RU2010154462A - Isolation of Insoluble Enzyme from Enzyme Bouillon and Preparation of Insoluble Enzyme - Google Patents

Isolation of Insoluble Enzyme from Enzyme Bouillon and Preparation of Insoluble Enzyme Download PDF

Info

Publication number
RU2010154462A
RU2010154462A RU2010154462/10A RU2010154462A RU2010154462A RU 2010154462 A RU2010154462 A RU 2010154462A RU 2010154462/10 A RU2010154462/10 A RU 2010154462/10A RU 2010154462 A RU2010154462 A RU 2010154462A RU 2010154462 A RU2010154462 A RU 2010154462A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
enzyme
microbial
insoluble
cells
microbial cells
Prior art date
Application number
RU2010154462/10A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Майкл БОДО (US)
Майкл БОДО
Роберт И. КРИСТЕНСЕН (US)
Роберт И. КРИСТЕНСЕН
Радждип С. ДХЕЙЛИВОЛ (US)
Радждип С. ДХЕЙЛИВОЛ
Менг Х. ХЕНГ (US)
Менг Х. ХЕНГ
Original Assignee
ДАНИСКО ЮЭс ИНК. (US)
ДАНИСКО ЮЭс ИНК.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41130419&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2010154462(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by ДАНИСКО ЮЭс ИНК. (US), ДАНИСКО ЮЭс ИНК. filed Critical ДАНИСКО ЮЭс ИНК. (US)
Publication of RU2010154462A publication Critical patent/RU2010154462A/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/98—Preparation of granular or free-flowing enzyme compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/189—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K40/00—Shaping or working-up of animal feeding-stuffs
    • A23K40/10—Shaping or working-up of animal feeding-stuffs by agglomeration; by granulation, e.g. making powders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K40/00—Shaping or working-up of animal feeding-stuffs
    • A23K40/30—Shaping or working-up of animal feeding-stuffs by encapsulating; by coating
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/06—Enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38609—Protease or amylase in solid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38672—Granulated or coated enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
    • C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C12N9/2428—Glucan 1,4-alpha-glucosidase (3.2.1.3), i.e. glucoamylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01001—Alpha-amylase (3.2.1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01003—Glucan 1,4-alpha-glucosidase (3.2.1.3), i.e. glucoamylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21062—Subtilisin (3.4.21.62)

Abstract

1. Способ выделения нерастворимого фермента из микробного бульона, содержащего микробные клетки и/или клеточный дебрис, полученный из микробных клеток, включающий выделение нерастворимого фермента из микробного бульона без удаления микробных клеток и/или клеточного дебриса, приводящее, таким образом, к образованию композиции, содержащей выделенный нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, в которой по меньшей мере часть фермента нерастворима в микробном бульоне. ! 2. Способ по п.1, в котором указанный микробный бульон получается посредствам способа, выбираемого из: ! составления смеси фермента с содержащим микробные клетки и/или клеточный дебрис микробным бульоном, в котором микробные клетки не продуцируют фермент и в котором фермент является нерастворимым или растворимым и в том случае способ далее включает перевод по крайней мере части фермента в нерастворимую форму путем добавления преципитирующего агента; !добавления преципитирующего агента к микробному бульону, содержащему растворимый фермент, экспрессируемый микробными клетками, вызывающего, таким образом, переход по меньшей мере части фермента в нерастворимую форму; и ! экспрессии микробными клетками фермента в микробном бульоне, в котором по меньшей мере часть фермента является нерастворимой. ! 3. Способ по п.1, в котором указанный процесс выделения включает по меньшей мере одну процедуру выделения, выбираемую из подготовки бульона; клеточного лизиса; гомогенизации; диафильтрации; и разделения твердой и жидкой фаз, ! в котором указанный процесс выделения включает выполнение двух или более указанных процедур выделения, � 1. A method of isolating an insoluble enzyme from a microbial broth containing microbial cells and / or cell debris obtained from microbial cells, comprising isolating an insoluble enzyme from a microbial broth without removing microbial cells and / or cell debris, thus leading to the formation of a composition, containing the selected insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris, in which at least a portion of the enzyme is insoluble in the microbial broth. ! 2. The method according to claim 1, wherein said microbial broth is obtained by a method selected from:! preparing a mixture of the enzyme with the microbial cell containing and / or cell debris, the microbial broth in which the microbial cells do not produce the enzyme and in which the enzyme is insoluble or soluble, and in which case the method further comprises converting at least a portion of the enzyme to an insoluble form by adding a precipitating agent ; ! adding a precipitating agent to the microbial broth containing the soluble enzyme expressed by the microbial cells, thereby causing at least a portion of the enzyme to become insoluble; and! expression of microbial cells of the enzyme in microbial broth, in which at least a portion of the enzyme is insoluble. ! 3. The method according to claim 1, wherein said isolation process comprises at least one isolation procedure selected from preparing the broth; cell lysis; homogenization; diafiltration; and separation of solid and liquid phases! in which the specified selection process includes the execution of two or more of these selection procedures, �

