RU2012878C1

RU2012878C1 - Universal test band for determination of glucose content in urine, blood and other biological liquids

Info

Publication number: RU2012878C1
Authority: RU
Inventors: Феликс Борисович Левин
Original assignee: Феликс Борисович Левин
Priority date: 1991-07-19
Filing date: 1991-07-19
Publication date: 1994-05-15

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: universal test band has paper with peroxidase, glucoseoxidase, ortho-tolidine, polycarboxylic acid and polymer (being treated by organic solvent) applied on said base. Mass ratio of components being peroxidase 1-3, glucoseoxidase 2-6, polycarboxylic acid 2-6, microgranulated ortho-tolidine 8-12, polypeptide polymer to 100. EFFECT: increases sensitivity of determination. 1 tbl

Description

Изобретение относится к медицине (диагностике), к устройствам для анализа глюкозы (сахара) в моче и крови и может быть использовано для диагностики сахарного диабета и контроля состояния больного. The invention relates to medicine (diagnosis), to devices for the analysis of glucose (sugar) in urine and blood and can be used to diagnose diabetes and monitor the patient's condition.

Известны тест-полоски для определения уровня глюкозы в крови, содержащие ферментную (глюкозооксидаза, перексидаза) смесь и хромоген. Однако, эти полоски имеют моноцелевое назначение и не позволяют проводить анализ мочи на содержание глюкозы. Known test strips for determining the level of glucose in the blood, containing an enzyme (glucose oxidase, peroxidase) mixture and chromogen. However, these strips have a single-purpose purpose and do not allow the analysis of urine for glucose.

Известны также тест-полоски для анализа глюкозы в моче. Коммерческие тест-полоски фирмы Eiken Chemical CO, LTD содержат в реактивной смеси вещества, мас. % : Глюкозооксидаза 4 Пероксидаза 0,6 2-7-диаминофлуорен 2˙ HCl 1,3 Хромоген (производное бензидина) 4,9 Эритрозин B 0,2 Буфер До 100. Test strips for urine glucose analysis are also known. Commercial test strips from Eiken Chemical CO, LTD contain in the reactive mixture substances, wt. %: Glucose oxidase 4 Peroxidase 0.6 2-7-diaminofluorene 2˙ HCl 1.3 Chromogen (benzidine derivative) 4.9 Erythrosine B 0.2 Buffer Up to 100.

Это решение взято в качестве прототипа. Однако чувствительность известных полосок невелика и не позволяет определить наличие и концентрацию сахара в моче при содержании его ниже, чем 0,05% . This decision is taken as a prototype. However, the sensitivity of the known strips is small and does not allow to determine the presence and concentration of sugar in the urine when its content is lower than 0.05%.

Таким образом, с помощью известных полосок невозможно определить скрытые формы диабета, когда содержание глюкозы в моче ниже порога их чувствительности. Thus, using the known strips, it is impossible to determine the latent forms of diabetes when the glucose content in the urine is below the threshold of their sensitivity.

Эти тест-полоски непригодны для анализа сахара крови. These test strips are not suitable for blood sugar analysis.

Целью заявленного решения является повышение чувствительности теста и придания ему универсальности действия. The aim of the claimed solution is to increase the sensitivity of the test and give it the universality of action.

Поставленная цель достигается тем, что реактивная смесь содержит поликарбоновую кислоту и обработанный органическим растворителем связующий полимер при соотношении, мас. % : Пероксидаза 1-3 Глюкозооксидаза 2-6 Поликарбоновая кислота 2-6 Хромоген 8-12
Обработанный связующий полимер До 100, причем хромоген выполнен в микрогранулированной форме.This goal is achieved in that the reactive mixture contains polycarboxylic acid and treated with an organic solvent binder polymer in a ratio, wt. %: Peroxidase 1-3 Glucose oxidase 2-6 Polycarboxylic acid 2-6 Chromogen 8-12
Treated binder polymer Up to 100, wherein the chromogen is in microgranular form.

Этим достигается повышенная чувствительность заявляемых тест-полосок так, что с их помощью можно определить глюкозу в моче, начиная с концентрации 0,005% , что превосходит по чувствительности известные полоски (аналоги) в 10-20 раз. This achieves an increased sensitivity of the claimed test strips so that they can be used to determine glucose in the urine, starting from a concentration of 0.005%, which is 10-20 times more sensitive than known strips (analogues).

Кроме того, предлагаемые полоски пригодны для определения глюкозы в крови, в других биологических средах, например в слюне, соках и т. д. , т. е. являются универсальными. In addition, the proposed strips are suitable for the determination of glucose in the blood, in other biological environments, for example in saliva, juices, etc., that is, they are universal.

