RU2003112676A

RU2003112676A - Гликоформы фактора vii

Info

Publication number: RU2003112676A
Application number: RU2003112676/13A
Authority: RU
Inventors: Ханс Курт ПИНГЕЛЬ (DK); Ханс Курт ПИНГЕЛЬ; Нильс Кристиан КЛАУСЕН (DK); Нильс Кристиан Клаусен
Original assignee: Ново Нордиск Хелт Кэр Аг (Ch); Ново Нордиск Хелт Кэр Аг
Priority date: 2000-10-02
Filing date: 2001-10-02
Publication date: 2005-01-20
Also published as: RU2325181C2

Claims

1. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VII или полипептидов, родственных фактору VII, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где в пределах примерно 94-99% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток сиаловой кислоты.

2. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VII или полипептидов, родственных фактору VII, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где в пределах примерно 1-7% олигосахаридных цепей имеют нейтральный заряд.

3. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VII или полипептидов, родственных фактору VII, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где в пределах примерно 6-16% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один конечный остаток галактозы.

4. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VII или полипептидов, родственных фактору VII, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где в пределах примерно 6-9% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один конечный остаток N-ацетилгалактозамина.

5. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VII или полипептидов, родственных фактору VII, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где в пределах примерно 11-23% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один конечный остаток галактозы или N-ацетилгалактозамина.

6. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VII или полипептидов, родственных фактору VII, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где, по меньшей мере, примерно 2% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток фукозы, связанный α1->3 с антеннарным N-ацетилглюкозамином.

7. Препарат по любому из пп.1-6, где сиаловые остатки в олигосахаридных цепях связаны с галактозой посредством связи α2->3.

8. Препарат по любому из пп.1-7, где остатки сиаловой кислоты содержат N-ацетилнейраминовую кислоту (Neu5Ac) и N-гликолилнейраминовую кислоту (Neu5Gc).

9. Препарат по любому из пп.1-8, где олигосахариды содержат фукозу, связанную α1->6 с каркасом N-ацетилглюкозамина.

10. Препарат по любому из пп.1-9, где в пределах примерно 95-98% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток сиаловой кислоты.

11. Препарат по любому из пп.1-10, где в пределах примерно 96-97% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток сиаловой кислоты.

12. Препарат по любому из пп.1-11, где в пределах примерно 2-4% олигосахаридных цепей имеют нейтральный заряд.

13. Препарат по любому из пп.1-12, где в пределах примерно 8-12% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один конечный остаток галактозы.

14. Препарат по любому из пп.1-13, где в пределах примерно 7-8% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один конечный остаток N-ацетилгалактозамина.

15. Препарат по любому из пп.1-14, где в пределах примерно 12-18% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один конечный остаток галактозы или N-ацетилгалактозамина.

16. Препарат по любому из пп.1-15, где, по меньшей мере, примерно 5% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток фукозы, связанный α1->3 с антеннарным N-ацетилглюкозамином.

17. Препарат по любому из пп.1-16, где, по меньшей мере, примерно 10% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток фукозы, связанный α1->3 с антеннарным N-ацетилглюкозамином.

18. Препарат по любому из пп.1-17, где, по меньшей мере, примерно 20% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток фукозы, связанный α1->3 с антеннарным N-ацетилглюкозамином.

19. Препарат по любому из пп.1-18, где, по меньшей мере, примерно 40% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток фукозы, связанный α1->3 с антеннарным N-ацетилглюкозамином.

20. Препарат по любому из пп.1-19, где полипептиды имеют последовательность аминокислот фактора VII дикого типа.

21. Препарат по любому из пп.1-20, где полипептиды представляют собой фактор VIIa дикого типа.

22. Препарат по любому из пп.1-19, где полипептиды фактора VII выбираются из группы, состоящей из: S52A-фактора VII, S60A-фактора VII, фактора VII, который протеолитически расщепляется между остатками 290 и 291; фактора VII, который протеолитически расщепляется между остатками 315 и 316; и фактора VII, который окисляется.