Claims (53)

1. Способ выделения нерастворимого фермента из микробного бульона, содержащего микробные клетки и/или клеточный дебрис, полученный из микробных клеток, включающий выделение нерастворимого фермента из микробного бульона без удаления микробных клеток и/или клеточного дебриса, приводящее, таким образом, к образованию композиции, содержащей выделенный нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, в которой по меньшей мере часть фермента нерастворима в микробном бульоне.1. A method of isolating an insoluble enzyme from a microbial broth containing microbial cells and / or cell debris obtained from microbial cells, comprising isolating an insoluble enzyme from a microbial broth without removing microbial cells and / or cell debris, thus leading to the formation of a composition, containing the selected insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris, in which at least a portion of the enzyme is insoluble in the microbial broth. 2. Способ по п.1, в котором указанный микробный бульон получается посредствам способа, выбираемого из:2. The method according to claim 1, wherein said microbial broth is obtained by a method selected from: составления смеси фермента с содержащим микробные клетки и/или клеточный дебрис микробным бульоном, в котором микробные клетки не продуцируют фермент и в котором фермент является нерастворимым или растворимым и в том случае способ далее включает перевод по крайней мере части фермента в нерастворимую форму путем добавления преципитирующего агента;formulating a mixture of the enzyme with microbial cells and / or cell debris containing microbial broth in which the microbial cells do not produce the enzyme and in which the enzyme is insoluble or soluble, and in which case the method further comprises converting at least a portion of the enzyme into an insoluble form by adding a precipitating agent ; добавления преципитирующего агента к микробному бульону, содержащему растворимый фермент, экспрессируемый микробными клетками, вызывающего, таким образом, переход по меньшей мере части фермента в нерастворимую форму; иadding a precipitating agent to the microbial broth containing the soluble enzyme expressed by the microbial cells, thereby causing at least a portion of the enzyme to become insoluble; and экспрессии микробными клетками фермента в микробном бульоне, в котором по меньшей мере часть фермента является нерастворимой.expression by microbial cells of the enzyme in microbial broth, in which at least a portion of the enzyme is insoluble. 3. Способ по п.1, в котором указанный процесс выделения включает по меньшей мере одну процедуру выделения, выбираемую из подготовки бульона; клеточного лизиса; гомогенизации; диафильтрации; и разделения твердой и жидкой фаз,3. The method according to claim 1, wherein said isolation process comprises at least one isolation procedure selected from preparing the broth; cell lysis; homogenization; diafiltration; and separation of solid and liquid phases, в котором указанный процесс выделения включает выполнение двух или более указанных процедур выделения, указанные процедуры выделения могут быть осуществлены в любом порядке.wherein said isolation process comprises performing two or more of said isolation procedures, said isolation procedures may be carried out in any order. 4. Способ по п.1, в котором указанный процесс выделения включает удаление по меньшей мере части жидкой фазы из микробного бульона.4. The method according to claim 1, wherein said recovery process comprises removing at least a portion of the liquid phase from the microbial broth. 5. Способ по п.4, в котором удаление по меньшей мере части жидкой фазы микробного бульона включает концентрирование микробного бульона.5. The method of claim 4, wherein removing at least a portion of the liquid phase of the microbial broth comprises concentrating the microbial broth. 6. Способ по п.5, в котором концентрирование микробного бульона включает процесс мембранной фильтрации, выбираемый из ультрафильтрации, микрофильтрации, обратного осмоса и нанофильтрации.6. The method according to claim 5, in which the concentration of the microbial broth includes a membrane filtration process selected from ultrafiltration, microfiltration, reverse osmosis and nanofiltration. 7. Способ по п.4, в котором удаление по меньшей мере части жидкой фазы микробного бульона включает процесс, выбираемый из фильтрации при помощи вакуумного фильтра с вращающимся барабаном, плиточно-рамного фильтрпресса, ленточного фильтра, центрифугирования, разделения при помощи циклонного сепаратора, декантирования, выпаривания.7. The method according to claim 4, in which the removal of at least part of the liquid phase of the microbial broth includes a process selected from filtration using a vacuum filter with a rotating drum, a tiled frame filter press, a belt filter, centrifugation, separation using a cyclone separator, decantation evaporating. 