Предлагаемые тест-полоски изготовляются из водонепроницаемой глянцевой бумаги, имеют размер 5 х 70 мм и содержат в 5 мм от края "пятно" со смесью реактивов. The proposed test strips are made of waterproof glossy paper, have a size of 5 x 70 mm and contain a “stain” with a mixture of reagents 5 mm from the edge.

Определение глюкозы в моче с помощью предлагаемых полосок /так же как известными аналогами/ является полуколичественным и производится визуально по цветной шкале стандартов. The determination of glucose in urine using the proposed strips / as well as well-known analogues / is semi-quantitative and is carried out visually on a color scale of standards.

Определение глюкозы в крови можно проводить как визуально /полуколичественно - по цветной шкале стандартов/ так и инструментальным методом, используя глюкометр. The determination of glucose in the blood can be carried out both visually / semi-quantitatively - on the color scale of standards / and instrumental method using a glucometer.

П р и м е р 1. Использование тест-полосок для полуколичественного определения концентрации глюкозы в моче. PRI me R 1. The use of test strips for semi-quantitative determination of the concentration of glucose in the urine.

Погружают конец полоски (с реактивным пятном) в свежую мочу на 30 с. Точно через 30 с полоску споласкивают водопроводной водой, слегка промокают (фильтровальная бумага, салфетка), помещают на сухую белую бумагу и через 1,5 мин (с начала погружения) определяют содержание глюкозы (% ), сравнивая цвет пятна с цветной шкалой. Immerse the end of the strip (with a reaction spot) in fresh urine for 30 s. After exactly 30 seconds, the strip is rinsed with tap water, blotted slightly (filter paper, napkin), placed on dry white paper and after 1.5 minutes (from the beginning of immersion) glucose content (%) is determined by comparing the spot color with a color scale.

В случае концентрации глюкозы в моче выше 0,7% мочу разводят водой в 10 раз, проводят определение вновь (как было описано) и результат умножают на 10. If the concentration of glucose in the urine is above 0.7%, the urine is diluted with water 10 times, the determination is carried out again (as described) and the result is multiplied by 10.

Цветная шкала стандартов изготовляется следующим образом. Готовят серию водных растворов глюкозы в концентрациях 0,005; 0,02; 0,06; 0,2; 0,7% и проводят с каждым раствором реакцию на тест-полосках. Полученные цвета окрашенных пятен на полосках воспроизводят полиграфически с цифрами соответствующих концентраций глюкозы. The color scale of the standards is as follows. A series of aqueous glucose solutions is prepared at concentrations of 0.005; 0.02; 0.06; 0.2; 0.7% and carry out a reaction on each test strip with test strips. The obtained colors of the stained spots on the strips are reproduced by printing with numbers of the corresponding glucose concentrations.

При исследовании образцов мочи 171 больного сахарным диабетом с помощью предложенных тест-полосок, а также параллельно с помощью импортных полосок и поляриметрическим методом было показано, что:
положительная реакция на глюкозу в моче обнаружена с помощью предложенных полосок у 157 больных, т. е. диагностическая ценность /совпадение с клиническим диагнозом/ равна до 92% ;
метод позволяет определять концентрацию глюкозы в моче, начиная с 0,005% , и превосходит по чувствительности в 10-20 раз возможности анализа на поляриметре и с помощью импортных полосок;
существует приемлемое для полуколичественных тестов совпадение (в 91,2% ) результатов анализов глюкозы в моче, полученных с помощью заявляемых полосок и поляриметра, а также с помощью импортных тест-полосок /прототипа/.When examining urine samples of 171 patients with diabetes mellitus using the proposed test strips, as well as using imported strips and the polarimetric method, it was shown that:
a positive reaction to glucose in urine was detected using the proposed strips in 157 patients, that is, the diagnostic value / coincidence with the clinical diagnosis / is up to 92%;
the method allows you to determine the concentration of glucose in the urine, starting from 0.005%, and is 10-20 times more sensitive than the analysis on a polarimeter and using imported strips;
there is an acceptable for semi-quantitative tests match (in 91.2%) of the results of urine glucose tests obtained using the inventive strips and a polarimeter, as well as using imported test strips / prototype /.

П р и м е р 2. Использование предложенных тест-полосок для определения концентрации глюкозы в крови. PRI me R 2. The use of the proposed test strips to determine the concentration of glucose in the blood.

Каплю крови из пальца наносят на реактивное пятно полоски, покрывая его полностью. Через 1 мин пятно стирают ватным тампоном и еще через 1 мин для визуального полуколичественного определения концентрации глюкозы сравнивают цвет пятна с цветной шкалой стандартов, построенной по растворам глюкозы с концентрациями: 25, 50, 100, 150, 200, 300, 400 мг/100 мл /или соответственно 1,4; 27; 5,5; 8,2; 11; 16,5 и 22 ммоль/л/. A drop of blood from a finger is applied to the reactive spot of the strip, covering it completely. After 1 min, the stain is washed with a cotton swab and after another 1 min for visual semi-quantitative determination of glucose concentration, the color of the stain is compared with the color scale of standards constructed using glucose solutions with concentrations: 25, 50, 100, 150, 200, 300, 400 mg / 100 ml / or 1.4, respectively; 27; 5.5; 8.2; eleven; 16.5 and 22 mmol / l /.

