Claims (16)
1. 6-Фосфоглюконолактоназа, выбранная из группы, состоящей из следующих белков:1. 6-Phosphogluconolactonase selected from the group consisting of the following proteins:
(A) белок, включающий последовательность аминокислот, приведенную в списке последовательностей под номером 2 (SEQ ID NO:2); и(A) a protein comprising the amino acid sequence shown in sequence listing number 2 (SEQ ID NO: 2); and
(B) белок, включающий оследовательность аминокислот, содержащую делеции, замены, вставки или добавление одной или нескольких аминокислот в последовательности аминокислот, приведенной в списке последовательностей под номером 2 (SEQ ID NO:2), который обладает как минимум 70% гомологией по отношению к аминокислотной последовательности, приведенной под номером 2 (SEQ ID NO:2), и который обладает активностью 6-фосфоглюконолактоназы.(B) a protein comprising an amino acid sequence comprising deletions, substitutions, insertions, or addition of one or more amino acids in the amino acid sequence listed in sequence number 2 (SEQ ID NO: 2), which has at least 70% homology to the amino acid sequence shown under number 2 (SEQ ID NO: 2), and which has the activity of 6-phosphogluconolactonase.
2. Фрагмент ДНК, кодирующий 6-фосфоглюконолактоназу по п.1.2. A DNA fragment encoding 6-phosphogluconolactonase according to claim 1.
3. Бактерия - продуцент L-аминокислоты, отличающаяся тем, что указанная бактерия модифицирована таким образом, что активность 6-фосфоглюконолактоназы по п.1 повышена.3. Bacteria - producer of L-amino acids, characterized in that the bacterium is modified so that the activity of 6-phosphogluconolactonase according to claim 1 is increased.
4. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанная бактерия принадлежит к семейству Enterobacteriaceae.4. The bacterium according to claim 3, characterized in that said bacterium belongs to the Enterobacteriaceae family.
5. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанная 6-фосфоглюконолактоназа получена из бактерии, принадлежащей к роду Escherichia.5. The bacterium according to claim 3, characterized in that said 6-phosphogluconolactonase is obtained from a bacterium belonging to the genus Escherichia.
6. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что активность 6-фосфоглюконолактоназы повышена путем модификации последовательности, контролирующей экспрессию гена 6-фосфоглюконолактоназы на хромосоме указанной бактерии, таким образом, что экспрессия указанного гена усилена.6. The bacterium according to claim 3, characterized in that the activity of 6-phosphogluconolactonase is increased by modifying the sequence that controls the expression of the 6-phosphogluconolactonase gene on the chromosome of the specified bacterium, so that the expression of the specified gene is enhanced.
7. Бактерия по п.6, отличающаяся тем, что природный промотор указанного гена заменен на более сильный промотор.7. The bacterium according to claim 6, characterized in that the natural promoter of the specified gene is replaced by a stronger promoter.
8. Бактерия по п.6, отличающаяся тем, что ген, кодирующий 6-фосфоглюконолактоназу, выбран из группы, состоящей из8. The bacterium according to claim 6, characterized in that the gene encoding 6-phosphogluconolactonase is selected from the group consisting of
(a) ДНК, включающая последовательность нуклеотидов с 1 по 996, приведенной в списке последовательностей под номером 1 (SEQ ID NO:1); и(a) DNA comprising the sequence of nucleotides 1 to 996 shown in the list of sequences under the number 1 (SEQ ID NO: 1); and
(b) ДНК, которая гибридизуется в жестких условиях с последовательностью нуклеотидов с 1 по 996, приведенной в списке последовательностей под номером 1 (SEQ ID NO:1), или с зондом, приготовленным на основании указанной последовательности нуклеотидов, и кодирует белок, обладающий активностью 6-фосфоглюконолактоназы.(b) DNA that hybridizes under stringent conditions with the nucleotide sequence 1 to 996 listed in the sequence number 1 (SEQ ID NO: 1), or with a probe prepared on the basis of the specified nucleotide sequence, and encodes a protein having activity 6-phosphogluconolactonase.
9. Бактерия по п.8, отличающаяся тем, что жесткими условиями являются условия, при которых отмывка осуществляется при 60°С, концентрация соли соответствует 1xSSC и 0.1% SDS, а продолжительность отмывки составляет 15 мин.9. The bacterium of claim 8, characterized in that the harsh conditions are the conditions under which washing is carried out at 60 ° C, the salt concentration corresponds to 1xSSC and 0.1% SDS, and the washing time is 15 minutes
10. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанная бактерия модифицирована таким образом, что экспрессия открытой рамки считывания yddG усилена.10. The bacterium according to claim 3, characterized in that said bacterium is modified in such a way that expression of the open reading frame of yddG is enhanced.
11. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанной L-аминокислотой является ароматическая L-аминокислота, выбранная из группы, состоящей из L-триптофана, L-фенилаланина и L-тирозина.11. The bacterium according to claim 3, characterized in that said L-amino acid is an aromatic L-amino acid selected from the group consisting of L-tryptophan, L-phenylalanine and L-tyrosine.
12. Способ получения L-аминокислоты, включающий стадии выращивания бактерии по п.3 в питательной среде, и выделения накопленной L-аминокислоты из культуральной жидкости.12. A method for producing an L-amino acid, comprising the steps of growing a bacterium according to claim 3 in a nutrient medium, and isolating the accumulated L-amino acid from the culture fluid.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что указанной L-аминокислотой является ароматическая L-аминокислота.13. The method according to p. 12, characterized in that said L-amino acid is an aromatic L-amino acid.
14. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанной L-аминокислотой является L-триптофан.14. The method according to item 13, wherein the specified L-amino acid is L-tryptophan.
15. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанной L-аминокислотой является L-фенилаланин.15. The method according to item 13, wherein the specified L-amino acid is L-phenylalanine.
16. Способ по любому из п.14 или 15, отличающийся тем, что в указанной бактерии усилена экспрессия генов биосинтеза ароматических аминокислот.16. The method according to any one of p. 14 or 15, characterized in that in said bacterium the expression of aromatic amino acid biosynthesis genes is enhanced.