Claims (25)
1. Бактерия Methylophilus, обладающая способностью продуцировать L-аминокислоту.1. The bacterium Methylophilus, with the ability to produce L-amino acid.
2. Бактерия Methylophilus по п.1, где L-аминокислотой является L-лизин, L-валин, L-лейцин, L-изолейцин или L-треонин.2. The Methylophilus bacterium according to claim 1, wherein the L-amino acid is L-lysine, L-valine, L-leucine, L-isoleucine or L-threonine.
3. Бактерия Methylophilus по п.1, которая проявляет резистентность к аналогу L-аминокислоты или ауксотрофию по L-аминокислоте.3. The Methylophilus bacterium according to claim 1, which exhibits resistance to the L-amino acid analog or auxotrophy of the L-amino acid.
4. Бактерия Methylophilus по п.1, у которой повышена активность ферментов биосинтеза L-аминокислот.4. The Methylophilus bacterium according to claim 1, in which the activity of L-amino acid biosynthesis enzymes is increased.
5. Бактерия Methylophilus по п.1, у которой повышена активность дигидродипиколинатсинтазы и активность аспартокиназы, и при этом бактерия обладает способностью продуцировать L-лизин.5. The bacterium Methylophilus according to claim 1, in which the activity of dihydrodipicolinate synthase and the activity of aspartokinase are increased, while the bacterium has the ability to produce L-lysine.
6. Бактерия Methylophilus по п.1, у которой повышена активность дигидродипиколинатсинтазы, и при этом бактерия обладает способностью продуцировать L-лизин.6. The bacterium Methylophilus according to claim 1, in which the activity of dihydrodipicolinate synthase is increased, and the bacterium has the ability to produce L-lysine.
7. Бактерия Methylophilus по п.1, у которой повышена активность аспартокиназы, и при этом бактерия обладает способностью продуцировать L-лизин.7. The bacterium Methylophilus according to claim 1, in which the activity of aspartokinase is increased, while the bacterium has the ability to produce L-lysine.
8. Бактерия Methylophilus по любому из пп.5-7, у которой активность или активности одного, двух или трех ферментов, выбранных из дегидрогеназы полуальдегида аспарагиновой кислоты, дигидродипиколинатредуктазы и диаминопимелатдекарбоксилазы, повышена(ы).8. The Methylophilus bacterium according to any one of claims 5 to 7, in which the activity or activity of one, two or three enzymes selected from aspartic acid hemaldehyde dehydrogenase, dihydrodipicolinate reductase and diaminopimelate decarboxylase is increased (s).
9. Бактерия Methylophilus по п.5, у которой активность дигидродипиколинатсинтазы и активность аспартокиназы повышены путем трансформации посредством введения в клетки ДНК, кодирующей дигидродипиколинатсинтазу, которая не подвергается ингибированию L-лизином по принципу обратной связи, и ДНК, кодирующей аспартокиназу, которая не подвергается ингибированию L-лизином по принципу обратной связи.9. The Methylophilus bacterium according to claim 5, in which the activity of dihydrodipicolinate synthase and the activity of aspartokinase are increased by transformation by introducing into the cells a DNA encoding a dihydrodipicolinate synthase that is not inhibited by L-lysine by the feedback principle and a DNA encoding an aspartokinase that does not undergo L-lysine feedback.
10. Бактерия Methylophilus по п.1, у которой повышены активности аспартокиназы гомосериндегидрогеназы, гомосеринкиназы и треонинсинтазы, и бактерия обладает способностью продуцировать L-треонин.10. The Methylophilus bacterium according to claim 1, in which the activities of aspartokinase homoserine dehydrogenase, homoserine kinase and threonine synthase are increased, and the bacterium has the ability to produce L-threonine.
11. Бактерия по одному из пп.1-10, где бактерией Methylophilus является Methylophilus methylotrophus.11. The bacterium according to one of claims 1 to 10, where the bacterium Methylophilus is Methylophilus methylotrophus.
12. Способ получения L-аминокислоты, который включает в себя культивирование бактерии Methylophilus, которая охарактеризована в любом из указанных выше пп.1-11, в среде, чтобы продуцировать и накопить L-аминокислоту в культуре, и сбор L-аминокислоты из культуры.12. A method for producing an L-amino acid, which includes culturing the Methylophilus bacterium, which is characterized in any one of the above 1 to 11, in a medium to produce and accumulate an L-amino acid in a culture, and collecting the L-amino acid from the culture.
13. Способ по п.12, при котором среда содержит метанол в качестве основного источника углерода.13. The method according to item 12, in which the medium contains methanol as the main carbon source.
