Claims (9)
1. Устройство для одновременного контроля в реальном масштабе времени множества амплификаций нуклеиновой кислоты, содержащее термоциклер, включающий теплопроводящий элемент с расположенными в нем углублениями для пробирок с реакционными смесями, термокрышку, теплоизолирующую перегородку и устройство автоматического управления температурным режимом, оптическую систему, включающую источник излучения, коаксиальный волоконно-оптический световод для передачи света возбуждения от источника к пробиркам и от пробирок с реакционными смесями к детектору для детектирования флуоресценции, и детектор для детектирования флуоресценции, а также микропроцессорное устройство управления и персональный компьютер с программным обеспечением, отличающееся тем, что оно снабжено корректирующей системой, содержащей базу данных, аппроксимирующее устройство, устройство определения тепловых параметров пробирок и устройство корректировки, при этом реакционные смеси могут содержать флуоресцентные зонды или исследуемые образцы, вход базы данных связан с выходом оптической системы, база данных соединена двухсторонней связью с аппроксимирующим устройством, устройством определения тепловых параметров пробирок и устройством корректировки, а выход базы данных соединен с входом устройства автоматического управления температурным режимом и входом персонального компьютера, при этом корректирующая система обеспечивает формирование, сохранение и передачу сигналов корректировки температуры устройству автоматического управления температурным режимом, а устройство автоматического управления температурным режимом сигналы выполняет операцию корректировки температуры теплопроводящего элемента.1. A device for simultaneous real-time monitoring of multiple amplifications of a nucleic acid, comprising a thermal cycler including a heat-conducting element with recesses for test tubes with reaction mixtures located therein, a thermal cover, a heat-insulating partition and an automatic temperature control device, an optical system including a radiation source, coaxial optical fiber for transmitting excitation light from a source to tubes and from tubes with reaction mixtures to a detector for detecting fluorescence, and a detector for detecting fluorescence, as well as a microprocessor control device and a personal computer with software, characterized in that it is equipped with a correction system containing a database, an approximating device, a device for determining the thermal parameters of tubes and a correction device, the reaction mixtures may contain fluorescent probes or test samples, the database input is associated with the output of the optical system, bases data is connected by two-way communication with an approximating device, a device for determining the thermal parameters of tubes and an adjustment device, and the output of the database is connected to the input of the automatic temperature control device and the input of a personal computer, while the correction system ensures the formation, storage, and transmission of temperature correction signals to the automatic control device temperature mode, and the device automatically controls the temperature of the signal ly performs corrections heat conductive element temperature.
2. Устройство по п. 1, отличающееся тем, что все или некоторые функциональные устройства корректирующей системы предлагаемого устройства выполнены в виде интегральных микросхем.2. The device according to p. 1, characterized in that all or some of the functional devices of the correction system of the proposed device are made in the form of integrated circuits.
3. Устройство по п. 2, отличающееся тем, что база данных обеспечивает сохранение дискретных сигналов кривой плавления каждой пробирки F от Т, производной кривой плавления dF/dТ от Т и сигналов ПЦР в реальном времени, поступающих с выхода детектора и с выходов других устройств корректирующей системы, передачу сохраненных сигналов управления устройству автоматического управления температурным режимом для корректировки неоднородности температуры теплопроводящего элемента, а также передачу сохраненных сигналов на вход персонального компьютера для наблюдения сигналов на экране монитора.3. The device according to claim 2, characterized in that the database provides the storage of discrete signals of the melting curve of each tube F from T, the derivative of the melting curve dF / dT from T and real-time PCR signals from the output of the detector and from the outputs of other devices corrective system, the transmission of stored control signals to the automatic temperature control device to correct the heterogeneity of the temperature of the heat-conducting element, as well as the transmission of stored signals to the input of a personal computer A measure for observing signals on a monitor screen.
4. Устройство по п. 3, отличающееся тем, что аппроксимирующее устройство обеспечивает выполнение операции аппроксимации сохраненной в базе данных производной кривой плавления каждой пробирки непрерывной функцией, например, полиномом или производной сигмоидальной функции, а также сохранение непрерывной функции в базе данных.4. The device according to claim 3, characterized in that the approximating device provides the approximation of the stored in the database derivative of the melting curve of each tube with a continuous function, for example, a polynomial or derivative of a sigmoid function, as well as storing a continuous function in the database.
5. Устройство по п. 4, отличающееся тем, что устройство определения температурных параметров пробирок обеспечивает выполнение операции определения значений температурных параметров каждой пробирки, а также обеспечивает сохранение этих значений в базе данных.5. The device according to p. 4, characterized in that the device for determining the temperature parameters of the tubes provides the operation of determining the values of the temperature parameters of each tube, and also provides the storage of these values in the database.
6. Устройство по п. 5, отличающееся тем, что устройство корректировки выполняет операции формирования сигнала, соответствующего среднему значению температурных параметров всех пробирок, сохраненных в базе данных, определения отклонения температурных параметров каждой пробирки от среднего значения, формирования сигналов корректировки температуры для устройства автоматического управления температурным режимом, соответствующих среднему значению отклонения температурных параметров во всех кластерах пробирок, количество которых равно количеству элементов Пельтье, а также сохранение сигналов управления в базе данных.6. The device according to claim 5, characterized in that the correction device performs the operation of generating a signal corresponding to the average value of the temperature parameters of all tubes stored in the database, determining deviations of the temperature parameters of each tube from the average value, generating temperature correction signals for the automatic control device temperature conditions corresponding to the average deviation of temperature parameters in all test tube clusters, the number of which is equal to the number of Peltier elements, as well as storing control signals in the database.
7. Устройство по п. 6, отличающееся тем, что устройство автоматического управления температурным режимом сигналы выполняет операцию корректировки температуры кластеров теплопроводящего элемента.7. The device according to claim 6, characterized in that the device for automatically controlling the temperature regime of the signals performs the operation of adjusting the temperature of the clusters of the heat-conducting element.
8. Устройство по п. 7, отличающееся тем, предлагаемое устройство обеспечивает выполнение операции определения значений пороговых циклов сигналов ПЦР в реальном времени от исследуемых проб в каждой пробирке, которые используются при количественных измерениях.8. The device according to p. 7, characterized in that the proposed device provides the operation of determining the values of threshold cycles of PCR signals in real time from the studied samples in each tube, which are used in quantitative measurements.
9. Устройство по п. 8, отличающееся тем, что предлагаемое устройство обеспечивает определение температуры плавления исследуемых проб в каждой пробирке.9. The device according to p. 8, characterized in that the proposed device provides a determination of the melting temperature of the test samples in each tube.