8. Способ по п.1, в котором указанный нерастворимый фермент получается путем добавления к микробному бульону, содержащему растворимый фермент, преципитирующего агента, переводящего по меньшей мере часть фермента в нерастворимую в микробном бульоне форму, в котором преципитирующий агент выбирается из изменения рН, изменения температуры, добавления соли, добавления кислоты, добавления основания, добавления по меньшей мере одного другого белка, добавления буфера, добавления полиэлектролита или их комбинации.8. The method according to claim 1, wherein said insoluble enzyme is obtained by adding a precipitating agent to the microbial broth containing the soluble enzyme, converting at least a portion of the enzyme into a form insoluble in the microbial broth, in which the precipitating agent is selected from changing pH temperature, adding salt, adding acid, adding base, adding at least one other protein, adding buffer, adding polyelectrolyte, or a combination thereof. 9. Способ по п.1, в котором композиция включает выделенный нерастворимый фермент, включающий интактные микробные клетки.9. The method according to claim 1, in which the composition comprises an isolated insoluble enzyme comprising intact microbial cells. 10. Способ по п.9, в котором интактные микробные клетки представлены живыми клетками.10. The method according to claim 9, in which the intact microbial cells are living cells. 11. Способ по п.9, в котором интактные микробные клетки представлены мертвыми клетками.11. The method according to claim 9, in which the intact microbial cells are dead cells. 12. Способ по п.1, в котором указанный микробный бульон включает микробные клетки и/или клеточный дебрис, включающий микробный клеточный лизат, в котором указанный микробный клеточный лизат получается путем разрушения микробных клеточных мембран.12. The method according to claim 1, wherein said microbial broth comprises microbial cells and / or cell debris comprising a microbial cell lysate, wherein said microbial cell lysate is obtained by disrupting microbial cell membranes. 13. Способ по п.9, в котором данный способ также включает разрушение микробных клеточных мембран интактных микробных клеток с целью получения микробного клеточного лизата, содержащего выделенный нерастворимый фермент.13. The method according to claim 9, in which the method also includes the destruction of microbial cell membranes of intact microbial cells in order to obtain a microbial cell lysate containing the selected insoluble enzyme. 14. Способ по п.12 или 13, в котором разрушение микробных клеточных мембран включает взаимодействие микробных клеток с ферментом, пригодным для осуществления лизиса микробных клеток.14. The method according to item 12 or 13, in which the destruction of microbial cell membranes includes the interaction of microbial cells with an enzyme suitable for the lysis of microbial cells. 15. Способ по п.14, в котором пригодный для клеточного лизиса фермент представляет собой лизоцим.15. The method according to 14, in which suitable for cell lysis, the enzyme is lysozyme. 16. Способ по п.13, в котором разрушение микробных клеточных мембран включает процесс механической деформации, выбираемой, например, из гомогенизации; смешивания с большим сдвиговым усилием; прессования под давлением; перекачивания с большим сдвиговым усилием.16. The method according to item 13, in which the destruction of microbial cell membranes includes a process of mechanical deformation, selected, for example, from homogenization; high shear mixing; pressing under pressure; pumping with high shear. 17. Способ по п.13, также включающий гомогенизацию микробного клеточного лизата с целью получения гомогенизированного микробного клеточного лизата.17. The method according to item 13, also comprising homogenizing the microbial cell lysate to obtain a homogenized microbial cell lysate. 18. Способ по п.17, дополнительно включающий диафильтрацию микробиального клеточного лизата.18. The method according to 17, further comprising diafiltration of the microbial cell lysate. 19. Способ по п.1, в котором микробные клетки представляют собой бактериальные клетки.19. The method according to claim 1, in which the microbial cells are bacterial cells. 20. Способ по п.19, в котором бактериальные клетки представляют собой клетки Bacillus.20. The method according to claim 19, in which the bacterial cells are Bacillus cells. 21. Способ по п.20, в котором клетки Bacillus представляют собой клетки Bacillus subtilis пли Bacillus licheniformis.21. The method of claim 20, wherein the Bacillus cells are Bacillus subtilis or Bacillus licheniformis cells. 22. Способ по п.1, в котором микробные клетки представляют собой грибные клетки.22. The method according to claim 1, in which the microbial cells are fungal cells. 