14. Способ получения бактериальных клеток бактерии Methylophilus с повышенным содержанием L-аминокислоты, который включает в себя культивирование бактерии Methylophilus, охарактеризованной в любом из пп.1-11, в среде, чтобы продуцировать и накопить L-аминокислоту в бактериальных клетках данной бактерии.14. A method for producing bacterial cells of a Methylophilus bacterium with an increased content of L-amino acid, which comprises culturing the Methylophilus bacterium, characterized in any one of claims 1 to 11, in a medium to produce and accumulate an L-amino acid in the bacterial cells of this bacterium.
15. Способ получения бактериальных клеток бактерии Methylophilus по п.14, при котором L-аминокислотой является L-лизин, L-валин, L-лейцин, L-изолейцин или L-треонин.15. The method for producing bacterial cells of the Methylophilus bacterium according to 14, wherein the L-amino acid is L-lysine, L-valine, L-leucine, L-isoleucine or L-threonine.
16. ДНК, которая кодирует белок, охарактеризованный в следующих ниже пунктах (А) или (В):16. DNA that encodes a protein, characterized in the following paragraphs (A) or (B):
(А) белок, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6, или(A) a protein that has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or
(B) белок, который имеет аминокислотные последовательности SEQ ID NO:6, включая замену, делецию, инсерцию, присоединение или инверсию одной или нескольких аминокислот, и обладает активностью аспартокиназы.(B) a protein that has the amino acid sequences of SEQ ID NO: 6, including substitution, deletion, insertion, addition or inversion of one or more amino acids, and has aspartokinase activity.
17. ДНК по п.16, которая представляет собой ДНК, охарактеризованную в следующие ниже пунктах (а) или (b):17. The DNA according to clause 16, which is a DNA characterized in the following paragraphs (a) or (b):
(a) ДНК, которая имеет нуклеотидную последовательность, включающую в себя нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 510 до нуклеотида номер 1736 SEQ ID NO:5,(a) a DNA that has a nucleotide sequence including the nucleotide sequence from nucleotide number 510 to nucleotide number 1736 of SEQ ID NO: 5,
(b) ДНК, которая способна гибридизоваться с пробой, имеющей нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 510 до нуклеотида номер 1736 SEQ ID NO:5, или ее часть, в жестких условиях, и кодирует белок, обладающий активностью аспартокиназы.(b) DNA that is capable of hybridizing with a sample having a nucleotide sequence from nucleotide number 510 to nucleotide number 1736 of SEQ ID NO: 5, or a part thereof, under stringent conditions, and encodes a protein having aspartokinase activity.
18. ДНК, которая кодирует белок, охарактеризованный в следующих ниже пунктах (С) или (D):18. DNA that encodes a protein, characterized in the following paragraphs (C) or (D):
(C) белок, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, или(C) a protein that has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or
(D) белок, который имеет аминокислотные последовательности SEQ ID NO:8, включая замену, делецию, инсерцию, присоединение или инверсию одной или нескольких аминокислот, и обладает активностью дегидрогеназы полуальдегида аспарагиновой кислоты.(D) a protein that has the amino acid sequences of SEQ ID NO: 8, including substitution, deletion, insertion, addition or inversion of one or more amino acids, and has aspartic acid hemaldehyde dehydrogenase activity.
19. ДНК по п.18, которая представляет собой ДНК, охарактеризованную в следующих ниже пунктах (с) или (d):19. The DNA of claim 18, which is the DNA characterized in the following (c) or (d):
(с) ДНК, которая имеет нуклеотидную последовательность, включающую в себя нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 98 до нуклеотида номер 1207 SEQ ID NO:7, или(c) a DNA that has a nucleotide sequence including the nucleotide sequence from nucleotide number 98 to nucleotide number 1207 of SEQ ID NO: 7, or
(d) ДНК, которая гибридизуется с пробой, имеющей нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 98 до нуклеотида номер 1207 SEQ ID NO:7 или ее часть, в жестких условиях, и кодирует белок, обладающий активностью дегидрогеназы полуальдегида аспарагиновой кислоты.(d) DNA that hybridizes to a sample having a nucleotide sequence from nucleotide number 98 to nucleotide number 1207 of SEQ ID NO: 7 or part thereof, under stringent conditions, and encodes a protein having aspartic acid hemaldehyde dehydrogenase activity.
20. ДНК, которая кодирует белок, охарактеризованный в следующих ниже пунктах (E) или (F):20. DNA that encodes a protein, characterized in the following paragraphs (E) or (F):
(Е) белок, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:10, или(E) a protein that has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or
(F) белок, который имеет аминокислотные последовательности SEQ ID NO:10, включая замену, делецию, инсерцию, присоединение или инверсию одной или нескольких аминокислот, и обладает активностью дигидродипиколинатсинтазы.(F) a protein that has the amino acid sequences of SEQ ID NO: 10, including substitution, deletion, insertion, addition or inversion of one or more amino acids, and has the activity of dihydrodipicolinate synthase.
