RU2008686C1

RU2008686C1 - Method for forecasting development of complications in children suffering from generalized respiratory conservative infection

Info

Publication number: RU2008686C1
Authority: RU
Inventors: Л.П. Сизякина; В.Н. Чернышов; И.И. Андреева; Н.К. Болгаринов
Original assignee: Ростовский медицинский институт
Priority date: 1991-07-09
Filing date: 1991-07-09
Publication date: 1994-02-28

Abstract

FIELD: pediatrics. SUBSTANCE: at early stage of disease the method involves determining the number of neutrophils of peripheral blood expressing receptors to Fcj-fragment of immunoglobulin G (FcjP) in rosette-forming reaction with erythrocytes of sheep. If percentage of neutrophils with FcjP is higher than 58% , a complication may be forecasted. As distinct from the prototype, the disclosed method is easily reproducible, does not call for great expenditures of time and equipment and enables development of pneumonia to be supposed at the earliest stage of disease. EFFECT: possibility of administering timely and adequate therapy of complications of generalized respiratory conservative infection in children.

Description

Изобретение относится к области медицины, преимущественно к педиатрии и клинической иммунологии. В последние годы отмечается тенденция к увеличению случаев осложненного течения ОРВИ у детей с развитием пневмонии (Пикуза О. И. , Адо Е. И. , 1989). В связи с морфологическими и функциональными особенностями иммунной системы детей возникающие осложнения могут протекать атипично, поздно диагностироваться, что приводит к неадекватной и несвоевременной терапии (В. Е. Пигаревский, 1983). Поэтому актуальной проблемой является выбор надежных критериев, позволяющих прогнозировать течение заболевания на самых ранних этапах его развития. The invention relates to medicine, mainly to pediatrics and clinical immunology. In recent years, there has been a tendency toward an increase in cases of complicated course of acute respiratory viral infections in children with the development of pneumonia (Pikuza O. I., Ado E. I., 1989). In connection with the morphological and functional features of the children's immune system, complications may occur atypically, be diagnosed late, which leads to inadequate and untimely therapy (V.E. Pigarevsky, 1983). Therefore, the urgent problem is the selection of reliable criteria to predict the course of the disease at the earliest stages of its development.

Анализ патентной и научно-медицинской литературы свидетельствует о существовании ряда способов прогнозирования осложнений респираторных заболеваний у детей. В частности, В. Н. Левин с соавт. (Авт. св. N 121567, 1986) прогнозируют затяжное течение пневмонии по определению содержания в клетках крови свободной и связанной воды. Однако предлагаемые показатели не отражают функциональное состояние иммунной системы, а сам тест требует использования специального оборудования, реактивов, не исключает влияния на исследуемые параметры диеты. The analysis of patent and medical literature indicates the existence of a number of methods for predicting the complications of respiratory diseases in children. In particular, V.N. Levin et al. (Auth. St. N 121567, 1986) predict a protracted course of pneumonia by determining the content of free and bound water in blood cells. However, the proposed indicators do not reflect the functional state of the immune system, and the test itself requires the use of special equipment, reagents, does not exclude the influence on the studied parameters of the diet.

Прогнозирование течения ОРЗ у детей по методу, предложенному Н. Б. Качергене с соавт. (Авт. св. N 942697, 1982) требует определения содержание дегидрогеназ и гидролаз в клетках крови больных. Недостатком данного способа является необходимость исследования крови в вечернее время, что является дополнительным травмирующим фактором для ребенка, трудно выполним в условиях поликлиники, а также требует затрат значительного числа реактивов, при этом учет цитохимических реакций достаточно трудоемок и субъективен. Prediction of the course of acute respiratory infections in children according to the method proposed by N. B. Kachergen et al. (Auth. St. N 942697, 1982) requires the determination of the content of dehydrogenases and hydrolases in the blood cells of patients. The disadvantage of this method is the need for blood tests in the evening, which is an additional traumatic factor for the child, it is difficult to perform in a clinic, and also requires a significant number of reagents, while taking into account cytochemical reactions is quite time-consuming and subjective.

Способ прогнозирования течения воспалительного процесса в легких А. К. Абрамовской с соавт. (Авт. св. N 1478123, 1989) основан на определении уровня циркулирующих иммунных комплексов у детей в сыворотке крови и постановки реакции непрямой иммунофлюоресценции с аутоштаммами бактерий, выделенных из мокроты больных. Существенным недостатком данного способа является то, что для выделения бактерий необходим длительный и трудоемкий этап, требующий использования большого числа реактивов, дорогостоящего оборудования, строгого соблюдения правил стерильности при работе. A method for predicting the course of the inflammatory process in the lungs of A. K. Abramovskaya et al. (Auth. St. N 1478123, 1989) is based on determining the level of circulating immune complexes in children in blood serum and staging the reaction of indirect immunofluorescence with auto-strains of bacteria isolated from the sputum of patients. A significant disadvantage of this method is that for the isolation of bacteria, a long and laborious stage is required, requiring the use of a large number of reagents, expensive equipment, and strict adherence to sterility rules during operation.