23. Способ по п.22, в котором грибные клетки представляют собой клетки Trichoderma.23. The method according to item 22, in which the fungal cells are Trichoderma cells. 24. Способ по п.23, в котором клетки Trichoderma представляют собой клетки Trichoderma reesei.24. The method according to item 23, in which the Trichoderma cells are Trichoderma reesei cells. 25. Способ по п.1, в котором по меньшей мере 10% фермента нерастворимо в микробном бульоне.25. The method according to claim 1, in which at least 10% of the enzyme is insoluble in the microbial broth. 26. Способ по п.1, в котором чистота нерастворимого фермента возрастает по меньшей мере на 10% по сравнению с чистотой нерастворимого фермента до указанного процесса выделения.26. The method according to claim 1, in which the purity of the insoluble enzyme increases by at least 10% compared with the purity of the insoluble enzyme before the specified process of selection. 27. Композиция, получаемая согласно способу по п.1, причем указанная композиция включает нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис.27. The composition obtained according to the method according to claim 1, wherein said composition comprises an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris. 28. Композиция по п.27, дополнительно включающая по меньшей мере один рецептурный ингредиент.28. The composition according to item 27, further comprising at least one prescription ingredient. 29. Способ получения очищенного жидкого раствора фермента, включающий29. A method of obtaining a purified liquid enzyme solution, including (а) получение композиции, содержащей нерастворимый фермент и микробные клетки или клеточный дебрис;(a) obtaining a composition containing an insoluble enzyme and microbial cells or cell debris; (б) растворение по меньшей мере части нерастворимого фермента путем добавления одной или более субстанции, растворяющей фермент и/или изменяющей физические параметры таким образом, что по меньшей мере часть фермента становится растворимой, и приводя, таким образом, к образованию раствора растворенного фермента; и(b) dissolving at least a portion of the insoluble enzyme by adding one or more substances that dissolve the enzyme and / or change the physical parameters so that at least a portion of the enzyme becomes soluble, and thus leads to the formation of a solution of the dissolved enzyme; and (с) удаление твердых компонентов из раствора, приготовленного на стадии (б), приводящее, таким образом, к образованию очищенного жидкого раствора фермента.(c) removing solid components from the solution prepared in step (b), thereby leading to the formation of a purified enzyme liquid solution. 30. Способ получения ферментсодержащего гранулированного состава, включающий получение ферментсодержащих гранул, содержащих композицию, включающую нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис.30. A method of obtaining an enzyme-containing granular composition, including obtaining enzyme-containing granules containing a composition comprising an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris. 31. Спсоб по п.30, в котором указанная композиция включает нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, получаемые посредством способа, включающего выделение нерастворимого фермента из микробного бульона, содержащего микробные клетки и/или клеточный дебрис, без удаления микробных клеток и/или клеточного дебриса, приводящее, таким образом, к образованию композиции, включающей выделенный нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, в которой по меньшей мере часть фермента нерастворима в микробном бульоне.31. The method of claim 30, wherein said composition comprises an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris obtained by a method comprising isolating an insoluble enzyme from a microbial broth containing microbial cells and / or cell debris without removing microbial cells and / or cell debris, thus leading to the formation of a composition comprising the isolated insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris, in which at least a portion of the enzyme is insoluble in the microbial boulevard yone. 32. Способ по п.30, в котором ферментсодержащие гранулы получены путем процесса гранулирования, выбираемого из гранулирования при помощи гранулятора с псевдоожиженным слоем, наносящего покрытие сверху, гранулятора, наносящего покрытие снизу и барабанного гранулятора (например гранулятора с высоким усилием сдвига).32. The method according to clause 30, in which the enzyme-containing granules are obtained by a granulation process selected from granulation using a fluidized bed granulator, a top-coating granulator, a bottom coating granulator and a drum granulator (eg, a high shear granulator). 