23. Препарат по любому из пп.1-19, где полипептиды, родственные фактору VII, выбираются из группы, состоящей из: R152E-фактора VII, S344A-фактора VII, FFR-фактора VII и фактора VIIa, где отсутствует домен Gla.

24. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VII или полипептидов, родственных фактору VII, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где (i) в пределах примерно 94-100% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток сиаловой кислоты и (ii) в пределах примерно 6-9% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один конечный остаток N-ацетилгалактозамина.

25. Препарат по п.24, где полипептиды фактора VII имеют последовательность фактора VII дикого типа.

26. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VIIa, имеющих последовательность фактора VII дикого типа, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где в пределах примерно 94-99% олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток сиаловой кислоты.

27. Препарат, содержащий множество полипептидов фактора VIIa, имеющих последовательность фактора VII дикого типа, где полипептиды содержат аспарагинсвязанные олигосахаридные цепи и где, по меньшей мере, примерно 2%

олигосахаридных цепей содержат, по меньшей мере, один остаток фукозы, связанный α1->3 с антеннарным N-ацетилглюкозамином.

28. Препарат по любому из пп.1-27, где полипептиды продуцируются в клетке-хозяине, выбранной из группы, состоящей из клеток грибов, насекомых и позвоночных.

29. Препарат по п.28, где клетка-хозяин представляет собой клетку млекопитающего.

30. Препарат по п.29, где клетку млекопитающего получают от хомячка.

31. Препарат по п.30, где клетка хомячка выбирается из группы, состоящей из клеток CHO и клеток BHK.

32. Препарат по п.29, где клетку млекопитающего получают от человека.

33. Препарат по п.32, где клетка человека представляет собой клетку HEK.

34. Препарат по любому из пп.1-33, где препарат демонстрирует биологическую доступность, которая составляет, по меньшей мере, примерно 110% от биологической доступности эталонного препарата, и где примерно 93% или менее олигосахаридных цепей в эталонном препарате содержат, по меньшей мере, один остаток сиаловой кислоты.

35. Препарат по п.34, где препарат демонстрирует биологическую доступность, которая составляет, по меньшей мере, примерно 120% от биологической доступности эталонного препарата.

36. Препарат по п.35, где препарат демонстрирует биологическую доступность, которая составляет, по меньшей мере, примерно 130% от биологической доступности эталонного препарата.

37. Препарат по п.36, где препарат демонстрирует биологическую доступность, которая составляет, по меньшей мере, примерно 140% от биологической доступности эталонного препарата.

38. Способ определения конфигурации гликоформ полипептидов фактора VII и полипептидов, родственных фактору VII, где способ включает в себя:

(a) культивирование клетки, экспрессирующей полипептиды фактора VII или полипептиды, родственные фактору VII, при первом наборе заданных условий культивирования;

(b) извлечение полипептидов фактора VII или полипептидов, родственных фактору VII, из культуры для получения препарата, содержащего полипептиды; и

(c) анализ конфигурации олигосахаридов, связанных с полипептидами, для определения конфигурации гликоформ препарата.

39. Способ по п.38, дополнительно включающий в себя:

(d1) изменение условий культивирования на стадии (a) для получения второго набора заданных условий культивирования;

(e1) повторение стадий (b)-(d1) до тех пор, пока не будет получена желаемая конфигурация гликоформ.

40. Способ по п.38, дополнительно включающий в себя:

(d2) химическую или ферментативную обработку препарата для изменения конфигурации олигосахаридов; и

(e2) повторение стадий (b)-(d2) до тех пор, пока не будет получена желаемая конфигурация гликоформ.

41. Способ получения препарата, содержащего полипептиды фактора VII или полипептиды, родственные фактору VII, имеющего заданную конфигурацию N-связанного гликозилирования, где указанный способ включает в себя культивирование клетки, экспрессирующей полипептиды, при условиях, в которых, по меньшей мере, примерно 94% аспарагинсвязанных олигосахаридов, присутствующих в полипептидах, содержат, по меньшей мере, один остаток сиаловой кислоты.

