Claims (2)
1. Способ определения фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови живых организмов, включающий забор крови с антикоагулянтом, приготовление смеси для исследования фагоцитоза, содержащей лейкоциты и объект фагоцитоза, включая выделение лейкоцитов, обработку смеси для исследования фагоцитоза, включая ее инкубацию в течение 2 ч при температуре 37°С и центрифугирование смеси после 30 мин инкубации и после 2 ч инкубации в течение 10 мин при 1500 об/мин, приготовление мазков из полученных после центрифугирования осадков тридцатиминутной и двухчасовой инкубации с последующим их фиксированием и окрашиванием, определение на каждом из мазков числа нейтрофилов, вступивших в фагоцитоз, и общего числа поглощенных нейтрофилами микробов, расчет показателей фагоцитоза и сопоставление полученных значений показателей фагоцитоза с нормальными величинами, по результатам которого делают вывод о наличии или об отсутствии нарушений фагоцитарной активности нейтрофилов исследуемой периферической крови, отличающийся тем, что в ходе приготовления смеси для исследования фагоцитоза сначала вносят объект фагоцитоза в кровь с антикоагулянтом не позднее, чем через 30 мин после ее забора, после чего заполняют полученной смесью для исследования фагоцитоза два капилляра, обработку смеси для исследования фагоцитоза производят путем инкубации при температуре 37°С каждого из капилляров, содержащих указанную смесь, причем один из капилляров инкубируют в течение 30 мин, а другой - в течение 2 ч, и центрифугирования каждого из указанных капилляров в течение 10 мин при 1500 об/мин, выделение лейкоцитов производят непосредственно после центрифугирования путем разъединения каждого из капилляров на границе размещения осадка лейкоцитов и осадка эритроцитов и извлечения осадка лейкоцитов из соответствующей части каждого из разъединенных капилляров, приготовление мазков осуществляют из осадков лейкоцитов, полученных из каждого из разъединенных капилляров, а в качестве показателей фагоцитоза используют фагоцитарный индекс, фагоцитарное число, коэффициент фагоцитарного числа и индекс бактерицидности нейтрофилов.1. A method for determining the phagocytic activity of peripheral blood neutrophils of living organisms, including blood sampling with an anticoagulant, preparation of a mixture for the study of phagocytosis containing leukocytes and the object of phagocytosis, including the isolation of leukocytes, processing of the mixture for the study of phagocytosis, including incubation for 2 hours at a temperature of 37 ° С and centrifugation of the mixture after 30 min of incubation and after 2 h of incubation for 10 min at 1500 rpm, preparation of smears from thirty centimines obtained after centrifugation of sediments and incubation for two hours, followed by their fixation and staining, determination of the number of neutrophils that entered into phagocytosis and the total number of microbes absorbed by neutrophils on each smear, calculation of phagocytosis indices and comparison of the obtained phagocytosis indices with normal values, based on which it is concluded that or the absence of violations of the phagocytic activity of neutrophils of the studied peripheral blood, characterized in that during the preparation of the mixture for the study of phagocytosis and first, the object of phagocytosis is introduced into the blood with an anticoagulant no later than 30 minutes after its collection, after which two capillaries are filled with the obtained mixture for the study of phagocytosis, the mixture is processed to study phagocytosis by incubation at a temperature of 37 ° C of each of the capillaries containing the indicated a mixture, one of the capillaries being incubated for 30 minutes and the other for 2 hours, and centrifuging each of these capillaries for 10 minutes at 1500 rpm, the leukocytes are isolated directly centrifugation by separating each of the capillaries at the border of the leukocyte sediment and erythrocyte sediment and extracting the leukocyte sediment from the corresponding part of each of the disconnected capillaries, smears are prepared from leukocyte sediments obtained from each of the disconnected capillaries, and the phagocytic index is used as indicators of phagocytosis, phagocytic number, phagocytic number coefficient and neutrophil bactericidal index.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в ходе приготовления смеси для исследования фагоцитоза и ее обработки используют капилляры с внутренним диаметром 0,2-0,8 мм.2. The method according to claim 1, characterized in that during the preparation of the mixture for the study of phagocytosis and its processing, capillaries with an inner diameter of 0.2-0.8 mm are used.