Claims (21)
1. Молекула кооперативной нуклеиновой кислоты, содержащая:1. A cooperative nucleic acid molecule containing:
a. первую последовательность нуклеиновой кислоты, характеризующуюся тем, что первая последовательность нуклеиновой кислоты является комплементарной первому участку нуклеиновой кислоты-мишени, и тем, что первая последовательность нуклеиновой кислоты является способной к элонгации на 3′-конце;a. a first nucleic acid sequence, characterized in that the first nucleic acid sequence is complementary to the first portion of the target nucleic acid, and that the first nucleic acid sequence is elongated at the 3′-end;
b. вторую последовательность нуклеиновой кислоты, характеризующуюся тем, что вторая последовательность нуклеиновой кислоты является комплементарной второму участку нуклеиновой кислоты-мишени; так что в присутствии нуклеиновой кислоты-мишени она гибридизируется с нуклеиновой кислотой-мишенью в прямом направлении от 3′-конца первой последовательности нуклеиновой кислоты;b. a second nucleic acid sequence, characterized in that the second nucleic acid sequence is complementary to the second portion of the target nucleic acid; so that in the presence of the target nucleic acid, it hybridizes with the target nucleic acid in the forward direction from the 3′-end of the first nucleic acid sequence;
c. линкер, соединяющий указанную первую и вторую последовательности нуклеиновых кислот таким способом, что позволяет обеим указанным первой и второй последовательностям нуклеиновых кислот одновременно гибридизироваться с последовательностью-мишенью.c. a linker connecting said first and second nucleic acid sequences in such a way that allows both of said first and second nucleic acid sequences to hybridize simultaneously with the target sequence.
2. Молекула кооперативной нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающаяся тем, что первая молекула нуклеиновой кислоты не будет гибридизироваться с мишенью без гибридизации с мишенью второй молекулы нуклеиновой кислоты.2. The cooperative nucleic acid molecule according to claim 1, characterized in that the first nucleic acid molecule will not hybridize with the target without hybridization with the target of the second nucleic acid molecule.
3. Молекула кооперативной нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающаяся тем, что вторая молекула нуклеиновой кислоты не будет гибридизироваться с мишенью без гибридизации с мишенью первой молекулы нуклеиновой кислоты.3. The cooperative nucleic acid molecule according to claim 1, characterized in that the second nucleic acid molecule will not hybridize with the target without hybridization with the target of the first nucleic acid molecule.
4. Молекула кооперативной нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающаяся тем, что соответственно ни первая, ни вторая молекула нуклеиновой кислоты не будет гибридизироваться с мишенью без гибридизации с мишенью соответственно другой молекулы.4. The cooperative nucleic acid molecule according to claim 1, characterized in that, respectively, neither the first nor the second nucleic acid molecule will hybridize with the target without hybridizing with the target, respectively, of another molecule.
5. Молекула кооперативной нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающаяся тем, что эффективная температура плавления (Tm) первой молекулы нуклеиновой кислоты увеличена по меньшей мере на 1°C по сравнению с отдельной Tm для первой последовательности нуклеиновой кислоты без присоединенной к ней второй последовательности нуклеиновой кислоты.5. The cooperative nucleic acid molecule according to claim 1, characterized in that the effective melting temperature (Tm) of the first nucleic acid molecule is increased by at least 1 ° C compared to a single Tm for the first nucleic acid sequence without a second nucleic acid sequence attached to it acids.
6. Молекула кооперативной нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающаяся тем, что молекула кооперативной нуклеиновой кислоты содержит метку.6. The cooperative nucleic acid molecule according to claim 1, characterized in that the cooperative nucleic acid molecule contains a label.
7. Молекула нуклеиновой кислоты по пункту 6, отличающаяся тем, что вторая последовательность нуклеиновой кислоты содержит метку.7. The nucleic acid molecule according to paragraph 6, characterized in that the second nucleic acid sequence contains a label.
8. Способ синтеза нуклеиновой кислоты, причем данный способ включает:8. A method for synthesizing a nucleic acid, the method comprising:
a. осуществление контакта нуклеиновой кислоты-мишени сa. contacting the target nucleic acid with
b. молекулой кооперативной нуклеиновой кислоты, содержащей:b. cooperative nucleic acid molecule containing:
i. первую последовательность нуклеиновой кислоты, характеризующуюся тем, что первая последовательность нуклеиновой кислоты является комплементарной первому участку нуклеиновой кислоты-мишени, и тем, что первая последовательность нуклеиновой кислоты является способной к элонгации на 3′-конце;i. a first nucleic acid sequence, characterized in that the first nucleic acid sequence is complementary to the first portion of the target nucleic acid, and that the first nucleic acid sequence is elongated at the 3′-end;
ii. вторую последовательность нуклеиновой кислоты, характеризующуюся тем, что вторая последовательность нуклеиновой кислоты является комплементарной второму участку нуклеиновой кислоты-мишени; так что она гибридизируется с нуклеиновой кислотой-мишенью в прямом направлении от 3′-конца первой последовательности нуклеиновой кислоты;ii. a second nucleic acid sequence, characterized in that the second nucleic acid sequence is complementary to the second portion of the target nucleic acid; so that it hybridizes with the target nucleic acid in the forward direction from the 3′-end of the first nucleic acid sequence;
iii. линкер, соединяющий указанную первую и вторую последовательности нуклеиновых кислот таким способом, что позволяет обеим указанным первой и второй последовательностям нуклеиновых кислот одновременно гибридизироваться с мишенью;iii. a linker connecting said first and second nucleic acid sequences in such a way that allows both of said first and second nucleic acid sequences to hybridize simultaneously with the target;
c. и предоставление условий, подходящих для синтеза нуклеиновых кислот, благодаря чему синтезируется нуклеиновая кислота.c. and providing conditions suitable for the synthesis of nucleic acids, whereby a nucleic acid is synthesized.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что молекула кооперативной нуклеиновой кислоты содержит метку.9. The method according to p. 8, characterized in that the cooperative nucleic acid molecule contains a label.