21. ДНК по п.20, которая представляет собой ДНК, охарактеризованную в следующих ниже пунктах (е) или (f):21. The DNA according to claim 20, which is a DNA characterized in the following paragraphs (e) or (f):
(е) ДНК, которая имеет нуклеотидную последовательность, включающую в себя нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 1268 до нуклеотида номер 2155 SEQ ID NO:9, или(e) a DNA that has a nucleotide sequence comprising a nucleotide sequence from nucleotide number 1268 to nucleotide number 2155 of SEQ ID NO: 9, or
(f) ДНК, которая гибридизуется с пробой, имеющей нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 1268 до нуклеотида номер 2155 SEQ ID NO:9 или ее часть, в жестких условиях, и кодирует белок, обладающий активностью дигидродипиколинатсинтазы.(f) DNA that hybridizes to a sample having a nucleotide sequence from nucleotide number 1268 to nucleotide number 2155 of SEQ ID NO: 9 or a part thereof, under stringent conditions, and encodes a protein having dihydrodipicolinate synthase activity.
22. ДНК, которая кодирует белок, охарактеризованный в следующих ниже пунктах (Q) или (Н):22. DNA that encodes a protein characterized in the following (Q) or (H):
(G) белок, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12, или(G) a protein that has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or
(Н) белок, который имеет аминокислотные последовательности SEQ ID NO:12, включая замену, делецию, инсерцию, присоединение или инверсию одной или нескольких аминокислот, и обладает активностью дигидродипиколинатредуктазы.(H) a protein that has the amino acid sequences of SEQ ID NO: 12, including substitution, deletion, insertion, addition or inversion of one or more amino acids, and has the activity of dihydrodipicolinate reductase.
23. ДНК по п.22, вторая представляет собой ДНК, охарактеризованную в следующих ниже пунктах (g) или (h):23. The DNA according to claim 22, the second is a DNA characterized in the following paragraphs (g) or (h):
(g) ДНК, которая имеет нуклеотидную последовательность, включающую в себя нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 2080 до нуклеотида номер 2883 SEQ ID NO:11,(g) DNA that has a nucleotide sequence including the nucleotide sequence from nucleotide number 2080 to nucleotide number 2883 of SEQ ID NO: 11,
(h) ДНК, которая гибридизуется с пробой, имеющей нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 2080 до нуклеотида номер 2883 SEQ ID NO: 11 или ее часть, в жестких условиях, и кодирует белок, обладающий активностью дигидродипиколинатредуктазы.(h) DNA that hybridizes to a sample having a nucleotide sequence from nucleotide number 2080 to nucleotide number 2883 of SEQ ID NO: 11 or a part thereof, under stringent conditions, and encodes a protein having dihydrodipicolinate reductase activity.
24. ДНК, которая кодирует белок, охарактеризованный в следующих ниже пунктах (I) и (J):24. DNA that encodes a protein, characterized in the following paragraphs (I) and (J):
(I) белок, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, или(I) a protein that has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or
(J) белок, который имеет аминокислотные последовательности SEQ ID NO:14, включая замену, делецию, инсерцию, присоединение или инверсию одной или нескольких аминокислот, и обладает активностью диаминопимелатдекарбоксилазы.(J) a protein that has the amino acid sequences of SEQ ID NO: 14, including substitution, deletion, insertion, addition or inversion of one or more amino acids, and has diaminopimelate decarboxylase activity.
25. ДНК по п.24, которая представляет собой ДНК, охарактеризованную в следующие ниже пунктах (i) или (j):25. The DNA according to paragraph 24, which is a DNA characterized in the following paragraphs (i) or (j):
(i) ДНК, которая имеет нуклеотидную последовательность, включающую в себя нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 751 до нуклеотида номер 1995 SEQ ID NO:13, или(i) a DNA that has a nucleotide sequence including the nucleotide sequence from nucleotide number 751 to nucleotide number 1995 SEQ ID NO: 13, or
(j) ДНК, которая гибридизуется с пробой, имеющей нуклеотидную последовательность от нуклеотида номер 751 до нуклеотида номер 1995 SEQ ID NO:13 или ее часть, в жестких условиях, и кодирует белок, обладающий активностью диаминопимелатдекарбоксилазы.(j) DNA that hybridizes to a sample having a nucleotide sequence from nucleotide number 751 to nucleotide number 1995 of SEQ ID NO: 13 or part thereof, under stringent conditions, and encodes a protein having diaminopimelate decarboxylase activity.