33. Способ по п.30, включающий нанесение ферментсодержащего слоя, включающего указанный нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, поверх ядра в грануляторе с псевдоожиженным слоем, наносящем покрытие сверху, в котором указанный способ факультативно включает нанесение солевого слоя между указанным ядром и указанным ферментсодержащим слоем.33. The method according to claim 30, comprising applying an enzyme-containing layer comprising said insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris over the core in a fluidized bed granulator coating on top, wherein said method optionally comprises applying a salt layer between said core and the specified enzyme-containing layer. 34. Способ по п.33, дополнительно включающий нанесение слоя, включающего барьерные соли, поверх указанного ферментсодержащего слоя.34. The method according to clause 33, further comprising applying a layer comprising barrier salts, on top of the specified enzyme-containing layer. 35. Способ по п.34, дополнительно включающий нанесение внешнего покровного слоя, содержащего полимер и/или пигмент, поверх указанного слоя барьерных солей.35. The method according to clause 34, further comprising applying an outer coating layer containing a polymer and / or pigment, on top of the specified layer of barrier salts. 36. Способ по п.30, котором указанные ферментсодержащие гранулы получают посредством нанесения слоя барьерных солей и/или одного или более покровного слоя поверх ферментсодержащего ядра, включающего указанный нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис.36. The method according to clause 30, wherein said enzyme-containing granules are obtained by applying a layer of barrier salts and / or one or more coating layers on top of the enzyme-containing nucleus, comprising said insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris. 37. Способ по п.36, в котором указанное ферментсодержащее ядро получают посредством гранулятора с псевдоожиженным слоем, наносящего покрытие сверху.37. The method according to clause 36, in which the specified enzyme-containing core is obtained by means of a granulator with a fluidized bed, coating on top. 38. Способ по п.36, в котором указанное ферментсодержащее ядро получают посредством гранулятора с высоким усилием сдвига.38. The method according to clause 36, in which the specified enzyme-containing core is obtained through a granulator with high shear. 39. Ферментсодержащая гранула, включающая:39. An enzyme-containing granule, including: ядро;core; факультативно, солевой слой, нанесенный поверх ядра; иoptionally, a salt layer applied over the core; and ферментсодержащий слой, нанесенный поверх ядра или солевого слоя, в котором указанный ферментсодержащий слой содержит композицию, включающую нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис.an enzyme-containing layer deposited on top of a core or salt layer, wherein said enzyme-containing layer contains a composition comprising an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris. 40. Ферментсодержащая гранула по п.39, в которой указанная композиция включает нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, получаемые посредством способа, включающего выделение нерастворимого фермента из микробного бульона, содержащего микробные клетки и/или клеточный дебрис, без удаления микробных клеток и/или клеточного дебриса, приводящее, таким образом, к образованию композиции, включающей выделенный нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, в которой по меньшей мере часть фермента нерастворима в микробном бульоне.40. An enzyme-containing granule according to claim 39, wherein said composition comprises an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris obtained by a method comprising isolating an insoluble enzyme from a microbial broth containing microbial cells and / or cell debris without removing microbial cells and / or cell debris, thus leading to the formation of a composition comprising the isolated insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris, in which at least a portion of the enzyme is insoluble Orima in microbial broth. 41. Ферментсодержащая гранула по п.39, также включающая слой барьерной соли, нанесенный поверх указанного ферментсодержащего слоя.41. An enzyme-containing granule according to claim 39, further comprising a layer of a barrier salt deposited on top of said enzyme-containing layer. 42. Ферментсодержащая гранула по п.39, также включающая внешний покровный слой, нанесенный поверх указанного слоя барьерной соли, в которой внешний покровный слой включает полимер и/или пигмент.42. The enzyme-containing granule according to claim 39, further comprising an outer coating layer deposited over said barrier salt layer, in which the outer coating layer comprises a polymer and / or pigment. 