Claims (15)
1. Самореплицирующийся рекомбинантный вектор, содержащий нуклеотидные последовательности вируса папилломы, по существу состоящие из (I) гена Е1 и гена Е2 папилломы, (II) минимального источника репликации вируса папилломы, (III) минихромосомного элемента поддержки вируса папилломы, и гетерологичной последовательности нуклеотидов, кодирующей регуляторный белок ВИЧ NEF. REV или ТАТ или его иммунологически активный фрагмент.1. A self-replicating recombinant vector containing the nucleotide sequences of the papilloma virus, essentially consisting of (I) the E1 gene and the papilloma E2 gene, (II) the minimal source of replication of the papilloma virus, (III) the minichromosomal papilloma virus support element, and a heterologous nucleotide sequence encoding HIV regulatory protein NEF. REV or TAT or an immunologically active fragment thereof.
2. Самореплицирующийся вектор по п. 1, отличающийся тем, что вирус папилломы является вирусом папилломы быка (ВПБ). 2. The self-replicating vector according to claim 1, characterized in that the papilloma virus is a bovine papilloma virus (VPB).
3. Самореплицирующийся вектор по любому из п. 1 или 2, отличающийся тем, что гетерологичная последовательность нуклеотидов кодирует белок ВИЧ-1 NEF. 3. The self-replicating vector according to any one of p. 1 or 2, characterized in that the heterologous nucleotide sequence encodes an HIV-1 NEF protein.
4. Самореплицирующийся вектор по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что Е1 находится под контролем промотора srα или промотора тимидинкиназы. 4. A self-replicating vector according to any one of the preceding paragraphs, characterized in that E1 is under the control of the srα promoter or the thymidine kinase promoter.
5. Самореплицирующийся вектор по п. 4, отличающийся тем. что он представляет собой pBNtkREV, pBNsrαTAT или pBNsrαNEF, изображенные на фиг. 2, 3 или 4. 5. The self-replicating vector according to claim 4, characterized in that. that it is pBNtkREV, pBNsrαTAT or pBNsrαNEF shown in FIG. 2, 3 or 4.
6. Вакцина для иммунизации против ВИЧ с помощью ДНК, содержащая самореплицирующийся вектор, как он определен в любом из пп. 1-5. 6. A vaccine for immunization against HIV using DNA, containing a self-replicating vector, as defined in any one of paragraphs. 1-5.
7. Вакцина по п. 6, отличающаяся тем, что она содержит смесь векторов, кодирующих различные регуляторные белки ВИЧ или их иммунологически активные фрагменты. 7. The vaccine according to claim 6, characterized in that it contains a mixture of vectors encoding various HIV regulatory proteins or immunologically active fragments thereof.
8. Способ получения самореплицирующегося рекомбинантного вектора, как он определен в любом из пп. 1-5, включающий следующие этапы а) осуществление вставки гетерологичной последовательности нуклеотидов. кодирующей регуляторный белок ВИЧ NEF. REV или ТАТ или его иммунологически активный фрагмент, в вектор, содержащий нуклеотидные последовательности вируса папилломы, обязательно состоящие из (I) гена Е1 и гена Е2 папилломы, (II) минимального источника репликации вируса папилломы, (III) минихромосомного элемента поддержки вируса папилломы, и б) трансформацию клетки-хозяина образующимся самореплицирующимся вектором, в) культивирование клетки-хозяина, и г) извлечение вышеуказанного вектора. 8. A method of obtaining a self-replicating recombinant vector, as defined in any one of paragraphs. 1-5, comprising the following steps a) inserting a heterologous nucleotide sequence. encoding HIV regulatory protein NEF. A REV or TAT or an immunologically active fragment thereof, into a vector containing the nucleotide sequences of the papilloma virus, necessarily consisting of (I) the E1 gene and the Papilloma E2 gene, (II) the minimum source of replication of the papilloma virus, (III) the minichromosomal papilloma virus support element, and b) transformation of the host cell into a self-replicating vector, c) culturing the host cell, and d) extracting the above vector.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что клетка-хозяин является клеткой Е. соli. 9. The method of claim 8, wherein the host cell is an E. coli cell.
10. Применение самореплицирующегося вектора, как он определен в любом из пп. 1-5 для производства вакцины для иммунизации против ВИЧ с помощью ДНК. 10. The use of a self-replicating vector, as defined in any one of paragraphs. 1-5 for the production of a vaccine for immunization against HIV using DNA.
11. Применение по п. 10 при производстве вакцины, содержащей смесь векторов, кодирующих различные регуляторные белки ВИЧ или их иммунологически активные фрагменты. 11. The use of claim 10 in the manufacture of a vaccine comprising a mixture of vectors encoding various HIV regulatory proteins or immunologically active fragments thereof.
12. Способ лечения или профилактики ВИЧ, включающий введение нуждающемуся в этом человеку эффективного количества самореплицирующегося вектора, как он определен в любом из пп. 1-5, и экспрессию белка NEF, REV или ТАТ или его иммунологически активного фрагмента у вышеуказанного человека. 12. A method of treating or preventing HIV, comprising administering to a person in need of this person an effective amount of a self-replicating vector, as defined in any one of claims 1-5, and the expression of the NEF, REV or TAT protein or its immunologically active fragment in the above person.
13. Способ по п. 12, включающий введение смеси векторов, кодирующих различные регуляторные белки ВИЧ или их иммунологически активные фрагменты. 13. The method of claim 12, comprising administering a mixture of vectors encoding various HIV regulatory proteins or immunologically active fragments thereof.
14. Клетка-хозяин, содержащая самореплицирующийся вектор, как он определен в любом из пп. 1-5. 14. A host cell containing a self-replicating vector, as defined in any one of claims. 1-5.
15. Клетка-хозяин по п. 14, отличающаяся тем, что она является бактериальной клеткой или клеткой млекопитающего. 15. A host cell according to claim 14, characterized in that it is a bacterial or mammalian cell.