Claims (17)
1. Основанный на MLV ретровирусный вектор, где кодирующие последовательности генов gag, env и pol вируса MLV (вирус лейкоза мыши) полностью делегированы.1. MLV-based retroviral vector, where the coding sequences of the gag, env and pol genes of the MLV virus (mouse leukemia virus) are fully delegated.
2. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 1, который включает гетерологичный интрон и/или гетерологичный акцепторный сайт сплайсинга, которые встроены выше положения сайта клонирования, предназначенного для чужеродного гена. 2. The MLV-based retroviral vector according to claim 1, which includes a heterologous intron and / or heterologous acceptor splice site, which are inserted above the position of the cloning site intended for a foreign gene.
3. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 2, где гетерологичный интрон и/или гетерологичный акцепторный сайт сплайсинга выбирают из группы, включающей интроны и/или акцепторные сайты сплайсинга гена iel (UL123) HCMV (цитоме-галовируса человека), гена EF1α(фактор элонгации 1α), гена GAPDH (глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы), гена β-актина человека и гена иммуноглобулина мыши. 3. The MLV-based retroviral vector of claim 2, wherein the heterologous intron and / or heterologous acceptor splicing site is selected from the group consisting of introns and / or acceptor splicing sites of the iel (UL123) HCMV gene (human cytomegalovirus), gene EF1α ( elongation factor 1α), GAPDH gene (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase), human β-actin gene and mouse immunoglobulin gene.
4. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 1, который включает гетерологичную некодирующую последовательность, встроенную выше положения сайта клонирования, предназначенного для чужеродного гена. 4. The MLV-based retroviral vector of claim 1, which comprises a heterologous non-coding sequence inserted above the position of the cloning site for the foreign gene.
5. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 4, где гетерологичная некодирующая последовательность выбирается из группы, включающей некодирующие последовательности гена iel (UL123) HCMV, гена EF1α, гена GAPDH и гена β-актина. 5. The MLV-based retroviral vector of claim 4, wherein the heterologous non-coding sequence is selected from the group consisting of non-coding sequences of the iel (UL123) HCMV gene, EF1α gene, GAPDH gene, and β-actin gene.
6. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 1, где полноразмерная последовательность U3 (нуклеотиды [-419] -[-1] ) из состава 5'-LTR MLV заменена на гетерологичный промотор. 6. The MLV-based retroviral vector of claim 1, wherein the full length U3 sequence (nucleotides [-419] - [- 1]) of the 5'-LTR MLV is replaced with a heterologous promoter.
7. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 6, где гетерологичным промотором является промотор главного немедленно раннего гена вируса HCMV. 7. The MLV-based retroviral vector of claim 6, wherein the heterologous promoter is the promoter of the immediate major early gene of the HCMV virus.
8. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 1, который включает гетерологичный промотор, встроенный ниже положения сайта клонирования, предназначенного для чужеродного гена. 8. The MLV-based retroviral vector of claim 1, which comprises a heterologous promoter inserted below the position of the cloning site for the foreign gene.
9. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 8, где гетерологичным промотором является минимальный промотор SV40. 9. The MLV-based retroviral vector of claim 8, wherein the heterologous promoter is the minimum SV40 promoter.
10. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 2, который является вектором DONSA1, где акцепторный сайт сплайсинга гена иммуноглобулина мыши и 1-й экзон гена iel (UL123) HCMV встроены выше расположения сайта клонирования чужеродного гена, полноразмерная последовательность U3 ([-419] -[-1] п. н. ) из состава 5'-LTR MLV заменена на промотор главного немедленно раннего гена вируса HCMV; а минимальный промотор SV40 встроен ниже положения сайта клонирования, предназначенного для чужеродного гена. 10. The MLV-based retroviral vector according to claim 2, which is a DONSA1 vector, where the acceptor mouse immunoglobulin gene splicing site and exon 1 of the iel gene (UL123) HCMV are inserted above the location of the foreign gene cloning site, the full-length sequence U3 ([-419 ] - [- 1] bp) from the 5'-LTR MLV is replaced by a promoter of the immediate main early gene of the HCMV virus; and the minimum SV40 promoter is inserted below the position of the cloning site for the foreign gene.
11. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 2, который является вектором DON2, где часть интрона А (3'-фрагмент длиной 112 п. н. ) и часть 2-го экзона (5'-фрагмент протяженностью от 5'-конца 2-го экзона до последовательности, находящейся непосредственно перед старт-кодоном) гена iel (UL123) HCMV встроены выше положения сайта клонирования для чужеродного гена; полноразмерная последовательность U3 ([-419] -[-1] п. н. ) из состава 5'-LTR MLV заменена на промотор главного немедленно раннего гена вируса HCMV; а минимальный промотор SV40 встроен ниже положения сайта клонирования, предназначенного для чужеродного гена. 11. MLV-based retroviral vector according to claim 2, which is a DON2 vector, where part of the intron A (3'-fragment 112 bp long) and part of the 2nd exon (5'-fragment with a length of 5'-end Exon 2 to the sequence immediately preceding the start codon) of the iel (UL123) HCMV gene is inserted above the position of the cloning site for the foreign gene; the full-length U3 sequence ([-419] - [- 1] bp) from the 5'-LTR MLV is replaced by a promoter of the main immediately early HCMV virus gene; and the minimum SV40 promoter is inserted below the position of the cloning site for the foreign gene.
12. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 4, который является вектором MIN-EI, где фрагмент ДНК, включающий часть интрона и часть 2-го экзона ([+772] -[+1008] п. н. ) гена EF1α человека встроен выше положения сайта клонирования, предназначенного для чужеродного гена. 12. MLV-based retroviral vector according to claim 4, which is a MIN-EI vector, where a DNA fragment comprising a part of the intron and part of the 2nd exon ([+772] - [+ 1008] bp) of the human EF1α gene embedded above the position of the cloning site intended for a foreign gene.
13. Основанный на MLV ретровирусный вектор по п. 4, который является вектором MIN-2, где фрагмент ДНК, включающий часть интрона А и часть 2-го экзона ([+837] -[+964] п. н. ) гена iel (UL123) HCMV, встроен выше положения сайта клонирования, предназначенного для чужеродного гена. 13. MLV-based retroviral vector according to claim 4, which is a MIN-2 vector, where a DNA fragment comprising a portion of intron A and a portion of exon 2 ([+837] - [+ 964] bp) of the iel gene (UL123) HCMV, inserted above the position of the cloning site intended for a foreign gene.
14. Штамм Е. coli Top10-DONSAl (депозитарный КССМ-10127), трансформированный вектором DONSA1, охарактеризованный в п. 10. 14. The strain E. coli Top10-DONSAl (depository KCCM-10127), transformed with the vector DONSA1, described in paragraph 10.
15. Штамм Е. coli Top10-DON2 (депозитарный КССМ-10128), трансформированный вектором DON2, охарактеризованный в п. 11. 15. The strain E. coli Top10-DON2 (depository KCCM-10128), transformed with the vector DON2, described in paragraph 11.
16. Штамм Е. coli MIN-EICAT (Тор10) (депозитарный КССМ-10163), трансформированный вектором MIN-EICAT, который включает бактериальный ген CAT (хлорамфениколацетилтрансферазы) в сайте клонирования вектора по п. 12. 16. The E. coli strain MIN-EICAT (Tor10) (depository KCCM-10163) transformed with the MIN-EICAT vector, which includes the bacterial CAT gene (chloramphenicolacetyltransferase) in the vector cloning site according to claim 12.
17. Штамм Е. coli MIN-2CAT (Тор10) (депозитарный КССМ-10164), трансформированный вектором MIN-2CAT, который включает бактериальный ген CAT (хлорамфениколацетилтрансферазы) в сайте клонирования вектора, охарактеризованного в п. 13. 17. The E. coli strain MIN-2CAT (Tor10) (depository KCCM-10164), transformed with the MIN-2CAT vector, which includes the bacterial CAT gene (chloramphenicolacetyltransferase) in the cloning site of the vector described in paragraph 13.