10. Способ по п. 8, отличающийся тем, что в нем предлагается более одной молекулы кооперативной нуклеиновой кислоты с различными последовательностями.10. The method according to p. 8, characterized in that it proposes more than one cooperative nucleic acid molecule with different sequences.
11. Способ детекции нуклеиновой кислоты, причем данный способ включает:11. A method for detecting a nucleic acid, the method comprising:
а. осуществление контакта образца, содержащего нуклеиновую кислоту-мишень сbut. contacting a sample containing the target nucleic acid with
b. молекулой кооперативной нуклеиновой кислоты, содержащей:b. cooperative nucleic acid molecule containing:
i. первую последовательность нуклеиновой кислоты, характеризующуюся тем, что первая последовательность нуклеиновой кислоты является комплементарной первому участку нуклеиновой кислоты-мишени, и тем, что первая последовательность нуклеиновой кислоты является способной к элонгации на 3′-конце;i. a first nucleic acid sequence, characterized in that the first nucleic acid sequence is complementary to the first portion of the target nucleic acid, and that the first nucleic acid sequence is elongated at the 3′-end;
ii. вторую последовательность нуклеиновой кислоты, характеризующуюся тем, что вторая последовательность нуклеиновой кислоты является комплементарной второму участку нуклеиновой кислоты-мишени; так что она гибридизируется с нуклеиновой кислотой-мишенью в прямом направлении от 3′-конца первой последовательности нуклеиновой кислоты;ii. a second nucleic acid sequence, characterized in that the second nucleic acid sequence is complementary to the second portion of the target nucleic acid; so that it hybridizes with the target nucleic acid in the forward direction from the 3′-end of the first nucleic acid sequence;
iii. линкер, соединяющий указанную первую и вторую последовательности нуклеиновых кислот таким способом, что позволяет обеим указанным первой и второй последовательностям нуклеиновых кислот одновременно гибридизироваться с мишенью;iii. a linker connecting said first and second nucleic acid sequences in such a way that allows both of said first and second nucleic acid sequences to hybridize simultaneously with the target;
c. и детектирование нуклеиновой кислоты-мишени.c. and detecting a target nucleic acid.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что метка присоединена к указанной второй последовательности нуклеиновой кислоты.12. The method according to p. 11, characterized in that the label is attached to the specified second nucleic acid sequence.
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что изменение сигнала происходит из-за изменения сигнала благодаря нуклеазному расщеплению второй последовательности нуклеиновой кислоты.13. The method according to p. 12, characterized in that the change in the signal is due to a change in the signal due to the nuclease cleavage of the second nucleic acid sequence.
14. Способ амплификации нуклеиновой кислоты-мишени, причем данный способ включает:14. A method for amplifying a target nucleic acid, the method comprising:
a) добавление молекулы кооперативной нуклеиновой кислоты по пункту 1;a) adding a cooperative nucleic acid molecule according to paragraph 1;
b) добавление нуклеиновой кислоты-мишени; иb) addition of a target nucleic acid; and
c) амплификацию нуклеиновой кислоты-мишени в условиях, подходящих для амплификации.c) amplification of the target nucleic acid under conditions suitable for amplification.
15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что первая последовательность нуклеиновой кислоты является праймером.15. The method according to p. 14, characterized in that the first nucleic acid sequence is a primer.
16. Способ по п. 14, отличающийся тем, что вторая последовательность нуклеиновой кислоты является зондом.16. The method according to p. 14, characterized in that the second nucleic acid sequence is a probe.
17. Способ по п. 14, отличающийся тем, что в нем предлагается более чем одна молекула кооперативной нуклеиновой кислоты с различными последовательностями.17. The method according to p. 14, characterized in that it proposes more than one cooperative nucleic acid molecule with different sequences.
18. Способ по п. 14, отличающийся тем, что первая последовательность нуклеиновой кислоты без присоединенной к ней второй последовательности нуклеиновой кислоты является обычным праймером.18. The method of claim 14, wherein the first nucleic acid sequence without a second nucleic acid sequence attached to it is a conventional primer.
19. Способ детекции нуклеиновой кислоты, причем данный способ включает:19. A method for detecting a nucleic acid, the method comprising:
a) добавление молекулы кооперативной нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающейся тем, что кооперативная нуклеиновая кислота содержит детектируемую метку.a) adding a cooperative nucleic acid molecule according to claim 1, characterized in that the cooperative nucleic acid contains a detectable label.
b) добавление нуклеиновой кислоты-мишени; иb) addition of a target nucleic acid; and
c) детекцию нуклеиновой кислоты-мишени.c) target nucleic acid detection.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что детектируемая метка присоединена к первой последовательности нуклеиновой кислоты.20. The method according to p. 19, characterized in that the detectable label is attached to the first nucleic acid sequence.
21. Способ по п. 19, отличающийся тем, что детектируемая метка присоединена ко второй последовательности нуклеиновой кислоты.
21. The method according to p. 19, characterized in that the detectable label is attached to the second nucleic acid sequence.