Для количественного определения пятно измеряют на глюкометре с предварительной калибровкой прибора раствором глюкозы и выбором подходящей программы. For quantitative determination, the spot is measured on a glucometer with preliminary calibration of the device with a glucose solution and the selection of a suitable program.

Определение концентрации глюкозы в 100 образцах крови больных сахаpным диабетом и здоровых людей проводили параллельно с помощью предложенных полосок, а также полосок и глюкометра фирмы Bajer-Ames. Determination of glucose concentration in 100 blood samples of patients with diabetes mellitus and healthy people was carried out in parallel using the proposed strips, as well as strips and glucometer company Bajer-Ames.

Визуальное полуколичественное определение (по цветным шкалам) известным и предложенным методами показало их полное совпадение. Visual semi-quantitative determination (on color scales) by known and proposed methods showed their complete coincidence.

Определение глюкозы на глюкометре (с использованием программы N 9) проводили, умножая показатель на вычисленный поправочный коэффициент 1,3. The determination of glucose on a glucometer (using program No. 9) was performed by multiplying the indicator by the calculated correction factor of 1.3.

При этом в 80 пробах крови различие не превышало 10 мг % (0,55 ммоль/л), а в 20 пробах не превышало 20 мг % (1,1 ммоль/л). Moreover, in 80 blood samples, the difference did not exceed 10 mg% (0.55 mmol / L), and in 20 samples did not exceed 20 mg% (1.1 mmol / L).

П р и м е р 3. Выбор оптимальных концентраций компонентов реактивной смеси для изготовления тест-полосок. PRI me R 3. The choice of optimal concentrations of the components of the reactive mixture for the manufacture of test strips.

Исследование чувствительности полосок, приготовленных с различными реактивными смесями при испытании стандартного раствора глюкозы (0,01% ) представлено в таблице. The sensitivity study of the strips prepared with various reactive mixtures when testing a standard glucose solution (0.01%) is presented in the table.

Из таблицы видно, что реактивные смеси N 2 и N 3 (интервал заявляемых концентраций компонентов) являются оптимальными. The table shows that the reactive mixture of N 2 and N 3 (the range of the claimed concentrations of the components) are optimal.

При концентрациях ниже заявленного предела (смесь N 1) интенсивность окраски реактивного пятна резко уменьшена и не соответствует цветной шкале. At concentrations below the declared limit (mixture N 1), the color of the reaction spot is sharply reduced and does not correspond to the color scale.

Более высокие концентрации компонентов (смесь N 4) также не желательны, так как при этом увеличен расход реактивов и увеличивается окраска контрольной пробы (с водой). Higher concentrations of the components (mixture N 4) are also not desirable, as this increases the consumption of reagents and increases the color of the control sample (with water).

Таким образом, показано, что предложенные тест-полоски пригодны для определения глюкозы как в моче, так и в крови, т. е. являются универсальными. Они обладают также повышенной чувствительностью. Thus, it was shown that the proposed test strips are suitable for determining glucose in both urine and blood, i.e., they are universal. They also have increased sensitivity.

Эти полоски могут быть использованы как скрининговый диагностический тест для выявления лиц с подозрением на наличие сахарного диабета, удобный при массовом обследовании населения. These strips can be used as a screening diagnostic test to identify people with suspected diabetes, convenient for a mass examination of the population.

Они приемлемы также для врачебного контроля и самоконтроля больных сахарным диабетом. They are also acceptable for medical monitoring and self-monitoring of patients with diabetes.

(56) BLOOD Glucose test for visua 1 or meter use инструкции фирмы Bajer-Ames. 1976. (56) BLOOD Glucose test for visua 1 or meter use instructions from Bajer-Ames. 1976.

Claims

UNIVERSAL TEST STRIP FOR DETERMINATION OF THE CONTENT OF GLUCOSE IN URINE, BLOOD AND OTHER BIOLOGICAL MEDIA, containing a paper base coated with peroxidase, glucose oxidase, orthotolidine, characterized in that it additionally has the following polyhydropeptide, polyhydropeptide, and polyhydropeptide have a polymeric peptide and polyhydropeptide the ratio of components, wt. %:
Peroxidase 1 - 3
Glucose oxidase 2 - 6
Microgranular Ortholidine 8-12
Polycarboxylic Acid 2 - 6
Polypeptide Polymer Else