42. Фармацевтический препарат, содержащий препарат по любому из пп.1-37, и фармацевтически приемлемый носитель или адьювант.

43. Способ лечения синдрома, чувствительного к фактору VII, где способ включает в себя введение фармацевтического препарата по п.42 пациенту, нуждающемуся в таком лечении, в условиях, приводящих к уменьшению кровотечения и/или к повышению свертывания крови, где препарат содержит полипептиды фактора VII.

44. Способ по п.43, где синдром выбирается из группы, состоящей из гемофилии A, гемофилии B, дефицита фактора XI, дефицита фактора VII, тромбоцитопении, болезни фон Виллебранда, присутствия ингибитора фактора свертываемости, хирургической операции, травмы и терапевтического лечения с помощью антикоагулянтов.

45. Способ предотвращения нежелательного кровотечения, где способ включает в себя введение фармацевтического препарата по п.42 пациенту, нуждающемуся в таком лечении, в условиях, приводящих к уменьшению кровотечения и/или повышению свертываемости крови, где препарат содержит полипептиды фактора VII.

46. Способ предотвращения нежелательного свертывания крови, где способ включает в себя введение фармацевтического препарата по п.42 пациенту, нуждающемуся в таком лечении, в условиях, эффективных для ингибирования свертывания, где препарат содержит полипептиды, родственные фактору VII.

47. Способ предотвращения реакций, опосредуемых тканевым фактором, где способ включает в себя введение фармацевтического препарата по п.42 пациенту, нуждающемуся в таком лечении, в условиях, эффективных для ингибирования свертывания, где препарат содержит полипептиды, родственные фактору VII.

48. Способ по п.46, где нежелательное свертывание крови связано с состоянием, выбранным из группы, состоящей из: ангиопластической операции, глубокого тромбоза вен, легочной эмболии, инсульта, диссеминированного внутрисосудистого свертывания (DIG); отложения фибрина в легких и почках, связанного с грамотрицательной эндотоксимией, и инфаркта миокарда.

49. Способ по п.47, где реакции, опосредуемые тканевым фактором, связаны с состоянием, выбранным из группы, состоящей из SIRS, ARDS, MOF, HUS и TTP.

50. Применение препарата, содержащего полипептиды фактора VII или полипептиды, родственные фактору VII, по любому из пп.1-37 для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения синдрома, чувствительного к фактору VII.

51. Применение по п.50, где синдром выбирается из группы, состоящей из гемофилии A, гемофилии B, дефицита фактора XI, дефицита фактора VII, тромбоцитопении, болезни фон Виллебранда, присутствия ингибитора фактора свертываемости, хирургической операции, травмы и терапевтического лечения с помощью антикоагулянта.

52. Применение препарата, содержащего полипептиды фактора VII или полипептиды, родственные фактору VII, по любому из пп.1-37 для приготовления лекарственного средства, предназначенного для предотвращения нежелательного кровотечения.

53. Применение препарата, содержащего полипептиды фактора VII или полипептиды, родственные фактору VII, по любому из пп.1-37 для приготовления лекарственного средства, предназначенного для предотвращения нежелательного свертывания крови.

54. Применение по п.53, где нежелательное свертывание крови связано с состоянием, выбранным из группы, состоящей из: ангиопластической операции, глубокого тромбоза вен, легочной эмболии, инсульта, диссеминированного внутрисосудистого свертывания (DIG); отложения фибрина в легких и почках, связанного с грамотрицательной эндотоксимией, и инфаркта миокарда.

55. Применение препарата, содержащего полипептиды фактора VII или полипептиды, родственные фактору VII, по любому из пп.1-37 для приготовления лекарственного средства, предназначенного для предотвращения реакций, опосредуемых тканевым фактором.

56. Применение по п.55, где реакции, опосредуемые тканевым фактором, связаны с состоянием, выбранным из группы, состоящей из SIRS, ARDS, MOF, HUS и TTP.