43. Ферментсодержащая гранула, включающая ферменсодержащее ядро и слой барьерной соли и/или один или более покровные слои, окружающие ядро, в которой указанное ядро содержит композицию, включающую нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис.43. An enzyme-containing granule comprising a enzyme-containing nucleus and a layer of barrier salt and / or one or more coating layers surrounding the nucleus, wherein said nucleus contains a composition comprising an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris. 44. Ферментсодержащая гранула по п.43, в которой указанная композиция включает нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, получаемые посредством способа, включающего выделение нерастворимого фермента из микробного бульона, содержащего микробные клетки и/или клеточный дебрис, без удаления микробных клеток и/или клеточного дебриса, приводящее, таким образом, к образованию композиции, включающей выделенный нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, в которой по меньшей мере часть фермента нерастворима в микробном бульоне.44. An enzyme-containing granule according to claim 43, wherein said composition comprises an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris obtained by a method comprising isolating an insoluble enzyme from a microbial broth containing microbial cells and / or cell debris without removing microbial cells and / or cell debris, thus leading to the formation of a composition comprising the isolated insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris, in which at least a portion of the enzyme is insoluble Orima in microbial broth. 45. Ферментсодержащая гранула по п.43, в которой указанное ферментсодержащее ядро получается посредством гранулятора с псевдоожиженным слоем, наносящего покрытие сверху.45. The enzyme-containing granule according to item 43, wherein said enzyme-containing core is obtained by means of a granulator with a fluidized bed, coating on top. 46. Ферментсодержащая гранула по п.43, в которой указанное ферментсодержащее ядро получается посредством гранулятора с высоким усилием сдвига.46. The enzyme-containing granule according to claim 43, wherein said enzyme-containing core is obtained by means of a high shear granulator. 47. Детергентная композиция, включающая ферментсодержащие гранулы по любому из пп.39-46.47. A detergent composition comprising enzyme-containing granules according to any one of claims 39-46. 48. Текстиль обрабатывающая композиция, включающая ферментсодержащие гранулы по любому из пп.39-46.48. Textile processing composition comprising enzyme-containing granules according to any one of claims 39-46. 49. Композиция корма для животных, включающая ферментсодержащие гранулы по любому из пп.39-46.49. The composition of animal feed, including enzyme-containing granules according to any one of paragraphs.39-46. 50. Пищевая композиция, включающая ферментсодержащие гранулы по любому из пп.39-46.50. A food composition comprising enzyme-containing granules according to any one of claims 39-46. 51. Ферментсодержащий жидкий состав, содержащий композицию, включающую нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис.51. An enzyme-containing liquid composition comprising a composition comprising an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris. 52. Жидкий состав по п.51, в котором указанная композиция включает нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, получаемые посредством способа, включающего выделение нерастворимого фермента из микробного бульона, содержащего микробные клетки и/или клеточный дебрис, без удаления микробных клеток и/или клеточного дебриса, приводящее, таким образом, к образованию композиции, включающей выделенный нерастворимый фермент и микробные клетки и/или клеточный дебрис, в которой по меньшей мере часть фермента нерастворима в микробном бульоне.52. The liquid composition according to § 51, wherein said composition comprises an insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris obtained by a method comprising isolating an insoluble enzyme from a microbial broth containing microbial cells and / or cell debris without removing microbial cells and / or cell debris, thus leading to the formation of a composition comprising the isolated insoluble enzyme and microbial cells and / or cell debris, in which at least a portion of the enzyme is insoluble in micro Bnom broth. 53. Жидкий состав по п.51, дополнительно включающий один или более рецептурный ингредиент, выбираемый из полиола; соли; консерванта; сурфактанта; и антиоксиданта. 53. The liquid composition according to § 51, further comprising one or more prescription ingredients selected from a polyol; salts; preservative; surfactant; and antioxidant.
RU2010154462/10A 2008-06-09 2009-06-09 Isolation of Insoluble Enzyme from Enzyme Bouillon and Preparation of Insoluble Enzyme RU2010154462A (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US6008708P 2008-06-09 2008-06-09
US61/060,087 2008-06-09

