семя имеет сниженные уровни насыщенных жирных ксилот относительно изогенной версии трансгенной линии Brassica napus.19. Seed of the transgenic line of Brassica napus , the seed having reduced levels of saturated fatty xylot relative to the isogenic version of the transgenic line of Brassica napus .
20. Способ получения модифицированного способами генной инженерии растения, содержащего сниженные количества насыщенных жирных кислот в растении по сравнению с растением дикого типа, причем способ включает:20. A method for producing a plant modified by genetic engineering methods containing reduced amounts of saturated fatty acids in a plant compared to a wild-type plant, the method comprising:
трансформацию растительного материала молекулой нуклеиновой кислоты по п.1; иthe transformation of plant material by a nucleic acid molecule according to claim 1; and
культивирование трансформированного растения с получением растения.culturing a transformed plant to obtain a plant.
21. Способ получения модифицированного способами генной инженерии растения, содержащего сниженные количества насыщенных жирных кислот в растении по сравнению с растением дикого типа, причем способ включает:21. A method for producing a plant modified by genetic engineering methods containing reduced amounts of saturated fatty acids in a plant compared to a wild-type plant, the method comprising:
трансформацию растительного материала конструкцией по п.4; иtransformation of plant material by the construction according to claim 4; and
культивирование трансформированного материала с получением растения.culturing the transformed material to obtain a plant.
22. Способ по п.21, где растение выбрано из рода, выбранного из группы, состоящей из Arabidopsis, Borago, Canola, Ricinus, Theobroma, Zea, Gossypium, Crambe, Cuphea, Linum, Lesquerella, Limnanthes, Linola, Tropaeolum, Oenothera, Olea, Elaeis, Arachis, рапса, Carthamus, Glycine, Soja, Helianthus, Nicotiana, Vernonia, Triticum, Hordeum, Oryza, Avena, Sorghum, Secale и других представителей Gramineae.22. The method according to item 21, where the plant is selected from a genus selected from the group consisting of Arabidopsis , Borago, Canola, Ricinus , Theobroma, Zea, Gossypium , Crambe , Cuphea , Linum , Lesquerella , Limnanthes , Linola, Tropaeolum , Oenothera , Olea , Elaeis , Arachis , rapeseed, Carthamus , Glycine , Soja , Helianthus , Nicotiana , Vernonia , Triticum , Hordeum , Oryza , Avena , Sorghum , Secale and other representatives of Gramineae .
23. Растение, полученное способом по п.21.23. The plant obtained by the method according to item 21.
24. Растительный материал, полученный из растения по п.23.24. The plant material obtained from the plant according to item 23.
25. Растительный материал по п.23, где растительный материал представляет собой семя.25. The plant material according to item 23, where the plant material is a seed.
26. Масло из растения по п.23.26. The oil from the plant according to item 23.
27. Масло из растения по п.23, где масло содержит менее 3,5% насыщенных жирных кислот.27. The plant oil of claim 23, wherein the oil contains less than 3.5% saturated fatty acids.
28. Масло растения по п.23, где масло содержит менее 3,0% насыщенных жирных кислот.28. The plant oil of claim 23, wherein the oil contains less than 3.0% saturated fatty acids.