Claims (27)
1. Способ продукции в клетке растения антитела, специфически связывающего онкобелок HER2/neu, который включает в себя:1. The method of production in the plant cell of an antibody that specifically binds HER2 / neu oncoprotein, which includes:
(а) обеспечение одного или более экспрессионных векторов, направляющих в клетке растения синтез тяжелой, легкой цепи антитела или его антигенсвязывающих фрагментов (dsFv, scFv, scFv-Fc);(a) providing one or more expression vectors directing in the plant cell the synthesis of the heavy, light chain of an antibody or its antigen-binding fragments (dsFv, scFv, scFv-Fc);
(б) введение указанных одного или более векторов в клетку растения;(b) introducing said one or more vectors into a plant cell;
(в) культивирование клетки растения в условиях, обеспечивающих совместную экспрессию в клетке указанных векторов.(c) cultivating a plant cell under conditions providing for co-expression of said vectors in the cell.
2. Способ по п.1, в котором клетка растения является изолированной клеткой или находится в составе культивируемого эксплантата (ткани, органа) или в составе целого растения.2. The method according to claim 1, in which the plant cell is an isolated cell or is part of a cultured explant (tissue, organ) or as part of a whole plant.
3. Способ по п.1, характеризующийся тем, что указанный один или более экспрессионных векторов обеспечивают синтез неамплифицирующейся РНК.3. The method according to claim 1, characterized in that the specified one or more expression vectors provide the synthesis of non-amplifying RNA.
4. Способ по п.3, характеризующийся тем, что указанный один или более экспрессионных векторов обеспечивают синтез неамплифицирующейся РНК с помощью индуцибельного промотора.4. The method according to claim 3, characterized in that the specified one or more expression vectors provide the synthesis of non-amplifying RNA using an inducible promoter.
5. Способ по п.1, характеризующийся тем, что указанный один или более экспрессионных векторов являются вирусными экспрессионными векторами.5. The method according to claim 1, characterized in that said one or more expression vectors are viral expression vectors.
6. Способ по п.5, характеризующийся тем, что указанные вирусные экспрессионные векторы являются векторами на основе генома ДНК-содержащего вируса.6. The method according to claim 5, characterized in that said viral expression vectors are vectors based on the genome of a DNA-containing virus.
7. Способ по п.5, характеризующийся тем, что указанные вирусные экспрессионные векторы являются векторами на основе генома РНК-содержащего вируса.7. The method according to claim 5, characterized in that said viral expression vectors are vectors based on the genome of an RNA-containing virus.
8. Способ по любому из пп.5-7, характеризующийся тем, что указанные вирусные экспрессионные векторы обеспечивают синтез вирусной РНК с помощью индуцибельного промотора.8. The method according to any one of claims 5 to 7, characterized in that said viral expression vectors provide for the synthesis of viral RNA using an inducible promoter.
9. Способ по п.7, характеризующийся тем, что экспрессионный вектор обеспечивает синтез РНК вируса табачной мозаики, кодирующей тяжелую цепь антитела.9. The method according to claim 7, characterized in that the expression vector provides the synthesis of RNA of the tobacco mosaic virus encoding the antibody heavy chain.
10. Способ по п.7, характеризующийся тем, что экспрессионный вектор обеспечивает синтез РНК вируса табачной мозаики, кодирующей легкую цепь антитела.10. The method according to claim 7, characterized in that the expression vector provides the synthesis of RNA of the tobacco mosaic virus encoding the antibody light chain.
11. Способ по п.7, характеризующийся тем, что экспрессионный вектор обеспечивает синтез РНК Х-вируса картофеля, кодирующей тяжелую цепь антитела.11. The method according to claim 7, characterized in that the expression vector provides for the synthesis of potato X virus RNA encoding an antibody heavy chain.
12. Способ по п.7, характеризующийся тем, что экспрессионный вектор обеспечивает синтез РНК Х-вируса картофеля, кодирующей легкую цепь антитела.12. The method according to claim 7, characterized in that the expression vector provides the synthesis of potato X virus RNA encoding the antibody light chain.
13. Способ по п.1, характеризующийся тем, что экспрессионные векторы обеспечивают синтез легкой и тяжелой цепи антитела в одной и той же клетке.13. The method according to claim 1, characterized in that the expression vectors provide synthesis of the light and heavy chains of the antibodies in the same cell.
14. Способ по п.5, характеризующийся тем, что вирусные экспрессионные векторы подбирают таким образом, чтобы исключить конкуренцию друг с другом в одной и той же клетке.14. The method according to claim 5, characterized in that the viral expression vectors are selected in such a way as to exclude competition with each other in the same cell.
15. Способ по п.1, характеризующийся тем, что антитело содержит сигнальный пептид, обеспечивающий адресацию антитела в клеточный компартмент или секрецию за пределы клетки.15. The method according to claim 1, characterized in that the antibody contains a signal peptide that addresses the antibody in the cell compartment or secretion outside the cell.
16. Способ по п.1, в котором антитело принадлежит к иммуноглобулину класса G, или А, или М, или D, или Е.16. The method according to claim 1, in which the antibody belongs to an immunoglobulin class G, or A, or M, or D, or E.
17. Способ по п.1, характеризующийся тем, что растительная клетка является клеткой двудольного или однодольного растения.17. The method according to claim 1, characterized in that the plant cell is a cell of a dicotyledonous or monocotyledonous plant.
18. Способ по п.17, характеризующийся тем, что двудольное растение принадлежит к семейству пасленовых.18. The method according to 17, characterized in that the dicotyledonous plant belongs to the nightshade family.
19. Способ по п.18, характеризующийся тем, что растением семейства пасленовых является растение рода Nicotiana.19. The method according to p. 18, characterized in that the plant in the nightshade family is a plant of the genus Nicotiana.
20. Способ по п.19, характеризующийся тем, что растением рода Nicotiana является N. tabacum или N. benthamiana.20. The method according to claim 19, characterized in that the plant of the genus Nicotiana is N. tabacum or N. benthamiana.
21. Способ по п.17, характеризующийся тем, что двудольным растением является растение семейств Brassicacea, Legume или Chenopodiaceae.21. The method according to 17, characterized in that the dicotyledonous plant is a plant of the family Brassicacea, Legume or Chenopodiaceae.
22. Способ по п.1, характеризующийся тем, что указанные векторы вводят в клетку растения путем агроинъекции.22. The method according to claim 1, characterized in that the vectors are introduced into the plant cell by agroinjection.
23. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в клетку растения вводят экспрессионные векторы, обеспечивающие стабильную трансформацию.23. The method according to claim 1, characterized in that expression vectors are introduced into the cell of the plant, ensuring stable transformation.
24. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в клетку растения вводят экспрессионные векторы, обеспечивающие транзиентную трансформацию.24. The method according to claim 1, characterized in that expression vectors that provide transient transformation are introduced into the plant cell.
25. Растительная клетка, охарактеризованная в п.1, продуцирующая антитело, взаимодействующее с онкобелком HER2/neu.25. The plant cell described in claim 1, producing an antibody that interacts with the HER2 / neu oncoprotein.
26. Растительная клетка по п.25, стабильно-трансформированная генетической конструкцией, направляющей синтез антитела.26. The plant cell of claim 25, stably transformed with a genetic construct directing antibody synthesis.
27. Растительная клетка по п.25, транзиентно-трансформированная генетической конструкцией, направляющей синтез антитела.27. The plant cell of claim 25, transiently transformed with a genetic construct directing antibody synthesis.