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2010154462A true RU2010154462A (en) 2012-07-20

Family

ID=41130419

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010154462/10A RU2010154462A (en) 2008-06-09 2009-06-09 Isolation of Insoluble Enzyme from Enzyme Bouillon and Preparation of Insoluble Enzyme

Country Status (12)

Country Link
US (3) US20110189344A1 (en)
EP (1) EP2285823B2 (en)
JP (2) JP2011523562A (en)
KR (1) KR20110028272A (en)
CN (1) CN102056936A (en)
BR (1) BRPI0914982B1 (en)
CA (1) CA2727443C (en)
CO (1) CO6331343A2 (en)
MX (1) MX2010013179A (en)
NZ (1) NZ589121A (en)
RU (1) RU2010154462A (en)
WO (1) WO2009152176A2 (en)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3431608A3 (en) * 2009-11-17 2019-02-20 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Method for enhanced protein production
US8877903B2 (en) * 2010-03-31 2014-11-04 Amsilk Gmbh Separation of insoluble target proteins
US20120252066A1 (en) 2011-03-29 2012-10-04 Heng Meng H Methods of foam control
FI126442B (en) * 2011-11-01 2016-12-15 Valio Oy Enzyme preparation in liquid form and process for its preparation
EP2852677A1 (en) 2012-05-21 2015-04-01 Danisco US Inc. Trichoderma hydrophobin production
CN102876648B (en) * 2012-10-25 2014-07-02 中国科学院天津工业生物技术研究所 Method for extracting cellulase from microorganism fermentation broth
FR2998450A1 (en) * 2012-11-26 2014-05-30 Dominique Hooreman USE OF AN ENZYMATIC COMPLEX IN FEEDING ANIMAL BREEDING ANIMALS
US9487759B2 (en) * 2013-02-26 2016-11-08 Avent, Inc. Preparation of stabilized catalase enzymes using polyvinyl alcohol
KR101617858B1 (en) * 2014-07-07 2016-05-04 유한책임회사 암브로티아 Wet Granularized Cell Culture Medium and Method for Producing the Same
CN106087508B (en) * 2016-08-10 2018-01-12 福建祥业实业有限公司 A kind of method and its device of ultrasonic assistant biology enzyme removing lignin
BR112019020772A2 (en) * 2017-04-03 2020-04-28 Novozymes As recovery process
EP3890507A1 (en) * 2018-12-05 2021-10-13 Novozymes A/S Use of an enzyme granule
EP4237525A1 (en) 2020-10-28 2023-09-06 Novozymes A/S Use of lipoxygenase
CN113200611B (en) * 2020-11-05 2023-02-03 青岛诺安百特生物技术有限公司 Composition for improving liquid microecological preparation bottle expansion and application thereof
WO2022106404A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Novozymes A/S Combination of proteases
WO2022106400A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Novozymes A/S Combination of immunochemically different proteases
CN117083370A (en) 2021-03-26 2023-11-17 诺维信公司 Detergent compositions with reduced polymer content
CN113621444B (en) * 2021-08-09 2023-04-07 广州天赐高新材料股份有限公司 Preparation method and application of rhamnolipid composite surfactant
WO2023061928A1 (en) 2021-10-12 2023-04-20 Novozymes A/S Endoglucanase with improved stability
WO2023116569A1 (en) 2021-12-21 2023-06-29 Novozymes A/S Composition comprising a lipase and a booster
WO2023165507A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 Novozymes A/S Use of xyloglucanase for improvement of sustainability of detergents
WO2023171644A1 (en) * 2022-03-08 2023-09-14 東レ株式会社 Filter aid, filtering processing method, and cellulase production method

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4009262A (en) * 1975-04-21 1977-02-22 Eli Lilly And Company Antibiotic a-28086 recovery process
JPS61168698A (en) * 1985-01-22 1986-07-30 昭和電工株式会社 Composite enzyme granule for detergent
DE3515650A1 (en) * 1985-05-02 1986-11-06 Biochemie GmbH, Kundl, Tirol METHOD FOR SEPARATING BIOTECHNOLOGICALLY PRODUCED VALUABLES BY CROSS-CURRENT MICROFILTRATION
GB8604164D0 (en) * 1986-02-20 1986-03-26 Albright & Wilson Enzymatic liquid detergent compositions
US5801034A (en) * 1989-06-13 1998-09-01 Genencor International Method for killing cells without lysis and enzyme recovery
US5324649A (en) * 1991-10-07 1994-06-28 Genencor International, Inc. Enzyme-containing granules coated with hydrolyzed polyvinyl alcohol or copolymer thereof
US5879920A (en) 1991-10-07 1999-03-09 Genencor International, Inc. Coated enzyme-containing granule
JP3312364B2 (en) * 1991-10-07 2002-08-05 ジェネンコア インターナショナル インコーポレーテッド Enzyme-containing granules coated
JPH10511549A (en) * 1994-12-28 1998-11-10 ジェネンコア インターナショナル インコーポレーテッド Enzyme stabilization
US5942611A (en) * 1995-01-19 1999-08-24 Cultor Ltd. Process for natamycin recovery
US5576282A (en) * 1995-09-11 1996-11-19 The Procter & Gamble Company Color-safe bleach boosters, compositions and laundry methods employing same
DE69632638T2 (en) * 1995-10-06 2004-11-11 Genencor International, Inc., Palo Alto MICROGRANULES FOR THE USE OF FOOD OR FEED
AU733734B2 (en) 1996-03-28 2001-05-24 Gist-Brocades B.V. Process for the preparation of a granular microbial biomass and isolation of valuable compounds therefrom
MA24137A1 (en) * 1996-04-16 1997-12-31 Procter & Gamble MANUFACTURE OF BRANCHED SURFACES.
AU752879B2 (en) * 1997-12-20 2002-10-03 Genencor International, Inc. Matrix granule
AU745104B2 (en) 1997-12-20 2002-03-14 Genencor International, Inc. Granule with hydrated barrier material
WO2000043502A1 (en) † 1999-01-25 2000-07-27 Novozymes A/S Recovery of a protein at high ph
ATE312171T1 (en) † 1999-10-01 2005-12-15 Novozymes As SPRAY DRIED ENZYME PRODUCT
DK1520012T3 (en) † 2002-07-01 2009-04-27 Novozymes As Monopropylene glycol added to fermentation medium
DK2125865T3 (en) 2007-03-15 2014-10-06 Novozymes As Dissolving protease crystals in fermentation soup