Прототипом предлагаемого изобретения является описанный Д. Ю. Каримовым (Авт. св. N 724128, 1980), способ диагностики осложнений ОРЗ у новорожденных путем исследования уровня суммарных и основных белков в нейтрофилах периферической крови и при показателях основных белков ниже 1,2-1,0 ед. активности, а суммарных - в пределах от 0,5 до 1,0 ед. активности диагностируют развитие осложнений. The prototype of the invention is described by D. Yu. Karimov (Auth. St. N 724128, 1980), a method for diagnosing complications of acute respiratory infections in newborns by examining the level of total and major proteins in peripheral blood neutrophils and when the basic proteins are below 1.2-1, 0 units activity, and total - in the range from 0.5 to 1.0 units. activities diagnose the development of complications.

Недостатком способа является сложность воспроизведения, связанная с необходимостью использования токсических хим. реактивов (раствор сулемы, уксусная кислота). Достаточно трудоемким является также процесс учета реакции, заключающийся в вычислении специальных коэффициентов при подсчете количества нейтрофилов с различной степенью насыщенности окраски. Существенным недостатком способа является субъективность оценки результатов по интенсивности окрашивания в обычном световом микроскопе. Кроме того, указанный способ не дает возможности раннего прогноза развития осложнения, лишь констатируя его наличие. The disadvantage of this method is the difficulty of reproduction associated with the need to use toxic chemicals. reagents (mercuric chloride solution, acetic acid). The process of taking into account the reaction, which consists in calculating special coefficients in calculating the number of neutrophils with varying degrees of color saturation, is also quite time-consuming. A significant disadvantage of this method is the subjectivity of evaluating the results according to the intensity of staining in a conventional light microscope. In addition, this method does not allow early prediction of the development of complications, only stating its presence.

Целью изобретения является упрощение способа и возможность раннего прогнозирования осложнений ОРВИ у детей. The aim of the invention is to simplify the method and the possibility of early prediction of complications of acute respiratory viral infections in children.

Цель достигается путем исследования периферической крови, в которой определяют количество нейтрофилов, несущих на поверхности рецепторы к Fcj фрагменту иммуноглобулинов класса G (FcjP) и при их числе свыше 58% в раннем периоде заболевания прогнозируют развитие осложнений. The goal is achieved by studying peripheral blood, in which the number of neutrophils carrying receptors for the Fcj fragment of class G immunoglobulins (FcjP) on the surface is determined, and with their number exceeding 58%, complications are predicted in the early period of the disease.

У обследуемого ребенка с первыми признаками ОРВИ берут кровь из локтевой вены в количестве 0,5 мл в пробирку, содержащую 20 ЕД. гепарина. Нейтрофилы выделяют путем разделения крови в фиколл-верографиновом градиенте. Оценку выработки FcjP на мембранах нейтрофилов проводят, используя стандартный метод розеткообразования (Методические рекомендации по оценке иммунного статуса. Москва, 1984), где индикаторами для выявления рецепторов служат эритроциты барана (ЭБ), нагруженные иммуноглобулином. В качестве источника иммноглобулина используют гипериммунную к ЭБ сыворотку крови кролика в субагглютинирующем разведении (производство НИИ БП г. Харьков). The examined child with the first signs of acute respiratory viral infections take blood from the ulnar vein in the amount of 0.5 ml in a test tube containing 20 units. heparin. Neutrophils are isolated by separation of blood in a ficoll-verographin gradient. Evaluation of FcjP production on neutrophil membranes is carried out using the standard method of rosette formation (Methodological recommendations for assessing the immune status. Moscow, 1984), where sheep erythrocytes (EB) loaded with immunoglobulin serve as indicators for detecting receptors. As a source of immunoglobulin, rabbit blood serum hyperimmune to EB in subagglutinating dilution is used (produced by the Scientific Research Institute of BP in Kharkov).

П р и м е р 1. Больной С. 2 г. 2 м. (И. Б. N 2009), поступил в клинику с жалобами на частый кашель, насморк, повышение температуры до 38^оС. Общее состояние средней тяжести, частота дыхания 27 в мин, нормальный легочный перкуторный тон. При аускультации - на фоне жесткого дыхания рассеянные сухие и крупнопузырчатые влажные хрипы. Поставлен диагноз: ОРВИ. Острый бронхит. При иммунологическом обследовании крови определено наличие FcjP у 85% нейтрофилов. Предположили возможность развития пневмонии, начали применение антибиотиков до рентгенографического подтверждения развившегося осложнения. Больной выписан с диагнозом - ОРВИ. Обструктивный бронхит. Прикорневая правосторонняя пневмония.EXAMPLE 1. EXAMPLE 2 Patient S. of 2 m. (IB N 2009), was admitted to the clinic with complaints of frequent cough, runny nose, fever up to 38 ° ^C. The general condition of moderate severity, frequency, respiration 27 per minute, normal pulmonary percussion tone. During auscultation, against the background of hard breathing, scattered dry and coarse-moist moist rales. Diagnosed with SARS. Acute bronchitis. An immunological examination of the blood revealed the presence of FcjP in 85% of neutrophils. They suggested the possibility of developing pneumonia, and began using antibiotics until radiographic confirmation of the complication developed. The patient was discharged with a diagnosis of ARVI. Obstructive bronchitis. Root right-sided pneumonia.