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0914982A2 (en) 2015-10-27
CN102056936A (en) 2011-05-11
EP2285823A2 (en) 2011-02-23
AU2009257559A1 (en) 2009-12-17
CO6331343A2 (en) 2011-10-20
JP2014076053A (en) 2014-05-01
WO2009152176A3 (en) 2010-02-04
US20110189344A1 (en) 2011-08-04
US20130337531A1 (en) 2013-12-19
WO2009152176A2 (en) 2009-12-17
MX2010013179A (en) 2011-01-14
NZ589121A (en) 2012-10-26
BRPI0914982B1 (en) 2019-09-24
KR20110028272A (en) 2011-03-17
EP2285823B1 (en) 2016-04-27
EP2285823B2 (en) 2024-03-06
JP2011523562A (en) 2011-08-18
CA2727443A1 (en) 2009-12-17
US20160264956A1 (en) 2016-09-15
CA2727443C (en) 2017-10-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2010154462A (en) Isolation of Insoluble Enzyme from Enzyme Bouillon and Preparation of Insoluble Enzyme
DK2548965T3 (en) Process for preparing a sugar solution
CN109705175A (en) The method for purifying neutral human milk oligosaccharides using Simulated Moving Bed Chromatography
Li et al. Separate and concentrate lactic acid using combination of nanofiltration and reverse osmosis membranes
JP2013537541A (en) Method to obtain high purity lactic acid from fermentation broth
JP2017521084A (en) Method for extracting soluble protein from microalgal biomass
CN101603038B (en) Preparation method of lysozyme
TW201231674A (en) Method for preparing concentrated aqueous solution of sugar
CN102907558A (en) Processing method of sea cucumber polypeptide
Díaz‐Montes et al. Metabolites recovery from fermentation broths via pressure‐driven membrane processes
CN102153633A (en) Method for extracting and separating bacitracin
CN1994107A (en) Method for preparing polypeptide nutrient
CN106349742B (en) A kind of film processing system and treatment process of extraction Semen Maydis polypeptide and corn yellow OB
CN108367245A (en) From fermentation solid method for purifying proteins under desorption condition
CN104561223A (en) Efficient synthesis and extraction method for blueberry anthocyanin
CN107418897A (en) A kind of technique for effectively discarding mycoprotein using glutamic acid fermentation
CN101492408A (en) Method for separating tryptophane from fermentation liquor
CN105218666A (en) A kind of method adopting cationic polysaccharide to prepare yelk antibody with high bioactivity
US9534026B2 (en) Corn active peptide additive for cell culture medium
JP2017521451A (en) Method for extracting soluble proteins from microalgal biomass
JP6077672B2 (en) Corn active peptide additive for cell culture media
CN104313105B (en) The method that a kind of utilization threonine fermentation liquid and waste liquor prepare 65% threonine
Gnasegaran et al. Process development for bioactive peptide production
Lee et al. Cell separation and disruption, product recovery, and purification
CN103211035B (en) Method for preparing liquid-state chymosin preparation

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20131014