П р и м е р 2. Больной П. , 1 г. 9 м. (И. Б. N 68), поступил в клинику с жалобами на одышку экспираторного характера, сухой частый кашель, повышение температуры до 37,2^оС, снижение аппетита. Общее состояние тяжелое. Кожа чистая, бледная. Выраженный периоральный цианоз. Число дыханий 52 в минуту с участием вспомогательных мышц.EXAMPLE Example 2. Patient P., 1 g of 9 m. (IB N 68), admitted to the clinic with complaints of expiratory dyspnea character dry frequent cough, fever up to 37.2 ^{° C,} decreased appetite. The general condition is serious. The skin is clear and pale. Severe perioral cyanosis. The number of breaths is 52 per minute with the participation of auxiliary muscles.

При перкуссии - коробочный оттенок перкуторного тона. При аускультации - жесткое дыхание с резко удлиненным выдохом. Обильные двусторонние свистящие хрипы. Поставлен диагноз: ОРВИ. Обструктивный бронхит. При иммунологическом обследовании у 68% нейтрофилов определяли экспрессию FcjP. Предположили развитие пневмонии, в связи с чем был начат курс антибактериальной терапии, однако полностью купировать осложнение не удалось. Рентгенография грудной клетки подтвердила диагноз. Больной выписан с диагнозом ОРВИ. Очаговая двусторонняя бронхопневмония, обструктивный синдром. With percussion - a boxed shade of percussion tone. With auscultation, hard breathing with sharply elongated exhalation. Profuse bilateral wheezing. Diagnosed with SARS. Obstructive bronchitis. Immunological examination of 68% of neutrophils determined the expression of FcjP. They suggested the development of pneumonia, in connection with which a course of antibacterial therapy was started, however, the complication was not completely stopped. A chest x-ray confirmed the diagnosis. The patient was discharged with a diagnosis of SARS. Focal bilateral bronchopneumonia, obstructive syndrome.

П р и м е р 3. Больной Д. , 2 г. 10 м. (И. Б. N 2191), поступил в клинику с жалобами на сухой частый кашель, насморк, повышение температуры до 38^оС, одышку, общее состояние тяжелое. Кожа бледная, чистая. Незначительный периоральный цианоз. Зев гиперемирован. Число дыханий 50 в минуту с участием вспомогательных мышц. При перкуссии - коробочный оттенок перкуторного тона, приглушение не определялось. При аускультации - на фоне жесткого дыхания обильные сухие двусторонние свистящие хрипы. При поступлении поставлен диагноз ОРВИ, левосторонняя пневмония. При иммунологическом обследовании экспрессия выявлена у 34% нейтрофилов. Рентгенография грудной клетки очаговые изменения в легких не выявила. Через неделю после традиционной для ОРВИ терапии больной выписан с улучшением.EXAMPLE EXAMPLE 3 Patient D., 10 m 2 g. (IB N 2191), admitted to the clinic with complaints of frequent dry cough, runny nose, fever up to 38 ^{° C,} dyspnea, general heavy. The skin is pale, clean. Slight perioral cyanosis. The pharynx is hyperemic. The number of breaths is 50 per minute with the participation of auxiliary muscles. With percussion - a boxed shade of percussion tone, muffling was not detected. With auscultation, amid dry breathing, plentiful dry bilateral wheezing. Upon admission, a diagnosis of SARS, left-sided pneumonia was made. An immunological examination revealed expression in 34% of neutrophils. Chest x-ray revealed no focal changes in the lungs. A week after the traditional ARVI therapy, the patient was discharged with improvement.

Количество нейтрофилов периферической крови, экспрессирующих FcjP у детей, больных ОРВИ с последующим развитием осложнений (I) и неосложненном течении (II), III гр. - доноры. The number of peripheral blood neutrophils expressing FcjP in children with acute respiratory viral infections, followed by the development of complications (I) and uncomplicated course (II), III gr. - donors.

Преимуществом предлагаемого способа является возможность прогнозирования осложнений ОРВИ на ранних стадиях развития заболевания, доступность, воспроизводимость, несложный учет результатов. (56) Авторское свидетельство СССР N 724128, кл. G 01 N 33/53, 1980. The advantage of the proposed method is the ability to predict complications of acute respiratory viral infections in the early stages of the development of the disease, accessibility, reproducibility, simple accounting of the results. (56) Copyright certificate of the USSR N 724128, cl. G 01 N 33/53, 1980.

Claims

METHOD FOR PREDICTING THE DEVELOPMENT OF COMPLICATIONS IN CHILDREN OF ARVI CHILDREN by examining blood neutrophils, characterized in that neutrophils expressing F _c ˙γ receptors on their surface are detected in the blood, and when their number is above 58%, complications are predicted to develop in the initial period of the disease.